電子束輻照對(duì)大黃品質(zhì)及抗氧化活性的影響

付 孟 王 丹,* 何 毅 王 鋼 唐藝文 于 明 高 鵬 黃 敏

(1 西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，四川 綿陽 621010； 2 四川原子能研究院，四川 成都 610101；3 輻照保藏四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610101)

大黃別名黃良、生軍、壯大黃、川軍，為蓼科植物掌葉大黃(RheumpalmatumL.)、唐古特大黃(RheumtanguticumMaxim. ex Balf.)或藥用大黃(RheumofficinaleBaill.)的干燥根[1]。大黃味苦性寒，是我國(guó)一種歷史悠久的傳統(tǒng)中藥材，具有瀉下、清熱、止血散瘀、保肝利膽、抗菌、抗腫瘤、預(yù)防糖尿病等作用[2]。目前，已從大黃中分離得到超過248種成分，主要生物活性成分為蒽醌類，包括蘆薈大黃素(aloe-emodin)、大黃酸(rhein)、大黃素(emodin)、大黃酚(chrysophanol)、大黃素甲醚(physcion)等[3]，蒽醌類成分常作為大黃的質(zhì)量控制指標(biāo)。此外，還有蒽酮類、二苯乙烯類、苯丁酮類、色原酮類等生物活性成分[4]。大黃的根莖較大，干燥困難，在貯藏過程中容易出現(xiàn)蟲害、氣味散失、霉變、變色等現(xiàn)象。目前，市售大黃的貯藏加工方式多為曬干、陰干和硫磺熏蒸處理，但曬干和陰干處理效率較低，硫熏會(huì)導(dǎo)致藥材化學(xué)成分改變[5]，且常存在濫熏、過量熏蒸、重復(fù)熏蒸等情況。近年來，一些新型處理技術(shù)被用于中藥材的貯藏保存，但同樣存在一定的局限性，例如低溫處理技術(shù)效率低、過程控制比較困難[6]，遠(yuǎn)紅外貯藏技術(shù)僅適用于少量貴重藥材的儲(chǔ)存[7]，微波處理技術(shù)可能會(huì)導(dǎo)致某些熱敏性成分被破壞[8]。因此，大黃的采后貯藏和加工技術(shù)落后成為了限制大黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。

中藥由于其獨(dú)特的生長(zhǎng)特性，在采收、干燥、炮制加工及貯藏等環(huán)節(jié)中易感染微生物，造成藥材變質(zhì)、腐敗等問題[9]。輻照技術(shù)作為一種綠色、高效的殺菌技術(shù)，能最大限度地保持中藥材的性狀、活性成分含量及藥理活性[10]，在中藥材貯藏加工方面的應(yīng)用越來越受到關(guān)注。王趙[11]采用60Co-γ射線輻照處理大黃，結(jié)果表明輻照對(duì)大黃的主要活性成分、指紋圖譜均無顯著影響。除了60Co可作為輻照源以外，高能電子束輻照在近年來也受到廣泛關(guān)注。與γ射線輻照相比，高能電子束輻照技術(shù)投入成本更低、安全性更強(qiáng)、加工效率更高、射線利用率更高、操作更簡(jiǎn)單[12]。隨著高能電子束輻照技術(shù)的不斷發(fā)展完善，特別是高能電子加速器(10 MeV)的研發(fā)和推廣[13]，其在各種農(nóng)產(chǎn)品、副食產(chǎn)品的冷加工、滅菌、貯藏等方面的應(yīng)用越來越廣泛。發(fā)布于2015年的《中藥輻照滅菌技術(shù)指導(dǎo)原則》[14]為高能電子束輻照技術(shù)的應(yīng)用提供了參考和指導(dǎo)。

目前，輻照滅菌技術(shù)在大黃中的應(yīng)用研究報(bào)道較少。李月梅等[15]以60Co-γ射線按中藥制劑常規(guī)劑量(≤10 kGy)輻照大黃飲片，研究大黃飲片中5種成分在輻照前后以及貯藏6個(gè)月后的含量變化，結(jié)果表明輻照后大黃飲片中蘆薈大黃素、大黃素甲醚、大黃素、大黃酚、大黃酸含量均有所下降，貯藏6個(gè)月后，雖然大黃飲片中主要成分有所降低，但輻照組大黃飲片中主要成分的穩(wěn)定性較未輻照組有所增強(qiáng)；陳金月[16]利用薄層層析、紫外吸收光譜等方法研究60Co-γ射線輻照對(duì)大黃的影響，結(jié)果表明6 kGy以下輻照對(duì)大黃主要成分無顯著影響；王趙[11]對(duì)比了硫磺熏蒸和輻照滅菌對(duì)大黃的影響，結(jié)果表明輻照對(duì)大黃主要成分無顯著影響，相對(duì)于硫磺熏蒸，輻照滅菌是一種更為安全的方式。但高能電子束輻照技術(shù)在大黃飲片的應(yīng)用研究尚鮮見報(bào)道。本研究以川產(chǎn)道地大黃藥材為試驗(yàn)材料，利用高能電子束輻照處理，以未處理組和硫磺熏蒸組為對(duì)照，綜合評(píng)估不同高能電子束輻照劑量(2、3、5、7、10、13、15、25 kGy)處理下，大黃中微生物含量、理化性質(zhì)、活性成分、抗氧化活性的變化，旨在探究適宜大黃的貯藏處理方式，為高能電子束輻照在大黃貯藏加工中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與試劑

大黃飲片購(gòu)自四川省中興藥業(yè)有限公司，產(chǎn)于四川阿壩，規(guī)格凈制(一級(jí))，批號(hào)181001，袋裝1.0 kg/袋，經(jīng)西南科技大學(xué)侯大斌教授鑒定為掌葉大黃(RheumpalmatumL.)的干燥根莖。

蘆薈大黃素(純度98%)、大黃酸(純度98%)、大黃素(純度98%)、大黃酚(純度98%)、大黃素甲醚(純度98%)標(biāo)準(zhǔn)品，均購(gòu)自成都埃法生物科技有限公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH)、甲醇，色譜純，購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司；磷酸、無水乙醇，分析純，購(gòu)自成都市科隆化學(xué)品有限公司。

1.2 試驗(yàn)儀器

5804R高速離心機(jī)，德國(guó)Eppendorf公司；GH6000隔水培養(yǎng)箱，天津市泰斯特儀器有限公司；GE60DA高壓蒸汽滅菌鍋，美國(guó)致微公司；DHG-9123A干燥箱，上海申賢恒溫設(shè)備廠；IS1020高能電子加速器，同方威視科技(北京)有限公司；UltiMate3000DGLC，雙三元、二維液相色譜儀系統(tǒng)，美國(guó)賽默飛世爾公司；SPECORD 200PLUS紫外-可見分光光度計(jì)，德國(guó)Analytik Jena公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品輻照處理 大黃飲片采用聚乙烯自封袋(20 cm×30 cm，30絲)封裝，每袋約400 g，鋪平厚度約4 cm。樣品送至四川潤(rùn)祥輻照技術(shù)有限公司，采用劑量率約為260 Gy·s-1的高能電子加速器(VF-ProAcc-10/20，10 MeV，20 kW)進(jìn)行雙面輻照處理。設(shè)定劑量為2、3、5、7、10、13、15、25 kGy，以未輻照樣品(control check, CK)和硫磺熏蒸處理的樣品為對(duì)照，每組均設(shè)置3個(gè)重復(fù)組。輻照后樣品于室溫避光貯藏，按《中華人民共和國(guó)藥典》[1]2020版藥材和飲片取樣法(通則 0211)分別于輻照后第0、第180、第360天取樣檢測(cè)。

1.3.2 大黃樣品微生物數(shù)量的測(cè)定 大黃飲片需氧菌總數(shù)(total aerobic microbial count，TAMC)采用培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定，霉菌和酵母菌總數(shù)(total combined yeasts and molds count，TYMC)參照李東嫻等[17]的方法按平板涂布法進(jìn)行檢測(cè)。TAMC、TYMC含量檢測(cè)結(jié)果以log CFU·g-1表示，大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)參照《GB 4789. 38-2012食品微生物學(xué) 檢驗(yàn)大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)》[18]進(jìn)行測(cè)定，沙門氏菌(Salmonella)參照《GB 4789. 4-2016食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)》[19]進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3 大黃樣品理化品質(zhì)的測(cè)定 大黃樣品粉碎，過二號(hào)篩(24目)，按照《中華人民共和國(guó)藥典》2020版[1]大黃項(xiàng)下規(guī)定測(cè)定其水分(干燥失重)、總灰分及水溶性浸出物含量。

1.3.4 大黃樣品活性成分的測(cè)定 大黃5種游離蒽醌類物質(zhì)含量按《中華人民共和國(guó)藥典》2020版[1]大黃項(xiàng)下規(guī)定的方法測(cè)定。

1.3.5 大黃樣品抗氧化活性的測(cè)定 參照Khanzadi等[20]的方法。檢測(cè)大黃甲醇提取物中DPPH自由基清除能力。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean ± SD)表示，用SPSS 25進(jìn)行方差分析，采用Duncan′s 多重比較分析是否有顯著差異(P<0.05表示差異顯著)，由Origin 2017繪制圖形。

2 結(jié)果與分析

2.1 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)微生物數(shù)量的影響

《中華人民共和國(guó)藥典》2020版[1]通則1108中藥飲片微生物限度檢查法中規(guī)定，直接口服及泡服飲片中需氧菌總數(shù)不得超過5 log CFU·g-1， 霉菌和酵母菌總數(shù)不得超過3 log CFU·g-1。由表1可知，大黃飲片在不同處理及不同貯藏時(shí)間內(nèi)均未檢出大腸埃希氏菌和沙門氏菌。貯藏0 d時(shí)，CK組大黃微生物數(shù)量處于較高水平，TAMC、TYMC數(shù)量分別為6.08、5.38 log CFU·g-1，超過藥典規(guī)定限度。經(jīng)硫磺熏蒸處理后，微生物數(shù)量有所下降，但仍超過現(xiàn)行藥典對(duì)直接口服及泡服飲片微生物限度的規(guī)定。高能電子束輻照處理能降低大黃中微生物的數(shù)量，延長(zhǎng)大黃的貯藏期。當(dāng)輻照劑量達(dá)到3 kGy及以上時(shí)，微生物數(shù)量均降至檢測(cè)限以下，符合現(xiàn)行藥典要求。

隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng)，大黃微生物數(shù)量總體呈下降趨勢(shì)，但CK組的微生物數(shù)量仍超過藥典要求。輻照組大黃微生物數(shù)量在貯藏期內(nèi)變化較小，2 kGy輻照處理的大黃TAMC、TYMC數(shù)量變化不明顯，3 kGy和5 kGy輻照后貯藏期內(nèi)檢測(cè)出少量微生物，而經(jīng)≥7 kGy劑量輻照處理后貯藏期內(nèi)未檢出微生物。由此可見，當(dāng)輻照劑量達(dá)到3 kGy及以上時(shí)，輻照能有效降低大黃中微生物數(shù)量，在360 d的貯藏期內(nèi)微生物數(shù)量均控制在藥典規(guī)定以下。

表1 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)微生物數(shù)量的影響Table 1 Effects of the electron-beam irradiation treatment on microbial loads of Rheum palmatum L. during its storage /(log CFU·g-1)

2.2 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)理化性質(zhì)的影響

《中華人民共和國(guó)藥典》2020版[1]規(guī)定，大黃飲片水分不得超過15.00%，總灰分不得超過10.00%。由表2可知，大黃干燥失重約為10.00%，總灰分含量約為5.50%，輻照對(duì)干燥失重和總灰分含量均無顯著影響。貯藏期內(nèi)，隨貯藏時(shí)間延長(zhǎng)，大黃干燥失重略有下降，而總灰分含量有所增加，但均符合藥典規(guī)定。

由表2可知，經(jīng)高能電子束輻照處理后，大黃水溶性浸出物含量顯著增加。貯藏0 d時(shí)，CK組大黃水溶性浸出物含量為41.46%，2 kGy輻照時(shí)已顯著高于CK組。而硫熏處理后，其含量明顯降低。隨著貯藏期延長(zhǎng)，大黃水溶性浸出物含量總體呈下降趨勢(shì)，但輻照組水浸物含量仍高于對(duì)照組和硫熏組。

2.3 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)活性成分含量的影響

取不同濃度對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣考察各對(duì)照品濃度與高效液相色譜(high performance liquid chromatography, HPLC)圖峰面積的線性關(guān)系，得到線性回歸方程及線性范圍如下：蘆薈大黃素Y= 0.943 2X- 0.05 (R2= 0.999 9 )，1.578 ～ 15.78 μg·mL-1；大黃酸Y= 0.830 1X- 0.103 6 (R2= 0.999 7)，1.584 ～ 15.84 μg·mL-1；大黃素Y= 0.672 7X- 0.010 9 (R2= 0.999 9)，1.584 ～ 15.84 μg·mL-1；大黃酚Y= 1.107 9X- 0.014 5 (R2= 0.999 9)，1.606 ～ 16.06 μg·mL-1；大黃素甲醚Y= 0.811 4X+ 0.122 8 (R2= 0.999 6)，0.782 ～ 7.82 μg·mL-1。由圖1可知，5種蒽醌類化合物色譜峰分離較好，峰內(nèi)無雜質(zhì)干擾，在各自的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表2 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)理化性質(zhì)的影響Table 2 Effects of the electron-beam irradiation treatment on physicochemical properties of Rheum palmatum L. during its storage

注：A：對(duì)照品；B：樣品；1：蘆薈大黃素；2：大黃酸；3：大黃素；4：大黃酚；5：大黃素甲醚。Note: A: Standards. B: Sample. 1: Aloe-emodin. 2: Rhein. 3: Emodin. 4: Chrysophanol. 5: Physcion.圖1 大黃HPLC圖Fig.1 HPLC chromatogram of Rheum palmatum L.

蒽醌類化合物為大黃藥效的主要成分之一。由圖2-A可知，經(jīng)高能電子束輻照后，大黃蒽醌類成分含量略有上升，主要體現(xiàn)在大黃酚含量增加，而對(duì)其他成分影響不大。隨輻照劑量增加，大黃酚含量先升高后趨于平穩(wěn)，當(dāng)輻照劑量達(dá)到25 kGy時(shí)，其含量呈下降趨勢(shì)。其他4種蒽醌類成分經(jīng)15 kGy及以下劑量輻照后，其含量變化不明顯，在25 kGy時(shí)，也表現(xiàn)出下降趨勢(shì)。

由圖2-B可知，經(jīng)360 d貯藏后，大黃蒽醌類成分整體明顯下降。輻照處理的大黃蒽醌類成分含量高于CK組，且總體上隨輻照劑量增加而略有上升，而硫熏處理組大黃蒽醌類成分含量略低于CK組和輻照組。由此可見，大黃蒽醌類成分含量隨貯藏時(shí)間延長(zhǎng)明顯下降，高能電子束輻照處理有利于保持大黃貯藏期內(nèi)主要活性成分含量。

注：A：貯藏第0天；B：貯藏第360天。Note: A:Storage day 0. B:Storage day 360.圖2 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)蒽醌類成分含量的影響Fig.2 Effects of the electron-beam irradiation treatment on the anthraquinones of Rheum palmatum L. during its storage

2.4 高能電子束輻照對(duì)大黃抗氧化活性的影響

由圖3可知，不同劑量輻照和硫熏處理對(duì)大黃DPPH自由基清除率無顯著影響(P>0.05)，且貯藏期內(nèi)，其DPPH自由基清除率無明顯變化。表明高能電子束輻照及貯藏時(shí)間對(duì)大黃抗氧化活性影響不大。

圖3 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏期內(nèi)DPPH自由基清除活性的影響Fig.3 Effects of the electron-beam irradiation treatment on the DPPH of Rheum palmatum L. during its storage

3 討論

3.1 高能電子束輻照對(duì)大黃貯藏過程中微生物數(shù)量的影響

本研究中，高能電子束輻照能降低大黃中微生物數(shù)量，當(dāng)輻照劑量達(dá)到3 kGy及以上時(shí)，微生物數(shù)量均降至檢測(cè)限度以下，達(dá)到現(xiàn)行藥典要求。隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，大黃中微生物數(shù)量略有下降，其原因可能與貯藏過程中干燥的環(huán)境以及藥材自身的理化性質(zhì)有關(guān)[21]。李奉勤等[22]利用60Co-γ射線輻照三黃片中大黃粉，結(jié)果顯示適宜輻照劑量為2 kGy；白羽辛等[23]對(duì)人參粉進(jìn)行輻照處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)達(dá)到預(yù)期滅菌效果的輻照劑量為6 kGy。與本試驗(yàn)結(jié)果有所不同，其原因可能是初始微生物負(fù)載不同。蔡汶莉[24]用電子束輻照百合和山銀花藥材，結(jié)果表明兩種藥材的初始含菌值不同，相同輻照劑量下的滅菌效果不同，表明適宜的輻照劑量不同。Khawory等[25]研究也表明，爪葉洋茱萸、灌狀買麻藤、非洲楝的適宜輻照劑量為9～13 kGy，而其葉提取物的適宜輻照劑量為6～12 kGy。表明樣品初始微生物負(fù)載越高，其適宜的殺菌劑量越大。

3.2 高能電子束輻照對(duì)大黃理化品質(zhì)的影響

中藥飲片浸出物是衡量中藥優(yōu)劣的重要指標(biāo)。王寧寧[26]研究表明，以水溶性浸出物作為評(píng)判山藥飲片質(zhì)量等級(jí)的主要指標(biāo)是可靠的。王薛等[27]也將水溶性浸出物作為評(píng)價(jià)藏邊大黃質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)之一。在《中華人民共和國(guó)藥典》[28]中收錄的以大黃為主要成分的水煎劑多達(dá)28種，可見大黃水浸物含量是評(píng)價(jià)大黃質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。本研究中大黃飲片經(jīng)不同劑量電子束輻照處理后，大黃水溶性浸出物顯著增加，增幅與輻照劑量總體呈正相關(guān)。蔡汶莉[22]報(bào)道了電子束輻照后百合藥材水溶性浸出物含量顯著增加，與本研究結(jié)果一致。其原因可能是輻照后蛋白質(zhì)等大分子發(fā)生降解，產(chǎn)生如糖類化合物、有機(jī)酸、游離氨基酸等。隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng)，大黃水溶性浸出物含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但輻照組的浸出物含量仍顯著高于對(duì)照組。李倩等[29]研究表明，大黃浸出物含量隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)有所降低，質(zhì)量呈下降趨勢(shì)，與本研究結(jié)果一致。本研究中，電子束輻照后大黃水溶性浸出物含量顯著高于對(duì)照組及硫熏處理組，且對(duì)其干燥失重、總灰分含量無明顯影響，表明電子束輻照有利于保持貯藏期內(nèi)大黃的品質(zhì)，其效果明顯優(yōu)于硫熏處理。

3.3 高能電子束輻照對(duì)大黃活性成分含量的影響

大黃蒽醌類化合物具有瀉下利尿、抗菌、抗病等多種作用，是藥典規(guī)定的大黃質(zhì)量控制指標(biāo)之一。本研究表明，電子束輻照后，蒽醌類化合物含量略有增加。王趙[11]采用60Co-γ射線和正電子輻照大黃，結(jié)果表明25 kGy以下劑量γ射線輻照對(duì)大黃蒽醌類成分無顯著影響，且兩種射線輻照對(duì)大黃指紋圖譜均無明顯影響。毛滕霄等[30]研究發(fā)現(xiàn)，30 kGy劑量以下60Co-γ射線輻照后，大黃總蒽醌、游離蒽醌含量無明顯變化。李月梅等[15]研究表明，大黃飲片中大黃素含量最高，經(jīng)60Co-γ射線輻照后大黃飲片蒽醌類含量均有所下降，其中大黃素甲醚含量降幅最大，與本研究結(jié)果存在差異，原因在于不同產(chǎn)地大黃主要成分含量差異較大[31]。有研究表明，大黃中主要活性成分的含量與貯藏時(shí)間有關(guān)[32-33]。本研究中，貯藏第0天時(shí)，大黃蒽醌類成分隨著輻照劑量的增加，呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，可能是輻照促進(jìn)大黃內(nèi)蒽酮、蒽酚轉(zhuǎn)化為蒽醌，導(dǎo)致蒽醌類成分含量上升[29]。而蒽醌類成分易分解，且受溫度的影響較大[34]，隨著貯藏時(shí)間的增加，大黃活性成分含量降低。唐文文[35]研究發(fā)現(xiàn)，大黃在貯藏期內(nèi)活性成分含量有所降低，可能是因?yàn)橘A藏過程中的質(zhì)量耗損，與本研究結(jié)果一致。本研究采用高能電子束對(duì)大黃飲片進(jìn)行不同劑量輻照處理，結(jié)果表明高能電子束輻照在一定程度上能提高大黃中主要活性成分含量，且增加其貯藏過程中主要成分的穩(wěn)定性，說明高能電子束輻照處理對(duì)大黃的貯藏具有積極作用。

3.4 高能電子束輻照對(duì)大黃抗氧化活性的影響

現(xiàn)代藥理研究表明，大黃主要對(duì)消化系統(tǒng)、保肝、腎臟等具有保護(hù)作用，還具有抗氧化、改善微循環(huán)等作用[36]。大黃所含的蒽醌類衍生物和鞣質(zhì)等能對(duì)自由基引起的細(xì)胞損傷起到直接作用，有利于細(xì)胞抗衰老及機(jī)體修復(fù)，此外，大黃的抗氧化活性對(duì)于大黃的其他藥用成分發(fā)揮作用起著較強(qiáng)的輔助作用。因此，大黃的抗氧化活性是評(píng)價(jià)大黃品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)[37]。

王宇卿等[38]利用高效液相色譜-質(zhì)譜儀(high performance liquid chromatography mass spectrometer, HPLC-MS)聯(lián)用檢測(cè)裝置分析大黃中抗氧化活性成分，在某種程度上客觀地評(píng)價(jià)了大黃的質(zhì)量。Serhat等[39]報(bào)道了大黃提取物是良好的抗氧化劑，對(duì)DPPH自由基清除率、羥自由基清除率、超氧陰離子自由基清除率均高于抗氧化劑叔丁基羥基茴香醚(butyl hydroxy anisd,BHA)。袁詩(shī)俊等[37]研究表明，大黃60%乙醇提取物的DPPH自由基清除率最高，為96.02%。以上研究均表明，大黃具有良好的抗氧化活性，除傳統(tǒng)藥用外，在保健食品的開發(fā)研究方面也有廣闊的應(yīng)用前景。

本研究表明，25 kGy及以下劑量電子束輻照、硫熏處理和貯藏時(shí)間對(duì)大黃DPPH自由基清除率均無明顯影響。呂慧英等[40]研究表明，大黃酚、大黃素甲醚與DPPH自由基清除能力呈負(fù)相關(guān)，而與大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素DPPH自由基清除能力呈正相關(guān)。本研究?jī)H探究了蒽醌類物質(zhì)在貯藏期內(nèi)的變化，5種成分含量在貯藏期內(nèi)的變化可能導(dǎo)致大黃的抗氧化活性變化不顯著。且大黃的抗氧化活性不僅與蒽醌類成分相關(guān)，而且是大黃內(nèi)所有抗氧化性物質(zhì)共同作用的結(jié)果[41]，大黃內(nèi)的鞣質(zhì)類化合物和苷類化合物也會(huì)影響大黃的抗氧化活性，因此大黃抗氧化活性變化不顯著也可能是鞣質(zhì)類化合物與苷類化合物的影響。何毅等[42]采用2、4、6 kGy高能電子束輻照川麥冬，結(jié)果表明高能電子束輻照對(duì)川麥冬抗氧化活性無顯著影響，與本研究結(jié)果類似。徐遠(yuǎn)芳等[43]采用60Co-γ射線和電子束輻照對(duì)葛根提取物的研究也得到了類似的結(jié)果，即兩種射線輻照對(duì)葛根提取物的DPPH自由基清除率、羥自由基清除率及總還原力均無顯著影響。張玉等[44]采用1、2、3 kGy電子束輻照香菇，結(jié)果表明輻照對(duì)香菇DPPH自由基清除率無顯著影響。孫熙浛等[45]研究表明，5、10、30 kGy輻照劑量對(duì)紅景天提取物的DPPH自由基清除率、2，2′-聯(lián)氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨鹽[2,2′-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid ammonium salt),ABTS]自由基清除率影響不大，與對(duì)照組相比均無顯著差異，與本試驗(yàn)結(jié)果類似。在此研究基礎(chǔ)上，今后擬探究電子束輻照加工工藝，以期提高輻照加工效率，為電子束輻照在大黃上的應(yīng)用提供依據(jù)。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，相比硫磺熏蒸，電子束輻照能有效延長(zhǎng)大黃的貯藏期，且對(duì)大黃品質(zhì)影響不大。當(dāng)電子束輻照劑量達(dá)到3 kGy時(shí)能有效殺滅大黃中的微生物，輻照范圍在3～5 kGy時(shí)，微生物限度達(dá)到《中華人民共和國(guó)藥典》現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)以下，同時(shí)大黃水浸物含量明顯增加，活性成分含量略有增加，適用于輻照后短期(約180 d)貯藏。當(dāng)輻照劑量達(dá)到7 kGy時(shí)大黃中的需氧菌、霉菌和酵母在貯藏期內(nèi)未檢出，7～10 kGy輻照處理能使微生物含量在一年的貯藏期內(nèi)處于較低水平，且對(duì)其活性成分含量具有較好的保持作用，適用于輻照后長(zhǎng)期(約360 d)貯藏。