真菌病毒減弱寄主致病性機(jī)理及其生防應(yīng)用

聶建華，張理航，張明明,3，郭立華，陳 偉，王雙超*

（1. 山西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，太原 030000；2. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193；3. 比利時(shí)列日大學(xué)讓步盧農(nóng)學(xué)院，讓步盧 5030）

真菌病害占植物病害的 70%～80%以上，嚴(yán)重降低作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。在過去 50年里，對(duì)農(nóng)作物真菌病害的防治主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，而化學(xué)農(nóng)藥的過度使用威脅食品安全，導(dǎo)致環(huán)境污染和病原菌抗藥性增強(qiáng)。真菌病毒是能夠在真菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和增殖的病毒，其中一些真菌病毒侵染后能夠減弱植物病原真菌的致病性，從而可用于植物病害的防治。真菌病毒作為一類新型的生防因子，具有綠色、環(huán)保、安全等優(yōu)點(diǎn)，以真菌病毒為核心的生防產(chǎn)品的研發(fā)和應(yīng)用能夠減少化學(xué)農(nóng)藥用量、延緩病原菌的抗藥性。本文綜述了真菌病毒減弱寄主致病性機(jī)理及其在病害防控中的應(yīng)用，同時(shí)提出了真菌病毒用于生物防治的前景和面臨的問題，為植物真菌病害綠色防控提供參考。

1 真菌病毒概述

1.1 真菌病毒的分類

真菌病毒廣泛存在于各大真菌類群中，根據(jù)其基因組組成及復(fù)制方式，真菌病毒可分為5種類型：雙鏈RNA（double-stranded RNA, dsRNA）病毒、正義單鏈RNA（positive single-stranded RNA，+ssRNA）病毒、負(fù)義單鏈RNA（negative single-stranded RNA，-ssRNA）病毒、逆轉(zhuǎn)錄單鏈RNA（RT ssRNA）病毒和單鏈DNA（single-stranded DNA，ssDNA）病毒。根據(jù)國(guó)際病毒分類委員會(huì)（International Committee on Taxonomy of Viruses，ICTV）的最新報(bào)告（https://talk.ictvonline.org/），真菌病毒共分為26個(gè)科。其中，dsRNA真菌病毒包含9個(gè)科：葡萄孢雙節(jié)段病毒科Botybirnaviridae、產(chǎn)黃青霉病毒科Chrysoviridae、彎孢霉病毒科Curvulavirida、巨型雙節(jié)段病毒科Megabirnaviridae、雙分病毒科Partitiviridae、多菌病毒科Polymycoviridae、四分體病毒科Quadriviridae、呼腸孤病毒科Reoviridae和全病毒科Totiviridae。+ssRNA真菌病毒包含12個(gè)科：甲型線形病毒科Alphaflexiviridae、桿菌狀核糖核酸病毒科Barnaviridae、葡萄孢歐爾密病毒科Botourmiaviridae、丁型線形病毒科Deltaflexiviridae、內(nèi)源病毒科Endornaviridae、鐮刀菌病毒科Fusariviridae、丙型線形病毒科Gammaflexiviridae、哈達(dá)卡病毒科Hadakaviridae、低毒病毒科Hypoviridae、線粒體病毒科Mitoviridae、裸露病毒科Narnaviridae和亞多卡利病毒科Yadokariviridae。-ssRNA真菌病毒包含2個(gè)科：?jiǎn)喂韶?fù)鏈RNA病毒科Mymonaviridae和白纖病毒科Phenuiviridae。RT ssRNA真菌病毒包含2個(gè)科：轉(zhuǎn)座病毒科Metaviridae和假病毒科Pseudoviridae。ssDNA真菌病毒目前報(bào)道包含1個(gè)科—類雙生病毒科Genomoviridae。還有很多已報(bào)道的真菌病毒尚未確定其分類地位。

1.2 能夠減弱寄主致病性的真菌病毒

真菌病毒可侵染絕大多數(shù)真菌類群，其中大部分病毒表現(xiàn)為隱性侵染，但也有少量病毒可減弱寄主真菌的致病性、抑制其生長(zhǎng)，這些病毒是防治真菌病害的潛在生防資源。目前已在多種病原菌中鑒定到可以減弱寄主真菌致病性的病毒（表1）。核盤菌Sclerotinia sclerotiorum嚴(yán)重危害大豆、油菜等油料作物和萵苣等蔬菜生產(chǎn)[1]，目前從核盤菌中已鑒定出8例能夠減弱寄主致病性的病毒，其中SsHADV-1（Sclerotinia sclerotiorumhypovirulence-associated DNA virus 1）是從核盤菌DT-8菌株中分離到的第1例DNA病毒[2-9]。栗疫病菌Cryphonectria parasitica感染栗樹引起嚴(yán)重的栗疫病，使板栗產(chǎn)量和質(zhì)量明顯下降，從栗疫菌中分離到 CHV1～4（Cryphonectria hypovirus 1～4）共 4例低毒病毒科病毒[10-13]。禾谷鐮孢菌Fusarium graminearum可引起小麥赤霉病，從中分離到2例低毒病毒科病毒[14,15]。真菌病毒的傳播方式主要分為水平傳播和垂直傳播。水平傳播是病毒通過感病寄主與其他菌株的菌絲融合進(jìn)行傳播；垂直傳播則是通過有性或無性孢子進(jìn)行傳播，多數(shù)真菌病毒可通過無性孢子傳播，而有性孢子的傳毒率很低。近期研究發(fā)現(xiàn)，真菌病毒還可通過昆蟲介體進(jìn)行傳播，侵染核盤菌的SsHADV-1病毒會(huì)隨著厲眼蕈蚊Lycoriella ingenua的取食傳播到其他菌絲[16]。

表1 部分減弱植物病原真菌致病力的真菌病毒Table 1 Part of mycoviruses that attenuate the virulence of plant pathogenic fungi

2 真菌病毒減弱寄主致病性機(jī)理

2.1 抑制寄主真菌生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)

減弱病原真菌致病力的真菌病毒侵染會(huì)影響寄主基因的表達(dá)。Allen和Nuss[17]對(duì)感染CHV1病毒的栗疫菌基因表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)毒菌株CHV1-EP713中132個(gè)基因表達(dá)水平上調(diào)、163個(gè)基因下調(diào)，弱毒菌株CHV1- Euro7中90個(gè)基因上調(diào)表達(dá)、76個(gè)基因下調(diào)表達(dá)，差異基因數(shù)量明顯減少。Wang等[18]發(fā)現(xiàn)禾谷鐮孢菌被FgHV1侵染后378個(gè)基因差異表達(dá)，其中多數(shù)是生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的關(guān)鍵基因。Lee等[19]通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)，SsHV2-L侵染后寄主核盤菌編碼的細(xì)胞色素P450和甲基轉(zhuǎn)移酶等生長(zhǎng)發(fā)育關(guān)鍵基因的mRNA表達(dá)量顯著增加。Li等[20]通過northern blot分析發(fā)現(xiàn)，SsDRV侵染的核盤菌差異表達(dá)基因都與能量轉(zhuǎn)換等生長(zhǎng)相關(guān)基因有關(guān)。Gao等[21]研究表明，SsNSRV-1編碼的ORF I蛋白調(diào)控寄主生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯和修飾。過表達(dá)ORF1蛋白的菌株表現(xiàn)出與SsNSRV-1侵染類似的表型，菌株的致病力均降低，表明ORF1蛋白是減弱寄主致病性的關(guān)鍵因子。真毒病毒通過調(diào)控寄主真菌基因表達(dá)從而改變寄主蛋白豐度。Wang等[22]對(duì)低毒病毒CHV1侵染的栗疫菌蛋白水平進(jìn)行測(cè)定，共檢測(cè)到33個(gè)蛋白存在差異表達(dá)，其中下調(diào)的蛋白多為參與代謝和能量轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，上調(diào)的蛋白多為囊泡相關(guān)蛋白。研究還發(fā)現(xiàn)CHV1編碼蛋白p48過表達(dá)菌株中存在4種不同分子質(zhì)量的囊泡。

2.2 抑制寄主RNA沉默

減弱病原真菌致病力的真菌病毒會(huì)影響寄主RNA沉默這一抗病毒反應(yīng)。RNA沉默（RNA干擾）是真核生物抗病毒的重要防御反應(yīng)[23]。植物、動(dòng)物和微生物等具有相同或相近的RNA沉默機(jī)制。當(dāng)病毒侵染導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的dsRNA積累后，RNA沉默系統(tǒng)被誘發(fā)。在Dicer-like（DCL）酶的作用下，dsRNA被切割形成20～30 nt長(zhǎng)度的雙鏈小分子RNA，稱為siRNA（small interfering RNA，siRNA）。siRNA被整合到Argonaute蛋白中，形成RISC復(fù)合體（RNA-induced silencing complex，RISC），進(jìn)而靶向切割與siRNA同源的病毒基因組，從而抑制病毒增殖。RNA沉默信號(hào)依賴RdRp（RNA dependent RNA polymerase，RdRP）促進(jìn) siRNA積累，將信號(hào)級(jí)聯(lián)放大。根據(jù)發(fā)生位點(diǎn)和作用方式，RNA沉默分為轉(zhuǎn)錄水平上的基因沉默（Transcriptional Gene Silencing，TGS）和轉(zhuǎn)錄后的基因沉默（Post Transcriptional Gene Silencing，PTGS）。目前，真菌病毒相關(guān)的RNA沉默研究主要集中在PTGS。

真菌RNA沉默抗病毒防御反應(yīng)首先在栗疫菌中發(fā)現(xiàn)。在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中，真菌病毒通過編碼RNA沉默抑制子抵御寄主的 RNA沉默。已被鑒定出的真菌病毒抑制子包括 CHV1-p29[24]、MyRV3-s10[25]、FgV1-ORF2[26]和CHV4-p24[27]。研究表明，RNA沉默抑制子p29通過抑制Cpdcl2和Cpagl2的轉(zhuǎn)錄激活來抑制寄主 RNA沉默，近期發(fā)現(xiàn)在栗疫菌中 RNA沉默需要轉(zhuǎn)錄激活因子 SAGA（Spt-Ada-Gcn5-acetyltransferase）結(jié)合從而上調(diào)Cpdcl2和Cpagl2的表達(dá)[28]。Yu等[26]發(fā)現(xiàn)禾谷鐮孢菌病毒FgV1編碼的ORF2具有DNA結(jié)合能力，可以抑制Fgdicer2和Fgago1的轉(zhuǎn)錄，從而促進(jìn)病毒增殖。栗疫菌低毒病毒CHV4編碼的蛋白p24通過抑制Cpdcl2的轉(zhuǎn)錄而抑制RNA沉默，并能夠協(xié)助病毒MyRV2侵染，促進(jìn)MyRV2的積累[27]。另有研究表明，SsHADV-1侵染抑制寄主RNA沉默后，激活了DNA復(fù)制和修復(fù)反應(yīng)[20]。

表2 真菌病毒編碼的RNA沉默抑制子Table 2 RNA silencing suppressores encoded by mycoviruses

2.3 影響寄主細(xì)胞信號(hào)通路

減弱植物真菌致病力的真菌病毒侵染會(huì)干擾寄主細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。MAPK（Mitogen-activated protein kinase，促分裂原活化蛋白激酶）信號(hào)通路是生物體內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑之一，通過磷酸化或去磷酸化將信號(hào)逐級(jí)傳遞。栗疫菌中分離到與MAPK途徑有關(guān)的兩個(gè)基因Cpmk1和Cpmk2，病毒CHV1-EP713通過上調(diào)Cpmk1基因的表達(dá)從而調(diào)控MAPK信號(hào)通路[31]，而Cpmk2基因的表達(dá)不受病毒影響[32]。鈣離子在真核生物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中起重要作用，Parsley等[33]發(fā)現(xiàn)CHV1-EP713能夠抑制CpLac-1和CpLac-3基因的表達(dá)，影響IP3-Ca2+-鈣調(diào)素-鈣調(diào)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)途徑，CHV1-Euro7只抑制CpLac-1基因的表達(dá)。

G蛋白在絲狀真菌中參與營(yíng)養(yǎng)代謝、信息素反應(yīng)和營(yíng)養(yǎng)不親和等過程[34]。Gao等[21]發(fā)現(xiàn)SsNSRV-1 ORF I的表達(dá)會(huì)影響G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。在突變株Z1-1和Z1-13中與G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的4個(gè)基因存在差異表達(dá)。Choi等[35]發(fā)現(xiàn)在CHV1侵染菌株中CpG-1基因的表達(dá)量減少，說明病毒通過抑制G蛋白同源基因CpG-1的表達(dá)從而干擾寄主 G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。Ding等[36]發(fā)現(xiàn)病毒SsHADV-1可能首先突破真菌細(xì)胞壁，并與細(xì)胞膜相關(guān)小G蛋白相互作用傳遞信號(hào)，將信號(hào)傳遞到細(xì)胞核等各種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中，破壞細(xì)胞的生物合成。Wu等[37]發(fā)現(xiàn)在SsMYRV4侵染的菌株與其他營(yíng)養(yǎng)不親和菌株發(fā)生融合時(shí)，G蛋白亞基Gα、Gβ和Gγ的表達(dá)被抑制，營(yíng)養(yǎng)不親和相關(guān)基因的表達(dá)也被降低，表明病毒能夠影響細(xì)胞內(nèi)G蛋白偶聯(lián)受體所介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)通路，降低菌絲的營(yíng)養(yǎng)不親和反應(yīng)。

2.4 影響寄主真菌次生代謝產(chǎn)物生物合成途徑

次生代謝產(chǎn)物是植物、動(dòng)物和微生物進(jìn)行抗病和生存競(jìng)爭(zhēng)的關(guān)鍵分子，其種類繁多，產(chǎn)生的時(shí)間和部位通常也具有條件誘導(dǎo)性。禾谷鐮孢菌侵染小麥引起赤霉病，會(huì)產(chǎn)生脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）等毒素，這些毒素會(huì)直接危害宿主細(xì)胞，為病菌生長(zhǎng)產(chǎn)生更有利的基質(zhì)條件。Li等[15]發(fā)現(xiàn)低毒病毒FgHV2侵染禾谷鐮孢菌后能夠降低病原體DON的積累，表明FgHV2抑制了寄主毒素的產(chǎn)生，從而進(jìn)一步降低禾谷鐮孢菌的致病性。Qu等[38]通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)當(dāng)SsHADV-1侵染DT-8菌株后，毒力相關(guān)基因下調(diào)表達(dá)。低毒病毒CHV1侵染板栗疫病菌后菌株色素分泌減少，致病力顯著降低。Wang等[39]通過雙向凝膠電泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）和差異蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜定量（isobaric Tagging for Relative and Absolute Quantitation，iTRAQ）技術(shù)發(fā)現(xiàn) CHV1侵染板栗疫菌下調(diào)漆酶代謝合成相關(guān)基因Cplaccase3和CplaccaseA基因的表達(dá)，表明CHV1可能通過調(diào)控漆酶的合成進(jìn)一步降低板栗疫病菌的致病力。

3 真菌病毒在病害防控中的應(yīng)用

3.1 通過減弱病原真菌致病性防治植物病害

首次用于防治植物真菌病害的低毒病毒是CHV1[40]，該病毒在20世紀(jì)90年代歐洲栗疫病流行期對(duì)栗疫病的防治取得顯著的成效，挽救了大批瀕臨滅絕的歐洲栗樹林。2012年，張林巧等[41]通過田間試驗(yàn)表明，在人工接種CHV1兩年后，CHV1-CN280在田間成功定殖，并擴(kuò)散到田間栗疫菌菌株中。2017年，Krstin等[42]發(fā)現(xiàn)CHV1侵染的菌株CR23和M56/1都有致病力減弱的現(xiàn)象，可以作為潛在的生物防治劑。2019年，Xiong等[43]通過表達(dá)CHV1-CN280的蛋白p29，發(fā)現(xiàn)其轉(zhuǎn)化子可以在栗疫菌和稻瘟病菌中表達(dá)，并能抑制色素產(chǎn)生、減少分生孢子產(chǎn)量，具有非常好的生物防治潛力。

2013年Yu等[9]提取SsHADV-1病毒粒子，發(fā)現(xiàn)這些粒子可直接侵染無毒的核盤菌菌絲，噴灑在植物葉片上能夠抑制菌斑擴(kuò)散。Yu等[44]在大田環(huán)境下進(jìn)行試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)病毒粒子在葉片上可存活15 d，且能夠降低病害發(fā)病率和病情指數(shù)。雖然SsHADV-1病毒粒子只可以侵染小核盤菌Sclerotinia minor3-4-1菌株和雪腐核盤菌Sclerotinia nivalisLet-19菌株，寄主范圍窄，但施用時(shí)靶向性高，安全性好，同時(shí)為更多真菌病毒產(chǎn)品的開發(fā)提供了新的模式。

2018年，Mochama等[45]發(fā)現(xiàn)核盤菌DK3菌株的dicer1/2雙敲除突變株生長(zhǎng)慢，在SsHV2-L、SsHADV-1共同侵染后表現(xiàn)出更嚴(yán)重的生長(zhǎng)緩慢、色素沉著減少等表型變化。這種混合侵染減弱寄主致病性的現(xiàn)象為我們開辟了新的生物防治途徑。另外，病毒侵染也可以增強(qiáng)寄主對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力。吳松松等[46]發(fā)現(xiàn)病毒SsMYRV4侵染核盤菌可以增強(qiáng)核盤菌耐高滲能力和耐活性氧的能力。目前，低毒病毒的體外傳播機(jī)制還不明確，研究有效的低毒病毒體外傳播途徑為病毒的傳播提供有力的支持。低毒病毒侵染的寄主往往單一，因此分離鑒定更多能夠減弱毒力又具有強(qiáng)侵染力的真菌病毒對(duì)生物防治具有重要意義。

3.2 通過誘導(dǎo)寄主真菌內(nèi)生活性和提高植物免疫力防控植物真菌病害

近期研究發(fā)現(xiàn)，一些真菌病毒侵染可以將植物病原真菌轉(zhuǎn)化為對(duì)植物有益的內(nèi)生真菌。Zhang等[47]發(fā)現(xiàn)真菌病毒SsHADV-1侵染核盤菌DT-8后，能夠抑制核盤菌關(guān)鍵致病基因的表達(dá)，調(diào)控油菜與防御、激素和晝夜節(jié)律通路有關(guān)基因的表達(dá)。田間試驗(yàn)表明，在開花期早期噴施 DT-8菌株可使油菜莖腐病減輕67.6%，增產(chǎn)14.9%。曲正等[48]利用攜帶SsHADV-1的核盤菌DT-8菌株菌絲懸液進(jìn)行油菜種子處理，觀察到核盤菌DT-8可以在油菜體內(nèi)定殖并且有效地控制油菜菌核病，有效增加油菜產(chǎn)量。對(duì)地下部分進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)微生物群體結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，植物病原菌豐度降低，且植物對(duì)莖腐病的耐受性更強(qiáng)。這些研究結(jié)果表明，攜帶減弱寄主致病性病毒的病原真菌侵染植物后，致病性狀基本喪失，反而能夠誘導(dǎo)植物免疫，同時(shí)具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高產(chǎn)量的作用。

Tian等[49]對(duì)SsHADV-1侵染的核盤菌DT-8菌株、脫毒菌株和野生型菌株進(jìn)行了不同寄主的侵染實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)核盤菌在油菜上是一種腐生菌，在小麥、水稻、大麥、玉米和其他谷類中則可以作為活體營(yíng)養(yǎng)型內(nèi)生定殖。DT-8菌株施用于小麥后，能夠減輕 40%的由鐮刀菌引起的病害危害，而且能夠提高小麥產(chǎn)量。這些數(shù)據(jù)表明，一種植物的病原菌在另外一種植物上可以作為內(nèi)生菌存在，真菌病毒的侵染能夠降低病原菌傳播的風(fēng)險(xiǎn)，提高內(nèi)生菌施用的安全性，并且增強(qiáng)內(nèi)生菌的功能活性。這種利用感侵染真菌病毒的菌株誘導(dǎo)植物免疫，開發(fā)病毒-真菌共生的植物疫苗，是真菌病害生物防治的一種新策略。真菌和病毒聯(lián)合應(yīng)用模式為植物疫苗的開發(fā)提供了新思路。

4 真毒病毒應(yīng)用的前景與面臨的問題

當(dāng)前，真菌病害新型生防因子的挖掘與開發(fā)越來越受到關(guān)注。真毒病毒能夠抑制病菌擴(kuò)散，且不會(huì)對(duì)植物造成傷害，無農(nóng)藥殘留，具有綠色、安全、可持續(xù)等優(yōu)點(diǎn)，利用真毒病毒對(duì)植物真菌病害進(jìn)行生物防治被認(rèn)為是極具潛力的防治策略。

與動(dòng)植物病毒相比，我們對(duì)真菌病毒的了解仍然不夠深入。多數(shù)真菌病毒在其增殖周期中缺乏細(xì)胞外階段，真菌菌株間普遍存在營(yíng)養(yǎng)不親和性，導(dǎo)致病毒傳播困難。Choi等[50]通過比較基因組學(xué)篩選了栗疫菌營(yíng)養(yǎng)不親和（vegetative incompatibility，vic）相關(guān)的7個(gè)基因，發(fā)現(xiàn)vic2、vic6或vic7的破壞增強(qiáng)了病毒的傳播。另外，研究表明，某些病毒能夠突破寄主營(yíng)養(yǎng)不親和性進(jìn)行侵染。Hamid等[51]報(bào)道真菌病毒SsDFV2可以克服寄主營(yíng)養(yǎng)不親和性，侵染核盤菌1980菌株，這是首次報(bào)道+ssRNA真菌病毒可以克服營(yíng)養(yǎng)不親和的限制，這一現(xiàn)象有助于真菌病毒在作物病害防治中更好的應(yīng)用。吳松松等[36]發(fā)現(xiàn)攜帶SsMYRV4的菌株能夠與營(yíng)養(yǎng)不親和菌絲進(jìn)行融合。SsMYRV4及其寄主核盤菌可以作為病毒傳播的“橋梁”，與SsDRV或SsMV1共侵染同一菌株時(shí)，SsMYRV4促進(jìn)其它病毒在營(yíng)養(yǎng)不親和的不同個(gè)體間傳播，帶動(dòng)病毒在核盤菌群體間的傳播。SsMYRV4的這種特性為其他具有生防潛力、但受限于營(yíng)養(yǎng)不親和限制的RNA病毒的生物防治應(yīng)用提供了可能。因此，探索發(fā)現(xiàn)能夠突破菌株?duì)I養(yǎng)不親和性的病毒及其模式機(jī)理是真菌病毒未來研究的重點(diǎn)之一。

近年來，伴隨分子生物學(xué)技術(shù)手段的快速發(fā)展，真菌病毒研究發(fā)展很快。但真菌病毒的研究應(yīng)用仍需要克服以下幾個(gè)困難：一是真菌病毒的資源挖掘程度不夠。目前已經(jīng)利用高通量技術(shù)發(fā)現(xiàn)了大量的真菌病毒，但存在菌株覆蓋面窄、病毒基因組序列不完整、病毒功能未知等短板，限制了真菌病毒資源發(fā)掘的全面性和完整性。二是病毒-真菌-植物互作機(jī)制研究較少。目前大部分的真菌病毒研究集中在資源挖掘和病毒鑒定水平，在病毒與寄主真菌互作以及病毒-真菌-植物三者互作機(jī)制方面研究較少。三是真菌病毒產(chǎn)品的商品化開發(fā)不足。市場(chǎng)上亟需基于真菌病毒的真菌病害生防產(chǎn)品，助力我國(guó)農(nóng)業(yè)安全生產(chǎn)。我國(guó)科學(xué)家對(duì) SsHADV-1等進(jìn)行了病毒體外施用和病毒-寄主植物疫苗等兩方面進(jìn)行了深入研究，有望開發(fā)出新型植物病害生防產(chǎn)品。