新型磷酸二酯酶5抑制劑CPD1對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)心肌肥厚大鼠心臟的保護(hù)作用

劉曉晴,楊建欽,王栩林,李 斌,封文斌,高 潔,趙子建,穆云萍,李芳紅

(1.廣東工業(yè)大學(xué)生物醫(yī)藥學(xué)院,廣東 廣州 510006；2.南方醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院,廣東省人民醫(yī)院,廣東 廣州 510080)

心血管疾病依然是世界范圍內(nèi)導(dǎo)致死亡的首要原因,2019年，柳葉刀發(fā)表的前瞻性城鄉(xiāng)流行病學(xué)研究結(jié)果顯示心血管疾病死因占比達(dá)40%,且不同收入水平國(guó)家心血管疾病死亡占比存在顯著差異,收入水平越低,心血管疾病發(fā)病率和死亡率越高[1]。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗塞、高血壓、慢性腎功能衰竭、糖尿病和肥胖等都是常見的引起心血管疾病的危險(xiǎn)因素,盡管病因不同,但常見的最后階段都是心力衰竭綜合征。值得注意的是,病理性心肌肥厚發(fā)展為心力衰竭越來越成為心血管疾病的重要病因[2-3],能夠引起心肌缺血和心肌病的發(fā)生,減少心臟容量,降低心臟射血分?jǐn)?shù)。因此,臨床上通過抑制左心肥大，保護(hù)心臟功能作為治療心力衰竭的重要策略。目前臨床上用于治療心衰患者的一線藥物有β受體阻滯劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張素受體阻斷劑和利尿劑,雖然很大程度上能減緩疾病的進(jìn)展,但死亡率仍然很高。雖然這些藥物通常耐受性良好,但患者出現(xiàn)頭暈、咳嗽、心動(dòng)過緩、高鉀血癥等不良副作用的情況并不少見[4]。因此，開發(fā)一種安全有效治療心肌肥厚的藥物對(duì)于預(yù)防嚴(yán)重心血管疾病的發(fā)生意義重大。

磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDEs)抑制劑是一類能夠抑制PDEs活性的藥物,在急性難治性心力衰竭、肺動(dòng)脈高壓、勃起功能障礙等多種疾病中被廣泛應(yīng)用。PDE3抑制劑氨力農(nóng)和米力農(nóng)具有正性肌力作用和血管擴(kuò)張作用,可加強(qiáng)心肌收縮力,改善左室功能[5],但因長(zhǎng)期口服副作用大,尤其米力農(nóng)有增加死亡率的風(fēng)險(xiǎn),目前只限用于頑固性心力衰竭的短期靜脈用藥。心臟中存在一個(gè)與cGMP耦合的內(nèi)在信號(hào)系統(tǒng),可以抑制心肌增殖反應(yīng)。cGMP由磷酸二酯酶超家族特定成員分解代謝,研究最廣泛的cGMP酯酶是PDE5,PDE5能夠選擇性水解細(xì)胞內(nèi)cGMP,生理?xiàng)l件下PDE5在心臟中的表達(dá)較低,而在心力衰竭患者心肌中表達(dá)上調(diào)[6],抑制PDE5可顯著改善缺血性心肌病、阿霉素誘導(dǎo)的心肌病，以及壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚[7-8]。PDE5抑制劑具有治療方法簡(jiǎn)單、臨床經(jīng)驗(yàn)豐富和安全性強(qiáng)的特點(diǎn),表明這可能是治療人類肥厚性心臟病的重要方法。目前,已被批準(zhǔn)上市的PDE5抑制劑西地那非和他達(dá)拉非等表現(xiàn)出的副作用仍未解決,中國(guó)專利(CN102020645A)公開了一種西地那非類似物(WYQ)制備方法,不僅降低了藥物副作用,且對(duì)PDE5的特異性顯著提升(IC50=0.001 4±0.000 1 μmol·L-1)。但WYQ的水溶性依然很差(室溫下<2 g·L-1),影響了藥物的生物利用度,因此,團(tuán)隊(duì)對(duì)其進(jìn)行成鹽和共晶篩選,評(píng)估發(fā)現(xiàn)的晶型或鹽型理化性質(zhì),最終選出水溶性高(室溫下>13 g·L-1)、理化性質(zhì)穩(wěn)定的優(yōu)良晶型CPD1(中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枺?01910505948.5),以滿足臨床用藥對(duì)活性成分純度、水溶性、吸濕性、熱穩(wěn)定性等理化性質(zhì)的嚴(yán)格要求。我們前期研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),CPD1干預(yù)能夠通過抑制肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中非電壓依賴性鈣通道功能,降低肺血管收縮力,減輕肺血管重塑,發(fā)揮防治肺動(dòng)脈高壓的作用[9]。但CPD1對(duì)心肌肥厚大鼠心功能的保護(hù)作用有待進(jìn)一步研究。

因此,本研究使用異丙腎上腺素(isoprenaline)持續(xù)腹腔注射誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠模型,應(yīng)用血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)、心臟病理學(xué)分析及分子生物學(xué)技術(shù),觀察CPD1干預(yù)對(duì)心肌肥厚大鼠左心室內(nèi)壓、心臟功能、心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)及肥大標(biāo)志基因表達(dá)量的影響,進(jìn)一步探討新型PDE5抑制劑CPD1在心肌肥厚發(fā)病過程中的防治作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雄性SD大鼠，體質(zhì)量(250～280) g,購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司[SCXK(湘)2016-0002]。本研究所需大鼠飼養(yǎng)于華南理工大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[SYXK(粵)2017-0178],實(shí)驗(yàn)方案獲得華南理工大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(No 2018-042)。

1.1.2試劑與儀器 異丙腎上腺素(I5627)購(gòu)自美國(guó)Sigma公司,依那普利(enalapril,A45103)購(gòu)自3A Chemicals 艾覽(上海)化工科技有限公司,蘇木素伊紅染色試劑盒(C0105)購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司。西地那非(139755-83-2)、CPD1(ET32637-37-P1)購(gòu)自和委托天津藥明康德新藥開發(fā)有限公司合成,經(jīng)COA分析測(cè)定CPD1純度為99%。藥物配制：異丙腎上腺素：用生理鹽水配成4 g·L-1藥液；CPD1：生理鹽水配成1.25 g·L-1的藥液；西地那非：用0.5%的羧甲基纖維素鈉配成5 g·L-1的藥液；依那普利：生理鹽水配成2.5 g·L-1的藥液；所有藥物均現(xiàn)配現(xiàn)用。TRIzol reagent RNA提取試劑盒(美國(guó)Invitrogen公司)、PrimeScript? RT reagent Kit(日本TaKaRa),引物由上海生工生物有限公司合成。其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)(RM6240BDJ)、壓力換能器(YPJ01)購(gòu)自成都儀器廠；石蠟包埋機(jī)(MPS/P1,德國(guó)SLEE)；石蠟切片機(jī)(美國(guó)Thermo)；冷凍臺(tái)(中威電子儀器有限公司)；自動(dòng)染色機(jī)：LEICA Autostainer ST5020；切片掃描儀：Pannoramic DESK,P-MIDI,P250(匈牙利)；-80 ℃冰箱(中國(guó)美菱)；烘箱(DH6-9143B5-Ⅲ,上海新苗)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1異丙腎上腺素致心肌肥厚大鼠模型的建立和分組 持續(xù)腹腔注射異丙腎上腺素誘導(dǎo)成年大鼠心臟左心重和室壁厚度增加[10],是最早報(bào)道的心肌肥厚動(dòng)物模型。大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(Con,8只)、異丙腎上腺素模型組(Iso,12只)、CPD1治療組(CPD1,10只)、西地那非治療組(Sif,10只)、陽性藥依那普利治療組(En,10只)。Iso組和各治療組大鼠,以5 mg·kg-1的劑量每天一次腹腔注射異丙腎上腺素,正常對(duì)照組則采用相同方法注射生理鹽水,2 h后治療組分別給予CPD1(5 mg·kg-1·d-1)、西地那非(20 mg·kg-1·d-1)、依那普利(10 mg·kg-1·d-1)灌胃治療,持續(xù)7 d,正常飲食飲水。

1.2.2大鼠心功能檢測(cè) RM6240生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)可檢測(cè)大鼠的左心室收縮壓(left ventricular systolic pressure,LVSP)和心室壓力變化速率(dp/dt),進(jìn)而反映心臟的舒縮功能。實(shí)驗(yàn)啟動(dòng)前,需選擇血壓測(cè)量項(xiàng)目,調(diào)節(jié)參數(shù),定標(biāo)壓力換能器。腹腔注射20%烏拉坦按照0.5 g·kg-1劑量麻醉大鼠,腹腔肝素化(500 IU·kg-1)處理,經(jīng)右頸總動(dòng)脈行左心室插管術(shù),記錄各組大鼠的心率、LVSP、dp/dt,待曲線穩(wěn)定后持續(xù)記錄10 min。

1.2.3心臟質(zhì)量指數(shù)和左心室質(zhì)量指數(shù)測(cè)量 完成心功能檢測(cè)后，嚴(yán)格按照華南理工大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)的要求對(duì)大鼠實(shí)施安樂死,迅速取出大鼠心臟,濾紙吸干血液和水分,拍照后稱重,分離左心室并稱重記錄。分離大鼠脛骨并測(cè)量其長(zhǎng)度,心臟質(zhì)量指數(shù)和左心室質(zhì)量指數(shù)分別用心臟-脛骨長(zhǎng)度比(HW/Tibial)以及左心室-脛骨長(zhǎng)度比(LV/Tibial)表示。

1.2.4大鼠心臟組織形態(tài)學(xué)檢測(cè) 心臟取出后置于10%甲醛溶液中固定24 h,常規(guī)脫水、包埋后最大橫切面連續(xù)切片(3 μm),行蘇木精-伊紅染色。利用切片數(shù)字掃描系統(tǒng)(Pannoramic Scanner)和瀏覽軟件(CaseViewer)對(duì)心臟組織切片進(jìn)行全自動(dòng)玻片掃描和分析,使用ImageJ軟件對(duì)每組大鼠心肌細(xì)胞橫截面積進(jìn)行計(jì)算。設(shè)定Con組左心室心肌細(xì)胞橫截面積為1,模型和治療組以Con組數(shù)據(jù)為參照,計(jì)算各組心肌細(xì)胞的相對(duì)橫截面積。

1.2.5心臟組織肥大因子mRNA檢測(cè) 利用TRIzol reagent RNA試劑盒提取各組大鼠左心組織總RNA,測(cè)定濃度后,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA并對(duì)目的基因進(jìn)行RT-PCR。ANP上下游引物序列分別為：5′-CTGGGGAAGTCAACCCGTCT-3′,5′-TCTGGGCTCCAATCCTGTCA-3′；BNP上下游引物序列為：5′-AGCCAGTCTCCAGAACAATCCA-3′,5′-TGTGCCATCTTGGAATTTCGA-3′；大鼠ACTB內(nèi)參上下游引物序列分別為：5′- TGTCACCAACTGGGACGATA-3′,5′- GGGGTGTTGAAGGTCTCAAA-3′。

2 結(jié)果

2.1 CPD1對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠心功能的影響通過左心室插管,記錄各組大鼠的左心室收縮壓和dp/dt,觀察CPD1治療對(duì)心肌肥厚大鼠左心室收縮壓、心率及心臟舒縮功能的影響。結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組(Con)相比,Iso組大鼠的LVSP明顯降低(Con：142.3±5.1 mmHg,n=8；Iso：107.7±9.9 mmHg,n=9,P<0.01),心率明顯降低(Con：409.9±37.5 beats·min-1；Iso：359.4±59.5 beats·min-1,P<0.01),Max dp/dt(Con：9 473.7±721.7 mmHg·s-1；Iso：5 968.7±1 330.1 mmHg·s-1,P<0.01)和Min dp/dt(Con：-6 787.2±840.9 mmHg·s-1；Iso：-3 697.2±826.1 mmHg·s-1,P<0.01)絕對(duì)值均明顯降低,表明持續(xù)異丙腎上腺素腹腔注射可致大鼠心率降低,心臟收縮和舒張功能受損。CPD1治療后可明顯升高大鼠的LVSP(136.8±8.3 mmHg,n=9,P<0.01)、心率(414.1±52.9 beats·min-1,P<0.01)以及Max dp/dt(8 724.3±1 063.7 mmHg·s-1,P<0.01)和Min dp/dt(-5 856.9±1 143.1 mmHg·s-1,P<0.01)絕對(duì)值,且CPD1治療效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)PDE5抑制劑西地那非和陽性對(duì)照藥依那普利,表明CPD1干預(yù)能夠有效恢復(fù)由異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠心功能的損傷(Fig 1A-I)。

Fig 1 Effect of CPD1 on cardiac function in hypertrophy rats after 7 d on isoprenaline intraperitoneal n=9)

2.2 CPD1對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠心臟質(zhì)量指數(shù)的影響與Con相比,Iso組大鼠的心臟-脛骨長(zhǎng)度比(HW/Tibial)(Con：23.4±2.6 mg·mm-1,n=8；Iso：31.4±3.1 mg·mm-1,n=9,P<0.01)和左心室-脛骨長(zhǎng)度比(LV/Tibial)(Con：14.1±1.7 mg·mm-1,n=8；Iso：18.8±1.6 mg·mm-1,n=9,P<0.01)均明顯增高,表明持續(xù)異丙腎上腺素腹腔注射可誘導(dǎo)大鼠發(fā)生全心肥大,左心肥大更為明顯。CPD1干預(yù)后,大鼠的HW/Tibial(26.4±2.1%,P<0.01)和LV/Tibial(15.5±1.5 mg·mm-1,P<0.01)均明顯降低,抑制效果不低于西地那非和依那普利,表明CPD1能減輕異丙腎上腺素誘導(dǎo)的大鼠心肌肥厚(Fig 2A-C)。

Fig 2 Effect of CPD1 on cardiac hypertrophy index in

2.3 CPD1對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠心肌細(xì)胞橫截面積的影響與Con相比,Iso組大鼠心臟左心室心肌組織形態(tài)發(fā)生改變,出現(xiàn)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn),左心室心肌細(xì)胞的橫截面積也明顯增大(Con：1.0±0.2,n=50；Iso：5.0±0.7,n=54,P<0.01),表明持續(xù)異丙腎上腺素腹腔注射可誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞發(fā)生肥大。CPD1可明顯減小大鼠的心肌細(xì)胞橫截面積(1.3±0.2,n=60,P<0.01),同樣,治療效果優(yōu)于西地那非和依那普利,表明在細(xì)胞層面上CPD1干預(yù)可抑制異丙腎上腺素引起的心肌肥大(Fig 3A-C)。

Fig 3 Effect of CPD1 on cardiac structure in hypertrophy rats

2.4 CPD1對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠左心組織中肥大因子表達(dá)的影響心臟組織中肥大因子心房鈉尿肽(atrial netriuretic peptide,ANP)和腦鈉肽(brain natriuretic peptide,BNP)的表達(dá)量可作為衡量心肌肥厚的標(biāo)志,本研究通過實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè),觀察各組大鼠左心室組織中ANP和BNP mRNA表達(dá)量的變化。結(jié)果顯示：與Con相比,Iso組大鼠左心室中ANP mRNA(Con：1.0±0.1,n=3；Iso：17.3±3.6,n=3,P<0.01)和BNP mRNA(Con：1.0±0.1,n=3；Iso：2.1±0.7,n=3,P<0.01)含量均明顯增加,表明持續(xù)異丙腎上腺素腹腔注射成功誘導(dǎo)大鼠發(fā)生心肌肥厚。同樣,CPD1治療明顯降低ANP mRNA(6.7±0.8,n=3,P<0.01)和BNP mRNA,0.6±0.1,P<0.01)含量,治療效果優(yōu)于西地那非,表明CPD1干預(yù)對(duì)異丙腎上腺素引起的心肌肥厚有明顯保護(hù)作用(Fig 4A-B)。

Fig 4 Effect of CPD1 on markers of hypertrophy rats after 7d

3 討論

心血管疾病目前仍是最常見的住院原因和死因,且發(fā)病率在低收入和中等收入國(guó)家遠(yuǎn)高于高收入國(guó)家[1],盡管診斷技術(shù)和治療策略已取得重大進(jìn)展,死亡率降低了50%以上,但長(zhǎng)期預(yù)后依然很差,隨著人口老齡化,負(fù)擔(dān)日益加重,患者醫(yī)療需求很難得到滿足,已成為重大公共衛(wèi)生問題。2019年柳葉刀在線發(fā)表的PURE研究評(píng)估了多種危險(xiǎn)因素與心血管疾病和死亡率的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)高血壓是心血管疾病最大的危險(xiǎn)因素,吸煙和糖尿病與死亡相關(guān)性最強(qiáng)[3]。心臟暴露于持續(xù)壓力超負(fù)荷中,多種細(xì)胞因子信號(hào)和轉(zhuǎn)錄途徑被激活,誘導(dǎo)心肌肥大性重塑,最終導(dǎo)致進(jìn)行性心功能不全和心力衰竭。病理性心肌肥厚成因復(fù)雜,受多個(gè)調(diào)控因素影響,臨床上尚缺乏有效防治藥物,有研究表明,控制氧化和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣離子信號(hào),減少心律失常和心肌細(xì)胞凋亡的風(fēng)險(xiǎn),抑制心肌細(xì)胞肥大的驅(qū)動(dòng)因素,同時(shí)

結(jié)合營(yíng)養(yǎng)、飲食和生活方式的選擇,可有利于心肌肥厚和心衰的防治[2]。

PDEs可特異性清除cAMP和cGMP的3′,5′-環(huán)磷酸酯部分,經(jīng)典的PDE3抑制劑氯力農(nóng)、米力農(nóng)通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外鈣平衡,增加心肌組織中cAMP水平,降低全身血管阻力和左心室充盈壓,改善心臟功能,但對(duì)心率和平均動(dòng)脈壓沒有影響[5]。cGMP參與心臟組織中細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡等多項(xiàng)生理過程,一氧化氮(NO)途徑是心血管系統(tǒng)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,可調(diào)節(jié)血管張力和心肌功能[11]。內(nèi)皮功能障礙引起的NO-sGC-cGMP信號(hào)軸的破壞和cGMP合成受損導(dǎo)致血管緊張素失調(diào)、血管和心室硬化、心肌纖維化和肥大,引起心臟和腎功能的下降[12-14]。因此,靶向NO-sGC-cGMP信號(hào)通路,減少cGMP的分解代謝,一直是抗心肌肥厚和治療心衰的有利途徑[15]。西地那非和其他選擇性藥物對(duì)PDE5的抑制作用在臨床上被廣泛用于增強(qiáng)勃起功能和治療肺動(dòng)脈高壓[16]。PDE5在心肌中也有表達(dá),并具有活性[17],西地那非抑制PDE5對(duì)靜息狀態(tài)下心功能影響不大,但對(duì)暴露于持續(xù)壓力負(fù)荷中的心功能作用重大,能夠阻止和逆轉(zhuǎn)由壓力超負(fù)荷引起的心室肌細(xì)胞和分子重構(gòu),改善心功能,甚至在超負(fù)荷持續(xù)存在的情況下,依然可以逆轉(zhuǎn)已經(jīng)發(fā)生肥大的心室肌功能[8],證明抑制PDE5是一種安全簡(jiǎn)單、臨床經(jīng)驗(yàn)豐富的治療肥厚性心臟病的重要方法。

現(xiàn)有PDE5抑制劑藥物副作用大且價(jià)格昂貴,給病人和社會(huì)帶來巨大身心和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),中國(guó)專利文獻(xiàn)CN102020645A公開的WYQ,是一種吡唑并嘧啶酮衍生物,它克服了原有藥物的缺點(diǎn),對(duì)PDE5特異性更強(qiáng),具有低劑量高藥效的特點(diǎn)[18],但其水溶性較差。為了改善藥物的水溶性,我們對(duì)WYQ進(jìn)行了成鹽和共晶篩選,最終選擇了水溶性及腸溶性好、理化性質(zhì)穩(wěn)定、安全性高(半數(shù)致死量LD50=1 120.650 mg·kg-1,LD50的95%可信限=(868.184～1 446.531) mg·kg-1的鉀鹽晶型CPD1。我們前期研究已經(jīng)證實(shí)其能特異性抑制PDE5,能有效防治肺動(dòng)脈高壓[9]。本研究利用異丙腎上腺素持續(xù)腹腔注射7 d制備心肌肥厚大鼠模型,觀察CPD1對(duì)心肌肥厚大鼠心臟的保護(hù)作用,以及對(duì)肥大標(biāo)志基因表達(dá)的影響。結(jié)果顯示CPD1治療后,顯著升高心肌肥厚大鼠的左心室壓力和壓力變化速率,且無論是治療劑量還是藥效均明顯優(yōu)于西地那非和依那普利,說明CPD1干預(yù)通過改善心臟的收縮和舒張功能,恢復(fù)心肌肥厚大鼠的心臟功能。ANP含量增加是早期心功能異常的表現(xiàn),BNP更是公認(rèn)的心力衰竭生物標(biāo)志物,CPD1顯著降低左心室組織中ANP和BNP基因的表達(dá),表明CPD1治療在動(dòng)物水平可改善異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚。

病理性心肌肥厚是誘發(fā)多種重大心血管疾病的重要病因,心肌細(xì)胞增大的過程中伴隨心肌細(xì)胞間質(zhì)的增加,因超過毛細(xì)血管的供應(yīng)能力,會(huì)引起心肌缺氧和心臟重構(gòu),如果不及時(shí)干預(yù),心臟會(huì)進(jìn)一步發(fā)展為不可逆的失代償期,并伴有心功能障礙,最終引起心力衰竭甚至死亡。但臨床上缺乏治療心肌肥厚的藥物,只能針對(duì)誘發(fā)因素,采取一定的治療策略。本研究中,給予CPD1治療后,顯著降低心肌肥厚大鼠的心臟質(zhì)量指數(shù)和左心室質(zhì)量指數(shù),同時(shí)減小左心室心肌細(xì)胞的橫截面積,表明與PDE5、cGMP和/或PKG調(diào)節(jié)相關(guān)的潛在機(jī)制對(duì)抑制肥大是有效的,并且可能干擾多種信號(hào)途徑,改善異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌肥厚,保護(hù)心臟,具有藥物開發(fā)潛在價(jià)值。

綜上所述,本研究從心臟功能、心臟質(zhì)量指數(shù)和心肌細(xì)胞橫截面積、肥大標(biāo)志因子表達(dá)水平說明了新型PDE5抑制劑CPD1對(duì)心肌肥厚的防治作用,但因心肌肥厚病因和發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,其具體作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。