維生素A對哺乳期灘羔羊生長性能、抗氧化能力、血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)及肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)的影響

李海海 張腱皓 魏大為 寇啟芳 張桂杰*

(1.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系，銀川 750021；2.紅寺堡區(qū)天源良種羊繁育養(yǎng)殖有限公司，吳忠 751900)

寧夏得天獨(dú)厚的天然地理環(huán)境，培育了灘羊這一獨(dú)特的綿羊優(yōu)良品種，其肉質(zhì)細(xì)嫩、無膻味、味道鮮美，深受消費(fèi)者推崇。自2003年起，為保護(hù)和恢復(fù)荒漠化草原生產(chǎn)力，寧夏地區(qū)實(shí)行全區(qū)禁牧，灘羊生產(chǎn)方式由放牧轉(zhuǎn)為舍飼，導(dǎo)致灘羊胴體品質(zhì)和肉品質(zhì)下降，嚴(yán)重影響了灘羊產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。家畜肌內(nèi)脂肪與肉質(zhì)的多汁性、嫩度和風(fēng)味等肉品質(zhì)指標(biāo)密切相關(guān)，是高檔肉的重要指標(biāo)[1]。而內(nèi)臟和皮下脂肪占身體脂肪組織的絕大多數(shù)且食用價(jià)值較低，過度發(fā)育會(huì)影響胴體品質(zhì)。因此，特異性地增加肌內(nèi)脂肪含量，是改善胴體品質(zhì)的有效方案。

反芻動(dòng)物各部位脂肪沉積包括脂肪細(xì)胞增殖和肥大2個(gè)過程，不同部位脂肪組織的發(fā)育存在特定的時(shí)序性，在妊娠中期內(nèi)臟脂肪細(xì)胞增殖最先啟動(dòng)，出生后內(nèi)臟脂肪細(xì)胞增殖基本停止；皮下脂肪細(xì)胞的增殖稍晚，介于胎兒中晚期至出生階段；而肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的增殖主要集中在出生前后至斷奶期[2-4]。因此出生至斷奶是反芻家畜肌內(nèi)脂肪細(xì)胞發(fā)育的關(guān)鍵窗口期。在脂肪組織的形成過程中，盡管新的脂肪細(xì)胞可以終生生成，但隨著動(dòng)物年齡增長，脂肪干細(xì)胞和祖細(xì)胞密度逐漸降低，脂肪細(xì)胞的形成能力隨之減弱[5]，在肌內(nèi)脂肪細(xì)胞增殖的關(guān)鍵窗口期，通過靶向營養(yǎng)調(diào)控能夠提高肌內(nèi)脂肪細(xì)胞增殖，為育肥期通過脂肪細(xì)胞肥大而提高肌內(nèi)脂肪含量打下基礎(chǔ)。維生素A是動(dòng)物維持正常生理功能所必需的一類脂溶性維生素，經(jīng)腸道攝取后約70%儲(chǔ)存于肝臟，通過淋巴和血液運(yùn)輸?shù)綑C(jī)體各組織器官相應(yīng)靶位點(diǎn)發(fā)揮其生理作用[6]。維生素A在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)主要以視黃醇、視黃醛和視黃酸3種衍生物的形式存在[7]。在大多數(shù)細(xì)胞中，視黃酸在與細(xì)胞視黃酸結(jié)合蛋白Ⅱ結(jié)合后被轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核，并通過配體誘導(dǎo)激活特定轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄[8]，發(fā)揮著細(xì)胞增殖、分化和穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)等生物學(xué)效應(yīng)[9]。Peng等[10]研究發(fā)現(xiàn)，犢牛出生后每天口服45 000 IU維生素A，促進(jìn)了犢牛2月齡時(shí)前脂肪細(xì)胞和肌肉的發(fā)育，且第45天時(shí)試驗(yàn)組體重顯著高于對照組；另有研究表明，在犢牛出生當(dāng)天肌肉注射30萬IU維生素A，上調(diào)了第45天和斷奶時(shí)(270日齡)背最長肌鋅指蛋白423(ZFP423)和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)等在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)量，同時(shí)進(jìn)一步促進(jìn)了育肥牛后期肌內(nèi)脂肪的生成[11]。因此，本研究以哺乳期灘羔羊?yàn)樵囼?yàn)對象，探究維生素A對哺乳期灘羔羊生長性能、抗氧化能力、血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)及肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)的影響，為維生素A在肉羊養(yǎng)殖中的廣泛應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用健康、胎次和體重[(46.83±1.30)kg]相近的經(jīng)產(chǎn)灘羊母羊60只，采用同期發(fā)情和人工授精處理。妊娠母羊分娩后選擇出生日期、體重[(4.38±0.23)kg]相近的健康灘羔羊45只，隨機(jī)分為3個(gè)組，每組3個(gè)重復(fù)(圈)，每個(gè)重復(fù)5只羔羊。在正常哺乳的基礎(chǔ)上，3組羔羊在1日齡和1月齡分別灌服0(對照組，CON組)、30 000(低劑量維生素A組，LVA組)和60 000 IU(高劑量維生素A組，HVA組)維生素A。維生素A含量為5×105IU/g。將維生素A粉劑微粒溶入全脂牛奶中，37 ℃緩慢加熱至完全溶解，倒入人工自制奶瓶，CON組僅灌服牛奶。牛奶[干物質(zhì)(DM)含量12.5%、乳脂含量4.6%和乳蛋白含量3.8%]飼喂前采用巴氏殺菌器滅菌。羔羊和母羊統(tǒng)一編號并同欄管理。參考NRC(2007)設(shè)計(jì)母羊基礎(chǔ)飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)羊舍為通風(fēng)良好的半開放式羊舍。正試期為分娩后至羔羊斷奶(70日齡)。試驗(yàn)?zāi)秆蛎刻?8:00和16:00分2次飼喂，自由飲水。圈舍內(nèi)一側(cè)設(shè)羔羊欄、只限羔羊自由出入，在欄內(nèi)安放料槽，槽上安裝橫桿防止羔羊進(jìn)入污染飼糧。試驗(yàn)羔羊統(tǒng)一在30日齡開始訓(xùn)練采食開食料，適應(yīng)期3 d內(nèi)羔羊自由采食，少喂勤添。33～50日齡、51～70日齡每天每只羔羊分別添加150和200 g開食料。根據(jù)羊場常規(guī)操作程序進(jìn)行消毒、免疫和保健。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測定

1.3.1 飼糧成分測定

分別參照中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6435—1986、GB/T 6432—1994、GB/T 6433—2006、GB/T 6436—2002和GB/T 6437—2002推薦的方法測定飼糧中DM、粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、鈣(Ca)和磷(P)含量；根據(jù)張麗英[12]編著的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》測定飼糧中有機(jī)物(OM)、粗纖維(CF)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和粗灰分(Ash)含量；利用氧彈測熱儀測定飼糧樣品總能(GE)后根據(jù)Valen?a等[13]的方法計(jì)算飼糧代謝能(ME)。飼糧ME計(jì)算公式如下：

ME=0.82×(GE-GE×0.2)。

1.3.2 生長性能及體尺測定

羔羊出生時(shí)擦干體表殘留胎液后個(gè)體稱重為出生重；羔羊斷奶當(dāng)天進(jìn)行個(gè)體稱重為斷奶重；羔羊直立時(shí)肩胛骨最高點(diǎn)到地面垂直距離為體高；從肩端至坐骨結(jié)節(jié)的直線距離為體斜長；肩胛骨后緣繞胸1周的長度為胸圍。

1.3.3 血清收集與分析

在斷奶當(dāng)天，每組隨機(jī)選取3只羔羊頸靜脈采集血液20 mL，3 000 r/min離心15 min分離血清，將得到的血清分為2份，一份置于-20 ℃冰箱保存用于檢測血清抗氧化指標(biāo)和血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)，另一份置于-80 ℃的黑暗環(huán)境中保存(防止類維生素A異構(gòu)化和降解)，用于血清中類維生素A含量的檢測。

采用酶標(biāo)儀和南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定血清總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性。采用全自動(dòng)生化儀和深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的試劑盒測定血清葡萄糖(GLU)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量。上述試驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

參照Kim等[14]的方法提取類維生素A，利用高效液相色譜測定視黃醇、視黃醛和視黃酸的含量。色譜條件：Luna C18液相色譜柱(150 mm×3 mm×3 mm，00G-4252-E0，Phenomenex，美國)，流動(dòng)相(65%甲醇水溶液)，流速1.0 mL/min。視黃醇、視黃醛和視黃酸檢測波長分別為325、340和385 nm，對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma-Aldrich，美國)貨號分別為R7632、R2500和302-79-4。

1.3.4 維生素A代謝相關(guān)酶和脂肪沉積相關(guān)基因mRNA相對表達(dá)量的測定

在斷奶當(dāng)天，每組隨機(jī)選取3只羔羊屠宰，取羔羊背最長肌樣品放入液氮中保存，用于分析ZFP423和PPARγmRNA相對表達(dá)量，同時(shí)測定參與維生素A代謝相關(guān)的3種酶的mRNA相對表達(dá)量，包括乙醇脫氫酶4(ADH4)、乙醇脫氫酶5(ADH5)和乙醛脫氫酶1A1(ALDH1A1)。采用液氮研磨硅基質(zhì)吸附柱法從組織中抽提總RNA，然后用去氧核糖核酸酶(DNase)(NEB，Ipswich，MA，美國)處理去除DNA。使用HiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(cDNA第1鏈合成試劑盒)對所提取的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)AceQ qPCR SYBR Green Master Mix(without ROX)試劑盒使用說明建立實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)體系。使用Bio-Rad CFX96儀器檢測系統(tǒng)進(jìn)行qRT-PCR試驗(yàn)。定量檢測完畢后，采用2-ΔΔCt法測定基因的相對表達(dá)量。用甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)作為內(nèi)參基因。引物使用Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)，引物序列見表2。

表2 引物序列

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel 2010記錄并作初步處理，采用SAS 8.2軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，組間差異采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05表示差異顯著，0.05≤P<0.10表示差異有顯著趨勢。

2 結(jié) 果

2.1 維生素A對哺乳期灘羔羊生長性能的影響

由表3可知，3個(gè)組羔羊的初生重和胸圍之間無顯著差異(P>0.05)；LVA組和HVA組羔羊的斷奶重顯著高于CON組(P<0.05)；LVA組和HVA組羔羊的體高和體斜長雖與CON組相比無顯著差異(P>0.05)，但具有提高的趨勢(0.05≤P<0.10)。

表3 維生素A對哺乳期灘羔羊生長性能的影響

2.2 維生素A對哺乳期灘羔羊血清類維生素A含量的影響

由表4可知，與CON組相比，LVA組和HVA組血清視黃酸含量顯著提高(P<0.05)；HVA組血清視黃醇含量顯著降低(P<0.05)。

表4 維生素A對哺乳期灘羔羊血清類維生素A含量的影響

2.3 維生素A對哺乳期灘羔羊背最長肌維生素A代謝相關(guān)酶和脂肪沉積相關(guān)基因mRNA相對表達(dá)量的影響

由圖1可知，與CON組相比，LVA組和HVA組羔羊背最長肌維生素A代謝相關(guān)酶(ADH4、ADH5和ALDH1A1)的mRNA相對表達(dá)量均無顯著差異(P>0.05)。與CON組相比，LVA組羔羊背最長肌ZFP423和PPARγmRNA相對表達(dá)量均顯著提高(P<0.05)；HVA組羔羊背最長肌ZFP423 mRNA相對表達(dá)量顯著提高(P<0.05)，但背最長肌PPARγmRNA相對表達(dá)量無顯著差異(P>0.05)。

數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.4 維生素A對哺乳期灘羔羊血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

由表5可知，與CON組相比，LVA組和HVA組羔羊血清膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量顯著提高(P<0.05)，血清葡萄糖含量無顯著差異(P>0.05)，但具有上升的趨勢(0.05≤P<0.10)。

表5 維生素A對哺乳期灘羔羊血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

2.5 維生素A對哺乳期灘羔羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，與CON組相比，LVA組和HVA組羔羊血清T-AOC和SOD活性顯著提高(P<0.05)，血清MDA含量顯著降低(P<0.05)；LVA組血清GSH-Px活性顯著提高(P<0.05)。

表6 維生素A對哺乳期灘羔羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 維生素A對哺乳期灘羔羊生長性能的影響

動(dòng)物體的生長發(fā)育除受到遺傳、激素水平和生長環(huán)境等眾多因素影響以外，營養(yǎng)供給水平和腸道功能狀態(tài)對動(dòng)物自身生長也起到關(guān)鍵性作用。前人研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充維生素A可以促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞的發(fā)育，同時(shí)有助于腸道微生物穩(wěn)定進(jìn)而提高動(dòng)物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收[15-17]。本試驗(yàn)中，哺乳期灘羔羊灌服維生素A能夠顯著提高其斷奶重，且體高和體斜長有上升趨勢，這表明維生素A的添加對羔羊生長有明顯的促進(jìn)作用。這可能是因?yàn)榫S生素A在到達(dá)腸道后，能夠促進(jìn)腸道杯狀細(xì)胞合成腸道黏蛋白。黏蛋白是高度糖基化的蛋白，其糖基化區(qū)域含有離子化的酸性基團(tuán)，使得腸道pH降低，而酸性條件有利于腸道上皮細(xì)胞發(fā)育和腸道消化酶活性提高，進(jìn)而上調(diào)腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率[18]。此外，維生素A具有較強(qiáng)的抗氧化和清除機(jī)體自由基的能力，能有效提高機(jī)體免疫能力，防止不飽和脂肪酸和過氧化物對機(jī)體造成的損傷[19]，減少動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)，促進(jìn)動(dòng)物生長。

3.2 維生素A對哺乳期灘羔羊肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)的影響

ZFP423參與細(xì)胞分化、增殖和凋亡等多種重要生命過程，在真核生物中廣泛表達(dá)。近年來，研究者發(fā)現(xiàn)含有鋅指模體的轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)控脂肪生成過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。以小鼠為模型，ZFP423已被確定為脂肪生成初始階段的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，并進(jìn)一步與PPARγ協(xié)調(diào)以調(diào)節(jié)脂肪生成[20-21]。在另一項(xiàng)研究中，ZFP423可調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞的生成已被證實(shí)[22]。研究表明，維生素A在動(dòng)物體內(nèi)通過其活性代謝產(chǎn)物視黃醇、視黃醛和視黃酸促進(jìn)脂肪形成，并在成脂定型、成脂分化和脂質(zhì)蓄積的每個(gè)階段都發(fā)揮重要作用，同時(shí)視黃酸也是決定脂肪細(xì)胞中ZFP423表達(dá)的重要因素[11]。ALDH1A1能夠促進(jìn)視黃醛生成視黃酸，在缺乏ALDH1A1的小鼠體內(nèi)ZFP423和PPARγ表達(dá)水平下調(diào)約70%[7]。

本研究中，與CON組相比，LVA組和HVA組羔羊背最長肌ZFP423 mRNA相對表達(dá)量顯著提高，LVA組羔羊背最長肌PPARγmRNA相對表達(dá)量顯著提高。這表明新生灘羔羊灌服維生素A能夠通過誘導(dǎo)ZFP423和PPARγ等脂肪沉積相關(guān)基因的表達(dá)，特異性地增強(qiáng)肌肉內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)量。理論而言，更大劑量的維生素A處理，將導(dǎo)致血清視黃酸含量更高，從而進(jìn)一步上調(diào)ZFP423和PPARγ的表達(dá)。但在本研究中，相對于高劑量處理，低劑量維生素A處理對羔羊背最長肌ZFP423和PPARγmRNA相對表達(dá)量的影響更顯著，同時(shí)LVA組血清視黃酸含量也較高。視黃醇通過ADH4和ADH5轉(zhuǎn)化為視黃醛，而視黃醛通過ALDH1A1生成視黃酸[7]。此外，本試驗(yàn)檢測了背最長肌參與維生素A代謝相關(guān)酶基因的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)各組相關(guān)酶基因表達(dá)方面無顯著差異。因此，相關(guān)酶基因的表達(dá)與血清視黃酸差異無關(guān)。所以，可能由于第1次高劑量維生素A灌服使肝臟儲(chǔ)存能力增加，導(dǎo)致第2次維生素A灌服后的1個(gè)月高劑量組僅有少量的維生素A用于代謝，進(jìn)而降低了機(jī)體對維生素A的總代謝率[23]。這是HVA組血清視黃酸含量低于LVA組的一個(gè)可能。此外，高劑量的維生素A可加速血清視黃酸分解代謝和清除，從而導(dǎo)致HVA組在灌服維生素A 1個(gè)月后的血清視黃酸含量更低，這是一種“過度補(bǔ)償”現(xiàn)象[24]。至于HVA組哺乳期灘羔羊肌內(nèi)PPARγmRNA的表達(dá)較CON組未呈現(xiàn)顯著差異，可能是由于PPARγmRNA表達(dá)還受其他通路的影響。

3.3 維生素A對哺乳期灘羔羊血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)的影響

葡萄糖被認(rèn)為是評價(jià)動(dòng)物機(jī)體能量狀態(tài)的標(biāo)志物。研究表明，脂肪酸在氧化過程中受到阻礙時(shí)，往往會(huì)打破機(jī)體固有的血糖穩(wěn)定狀態(tài)出現(xiàn)低血糖癥狀[25]。相反，血糖升高時(shí)，葡萄糖又可以轉(zhuǎn)化為脂肪儲(chǔ)存。本試驗(yàn)結(jié)果表明，LVA組和HVA組羔羊血清葡萄糖含量均高于CON組，表明維生素A可能通過影響動(dòng)物機(jī)體能量代謝來調(diào)控哺乳期灘羔羊脂肪沉積。

研究表明，維生素A及其代謝產(chǎn)物可以通過調(diào)節(jié)動(dòng)物體脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)以及脂肪細(xì)胞體積或數(shù)量，最終實(shí)現(xiàn)對機(jī)體脂類代謝的調(diào)控作用[26-27]。本試驗(yàn)中，羔羊血清低密度脂蛋白、甘油三酯和總膽固醇含量與血清視黃酸含量呈正相關(guān)，且與CON組相比整體呈上升趨勢。Yehya等[28]研究發(fā)現(xiàn)，過量維生素A攝入的人群，血清低密度脂蛋白含量顯著升高，同時(shí)機(jī)體表現(xiàn)出高甘油三酯血癥。維生素A通過促進(jìn)肝臟合成和分泌甘油三酯，進(jìn)而提高血清甘油三酯含量[29]。基于對小鼠的研究，維生素A缺乏會(huì)引起小鼠血清高密度脂蛋白、甘油三酯和膽固醇含量的降低[30-31]。此外，另有報(bào)道指出，維生素A及其衍生物促進(jìn)機(jī)體脂肪合成能力強(qiáng)于促進(jìn)機(jī)體脂肪分解能力[32]。上述研究結(jié)果與本試驗(yàn)研究結(jié)果相似，表明哺乳期灘羔羊灌服維生素A可能會(huì)促進(jìn)機(jī)體脂肪的合成。

3.4 維生素A對哺乳期灘羔羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

動(dòng)物體正常生理活動(dòng)中，機(jī)體內(nèi)各種生化反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生造成機(jī)體氧化損傷的自由基。但動(dòng)物機(jī)體內(nèi)存在自身抗氧化防御體系，即酶促體系和非酶促體系，其能切斷脂質(zhì)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，避免自由基產(chǎn)生過剩，維持機(jī)體氧化穩(wěn)定，減少細(xì)胞氧化損傷。機(jī)體內(nèi)的抗氧化酶，包括SOD、CAT和GSH-Px，共同組成細(xì)胞抵抗自由基攻擊的內(nèi)源性屏障，其活性反映機(jī)體消除自由基能力的強(qiáng)弱[33]。T-AOC是反映動(dòng)物體自身抗氧化防御系統(tǒng)對自由基代謝狀況的重要參數(shù)；體現(xiàn)動(dòng)物機(jī)體自身酶促體系和非酶促體系抵抗氧化應(yīng)激能力的重要指標(biāo)。MDA是脂質(zhì)過氧化物代謝過程中的最終產(chǎn)物，可間接反映細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能受損程度。SOD是一種特殊的金屬蛋白質(zhì)，它能夠降低超氧陰離子的穩(wěn)定性，切斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，減少超氧化物對細(xì)胞造成的損害，而SOD在降低超氧陰離子的同時(shí)會(huì)產(chǎn)生少量過氧化氫和分子氧，但其產(chǎn)物可被CAT或GSH-Px所抵消，進(jìn)而減輕自由基對細(xì)胞造成的損害[34]。GSH-Px是一種關(guān)鍵的解毒酶，它能抵消或清除由細(xì)胞代謝過程中產(chǎn)生的過氧化氫和細(xì)胞毒害物，減少機(jī)體有害物質(zhì)對膜系統(tǒng)攻擊。CAT廣泛存在于動(dòng)物體組織中，可避免產(chǎn)生過多羥基自由基，使細(xì)胞內(nèi)外成分免受過氧化物酶體傷害。

研究表明，維生素A能提高機(jī)體抗氧化酶活性，增強(qiáng)清除自由基的能力，從而提高機(jī)體抗氧化能力[35]。韓磊等[36]證實(shí)，適量補(bǔ)充維生素A在提高大鼠體內(nèi)維生素A儲(chǔ)存量的同時(shí)增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。王平[37]同樣發(fā)現(xiàn)，母羊妊娠后期每千克飼糧維生素A添加量為1 100 IU或1 100～2 200 IU時(shí)，分別顯著提高了妊娠母羊血清中SOD活性和T-AOC，而添加量為2 200 IU時(shí)顯著降低妊娠母羊血清中MDA含量。本研究發(fā)現(xiàn)，灌服維生素A顯著提高了哺乳期灘羔羊血清T-AOC和SOD活性，顯著降低了血清MDA含量。在不同的維生素A營養(yǎng)水平下，大鼠血清中視黃酸含量與SOD活性呈正相關(guān)，與MDA含量呈負(fù)相關(guān)[38]，本研究結(jié)果與之相似。以上結(jié)果表明，維生素A可提高機(jī)體抗氧化酶活性，增強(qiáng)其清除自由基能力，進(jìn)而提高機(jī)體抗氧化能力。然而，維生素A提高機(jī)體抗氧化能力機(jī)制尚不明確。有研究認(rèn)為可能與其特殊結(jié)構(gòu)有關(guān)，首先維生素A是由β-白芷酮環(huán)和2分子的2-甲基丁二烯所構(gòu)成的不飽和一元醇，側(cè)鏈擁有4個(gè)雙鍵，化學(xué)性質(zhì)活潑，自身容易被氧化，從而有效避免或降低機(jī)體內(nèi)部其他抗氧化酶的消耗[39]。另外，維生素A屬于脂溶性維生素，易進(jìn)入細(xì)胞膜，能夠抑制細(xì)胞膜上發(fā)生的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，進(jìn)而降低MDA在脂質(zhì)代謝反應(yīng)中的產(chǎn)生，間接提升機(jī)體抗氧化能力[35]。值得一提的是，本試驗(yàn)中，LVA組羔羊血清CAT活性以及HVA組血清CAT和GSH-Px活性較CON組無顯著差異，可能是由于SOD在降低超氧陰離子的過程中產(chǎn)生的少量過氧化氫和分子氧消耗了CAT和GSH-Px，因此推斷隨著血清視黃酸含量的提高，血清CAT和GSH-Px活性有上升趨勢，但有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

4 結(jié) 論

綜上所述，灌服維生素A能夠提高哺乳期灘羔羊生長性能及抗氧化能力，提高背最長肌脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)，并對血清脂質(zhì)代謝指標(biāo)有一定的影響，且以30 000 IU的添加量為宜。