海洋紅酵母不同添加劑量對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、免疫酶活性及抗病力的影響

何 玉，朱彥博，田相利，2*，賈釗陽，李海東，李 麗，2，董雙林，2，范瑞用

(1.中國(guó)海洋大學(xué) 海水養(yǎng)殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 青島 266003；2.青島海洋科學(xué)與技術(shù)國(guó)家試點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 青島 266235；3.青島瑞滋海珍品發(fā)展有限公司，山東 青島 266408)

引 言

凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)生長(zhǎng)速度快，適應(yīng)環(huán)境能力強(qiáng)，是世界對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的品種[1]。但近幾年來，愈來愈多的致病微生物也導(dǎo)致對(duì)蝦養(yǎng)殖成功率下降[2]。此外，在養(yǎng)殖過程中抗生素藥物的不科學(xué)使用，還造成了不同程度的環(huán)境和食品安全問題(如耐藥細(xì)菌的出現(xiàn)、水生生態(tài)系統(tǒng)的破壞和腸道共生菌群的改變)[3]。針對(duì)這些問題，人們對(duì)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中益生菌的使用日益關(guān)注，多種微生物及其細(xì)胞組分和代謝產(chǎn)物已被作為益生菌或免疫刺激劑研究并應(yīng)用，用以提高對(duì)蝦的非特異性免疫和抗氧化能力，從而增強(qiáng)它們對(duì)病原體的抵抗力[4]。益生菌可能在疾病控制中發(fā)揮重要作用，并已被證明在某些情況下是抗菌化合物的優(yōu)質(zhì)替代品[5-7]。

海洋紅酵母(Rhodotorulamucilaginosa)屬于單細(xì)胞真核生物，從自然海洋環(huán)境中分離而來。菌落形態(tài)呈圓形或橢圓形，肉眼可見紅色，無性繁殖，多極出芽，經(jīng)檢測(cè)無酒精發(fā)酵能力[8-9]。它含有豐富的蛋白質(zhì)，同時(shí)也含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如以蝦青素為主的類胡蘿卜素、維生素、碳水化合物、各種消化酶及不飽和脂肪酸等[10]。海洋紅酵母不僅可以促進(jìn)水生動(dòng)物生長(zhǎng)、提高成活率、改善動(dòng)物體色，還可以顯著提高養(yǎng)殖動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力和非特異性免疫能力[11]。它是一類抗逆性較強(qiáng)、有較好的耐鹽性的腐生菌，是優(yōu)質(zhì)的蝦青素生產(chǎn)菌，在動(dòng)物飼料添加劑方面也極具潛力[12]。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，目前海洋紅酵母主要是作為餌料使用，用于育苗、養(yǎng)殖過程中的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化，也可作為飼料添加劑，起到促進(jìn)發(fā)育生長(zhǎng)、提高生長(zhǎng)率、預(yù)防疾病等作用[13-15]。然而，從目前的研究和應(yīng)用現(xiàn)狀態(tài)看，關(guān)于海洋紅酵母在水產(chǎn)動(dòng)物飼料中適宜的添加量尚缺乏一致的數(shù)據(jù)。

以凡納濱對(duì)蝦為研究對(duì)象，研究了不同濃度的海洋紅酵母添加量對(duì)凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能、免疫酶活性及對(duì)副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)病原脅迫的影響，以期為海洋紅酵母在凡納濱對(duì)蝦飼料中的適宜添加濃度提供理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所使用的海洋紅酵母菌株(菌株編號(hào)：RM)來自于中國(guó)海洋大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室保種中心，將菌種進(jìn)行液體發(fā)酵后制成干粉制劑，菌體含量為9.17×1010cfu/g。

凡納濱對(duì)蝦購于青島卓越海洋集團(tuán)有限公司對(duì)蝦養(yǎng)殖場(chǎng)，初始體重為7.23±0.24 g。

超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、溶菌酶(LSM)試劑盒、酸性磷酸酶(ACP)試劑盒、堿性磷酸酶(AKP)試劑盒、總一氧化氮合酶(TNOS)試劑盒均采購于南京建成生物工程研究所，測(cè)定過程參照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

病原脅迫實(shí)驗(yàn)所用副溶血弧菌由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院黃海水產(chǎn)研究所提供。

1.2 飼料制備

基礎(chǔ)飼料選用廣東粵海有限公司的南美白對(duì)蝦配合飼料(2號(hào)料)，其主要飼料成分見表1。

表1 基礎(chǔ)飼料主要成分

本研究共設(shè)置了4個(gè)處理組和1個(gè)對(duì)照組。其中，海洋紅酵母的不同添加濃度分別為1.0×108、1.0×109、1.0×1010和1.0×1011cfu/kg飼料(分別記為T1、T2、T3和T4)。按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的添加量，將菌粉與凡納濱對(duì)蝦配合飼料均勻混合，再在其表面包裹一層褐藻酸鈉(3.15 g/500 g)和魚油(4.2 ml/500 g)。之后揉搓陰干，在4 ℃冰箱中保存以備后用[16]。對(duì)照飼料由凡納濱對(duì)蝦配合飼料表面直接包裹一層褐藻酸鈉和魚油制成(比例同上，記為DZ)。

1.3 養(yǎng)殖管理

養(yǎng)殖用水鹽度為23。幼蝦運(yùn)回后，在水族箱中先馴化暫養(yǎng)5 d。暫養(yǎng)期間，養(yǎng)殖用水的鹽度逐日升高2，直至30，穩(wěn)定2 d再開始養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程中，凡納濱對(duì)蝦幼蝦養(yǎng)殖于30×40×50 cm的水族箱中，每個(gè)水族箱養(yǎng)殖10尾蝦，每個(gè)處理組分別設(shè)置5個(gè)平行。在整個(gè)馴化暫養(yǎng)過程中使用南美白對(duì)蝦配合飼料(2號(hào)料)，每天兩次投喂(10:00 am和17:00 pm)，保證每天投喂總量為對(duì)蝦體重4%～5%。

馴化暫養(yǎng)結(jié)束后饑餓24 h。選擇活力旺盛、規(guī)格相近的對(duì)蝦250尾，隨機(jī)分為5組，每個(gè)組別設(shè)置5個(gè)平行(10尾蝦/平行)，置于50 L的玻璃水族箱中養(yǎng)殖，養(yǎng)殖周期為42 d。實(shí)驗(yàn)期間，每天投喂兩次(8:00 am和17:00 pm)，日投喂量為對(duì)蝦體重的4%～5%之間。分別收集殘餌和糞便，于60 ℃下烘干保存。每天換水1次，換水量為總體積的1/3～2/3。

實(shí)驗(yàn)期間環(huán)境條件：pH為8.0±0.1，鹽度保持在30，水溫25 ℃左右，連續(xù)微量充氣，保持溶氧在5 mg/L以上。每日察看并記錄對(duì)蝦死亡和攝食狀況，如有死蝦，及時(shí)清除。

1.4 樣品采集與處理

1.4.1 凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，停止投喂，禁食24 h，對(duì)各處理組對(duì)蝦進(jìn)行分別計(jì)數(shù)和稱重，參照王苓等[16]的計(jì)算方法計(jì)算對(duì)蝦成活率、特定生長(zhǎng)率(SGR)、飼料效率(FER)、消化率(ADR)等生長(zhǎng)指標(biāo)。

1.5 對(duì)蝦免疫酶活性測(cè)定

1.5.1 樣品預(yù)處理

養(yǎng)殖結(jié)束后，每個(gè)處理選取30尾對(duì)蝦抽取血液，用無菌注射器從凡納濱對(duì)蝦腹部血竇中抽取血淋巴置于1.5 mL加厚離心管中，置于4 ℃冰箱中1夜后離心(3 000 r/min，10 min)，取上層血清保存于-80 ℃冰箱中。

1.5.2 免疫酶活性測(cè)定

稀釋樣品至適宜濃度，然后參照試劑盒說明書測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSM)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、總一氧化氮合酶(TNOS)。

1.6 病原攻毒實(shí)驗(yàn)

將保存的菌株活化后接種于TSB肉湯培養(yǎng)基中，28 ℃震蕩培養(yǎng)24 h制成菌懸液以備后用。經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)，副溶血弧菌的適宜注射濃度確定為5×107cfu/mL。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，保持養(yǎng)殖條件不變，將取樣后剩余的對(duì)蝦正常飼喂3 d后進(jìn)行副溶血弧菌攻毒試驗(yàn)。其中，每個(gè)處理分別設(shè)置3個(gè)平行，每個(gè)平行5尾蝦，利用無菌注射器將35 μL副溶血弧菌注射入凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)，對(duì)照組注射相同體積的生理鹽水。

整個(gè)攻毒試驗(yàn)持續(xù)15 d，期間養(yǎng)殖條件不變。每天察看并記錄對(duì)蝦的活動(dòng)、攝食及死亡狀況，如有死蝦，及時(shí)清除。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 19軟件進(jìn)行單因素方差分析和Duncan’s多重比較進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，以P<0.05為差異顯著水平，統(tǒng)計(jì)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±S.E.)表示。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，添加海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)具有不同程度的促進(jìn)作用。除T1組外，各試驗(yàn)處理組的末體重均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。其中，T2和T3組(添加量為1.0×109和1.0×1010cfu/kg)對(duì)蝦特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組(添加量為1.0×1010cfu/kg)，但兩組之間差異不顯著(P>0.05)。不同處理對(duì)蝦存活率未見顯著差異，均在90.0～94.0%之間(P>0.05)。

表2 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

與對(duì)照組相比，添加不同濃度的海洋紅酵母均顯著提高了凡納濱對(duì)蝦的消化率(P<0.05)，但各處理組間差異性不顯著(P>0.05)。T2和T3組的飼料效率均顯著高于對(duì)照組及其他兩個(gè)處理組(P<0.05)。

2.2 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫酶活性的影響

2.2.1 不同濃度海洋紅酵母對(duì)對(duì)蝦血清超氧化物歧化酶活性的影響

由圖1可知，添加不同濃度的海洋紅酵母后，各處理組的SOD活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中，T2和T3處理組顯著高于T1和T4組(P<0.05)。

圖1 不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清超氧化物歧化酶活性的影響

2.2.2 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦酸性磷酸酶活性的影響

由圖2可知，添加不同劑量的海洋紅酵母均可以提高凡納濱對(duì)蝦血清酸性磷酸酶(ACP)活性。各處理組的ACP活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其中，T3組(添加量為1.0×1010cfu/kg)活性最高，顯著高于其他各組(P<0.05)。T2組活性顯著高于T1、T4組(P<0.05)，但T1和T4組之間差異不顯著(P>0.05)。

圖2 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清酸性磷酸酶活性的影響

2.2.3 不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦堿性磷酸酶活性的影響

由圖3可知，飼料中添加不同劑量的海洋紅酵母后，凡納濱對(duì)蝦的血清堿性磷酸酶(AKP)活性表現(xiàn)出差異性。其中，T2和T3處理組AKP活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，以T3組(添加量為1.0×1010cfu/kg)的活性最高，顯著高于T2組(P<0.05)。但T1和T4組AKP活性與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)。

圖3 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清堿性磷酸酶活性的影響

2.2.4 不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦溶菌酶活性的影響

由圖4可知，添加不同濃度的海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清溶菌酶(LSM)活性影響有所不同。其中，T2和T3處理組的LSM活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，以T3組(添加量為1.0×1010cfu/kg)的活性最高，顯著高于T2組(P<0.05)。但T1和T4組LSM活性與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)。

圖4 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清溶菌酶活性的影響

2.2.5 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦總一氧化氮合酶活性的影響

由圖5可知，飼料中添加不同劑量的海洋紅酵母后，各處理組的血清總一氧化氮合酶(TNOS)活性均有所提高。其中，T2、T3和T4組的TNOS活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，T2組雖活性最高，但與其他兩組相比差異并不顯著(P>0.05)。T1組與對(duì)照組差異不顯著性(P>0.05)。

圖5 添加不同濃度海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦血清總一氧化氮合酶活性的影響

2.3 副溶血弧菌攻毒

注射副溶血弧菌后，被感染的對(duì)蝦表現(xiàn)為攝食量下降、附肢發(fā)紅、空胃、肝胰腺腫大、不好動(dòng)或沿養(yǎng)殖桶壁漫游，活力弱，直至最后死亡。

圖6顯示了注射副溶血弧菌后各處理組對(duì)蝦的累積死亡率情況。從圖中可看出，各處理組對(duì)蝦在攻毒后陸續(xù)出現(xiàn)死亡，持續(xù)不同時(shí)間之后又逐漸停止死亡。其中，各處理組對(duì)蝦在攻毒后第5—6天逐漸停止死亡，而對(duì)照組對(duì)蝦則在第8天停止死亡。

圖6 注射副溶血弧菌后各處理組凡納濱對(duì)蝦的累計(jì)死亡率

整個(gè)攻毒實(shí)驗(yàn)期間，各處理組對(duì)蝦累計(jì)死亡率分別為53%、27%、20%和33%，均顯著低于對(duì)照組(73%)(P<0.05)。各處理組間比較，以添加海洋紅酵母的1.0×1010cfu/kg處理組對(duì)蝦累積死亡率為最低。

3 討論

3.1 飼料中添加海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)的影響

海洋紅酵母遍及于海洋環(huán)境中，是海水正常微生物區(qū)系的一部分[17]。研究表明，海洋紅酵母既可提高水產(chǎn)動(dòng)物的存活率，又可改善養(yǎng)殖效果，還可增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物免疫力、減少抗生素使用，因此被廣泛應(yīng)用于魚、蝦、蟹、貝、海參等水產(chǎn)動(dòng)物的飼料中[18]。Scholz等研究顯示，在凡納濱對(duì)蝦幼蝦餌料中定量添加海洋紅酵母能使其成活率大大提高，并在促進(jìn)生長(zhǎng)的同時(shí)，還增強(qiáng)了幼蝦對(duì)環(huán)境因子的耐受力[19]。齊瓊的研究也表明，凡納濱對(duì)蝦攝食添加過海洋紅酵母的餌料后，其增重率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)、肝體比等指標(biāo)得到有效改善[20]。而本研究中，在飼料中添加不同濃度的海洋紅酵母均顯著提高了凡納濱對(duì)蝦的末體重，其中，添加濃度為1.0×109和1.0×1010cfu/kg處理組凡納濱對(duì)蝦的特定生長(zhǎng)率及飼料效率顯著提高，優(yōu)于其添加濃度。這一結(jié)果表明，添加適宜劑量的海洋紅酵母可以明顯改善凡納濱對(duì)蝦的生長(zhǎng)性能。

益生菌是一種對(duì)宿主生長(zhǎng)、健康有益的活的微生物，在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用[21]。研究認(rèn)為，益生菌可以分泌胞外消化酶如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等，提高養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的效率，而且也可以產(chǎn)生氨基酸、小分子多肽和各種維生素等營(yíng)養(yǎng)性物質(zhì)，因而促進(jìn)了養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)[22-24]。作為一種重要的益生菌，海洋紅酵母可以合成蝦青素、β-胡蘿卜素和VE，并且其產(chǎn)生的消化酶類和生長(zhǎng)因子能夠有效地促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物消化吸收營(yíng)養(yǎng)素，提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)速率和飼料利用率[15]。楊鏗等的研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加2‰和4g/‰的海洋紅酵母能顯著降低尼羅羅非魚(Oreochromisniloticus)的飼料系數(shù)，同時(shí)可增加羅非魚蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶活性，提高其生長(zhǎng)性能[25]。而在楊世平等[20]的研究中，飼料中加入沼澤生海洋紅酵母(R.paludigenum)，顯著提高了凡納濱對(duì)蝦肝胰腺中蛋白酶和脂肪酶活性，減少了其腸道中弧菌數(shù)量、降低了弧菌和總細(xì)菌的比例，使對(duì)蝦的腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)得到改善，從而促進(jìn)對(duì)蝦的生長(zhǎng)。另外，張坤等[26]將膠紅酵母以添加量分別為109、1010和1011cfu/kg添加到刺參餌料中后發(fā)現(xiàn)，三種添加濃度均能顯著提高刺參的生長(zhǎng)性能，其中以1010cfu/kg添加量的效果最好。這與本研究中獲得凡納濱對(duì)蝦最佳生長(zhǎng)性能的海洋紅酵母添加濃度(109-10cfu/kg)稍有差異。因此，在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)根據(jù)不同養(yǎng)殖對(duì)象的不同情況適當(dāng)調(diào)整海洋紅酵母的添加量。

3.2 飼料中添加海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫酶活性及抗病力的影響

凡納濱對(duì)蝦免疫系統(tǒng)屬于先天免疫，其機(jī)體保護(hù)及疾病防御主要依靠非特異性免疫來完成。研究表明，超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSM)、堿性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和一氧化氮合酶(TNOS)等的活性反映了對(duì)蝦的免疫能力的高低，在凡納濱對(duì)蝦的免疫防御中起著重要的作用[27-28]。此外，SOD可以清除對(duì)蝦體內(nèi)多余的自由基、防御機(jī)體衰老和防止生物分子損傷[29]；LSM在最前沿防御機(jī)制中起著重要的作用，可以水解革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁，使細(xì)胞破裂死亡[30]；ACP參與磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移和代謝活動(dòng)，提高物質(zhì)的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)速度，與其他酶類構(gòu)成吞噬細(xì)胞殺菌的物質(zhì)基礎(chǔ)，破壞和消除侵入體內(nèi)的異物[31-32]。與此同時(shí)，ACP參與甲殼動(dòng)物的解毒體系，并與甲殼動(dòng)物在海水中磷質(zhì)與鈣質(zhì)的吸取活動(dòng)、磷酸鈣的生成過程、甲殼素的形成和分泌密切相關(guān)[31-32]。對(duì)蝦的機(jī)體受到免疫刺激時(shí)，免疫反應(yīng)會(huì)激活體內(nèi)的一氧化氮合酶，誘導(dǎo)激發(fā)釋放出大量的NO，NO可參與一系列的免疫反應(yīng)，對(duì)病原生物產(chǎn)生殺滅作用[33]。

海洋紅酵母中富含以蝦青素為主的類胡蘿卜素，可通過消除自由基維護(hù)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，因此具有增強(qiáng)宿主免疫力和抗氧化能力的功能。Subramanian等[34]研究發(fā)現(xiàn)，以從紅樹林中分離出的海洋紅酵母作為免疫刺激源，添加10%酵母生物量養(yǎng)殖對(duì)蝦15 d，然后用致病性霍亂弧菌(V.cholerae)攻毒，檢測(cè)對(duì)蝦血細(xì)胞數(shù)量、酚氧化酶活性等指標(biāo)，結(jié)果顯示海洋紅酵母對(duì)對(duì)蝦類具有較高的免疫刺激作用，顯著提高對(duì)蝦對(duì)致病性弧菌的抵抗力。齊瓊的研究表明，添加0.025%～0.5%的2號(hào)紅酵母可有效提高凡納濱對(duì)蝦ACP、LSM和過氧化氫酶活性；投喂海洋紅酵母飼料40 d后進(jìn)行哈維氏弧菌(V.harveyi)攻毒試驗(yàn)，對(duì)蝦死亡率顯著降低[20]。從本研究結(jié)果看，飼料中添加不同濃度的海洋紅酵母對(duì)上述5種非特異性免疫酶活性所產(chǎn)生的影響有一定差異。其中，添加濃度為1.0×1010cfu/kg處理組對(duì)蝦血清中ACP、AKP和LSM活性顯著高于對(duì)照組及其他各處理組，而1.0×109cfu/kg添加水平下，血清SOD和TNOS活性顯著高于其他各組。從副溶血弧菌攻毒的結(jié)果來看，雖然1.0×109和1.0×1010cfu/kg兩個(gè)處理組均展現(xiàn)出了較強(qiáng)的抗病力，但以1.0×1010cfu/kg處理組的累計(jì)死亡率為最低，對(duì)病原的抵抗效果最好。因此，綜合來看，1.0×1010cfu/kg的海洋紅酵母添加量在提高對(duì)蝦血清非免疫性能和抗病能力方面的效果最佳。

3.3 海洋紅酵母的適宜添加濃度

李正[35]等比較了嗜酸乳桿菌(Lactobacilluscasei)、鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)、納豆芽孢桿菌(Bacillusnatto)和黏紅酵母(R.glutinis)等益生菌對(duì)牙鲆(Paralichthys)的益生作用，發(fā)現(xiàn)黏紅酵母對(duì)牙鲆腸黏液的黏附能力最佳，在腸道內(nèi)含物中可達(dá)103～104cfu/g，且顯著降低了牙鲆因鰻弧菌(V.anguillarum)引起的死亡率。張坤[27]等研究表明，刺參攝入膠紅酵母后可以在一定程度上提高其生長(zhǎng)性能、免疫能力及抗病力，其中以107cfu/g添加量效果最好。夏冬梅[36]等發(fā)現(xiàn)，海洋紅酵母添加量在一定范圍內(nèi)時(shí)，具備凡納濱對(duì)蝦的免疫增強(qiáng)劑功能；但超出適宜范圍后可能會(huì)出現(xiàn)過度免疫，造成對(duì)蝦免疫過激和飼料浪費(fèi)。王苓等[17]在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加芽孢桿菌以提高對(duì)蝦生長(zhǎng)及非特異性免疫能力，結(jié)果表明當(dāng)添加濃度為1.0×109cfu/kg時(shí)，其效果最佳。在本研究中，隨著海洋紅酵母添加濃度的增加，對(duì)蝦的生長(zhǎng)和免疫指標(biāo)變化規(guī)律與上述研究結(jié)論基本上一致，以1.0×109和1.0×1010cfu/kg的添加量效果較好。若綜合考慮對(duì)蝦生長(zhǎng)、非特異性免疫能力及對(duì)副溶血弧菌的抗病力，則以1.0×1010cfu/kg飼料為最適宜的添加濃度。

4 結(jié)論

研究了添加不同濃度的海洋紅酵母對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、免疫酶活性及對(duì)副溶血弧菌抵抗力的影響，結(jié)果表明添加1.0×109和1.0×1010cfu/kg海洋紅酵母，對(duì)對(duì)蝦生長(zhǎng)、飼料效率、免疫酶活性及抗病力均具有顯著提高作用。若綜合考慮對(duì)蝦生長(zhǎng)、非特異性免疫能力及對(duì)副溶血弧菌的抗病力，則以1.0×1010cfu/kg飼料為最適宜的添加濃度。