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    流式細(xì)胞儀在水環(huán)境中的研究熱點(diǎn)和應(yīng)用
    ——基于Cite Space知識圖譜的分析

    2022-08-30 03:52:18安志強(qiáng)王永剛王琦琳李亞翠王恒嘉
    海洋湖沼通報(bào) 2022年4期
    關(guān)鍵詞:浮游飲用水圖譜

    安志強(qiáng),王永剛,王 旭,王琦琳 ,李亞翠 ,王恒嘉

    (1.首都師范大學(xué)資源環(huán)境與旅游學(xué)院,北京 100089;2.北京市生態(tài)環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院,北京 100037;3. 國家城市環(huán)境污染控制工程技術(shù)研究中心, 北京 100037;4. 天津大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,天津 300072)

    引 言

    近年來,水環(huán)境問題日益突出,水體污染和水質(zhì)安全等問題引起了人們廣泛的關(guān)注。某些指示性浮游微生物對自身生存的環(huán)境水質(zhì)的變化較為敏感,其濃度變化在一定程度上反映出水環(huán)境的變化情況[1]。目前,對于浮游微生物群落動態(tài)監(jiān)測常采用傳統(tǒng)的鏡檢法,該方法分析速度慢、耗時長,對操作人員的要求較高,難以滿足種群動力學(xué)觀測量大、連續(xù)的要求[2],也就無法保證水環(huán)境健康穩(wěn)定。而流式細(xì)胞儀(Flow Cytometer,F(xiàn)CM)的應(yīng)用,使得這一問題得到了很好的解決。

    FCM是以流式細(xì)胞術(shù)為核心技術(shù),依賴于流體學(xué)、光學(xué)、電子學(xué)的基本原理,集合細(xì)胞化學(xué)、免疫學(xué)以及激光技術(shù)、細(xì)胞熒光技術(shù)等多門學(xué)科和技術(shù)于一體的先進(jìn)科學(xué)技術(shù)設(shè)備[3]。自問世以來,被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、血液學(xué)和遺傳學(xué)等臨床醫(yī)學(xué)中[4]。直到近些年來,隨著光電探測技術(shù)的發(fā)展和新型熒光染料的開發(fā),并與FCM相結(jié)合,可實(shí)現(xiàn)對浮游微生物的快速分析 、多參數(shù)分析和定向分選以及相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)集的優(yōu)化等,后逐漸被應(yīng)用水環(huán)境的檢測中[5]。

    現(xiàn)如今,國內(nèi)外學(xué)者對FCM在水環(huán)境中應(yīng)用的研究成果日益增多,但尚未見到利用知識圖譜等文獻(xiàn)計(jì)量分析方法對FCM在水環(huán)境中研究現(xiàn)狀系統(tǒng)深入分析研究的報(bào)道。鑒于此,本文采用文獻(xiàn)計(jì)量分析方法系統(tǒng)梳理FCM在水環(huán)境研究領(lǐng)域已有的成果,并通過可視化分析方法生成形象直觀的知識圖譜,以期揭示該領(lǐng)域研究的動態(tài)發(fā)展規(guī)律并展望未來研究方向,為FCM在水環(huán)境中的理論與實(shí)踐研究提供科學(xué)依據(jù)。

    1 研究方法和數(shù)據(jù)來源

    本研究基于在國內(nèi)外學(xué)術(shù)界得到廣泛應(yīng)用的 Cite Space 可視化軟件[6],它可以將文獻(xiàn)當(dāng)中潛在的信息挖掘出來,再通過巧妙的空間布局與多元、分時、動態(tài)的可視化語言將研究領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)、研究趨勢和發(fā)展歷程等展現(xiàn)在一張科學(xué)知識圖譜中,可視化的展現(xiàn)FCM在水環(huán)境中的研究熱點(diǎn)和發(fā)展趨勢。

    本文所需數(shù)據(jù)來源WOS核心合集和CNKI數(shù)據(jù)庫,檢索時間為2021年2月15日,對檢索結(jié)果通過人工篩選剔除后,檢索結(jié)果如表1。

    表1 數(shù)據(jù)來源

    2 文獻(xiàn)計(jì)量分析

    2.1 文獻(xiàn)數(shù)量變化分析

    年發(fā)文數(shù)量能夠反映該研究領(lǐng)域不同時期的基本研究情況、發(fā)展程度以及學(xué)者對該領(lǐng)域的關(guān)注度變化。通過對WOS核心合集和CNKI數(shù)據(jù)庫所得近十年數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),可以得出在2010—2020年間國內(nèi)外有關(guān)FCM在水環(huán)境方面研究文獻(xiàn)發(fā)表的數(shù)量變化(圖1)??傮w來看,英文文獻(xiàn)發(fā)文數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于中文文獻(xiàn)。從變化趨勢上看,英文文獻(xiàn)發(fā)文量總體呈上升趨勢,在2018年達(dá)到峰值,發(fā)文量為117篇,近兩年發(fā)文量有所下降,平均71篇/年。中文文獻(xiàn)發(fā)文量變化趨勢與英文文獻(xiàn)變化趨勢相近,但整體發(fā)文量較低。

    圖1 2010—2020年國內(nèi)外流式細(xì)胞儀在水環(huán)境中研究文獻(xiàn)發(fā)文數(shù)量變化

    2.2 研究關(guān)鍵詞的分布及分析

    研究關(guān)鍵詞的分布及演化最能直觀地體現(xiàn)不同時間段的研究領(lǐng)域內(nèi)的研究風(fēng)向,而論文主題中的關(guān)鍵詞是對論文最為精煉的表達(dá),高頻關(guān)鍵詞在一定程度上代表相關(guān)研究領(lǐng)域的發(fā)展動向和研究熱點(diǎn)[7]。

    基于WOS核心合集所得文獻(xiàn)進(jìn)行可視化分析,得出的知識圖譜(圖2,a)共包含關(guān)鍵詞節(jié)點(diǎn)287個、連線1 103條;基于CNKI數(shù)據(jù)庫所得文獻(xiàn)進(jìn)行可視化分析,得出的知識圖譜(圖2,b)共包含關(guān)鍵詞節(jié)點(diǎn)14個、連線11條。在圖2中,節(jié)點(diǎn)越大,表明詞頻越高,與主題相關(guān)性越大;連線表示關(guān)鍵詞共現(xiàn),線條粗細(xì)反映共現(xiàn)頻次[8]。從圖2(a)可以看出,除檢索的關(guān)鍵詞外,phytoplankton(浮游植物)、bacteria(細(xì)菌)、community structure(群落結(jié)構(gòu))、dynamic(動態(tài)的)等關(guān)鍵詞節(jié)點(diǎn)較大,連線較為密集;從(b)可以看出,浮游病毒、異養(yǎng)細(xì)菌、浙江近海、浮游細(xì)菌等關(guān)鍵詞節(jié)點(diǎn)較大,連線較為密集。由此可見FCM集中用于對水域中浮游微生物的檢測中,通過FCM高效精確的檢測結(jié)果,便于掌握浮游微生物的群落結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化,這也是當(dāng)下國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)方向。

    圖2 2010—2020國內(nèi)外流式細(xì)胞儀在水環(huán)境研究領(lǐng)域關(guān)鍵詞圖譜

    2.3 研究熱點(diǎn)演化過程

    研究熱點(diǎn)為某時間段內(nèi)研究領(lǐng)域中突然出現(xiàn)的最先進(jìn)和具有發(fā)展?jié)摿Φ难芯繜狳c(diǎn)問題。突現(xiàn)詞是指在短時間關(guān)鍵詞頻次突然增加或頻次增長率突然提高的研究主題詞,其突現(xiàn)強(qiáng)度值和突現(xiàn)期可以反映研究前沿的演化趨勢[9]。在Cite Space中對WOS核心合集和CNKI數(shù)據(jù)庫中文獻(xiàn)的關(guān)鍵詞進(jìn)行分析,得到關(guān)鍵詞的突現(xiàn)圖譜和時序圖譜。

    2.3.1 國外流式細(xì)胞儀在水環(huán)境研究熱點(diǎn)演變

    基于WOS核心合集文獻(xiàn)研究熱點(diǎn)演化可分為兩個階段:

    第一階段為2010—2017年(見圖3),這一階段突現(xiàn)關(guān)鍵詞主要有phytoplankton growth(浮游植物生長)、enumeration(計(jì)數(shù))、heterotrophic bacteria(異養(yǎng)細(xì)菌)、assimilable organic carbon(可吸收的有機(jī)碳)等,其中heterotrophic bacteria突現(xiàn)強(qiáng)度最高,enumeration突現(xiàn)時間最長,在這一時期,由于FCM在水環(huán)境中的應(yīng)用剛剛興起,學(xué)者主要應(yīng)用其對水域中浮游微生物的豐度進(jìn)行研究; 第二階段為2018—2020年,主要突現(xiàn)關(guān)鍵詞有bacterial community(細(xì)菌群落)、waste water(污水)、biofilm(生物膜)等,其中突現(xiàn)強(qiáng)度最高的為bacterial community、其次為waste water。由此可以得出,近幾年國外學(xué)者對FCM在水環(huán)境中的應(yīng)用不再局限于對海洋中浮游生物的檢測,而是將其轉(zhuǎn)移至飲用水和再生水處理工藝中來,通過水體中細(xì)菌的實(shí)時檢測,來確保水質(zhì)的安全性。

    (a)突現(xiàn)圖譜

    圖3 2010—2020國外流式細(xì)胞儀在水環(huán)境領(lǐng)域研究熱點(diǎn)詞突現(xiàn)圖譜和時序圖譜

    Fig.3 Emergence and time series of hot words in water environment research by foreign flow cytometry from 2010 to 2020

    2.3.2 國內(nèi)流式細(xì)胞儀在水環(huán)境研究熱點(diǎn)演變

    基于CNKI文獻(xiàn)研究熱點(diǎn)演化可分為兩個階段:

    第一階段為2010—2016年(見圖4),主要代表突現(xiàn)關(guān)鍵詞有湖泊、異養(yǎng)細(xì)菌。由此可以看出,早期學(xué)者主要是對湖泊進(jìn)行研究,這與我國內(nèi)陸湖泊較多,且經(jīng)常出現(xiàn)環(huán)境問題有關(guān),使得國內(nèi)學(xué)者更多的將FCM應(yīng)用于湖泊中細(xì)菌、藻類的監(jiān)測,預(yù)防并治理水環(huán)境問題。第二階段為2017—2020年,主要代表突現(xiàn)關(guān)鍵詞為生物穩(wěn)定性、浮游植物、浮游細(xì)菌、飲用水、群落結(jié)構(gòu)等。這一階段學(xué)者除對水域中浮游微生物的動態(tài)監(jiān)測的研究外,同時FCM在飲用水中的應(yīng)用也做了探究。由此不難看出, FCM在飲用水再生水中的應(yīng)用成為各國學(xué)者的研究熱點(diǎn),也是未來幾年研究的發(fā)展方向。

    2.4 研究機(jī)構(gòu)

    圖5顯示,WOS檢索到FCM在水環(huán)境研究的文獻(xiàn)中研究機(jī)構(gòu)主要有:Chinese Academy of Sciences(中國科學(xué)院)、China Shipbuilding Industry Group Co, Ltd. (中國船舶重工集團(tuán)公司)、University of Chinese Academy of Sciences(中國科學(xué)院大學(xué))、Centre national de la recherche scientifique(法國國家科學(xué)研究中心)、University of aix-marseilles(艾克斯馬賽大學(xué))等;CNKI數(shù)據(jù)庫檢索到FCM在水環(huán)境研究的文獻(xiàn)中研究機(jī)構(gòu)主要有:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心中國科學(xué)院飲用水科學(xué)與技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、太湖流域水文水資源監(jiān)測中心、浙江海洋大學(xué)海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院和中國海洋大學(xué)海洋生物遺傳學(xué)與基因資源利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等。

    圖5 2010—2020流式細(xì)胞儀在水環(huán)境領(lǐng)域研究機(jī)構(gòu)圖譜

    2.5 代表作者

    圖6顯示,基于WOS檢索文獻(xiàn)中代表作者團(tuán)隊(duì)主要有:Frederik Hammes、Nico Boon、Ruben Props、Michael D Besmer等人的團(tuán)隊(duì);Wang Yingyin、Liu Jie、Ling Bing、Zhang Guijuan等人的團(tuán)隊(duì);Li Jiajun、Jiang Xin、Tan Yehui團(tuán)隊(duì)等和Josep M Gasol、Fernando Unrein團(tuán)隊(duì)等。CNKI檢索文獻(xiàn)中代表作者團(tuán)隊(duì)主要有:史小麗、孔繁翔、李勝男、謝薇薇等人的團(tuán)隊(duì);李汝偉、徐大鵬、姚天舜等人的團(tuán)隊(duì);楊琳、孫輝、汪岷等人的團(tuán)隊(duì)和毛冠男、王瑩瑩團(tuán)隊(duì)等。

    圖6 2010—2020流式細(xì)胞儀在水環(huán)境研究領(lǐng)域代表作者圖譜

    3 流式細(xì)胞儀在水環(huán)境中的應(yīng)用

    通過對FCM在水環(huán)境中的文獻(xiàn)計(jì)量分析,可以得出FCM在水環(huán)境中的應(yīng)用主要是對水環(huán)境中浮游微生物的檢測,以及在飲用水和再生水中細(xì)菌病毒的檢測。現(xiàn)針對FCM在水環(huán)境中的應(yīng)用熱點(diǎn)做一簡單概述。

    3.1 計(jì)數(shù)和分選的應(yīng)用

    流式細(xì)胞儀最常見的應(yīng)用就是計(jì)數(shù)應(yīng)用,與常規(guī)的平板計(jì)數(shù)法相比較,F(xiàn)CM不僅具有分析速度快、靈敏度高和準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn),而且可以實(shí)現(xiàn)對樣品的多參數(shù)測定[10]。熊忠亮等[11]進(jìn)行藻類計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示應(yīng)用FCM計(jì)數(shù)結(jié)果比傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)更加精確和可靠。吳曉文等[12]對比了FCM和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)兩種方法,結(jié)果顯示FCM計(jì)數(shù)結(jié)果的更準(zhǔn)確,是一種可以代替血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的快速準(zhǔn)確的方法。Siebel 等[13]對比了常規(guī)平板計(jì)數(shù)法與流式細(xì)胞儀的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)平板法的測定結(jié)果比流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果低約2個數(shù)量級且不存在任何相關(guān)性。由此可以看出,F(xiàn)CM可實(shí)現(xiàn)對樣品的高精度快速定量檢測。

    不同類型的浮游微生物應(yīng)用FCM測定的方法有所區(qū)別,對于自養(yǎng)型浮游藻類來說,由于體內(nèi)含有特定的細(xì)胞色素,如葉綠素a和b、藻藍(lán)素、藻紅素等,可根據(jù)細(xì)胞所含色素的不同來進(jìn)行區(qū)分和計(jì)數(shù)。而對于大部分浮游細(xì)菌和病毒細(xì)胞內(nèi)不含色素,因此還需要借助熒光染料對細(xì)胞核酸進(jìn)行染色處理,目前,SYTO-13和SYBR Green Ⅰ是最適用于自然水體浮游細(xì)菌計(jì)數(shù)的熒光染料,其使用率也最高。Marc等[14]利用FCM對SYTO-13熒光染劑染色的浮游細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),發(fā)現(xiàn)與熒光顯微鏡計(jì)數(shù)有很好的相關(guān)性。Marie等[15]通過 SYBR Green Ⅰ染色首次利用標(biāo)準(zhǔn)流式細(xì)胞儀成功地檢測和計(jì)數(shù)了海洋中的浮游病毒,并且與透射電鏡和熒光顯微鏡的計(jì)數(shù)結(jié)果基本一致。因此,在快速評估理化條件的改變對細(xì)菌數(shù)量的影響和消毒效果評價(jià)以及計(jì)算海洋湖泊藻類豐度等需要快速高效計(jì)數(shù)的研究中,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)顯著優(yōu)于傳統(tǒng)的平板計(jì)數(shù)法[16-17]。

    此外,F(xiàn)CM還具有獨(dú)特的分選功能,它能夠?qū)⑵錂z測出來的細(xì)胞亞類群分選出來,供進(jìn)一步深入研究,如利用流式細(xì)胞儀分選出來的細(xì)胞進(jìn)行純培養(yǎng)[18],還可以結(jié)合分子生物學(xué)技術(shù),進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析[19]。甚至可以將單個細(xì)胞分選出來進(jìn)行分析[20],這必然也會成為一種新的研究趨勢。

    3.2 群落結(jié)構(gòu)的分析

    浮游微生物群落結(jié)構(gòu)的研究一直是海洋生態(tài)學(xué)研究的重點(diǎn),研究其群落結(jié)構(gòu)、豐度和生物量的時空變化,不僅有助于學(xué)者探究浮游微生物與環(huán)境或生物因子之間的關(guān)系[21-23],還可進(jìn)一步了開發(fā)、利用和保護(hù)海洋資源[[24-25]。浮游病毒和異養(yǎng)細(xì)菌是生命與非生命系統(tǒng)之間聯(lián)系的關(guān)鍵環(huán)節(jié),是生源要素循環(huán)的重要驅(qū)動力[26],浮游藻類也對水環(huán)境中物質(zhì)循環(huán)和能量流動起著至關(guān)重要的作用[27],若只采用人工檢測方式對較大海域或者湖泊中浮游微生物的群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,工作量太大不易實(shí)現(xiàn),F(xiàn)CM以其分析速度快、準(zhǔn)確性高和靈敏度高等優(yōu)勢,在海洋浮游微生物群落結(jié)構(gòu)分析中發(fā)揮著重要的作用,可通過儀器對浮游微生物進(jìn)行快速計(jì)數(shù)和粗略分選,可大大縮短檢測時間??v觀國內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的研究已經(jīng)取得豐厚的成果,李中石等[28]應(yīng)用FCM對馬里亞納海溝中浮游病毒的垂直分布和動態(tài)變化進(jìn)行分析得出,病毒的生產(chǎn)力與溫度成正相關(guān),表明浮游病毒的活躍程度依賴于海水溫度。沈麗新等[29]通過對三門灣微型浮游生物豐度時空變化的研究,得出溫度是造成浮游微生物季節(jié)性差異的主要原因。Paerl等[30]通過對極端天氣下水體中浮游植物的動態(tài)變化分析得出,降雨是影響河口浮游生物量激增的重要因素。同時,F(xiàn)CM在浮游微生物的食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)、晝夜變化節(jié)律、季節(jié)變化規(guī)律的研究分析中也發(fā)揮著出色的作用[31-32],F(xiàn)CM的應(yīng)用加快了學(xué)者對海洋微生物的群落結(jié)構(gòu)和時空分布研究進(jìn)展,也對了解海洋湖泊生態(tài)環(huán)境變化和物質(zhì)循環(huán)具有重要意義。

    3.3 水質(zhì)安全的監(jiān)測和預(yù)警

    通過文獻(xiàn)計(jì)量分析可以得出,F(xiàn)CM在飲用水和污水處理中的應(yīng)用是當(dāng)前國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn),飲用水和再生水中微生物含量的測定是一項(xiàng)重要指標(biāo),直接反映水的細(xì)菌污染程度,對人體健康和水處理過程優(yōu)化具有重大意義[33]。目前國際通用的檢測飲用水中微生物的方法是平板計(jì)數(shù)法,但飲用水中的微生物僅有不到1%的細(xì)菌可以通過平板進(jìn)行培養(yǎng)[34],且只能對適應(yīng)于特定培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境的菌種進(jìn)行檢測[35]。而FCM因檢測耗時少、操作簡單、重復(fù)性好,并能克服微生物不可培養(yǎng)的阻礙等諸多優(yōu)點(diǎn),已逐漸應(yīng)用于水質(zhì)監(jiān)測過程中[36]。Hammes等[37]應(yīng)用FCM對瑞士飲用水進(jìn)行了調(diào)查,揭示了常規(guī)飲用水處理工藝對細(xì)菌的去除規(guī)律,并檢測出廠水細(xì)菌濃度約為9×104cells/mL。Jorien等[38]基于流式細(xì)胞儀檢測圖譜,計(jì)算了Bray-Curtis差異,并將其發(fā)展為明確的參數(shù),以指示或警告操作事件中微生物飲用水質(zhì)量的變化。所以,推薦該FCM檢測方法作為飲用水廠微生物指標(biāo)的測定方法。

    此外,較高的有機(jī)物濃度可能會導(dǎo)致出廠水中未被消毒殺死的異養(yǎng)細(xì)菌重新生長,造成水體二次污染[39],因此,實(shí)現(xiàn)對水中微生物的實(shí)時監(jiān)測就顯得尤為重要,Hammes等[40]建立了基于FCM的飲用水微生物總細(xì)菌濃度(TCC)的全自動在線監(jiān)測系統(tǒng),并已應(yīng)用于自來水生產(chǎn)處理系統(tǒng)中。該在線監(jiān)測系統(tǒng)可全自動實(shí)現(xiàn)包含抽樣、試劑添加、稀釋、恒溫孵育等過程的水樣前處理和FCM分析。Besmer等[41,42]利用FCM長時間高頻率地自動在線監(jiān)測水源地水和水務(wù)公司中處理水(絮凝—超濾—臭氧化—顆?;钚赃^濾)的微生物總細(xì)菌濃度含量變化,可以更好地理解和緩解微生物含量動態(tài)波動問題。自動化FCM在水質(zhì)安全監(jiān)測中的應(yīng)用,能有效的避免一些重大水質(zhì)安全問題的發(fā)生。

    4 展望

    近十年來,有關(guān)流式細(xì)胞儀的文獻(xiàn)共計(jì)100 514篇文獻(xiàn),但在水環(huán)境中應(yīng)用的文獻(xiàn)只有745篇,僅占0.7%,且FCM在水環(huán)境中的應(yīng)用范圍也有限,基于目前研究現(xiàn)狀,針對流式細(xì)胞儀的不足和改良進(jìn)行總結(jié)。

    (1)流式細(xì)胞儀在水環(huán)境中主要是對海洋湖泊中浮游微生物和飲用水中微生物的檢測,由于微生物數(shù)量變化迅速,在實(shí)際工作中,需對部分樣品進(jìn)行現(xiàn)場檢測,而目前大多數(shù)流式細(xì)胞儀包含液流系統(tǒng)、激光系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)分析系統(tǒng)等大型設(shè)備,無法實(shí)現(xiàn)對樣品的實(shí)時監(jiān)測,因此便捷、自動化的儀器改進(jìn),將成為今后的研究方向,例如便攜式浮游植物分析流式細(xì)胞儀、在線監(jiān)測型流式細(xì)胞儀和水下流式細(xì)胞儀等,它們實(shí)現(xiàn)了對微型浮游生物進(jìn)行連續(xù)定量、實(shí)時原位的監(jiān)測[43-45]。隨著科技的進(jìn)一步發(fā)展,流式細(xì)胞儀將會越來越廣泛地應(yīng)用于水體微生物檢測方面的研究。

    (2)流式細(xì)胞儀在定量分析上可以做到便捷、高效、和精確等優(yōu)點(diǎn),但在定性分析中卻有所欠缺,F(xiàn)CM分選出來的細(xì)胞類群大都并不是某特定的單一細(xì)胞群體,它們只是通過細(xì)胞光學(xué)性質(zhì)區(qū)分出的具有相似性質(zhì)(如大小、色素等)的某一生態(tài)功能群,其種群、類屬信息還必需依靠顯微觀察和一定的經(jīng)驗(yàn)才能確定。因此,可以將分選技術(shù)與成像技術(shù)相結(jié)合,被分選出的細(xì)胞可以清晰的呈現(xiàn)在計(jì)算機(jī)系統(tǒng)中,在通過數(shù)據(jù)庫的對比,分析出細(xì)胞的種屬,同時還可以和16sRNA測序結(jié)合,定性定量研究網(wǎng)管水中的致病菌,可為飲用水安全提供數(shù)據(jù)支撐。

    (3)目前,流式細(xì)胞儀在水環(huán)境中的研究熱點(diǎn)是在飲用水中的應(yīng)用,但受限于微生物檢測技術(shù),《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749—2006)規(guī)定的微生物指標(biāo)是基于HPC的檢測結(jié)果,但HPC只能檢測自來水中不到1%的微生物,因此,可用FCM作為對照工具,核驗(yàn)計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    如上文所述,流式細(xì)胞儀在水環(huán)境微生物檢測中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,但是,與其他技術(shù)一樣,流式細(xì)胞儀也具有自身的障礙和局限。盡管如此,隨著科學(xué)研究的進(jìn)一步發(fā)展,并且結(jié)合其他輔助技術(shù),流式細(xì)胞儀在水環(huán)境微生物學(xué)方面仍然具有很大的應(yīng)用潛力和應(yīng)用前景。此外,日本擬將核廢水傾倒入海洋中,對于我國及周邊國家的水質(zhì)安全問題都帶來了嚴(yán)峻的考驗(yàn),水質(zhì)安全的監(jiān)測與預(yù)警的研究已將成為今后的一大研究熱點(diǎn),F(xiàn)CM作為水質(zhì)檢測類的新興工具,也將得到更廣泛的應(yīng)用。

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