劉晉仙
砂仁為一種姜科豆蔻草本植物,主要藥用部分為其干燥成熟果實(shí),且同時(shí)具有食用功能,沿用至今已有1300 多年的藥食史[1]。1963 年我國出版的《中華人民共和國藥典》(以下簡(jiǎn)稱作《中國藥典》)中將產(chǎn)自廣東、廣西等地的“陽春砂”(Amomum villosum Lour)與緬甸、越南、泰國、印尼等國進(jìn)口的“縮砂”(A.xanthioides)規(guī)定為藥用砂仁的主要來源。至1977 版《中國藥典》頒布時(shí),去除縮砂,增列入海南砂(Amomum longiligulare T.L.Wu)。而現(xiàn)今參考應(yīng)用的砂仁是由1990 版《中國藥典》所規(guī)定的藥材來源,包括前述陽春砂、海南砂,并在此基礎(chǔ)上增加了綠殼砂(Amomumvillosum Lour.var.xanthioides T.L.Wu et Senjen)。
砂仁是臨床常用的中藥,性辛、溫,歸脾胃經(jīng),可發(fā)揮化濕開胃、溫脾止瀉、理氣安胎之效[2],多用于治療腹痛痞脹,納呆食滯,噎膈嘔吐,寒瀉冷痢,胎動(dòng)不安等疾?。?]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表示,砂仁可以保護(hù)胃腸道,發(fā)揮抗炎、抗菌、抗氧化、鎮(zhèn)痛等作用,且有一定程度的降血糖功能[4]。砂仁的主要化學(xué)成分是揮發(fā)油類(包括乙酸龍腦酯、樟腦、樟烯、檸檬烯等),除此之外還有香豆素類、黃酮類、酚酸類、倍半萜苷類化合物等有機(jī)成分[5]。
除藥典規(guī)定的砂仁藥材來源外,我國各個(gè)地方實(shí)行的飲片炮制法包括了帶殼砂仁及砂仁粉、米等多種規(guī)格的中藥飲片[6]。其中一些飲片來自于外殼去皮后的種子或是種子散粒,價(jià)格低于正品砂仁,而由于這類飲片的原料種子與正品砂仁為近似基原品種,故鑒別存在一定難度,容易摻雜偽劣品,導(dǎo)致中藥飲片市場(chǎng)常出現(xiàn)真?zhèn)螕诫s售賣的情況,飲片質(zhì)量無法得到保證[7,8]。
為進(jìn)行中藥飲片與其易混品種在性狀和顯微結(jié)構(gòu)上的鑒別分析,本研究收集了中國藥典所納的正品砂仁和飲片市場(chǎng)上較多見的砂仁易混品海南假砂仁、紅殼砂仁的種子,對(duì)其正、側(cè)面、外表的性狀以及種子的橫、縱剖面與橫切面的顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)進(jìn)行數(shù)字化特征分析,內(nèi)容報(bào)告如下。
1.1 材料 本研究的觀察樣品全部來自于中藥材市場(chǎng),由本市中藥材檢驗(yàn)研究院中藥師鑒定,包括陽春砂、綠殼砂、海南砂以及海南假砂仁、紅殼砂仁的種子。
1.2 研究?jī)x器 使用體式顯微鏡(LEICA 公司,型號(hào):DVM 6)、光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS 公司,型號(hào):BX53)、數(shù)碼相機(jī)(Canon 公司,型號(hào):EOS5D)。
1.3 化學(xué)試劑 水合氯醛(中國醫(yī)藥集團(tuán)上?;瘜W(xué)工業(yè)公司)。
2.1 外觀特征觀察
2.1.1 整體結(jié)構(gòu) 取50 ml 的燒杯,放入樣品種子,添加適量純化水(去離子水),高度沒過樣品即可,酒精燈上煮沸,2 min 后用鑷子夾出,以鑷尖小心去除種子外被的假皮,然后自然條件下晾干。用數(shù)碼相機(jī)拍攝具有顯著特征的種子樣品。
2.1.2 外形結(jié)構(gòu) 選取大小適中、特征明顯的種子,用體視顯微鏡觀察正面(種臍向下,種子最大面向上)、側(cè)面(種臍向下,種子窄面向上)及臍面(種臍向上)等方位的外觀,用數(shù)碼相機(jī)拍攝記錄。
2.2 剖面結(jié)構(gòu) 以種子的長(zhǎng)軸為切面即為縱切面,以種子的短軸為切面即為橫切面。使用體視顯微鏡進(jìn)行剖面特征觀察,觀察內(nèi)容包括種子剖面性狀、胚型、胚乳、大小、顏色等,并用數(shù)碼相機(jī)拍攝記錄。
2.3 顯微結(jié)構(gòu)(橫切面) 在種子長(zhǎng)軸的中間點(diǎn)切斷即為橫切面。用光學(xué)顯微鏡觀察種子自外向內(nèi)的組織結(jié)構(gòu),并用數(shù)碼相機(jī)拍攝記錄。
3.1 性狀觀察
3.1.1 外觀結(jié)構(gòu) ①陽春砂、綠殼砂:外形為不規(guī)則的多面體,外被黃色或淡棕色假皮(膜質(zhì)),表面呈紅棕或深褐色,有規(guī)則的波狀突起和條紋,背面有縱溝;質(zhì)地堅(jiān)硬,氣味香且濃,味辛、略苦。見圖1a、b。②海南砂:外形為不規(guī)則的多面體,外被淡棕色假皮(膜質(zhì)),表面呈紅棕或深褐色,有不規(guī)則的波狀突起和條紋,背面縱溝不明顯;質(zhì)地堅(jiān)硬,氣味較淡。見圖1c。③海南假砂仁:外形為不規(guī)則的卵圓形,外被淡棕色假皮,表面為深棕褐色,有條紋和低凸起,背面縱溝較淺;質(zhì)堅(jiān)硬,氣味較淡。見圖1d。④紅殼砂仁:外形為不規(guī)則的多面體,體型最小,外被淺棕色假皮,表面呈較光滑的紅棕或黑褐色,有條紋;質(zhì)地堅(jiān)硬,氣味弱,較淡。見圖1e。
3.1.2 剖面觀 ①陽春砂、綠殼砂:縱剖面近似三角形,表層種皮堅(jiān)硬,胚乳近似橢圓形。橫剖面類梯形,外、內(nèi)胚乳、胚分別呈灰白色、淡黃或黃褐色。見圖2a、b。②海南砂:縱剖面是不規(guī)則的四邊形,表層種皮堅(jiān)硬。橫剖面呈四邊形,外、內(nèi)胚乳、胚分別呈黃白色、淡黃或黃褐色。見圖2c。③海南假砂仁:縱剖面近似長(zhǎng)方形,表層種皮堅(jiān)硬,胚乳為橢圓形。橫剖面類梯形,外、內(nèi)胚乳、胚分別呈灰白色、黃或黃褐色。見圖2d。④紅殼砂仁:縱剖面近似三角形,表層種皮堅(jiān)硬,胚乳為橢圓形。橫剖面類梯形,外、內(nèi)胚乳、胚分別呈灰白色、淺黃色。見圖2e。
3.2 顯微特征(橫切面) 正品砂仁(陽春砂、綠殼砂、海南砂):假皮有時(shí)殘存,種皮包括表皮細(xì)胞和下皮細(xì)胞各一列,前者徑向延長(zhǎng),壁略厚,長(zhǎng)度約占種皮厚度的30%,后者內(nèi)含棕或紅棕色物質(zhì);油細(xì)胞層呈一列,內(nèi)有黃色油滴;色素層為數(shù)列無規(guī)則排列的以角形為主的棕色細(xì)胞;內(nèi)種皮均為一列柵狀厚壁小細(xì)胞,呈黃棕色,內(nèi)壁和側(cè)壁較厚,內(nèi)有硅質(zhì)粒,長(zhǎng)度約為內(nèi)種皮的30%~40%。外胚乳細(xì)胞包含淀粉塊和微量小粒子草酸鈣方晶,內(nèi)胚乳細(xì)胞包含細(xì)小糊粉粒和脂肪油滴。
海南假砂仁:假皮或有殘存。種皮包括表皮細(xì)胞、下皮細(xì)胞各一列,前者徑向延伸,壁略厚,長(zhǎng)度約占種皮厚度的4%~8%,后者內(nèi)含紅棕色物質(zhì)。色素層為數(shù)列無規(guī)則排列的以角形為主的紅棕色細(xì)胞,其中間斷排列2 列油細(xì)胞;內(nèi)種皮均為一列柵狀厚壁細(xì)胞,呈黃棕色,內(nèi)壁和側(cè)壁較厚,內(nèi)有硅質(zhì)粒,長(zhǎng)度約為內(nèi)種皮30%~50%。外胚乳細(xì)胞包含淀粉塊,少量細(xì)胞包含小粒子草酸鈣方晶。
紅殼砂仁:假皮或有殘存。種皮包括表皮細(xì)胞、下皮細(xì)胞各一列,前者徑向延伸,壁厚,長(zhǎng)度約占種皮厚度的10%~30%,后者內(nèi)含棕色物質(zhì)。油細(xì)胞層呈一列,內(nèi)有黃色油滴;色素層為數(shù)列無規(guī)則排列的以角形為主的棕色細(xì)胞;內(nèi)種皮均為一列柵狀厚壁小細(xì)胞,呈黃棕色,內(nèi)壁和側(cè)壁較厚,內(nèi)有硅質(zhì)粒,長(zhǎng)度約為內(nèi)種皮30%。外胚乳細(xì)胞包含淀粉塊,少量細(xì)胞包含小粒子草酸鈣方晶。
砂仁與其近似基原品的種子極為相似,區(qū)分鑒別難度較大。本研究參考植物學(xué)中關(guān)于形態(tài)鑒定及科目分類的專業(yè)術(shù)語和研究技術(shù),使用顯微鏡、數(shù)碼相機(jī)等科學(xué)儀器對(duì)多種砂仁的正、側(cè)面及外表進(jìn)行全方位的性狀觀察,并觀察種子的橫、縱剖面及橫切面的顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn),對(duì)砂仁與其相近基原的種子實(shí)施生藥學(xué)鑒別及數(shù)字化外觀特征分析。研究結(jié)果顯示,砂仁與其近似基原品的種子存在外觀性狀、橫切面顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)等方面的顯著差異,可根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的不同進(jìn)行鑒別。
調(diào)查資料顯示,目前陽春砂在我國主要為引種,廣東、云南是主要生產(chǎn)基地[9]。產(chǎn)地不一的陽春砂其果實(shí)外觀性狀也存在差異,廣東生長(zhǎng)的陽春砂種子外皮顏色偏深,表皮有細(xì)密的小刺,外皮與果實(shí)貼合更緊密,而云南和廣西生長(zhǎng)的陽春砂種子顏色較淺,表皮小刺稀疏,外皮與果實(shí)貼合不緊密[10-12]。見圖3。然而產(chǎn)地不同是否導(dǎo)致種子質(zhì)量存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異還需深入探索分析。
我國綠殼砂種植規(guī)模不大,市場(chǎng)流通的綠殼砂較少,而海南砂更為稀少,因此我國中藥飲片市場(chǎng)上一大部分是進(jìn)口砂仁種子所制的飲片[13]。進(jìn)口砂仁較為廉價(jià),常被用作摻雜砂仁飲片售賣,例如目前飲片市場(chǎng)上較為多見的主流混淆品——長(zhǎng)序砂仁(豆蔻屬)[14]。云南是紅殼砂的主要產(chǎn)地,常被當(dāng)?shù)赜米魃叭实奶娲?但現(xiàn)階段已極少進(jìn)入飲片市場(chǎng)[15]。
綜上所述,不同產(chǎn)地的正品砂仁在性狀特征、橫切面顯微特征方面差異性較小,而砂仁近似基原品種在性狀特征、橫切面顯微特征方面與正品砂仁具有顯著差異性,臨床采購、應(yīng)用藥物時(shí)可根據(jù)其特征、差異進(jìn)行鑒別。