濾泡輔助性T細(xì)胞在重癥肌無力發(fā)病機制中的研究進展

孫靜 李曉玲 孫夢嬌 王紅霞 王滿俠

重癥肌無力(myasthenia gravis，MG)是一種抗體介導(dǎo)的獲得性自身免疫性疾病，其主要臨床表現(xiàn)是神經(jīng)肌肉傳遞障礙導(dǎo)致的骨骼肌無力和疲勞。MG在普通人群發(fā)病率為(0.50～3.00)/10萬人，患病率為(10～20)/10萬人[1]，隨著診斷技術(shù)的發(fā)展和人類壽命的延長，其發(fā)病率和患病率不斷上升[2]。MG的發(fā)病機制主要涉及免疫系統(tǒng)紊亂，也與環(huán)境、感染、遺傳及用藥等因素有關(guān)，但調(diào)控MG發(fā)生發(fā)展的細(xì)胞和免疫機制尚不完全清楚。MG患者中80%血液中可檢測到抗乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor，AChR)抗體(acetylcholine receptor antibody，AChR-Ab)，而一小部分可以檢測到抗肌肉特異性激酶(muscle-specific kinase，MuSK)抗體或低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(low-density lipoprotein receptor-related protein 4，LRP4)抗體[3]。隨著AChR-Ab的發(fā)現(xiàn)，體液免疫在MG發(fā)病中的作用引起了廣泛關(guān)注。因此，針對MG抗體產(chǎn)生途徑及靶向治療的研究具有重要的臨床價值。

濾泡輔助性T細(xì)胞(follicular helper T cells，Tfh)位于B細(xì)胞濾泡和生發(fā)中心(germinal center，GC)，是CD4+T細(xì)胞的一個重要子集[4]。源于GC的Tfh是輔助B細(xì)胞遷移、增殖、分化為漿細(xì)胞并產(chǎn)生高親和力抗體的主要效應(yīng)T細(xì)胞[5]。GC的Tfh細(xì)胞和B細(xì)胞相互依賴，識別B細(xì)胞表面的同源抗原，并通過共刺激分子如CD28、分化簇40配體(cluster of differentiation 40 ligand，CD40L)、誘導(dǎo)共刺激分子(inducible costimulatory molecule，ICOS)和腫瘤壞死因子受體超家族成員4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4，OX40)等形成穩(wěn)定的相互作用，有助于促進GC反應(yīng)。此外，Tfh細(xì)胞分泌的效應(yīng)細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素21(interleukin 21，IL-21)、IL-4、IL-9和IL-10等，它們不僅維持GC反應(yīng)，還誘導(dǎo)GC的B細(xì)胞最終分化為漿細(xì)胞或記憶B細(xì)胞[6-9]。因此，Tfh在免疫調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮重要作用。

近年來，靶向自身抗體的研究已成為MG研究領(lǐng)域的熱點，而Tfh在其中起重要作用。本文將圍繞Tfh細(xì)胞的表型、分化及調(diào)節(jié)，以及其與MG 的相關(guān)性等方面研究進行綜述。

1 Tfh細(xì)胞的表型

Tfh細(xì)胞被認(rèn)為是不同于傳統(tǒng)Th1、Th2和Th17細(xì)胞的一個新型的輔助性T細(xì)胞亞群[10]。其在次級淋巴器官(secondary lymphoid organs，SLO)中發(fā)育，可根據(jù)獨特的表面表型、細(xì)胞因子分泌譜和特征轉(zhuǎn)錄因子對其進行鑒定[11]。由于Tfh細(xì)胞是一個異質(zhì)性細(xì)胞群體，因此不能用單一的標(biāo)記物來定義。Tfh細(xì)胞具有多個功能性標(biāo)記物，包括C-X-C趨化因子受體5(C-X-C chemokine receptor 5，CXCR5)、轉(zhuǎn)錄因子B細(xì)胞淋巴瘤6(B cell lymphoma 6，BCL-6)、 程序性細(xì)胞死亡蛋白1 (programmed cell death protein，1，PD-1)、ICOS 等[12]。其中CXCR5在Tfh細(xì)胞的遷移和定位上發(fā)揮作用，BCL-6嚴(yán)重影響GC的形成，從而對Tfh細(xì)胞的產(chǎn)生起作用，PD-1協(xié)助B細(xì)胞促進GC的形成，ICOS對Tfh細(xì)胞的產(chǎn)生和存活起重要作用[13]。這些轉(zhuǎn)錄因子驅(qū)動一系列基因的表達，對于Tfh細(xì)胞的分化發(fā)育和維持非常重要。Tfh細(xì)胞的不同表型是由免疫反應(yīng)的當(dāng)前階段及其在組織中的不同定位決定的[14-15](圖1)。次級淋巴器官和血液中的所有Tfh細(xì)胞亞群均表達CXCR5，但表達不同數(shù)量的其他標(biāo)記物，包括轉(zhuǎn)錄因子BCL-6和ICOS。非淋巴組織中的大多數(shù)Tfh樣細(xì)胞不表達CXCR5。次級淋巴器官中Tfh細(xì)胞包括前Tfh細(xì)胞、GC-Tfh細(xì)胞和記憶性Tfh細(xì)胞亞群。GC-Tfh細(xì)胞通常以CD4+CXCR5hiCCR7-PD1hiBCL-6+為特征。根據(jù)PD-1和趨化因子受體7(chemokine receptor 7，CCR7)的表達，血液中的循環(huán)Tfh(circulation Tfh，cTfh)細(xì)胞可分為效應(yīng)器記憶(effector memory，cTfh EM)細(xì)胞或中央記憶(central memory，cTfh CM)細(xì)胞亞群，或根據(jù)C-X-C趨化因子受體3(C-X-C chemokine receptor 3，CXCR3)和趨化因子受體6(chemokine receptor 6，CCR6)的表達分為cTfh1細(xì)胞、cTfh2細(xì)胞和cTfh17細(xì)胞亞群[16]。

注：CXCR3、5：C-X-C趨化因子受體3、5；CCR6、7：趨化因子受體6、7；PD-1：程序性細(xì)胞死亡蛋白1；ICOS：誘導(dǎo)型共刺激分子；IL-21：白細(xì)胞介素21；BCL-6：B細(xì)胞淋巴瘤6 圖1 Tfh細(xì)胞表型示意圖：根據(jù)標(biāo)記物的表達不同，次級淋巴器官、血液循環(huán)以及非淋巴組織中的Tfh細(xì)胞分為不同的類別

2 Tfh細(xì)胞的分化

Tfh細(xì)胞分化指初始CD4+T細(xì)胞向Tfh細(xì)胞的分化，是一個復(fù)雜的、受多因素調(diào)節(jié)的動態(tài)過程，涉及多個環(huán)節(jié)。正常的Tfh細(xì)胞分化通常需要樹突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)和B細(xì)胞兩個抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cell，APC)[14]，DC和B細(xì)胞在Tfh細(xì)胞分化和GC形成中相互合作。初始CD4+T細(xì)胞向Tfh細(xì)胞的分化過程涉及3個階段，包括起始、維持和全極化階段[17]。Tfh細(xì)胞分化的起始階段即DC啟動期，多種信號參與了這一過程，包括轉(zhuǎn)錄因子BCL-6、共刺激分子ICOS、細(xì)胞因子IL-6和IL-21以及高親和力的T細(xì)胞受體( T cell receptor，TCR)。Tfh細(xì)胞分化維持階段：BCL-6+CXCR5+Tfh前體細(xì)胞進入T-B邊界區(qū)，B細(xì)胞呈遞抗原并提供共刺激信號誘導(dǎo)型共刺激分子配體(inducible costimulatory molecular ligand，ICOXL)，BCL-6+CXCR5+Tfh前體細(xì)胞與抗原特異性B細(xì)胞相互作用發(fā)生共定位，表達CXCR5，下調(diào)CCR7和Pselectin糖蛋白配體1(pselectin glycoprotein ligand 1，PSGL1)。全極化階段即GC期，當(dāng)Tfh細(xì)胞遷移進入GC濾泡區(qū)并分化為成熟的GC-Tfh細(xì)胞時，進入Tfh細(xì)胞分化的終末階段。在此階段，GC-Tfh細(xì)胞黏附于GC-B細(xì)胞并調(diào)節(jié)GC-B細(xì)胞向漿細(xì)胞和記憶B細(xì)胞的分化。GC-Tfh細(xì)胞的生物學(xué)特性與CXCR5、CCR7、ICOS、信號淋巴細(xì)胞活化分子相關(guān)蛋白(signaling lymphocytic activation molecule-associated protein，SAP )及相關(guān)分子的變化密切相關(guān)[18]。在每個分化階段，Tfh細(xì)胞的發(fā)育都受到轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子、趨化因子和細(xì)胞環(huán)境變化的影響。典型的Tfh細(xì)胞分化過程始于初始CD4+T細(xì)胞的DC啟動[19]。CD4+T細(xì)胞在不同條件刺激下會出現(xiàn)不同的分化結(jié)果[20]。如果趨化因子受體CXCR5表達，早期Tfh細(xì)胞將遷移到B細(xì)胞濾泡的邊緣，并經(jīng)歷進一步的Tfh細(xì)胞分化。如果細(xì)胞接收Th1、Th2或Th17信號，則CD4+T細(xì)胞遵循Th1、Th2或Th17細(xì)胞分化程序，包括炎癥趨化因子的趨化因子受體上調(diào)，這將驅(qū)動效應(yīng)細(xì)胞退出淋巴組織并流向感染或炎癥部位[21]。綜上所述，Tfh細(xì)胞分化途徑，涉及多個信號、多階段過程和兩個不同的APC。幾乎所有病原體，無論是病毒、細(xì)菌、真菌還是多細(xì)胞寄生蟲，攻擊人體組織時均可能發(fā)生抗體反應(yīng)。因此，當(dāng)人體受到病原體攻擊的情況下，免疫系統(tǒng)觸發(fā)Tfh細(xì)胞誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生信號至關(guān)重要。

3 Tfh細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)

Tfh細(xì)胞的分化是由細(xì)胞內(nèi)信號通路、下游轉(zhuǎn)錄因子和轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)等機制參與調(diào)控的，這些機制涉及數(shù)十種轉(zhuǎn)錄因子、RNA結(jié)合蛋白和微小核糖核酸[15]。

3.1 Tfh細(xì)胞分化相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子Tfh細(xì)胞的分化受復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，其中一些轉(zhuǎn)錄因子能夠正向調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞分化，而另一些轉(zhuǎn)錄因子能夠抑制Tfh細(xì)胞分化。BCL-6是調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞分化和發(fā)揮生物學(xué)功能的主要轉(zhuǎn)錄激活因子[22]。自從BCL-6被發(fā)現(xiàn)以來，已證實越來越多的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子影響Tfh細(xì)胞發(fā)育、遷移和生物學(xué)功能。正向調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄因子有巨噬細(xì)胞活化因子(macrophage activating factor，c-MAF)、活化轉(zhuǎn)靈因子-堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子(basic leucine zipper ATF-like transcription factor，BATF)、干擾素調(diào)節(jié)因子-4(interferon regulatory factor 4，IRF4)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1，STAT1)、STAT3、STAT4、T細(xì)胞因子1(T cell factor 1，TCF1)和淋巴樣增強結(jié)合因子1(lymphoid enhanced binding factor 1，LEF1)及早期生長反應(yīng)因子(early growth response factor，EGR)[23-28]等。能夠抑制Tfh細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄因子，包括B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)的成熟蛋白-1(B lymphocyte induced maturation protein 1，Blimp-1)、叉頭框蛋白1(forkhead box protein 1，F(xiàn)OXO-1)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptorγ，PPARγ)、Kruppel樣因子2(kruppel like factor 2，KLF2)和叉頭框蛋白p1(forkhead box protein P1，F(xiàn)OXP1)等[29-33]。FOXO-1可負(fù)性調(diào)節(jié) KLF2的表達。KLF-2通過與CXCR5基因結(jié)合來抑制CXCR5的表達，而KLF2能誘導(dǎo)Blimp-1產(chǎn)生。Blimp-1可抑制BCL-6、c-MAF、CXCR5和PD-1的表達[34]。上述研究表明，多個轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)正向或負(fù)向調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞分化，且各個轉(zhuǎn)錄因子之間也可相互調(diào)節(jié)。

3.2 Tfh細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)在人類基因組中，大約有1500個RNA結(jié)合蛋白(RNA-binding proteins，RBPs)。RBP可識別并直接與信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid，mRNA)3′非翻譯區(qū)的順式調(diào)控元件結(jié)合，調(diào)節(jié)mRNA穩(wěn)定性或翻譯效率，這個過程被稱為“轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)”[35]。轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控是適應(yīng)基因表達和改變細(xì)胞反應(yīng)的一種快速有效的方法。據(jù)估計，T細(xì)胞激活后發(fā)生的50%以上的蛋白質(zhì)表達變化是由轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)引起的[36]。一些蛋白質(zhì)和微小核糖核酸(miRNA)被證明可以調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞的發(fā)育、體內(nèi)平衡和生物學(xué)功能。Roquin(也被稱為Roquin 1，由Rc3h1編碼)是第一個被證明能抑制Tfh細(xì)胞聚集的核糖核酸結(jié)合蛋白，其定位于應(yīng)激顆粒和P體，能與ICOS和OX40(CD134)的TCR結(jié)合，誘導(dǎo)其衰變[37]。有研究表明miRNA-17～92家族通過限制非Tfh基因(如Rora)[38]的表達和增強磷酸肌醇3激酶(phosphoinositide 3 kinase，PI3K)信號傳導(dǎo)，促進T細(xì)胞初始激活后Tfh細(xì)胞的形成。它們主要通過直接抑制含有PH結(jié)構(gòu)域亮氨酸豐富的磷酸酶2(pleckstrin homology domain leucine-rich repeat protein phosphatase 2，Phlpp2)發(fā)揮作用，Phlpp2使PI3K下游效應(yīng)器Akt(也稱為蛋白激酶B或PKB)失活，第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10，PTEN)的下調(diào)起一定作用，PTEN拮抗PI3K通路[39]。其在T細(xì)胞中的過度表達可誘發(fā)自發(fā)性Tfh細(xì)胞分化和系統(tǒng)性自身免疫[40]。miRNA-146a可導(dǎo)致GC-B細(xì)胞自主抑制，并間接限制GC-B細(xì)胞上ICOSL的表達，其是Tfh分化的細(xì)胞內(nèi)在抑制物，缺乏miRNA-146a的小鼠以細(xì)胞自主方式聚集Tfh細(xì)胞[41]；miRNA-155在慢性炎癥期間驅(qū)動異常GC反應(yīng)調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞的發(fā)育，此外，miRNA-155可下調(diào)低聚果糖相關(guān)抗原2(FOS associated antigen 2，F(xiàn)OSL2)的表達，從而負(fù)向調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞的分化[42]。

3.3 Tfh細(xì)胞分化相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路Tfh細(xì)胞分化是由多因素、多環(huán)節(jié)及復(fù)雜機制調(diào)節(jié)的動態(tài)變化過程。與Th1、Th2和Th17細(xì)胞相比，Tfh細(xì)胞的分化更依賴于持續(xù)的TCR信號和ICOS的共刺激。Tfh細(xì)胞對持續(xù)TCR信號和ICOS共刺激的獨特依賴性是通過PI3K信號介導(dǎo)的，ICOS介導(dǎo)的PI3K信號通路已被證明在Tfh編程、向GC的遷移以及在Tfh-GC-B細(xì)胞結(jié)合過程中起著關(guān)鍵作用。ICOS過通過Akt的PI3K信號促進Tfh細(xì)胞分化。PI3K p85α亞單位在Tfh細(xì)胞分化相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中具有雙重作用。一方面，p85α與細(xì)胞內(nèi)骨橋蛋白(osteopontin，OPNi)形成復(fù)合物，后者遷移到細(xì)胞核中并保護BCL-6免受泛素依賴性降解。另一方面，PI3K激活A(yù)kt通過磷酸化介導(dǎo)的胞質(zhì)滯留抑制FOXO-1功能，從而上調(diào)BCL-6和下調(diào)KLF2，促進了Tfh細(xì)胞遷移和功能相關(guān)的特征基因表達，參與Tfh細(xì)胞的形成[43]。其次，酪氨酸激酶-信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化(tyrosine kinase-signal transduction and transcriptional activation，JAK-STAT)信號通路也能調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞的分化，STAT1和STAT4信號通過驅(qū)動B細(xì)胞表達T-bet(T-box expressed in T cells)和產(chǎn)生γ干擾素(γ interferon，IFN-γ)來控制GC的反應(yīng)和Tfh細(xì)胞的產(chǎn)生[44-45]。STAT3能與BCL-6[46]和IL-21[47]的啟動子區(qū)相結(jié)合，并激活這些基因的轉(zhuǎn)錄，間接調(diào)節(jié)Tfh分化。此外，STAT5是Tfh細(xì)胞分化的有效負(fù)調(diào)節(jié)因子[48]。

4 Tfh細(xì)胞與MG關(guān)系的相關(guān)研究

MG是一種由自身抗體介導(dǎo)的神經(jīng)肌肉接頭傳遞障礙引起的神經(jīng)免疫性疾病。盡管以前的研究認(rèn)為 MG 主要與 B 細(xì)胞功能有關(guān)，但近年來越來越多的實驗研究發(fā)現(xiàn)Tfh細(xì)胞在MG的免疫性致病中發(fā)揮了重要的作用。目前普遍認(rèn)為，Tfh細(xì)胞活化不是 MG發(fā)生的始動因素，但其卻在MG相關(guān)自身抗體產(chǎn)生過程中發(fā)揮了促進作用。自身抗體在MG發(fā)病中發(fā)揮直接致病作用，因此，Tfh細(xì)胞對MG的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。

4.1 臨床研究MG曾被認(rèn)為是細(xì)胞免疫依賴、補體參與的神經(jīng)免疫性疾病。但AChR-Ab的檢出，使體液免疫在MG發(fā)病中的作用得到關(guān)注，抗體的產(chǎn)生途徑成為進一步研究MG的熱點。胸腺GC的發(fā)現(xiàn)對MG的研究意義重大，源于GC的Tfh細(xì)胞能輔助B細(xì)胞增殖、分化成熟為漿細(xì)胞并產(chǎn)生高親和力抗體，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。多項臨床研究發(fā)現(xiàn)MG患者血液中的Tfh細(xì)胞異常活化，且Tfh細(xì)胞表達水平與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)。而濾泡調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(follicular regulatory T cells，Tfr)作為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell，Treg)的特殊亞群，可以遷移到GC并抑制Tfh細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞活化和抗體的產(chǎn)生。

Yang等和王麗芳等[49-50]研究報道，與健康對照組相比，MG患者循環(huán)中Tfh細(xì)胞的比例顯著增高，且與血清抗AChR-Ab水平呈正相關(guān)。王圣元等[51]發(fā)現(xiàn)Tfh/Tfr比值與美國重癥肌無力基金會(Myasthenia Gravis Foundation of America，MGFA)分型和定量重癥肌無力評分(quantitative myasthenia gravis score，QMGs)呈正相關(guān)。Wang等[52]發(fā)現(xiàn)MG患者外周血中Tfh細(xì)胞比例明顯高于健康人，且與MG的嚴(yán)重程度有關(guān)。Shinji等[53]報道MG患者外周血中Tfh水平與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，免疫治療后循環(huán)Tfh異常改善與臨床改善同步，提示循環(huán)Tfh的改變是MG發(fā)生發(fā)展的一個重要特征，其可能成為疾病嚴(yán)重程度和治療效果的生物標(biāo)志物。Wen等[54]發(fā)現(xiàn)，與健康對照組相比，Tfr細(xì)胞在MG患者外周血中的表達比例下降，Tfh細(xì)胞表達比例則顯著升高；Tfr /Tfh細(xì)胞比例與QMGs評分呈顯著負(fù)相關(guān)。上述研究結(jié)果表明Tfr細(xì)胞比例降低、Tfh細(xì)胞比例增多，這些變化可能通過介導(dǎo)相應(yīng)抗體的生成反應(yīng)，改變QMGs評分，影響疾病的嚴(yán)重程度而參與MG疾病進程。

單純眼肌型重癥肌無力(ocular myasthenia gravis，OMG)為 MG 的一種亞型。Zhao等[55]發(fā)現(xiàn)，與OMG組和全身型MG( generalized masthenia gravis，GMG)組相比較，Tfr細(xì)胞在健康對照組表達比例最高，OMG 次之，GMG中最低；相反，Tfh細(xì)胞在GMG組中的表達比例最高，OMG組次之，健康對照組中最低；同時，Tfr /Tfh細(xì)胞比值在健康對照組中最高，其次是OMG患者，在GMG患者中表達最低。以上研究結(jié)果提示Tfr和Tfh細(xì)胞平衡表達對維持正常免疫功能和免疫耐受具有重要作用，其免疫失衡可能參與MG的發(fā)病。宋陽等[56]報道，與無MG的胸腺瘤組和健康對照組相比，MG合并胸腺瘤組胸腺組織中Tfh細(xì)胞比例及其CXCR 5、ICOS、PD-1和BCL-6的表達水平顯著增高。Zhang等[57]通過共聚焦顯微鏡觀察到，在MG患者的胸腺中，Tfh細(xì)胞和B細(xì)胞共同定位在異位GC內(nèi)，并且Tfh細(xì)胞的比例增高、B 細(xì)胞和自身抗體滴度增加；體外研究進一步顯示Tfh細(xì)胞通過效應(yīng)細(xì)胞因子IL-21誘導(dǎo)AChR-Ab的分泌。上述研究結(jié)果表明，胸腺內(nèi)Tfh細(xì)胞和B細(xì)胞的相互作用在胸腺異位GC的形成和AChR-Ab的產(chǎn)生中起關(guān)鍵作用，這種相互作用可能引發(fā)MG。Li等[58]發(fā)現(xiàn)在MuSK抗體陽性MG患者外周血中，Tfh細(xì)胞比例增高，Tfh/Tfr細(xì)胞比值增高，這些結(jié)果均提示Tfh細(xì)胞在MuSK抗體陽性MG患者中過度活化，有可能促進了MuSK抗體的分泌，引發(fā)了MG。以上這些證據(jù)都為調(diào)控Tfh細(xì)胞活化治療MG 提供了理論基礎(chǔ)，尚需要進一步研究Tfh細(xì)胞如何參與MG的免疫反應(yīng)。

4.2 動物實驗雖然Tfh細(xì)胞與各種自身免疫性疾病有關(guān)，并且上述臨床研究發(fā)現(xiàn)MG患者中Tfh細(xì)胞存在異常表達，但目前尚不清楚Tfh細(xì)胞是如何以及何時被誘導(dǎo)的，以及它們?nèi)绾瓮苿覯G的進展。因此許多學(xué)者相繼通過建立實驗性自身免疫性重癥肌無力(experimental autoimmune myasthenia gravis，EAMG)模型去探究Tfh細(xì)胞與MG發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。

Xin等[59]研究證實，EAMG小鼠的脾臟單核細(xì)胞中Tfh細(xì)胞及相關(guān)分子BCL-6、IL-21上調(diào)，并且Tfh細(xì)胞比例與血清AChR抗體滴度呈正相關(guān)。Gong等[60]和Huang等[61]的研究結(jié)果顯示，EAMG外周血中Tfr/Tfh細(xì)胞的比例失衡，Tfr細(xì)胞比例下降，而Tfh細(xì)胞比例上升；且藥物干預(yù)結(jié)果表明，通過增加Tfr細(xì)胞和減少Tfh細(xì)胞的數(shù)量或比例可以減輕EAMG大鼠疾病的嚴(yán)重程度。Cui等[62]研究報道，Tfh細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫反應(yīng)在EAMG發(fā)病中有增強作用。也有研究發(fā)現(xiàn)全反式維甲酸可通過平衡Tfr/Tfh的比例來改善EAMG小鼠的肌無力癥狀[63]。Yang等[64]報道，CXCR5陰性自然殺傷細(xì)胞通過抑制Tfh細(xì)胞改善EAMG。上述動物實驗結(jié)果提示，Tfh可能參與MG的發(fā)病，且其作用可能與Tfr和Tfh免疫失衡有關(guān)。

上述臨床研究和動物實驗均提示，MG發(fā)病中存在顯著的Tfh細(xì)胞活化?？赏ㄟ^藥物干預(yù)Tfh細(xì)胞活化，降低Tfh細(xì)胞比例，有助于維持Tfr /Tfh細(xì)胞免疫平衡，進而可影響Tfh細(xì)胞與B細(xì)胞在GC中的相互作用，導(dǎo)致MG相關(guān)自身抗體生成減少，從而減少了MG的發(fā)病。因此，以Tfr/Tfh細(xì)胞為靶點設(shè)計新型藥物可能有助于MG的治療。

綜上，Tfh細(xì)胞是CD4+T細(xì)胞的一個重要亞群，在MG發(fā)生發(fā)展中的作用引起了廣泛關(guān)注。Tfh細(xì)胞活化和功能的異質(zhì)性及其在不同抗體類型的MG中是否有不同的作用機制，尚需更加深入的研究證實。因此，深入闡述Tfh細(xì)胞表型、功能及相關(guān)免疫學(xué)因素與MG發(fā)生發(fā)展的內(nèi)在聯(lián)系，有助于進一步揭示疾病的發(fā)病機制，為其治療提供新的思路和方法。