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    乳酸菌及丙酸鈣對(duì)全株玉米和燕麥青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和霉菌毒素含量的影響

    2022-08-24 05:50:40田吉鵬劉蓓一顧洪如丁成龍程云輝玉柱
    草業(yè)學(xué)報(bào) 2022年8期
    關(guān)鍵詞:青貯飼料丙酸丁酸

    田吉鵬,劉蓓一,顧洪如,丁成龍*,程云輝,玉柱

    (1. 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所,江蘇 南京 210014;2. 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部種養(yǎng)結(jié)合重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210014;3. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,北京 100193)

    玉米(Zea mays)和燕麥(Avena sativa)均為一年生禾本科植物,產(chǎn)量和營養(yǎng)價(jià)值高,抗性強(qiáng),是我國反芻動(dòng)物主要的粗飼料來源[1]。在我國,全株玉米主要以制作全株玉米青貯飼料為主。而燕麥主要通過田間晾曬制作干草,但是在多雨季節(jié)仍可能會(huì)受到雨水影響而腐爛發(fā)霉,因此通過調(diào)制青貯亦是有效保存燕麥營養(yǎng)成分的重要技術(shù)。

    全株玉米具有豐富的可溶性碳水化合物和較低的緩沖能值,不需要添加劑也能發(fā)酵良好。但是有氧暴露后酵母菌和霉菌等快速繁殖容易造成有氧腐敗從而導(dǎo)致飼料安全問題如霉菌和霉菌毒素污染[2]。燕麥因含水量及緩沖能值較高而且可溶性碳水化合物含量較低等問題,單獨(dú)青貯成功率較低,為此需要添加添加劑及適當(dāng)?shù)奈瑁?]處理才能保證青貯成功。添加合適的添加劑能夠有效改善青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)、抑制有害微生物生長與增殖、保存營養(yǎng)物質(zhì)、降低青貯飼料中霉菌毒素含量。目前常用的添加劑主要有復(fù)合乳酸菌添加劑以及有機(jī)酸鹽等[4]。復(fù)合乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)添加劑能夠有效提高青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性[5]。丙酸鹽能夠提高青貯飼料的丙酸含量,抑制丁酸梭菌、霉菌和酵母菌等有害微生物生長,從而提高青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)和有氧穩(wěn)定性[6]。目前全株玉米青貯多集中于鐮刀彎地區(qū),而燕麥多在青海、西藏、內(nèi)蒙古、東北等地區(qū)[7]。相對(duì)而言我國長江淮河流域全株玉米和燕麥青貯對(duì)于抑制有氧腐敗問題和霉菌毒素污染的需求更為迫切,但相關(guān)乳酸菌和丙酸鈣的復(fù)合添加劑研發(fā)較少。目前本課題組自主研發(fā)的乳酸菌復(fù)合添加劑能夠有效提高稻秸(Oryza sativa)和大麥(Hordeum vulgare)等青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)[8-9],但是在燕麥和玉米青貯飼料中尚未驗(yàn)證過。鑒于全株玉米和燕麥在我國反芻動(dòng)物粗飼料的占比較大,因此有必要研究復(fù)合乳酸菌添加劑及丙酸鹽對(duì)本地全株玉米和燕麥青貯飼料的發(fā)酵效果。本研究通過乳酸菌制劑及丙酸鹽在全株玉米和燕麥青貯飼料中復(fù)合利用,分析添加劑對(duì)兩種青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)、微生物數(shù)量、營養(yǎng)品質(zhì)、有氧穩(wěn)定性和霉菌毒素含量的影響,探討適合本地全株玉米和燕麥青貯飼料的添加劑組合,為全株玉米燕麥青貯飼料加工和利用提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)依托。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    全株玉米來源于江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院六合實(shí)驗(yàn)基地,2019 年9 月蠟熟期收獲,留茬高度5 cm,收獲后立即粉碎成2~3 cm 的小段。燕麥來自鹽城大豐鼎旺飼料有限公司,2019 年6 月乳熟期收割后作為試驗(yàn)材料,留茬高度5 cm,收獲后粉碎成2~3 cm 小段然后置于陰涼處萎蔫4 h。復(fù)合乳酸菌由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧所自主研發(fā),主要包括植物乳桿菌、布氏乳桿菌和副干酪乳桿菌菌種(各菌添加比例為2∶1∶1),總體添加量為5×105CFU·g-1。采用試劑級(jí)丙酸鈣(calcium propionate,PACA,4075-81-4),購自上海源葉生物科技有限公司。

    1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    利用雙因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)開展試驗(yàn),全株玉米和燕麥原料分別用蒸餾水(CK 組),復(fù)合乳酸菌(LAB 組),丙酸鈣(PACA),復(fù)合乳酸菌及丙酸鈣(LAB+PACA 組)進(jìn)行處理,每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù)。其中乳酸菌添加量為5×105CFU·g-1鮮樣,丙酸鈣添加量為鮮樣的0.4%。

    將全株玉米用汽油粉碎機(jī)(CX20,日照洋工園林機(jī)械有限公司)均勻切割為2~3 cm 的小段并混合均勻,燕麥采用飼料公司的大型收割粉碎一體機(jī)(JAGUAR900,德國克拉斯農(nóng)機(jī)公司)直接進(jìn)行粉碎后取樣。將乳酸菌制劑加入6 mL 滅菌脫脂奶粉溶液中室溫活化2 h,加入適量水(60 mL)溶解均勻噴灑進(jìn)青貯料中。稱取12 g 丙酸鈣溶于60 mL 蒸餾水中。每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3.0 kg,分別均勻噴灑60 mL 的乳酸菌菌懸液或者丙酸鈣渾濁液,CK 組加入等量60 mL 蒸餾水,然后裝入大號(hào)青貯袋中抽真空密封。全部處理完成后放入儲(chǔ)藏室中遮光儲(chǔ)存120 d。開封后將3.0 kg 青貯料利用五分法取約500 g 用于發(fā)酵、微生物和營養(yǎng)品質(zhì)的測定,剩下2.5 kg 裝入5 L 塑料桶中用于有氧穩(wěn)定性的測定。

    1.3 測定指標(biāo)及方法

    1.3.1發(fā)酵品質(zhì)測定 開封后取混合均勻后的青貯料20 g,加入180 mL 水后放入4 ℃冰箱中浸提24 h,然后用4 層紗布和定性濾紙過濾,得到浸提液保存于-20 ℃冰箱中,用于后期pH 值、氨態(tài)氮和有機(jī)酸含量的測定。采用玻璃電極pH 計(jì)(FE20,瑞士梅特勒-托利多集團(tuán))測量pH 值。參考許慶方等[10]的方法采用高效液相色譜儀(1260,美國安捷倫科技有限公司)測定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸的含量。色譜條件如下:色譜柱:Shodex RSpak KC-811S-DVB gel C(8.0 mm×30 cm,日本島津公司),進(jìn)樣體積5 μL,流動(dòng)相為3 mmol·L-1HClO4,流速為1 mL·min-1,柱溫為60 ℃,檢測波長為210 nm,運(yùn)行時(shí)間20 min。采用苯酚-次氯酸鈉法測定氨態(tài)氮含量[11],最后計(jì)算氨態(tài)氮占總氮的比值。

    1.3.2微生物數(shù)量測定 另取混合均勻的20 g 新鮮樣品加入180 mL 滅菌生理鹽水,振蕩混勻30 min 后用于乳酸菌、酵母菌和霉菌的測定。提取液在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行梯度稀釋后用MRS 培養(yǎng)基(北京路橋)37 ℃恒溫培養(yǎng)48 h 后進(jìn)行乳酸菌的計(jì)數(shù),用孟加拉紅培養(yǎng)基28 ℃恒溫培養(yǎng)3~7 d 進(jìn)行霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)。

    1.3.3營養(yǎng)品質(zhì)測定 取300 g 樣品放在105 ℃烘箱中殺青15 min,然后65 ℃烘干約48 h 至恒重,稱重計(jì)算干物質(zhì)含量(dry matter,DM),烘干后樣品粉碎過1 mm 篩用于營養(yǎng)價(jià)值的檢測。采用凱氏定氮法檢測總氮(total nitrogen,TN)含量[12],以TN×6.25 進(jìn)行計(jì)算粗蛋白含量,采用范氏法[12-13]測定中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量(Ankom200i 纖維檢測儀,美國Ankom 科技有限公司),采用蒽酮比色法測定可溶性碳水化合物含量[14],采用高氯酸-蒽酮比色法測定淀粉含量[15]。

    1.3.4有氧穩(wěn)定性測定 取2.5 kg 青貯料松散放入5 L 青貯桶中,在青貯料中心部位安裝溫度記錄儀(MDL-1048A,中國上海天河自動(dòng)化儀表有限公司)溫度傳感探頭,然后用紗布覆蓋桶口后在室溫條件下進(jìn)行有氧穩(wěn)定性的測定。每小時(shí)記錄各個(gè)青貯桶中的溫度1 次,將每次青貯桶中溫度值與室溫值相減制作溫差Δt的動(dòng)態(tài)變化圖(圖1),以Δt超過2 ℃的時(shí)間記為該重復(fù)的有氧穩(wěn)定性時(shí)間(h)。

    圖1 玉米和燕麥青貯飼料有氧暴露期間溫度差Δt(樣品溫度-室溫)變化Fig. 1 Curve of Δt(temperature difference between sample temperature and room temperature)during aerobic exposure of corn and oat silages

    1.3.5霉菌毒素測定 青貯飼料開封后每個(gè)重復(fù)立即取兩份各50 g 鮮樣在-20 ℃條件下進(jìn)行單獨(dú)保存,并盡快用于霉菌毒素的檢測。采用ELISA 檢測試劑盒(北京中檢維康生物技術(shù)有限公司)檢測黃曲霉毒素B1 含量,采用ELISA 檢測試劑盒(北京華安麥科生物技術(shù)有限公司)檢測玉米赤霉烯酮含量,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包抗原,樣本中相應(yīng)毒素和此抗原競爭抗體,酶標(biāo)二抗催化TMB 底物顯色,樣本吸光值與其含有的相應(yīng)毒素呈負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較得出樣品中對(duì)應(yīng)霉菌毒素的含量,具體方法見試劑盒說明書。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    采用Excel 2016 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、初步分析和圖表制作,用SPSS 20.0 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析。利用一般線性模型對(duì)原料(material,M)、添加劑(additive,A)以及交互效應(yīng)(M×A)進(jìn)行方差分析。方差分析顯著(P<0.05)進(jìn)一步進(jìn)行多重比較,采用Tukey 法進(jìn)行多重比較。各處理以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響

    添加劑對(duì)兩種原料青貯后的飼料品質(zhì)所測定指標(biāo)均有顯著影響(表1),且不同原料、添加劑與青貯原料之間存在顯著的交互效應(yīng)(P<0.01)。就燕麥青貯結(jié)果而言,CK 組的pH 值達(dá)到4.73。LAB、PACA、LAB+PACA能夠顯著降低燕麥青貯飼料的pH 值(P<0.05)。而對(duì)于玉米青貯飼料來說,添加劑對(duì)pH 無顯著降低效果,且PACA 能夠顯著提高玉米青貯飼料的pH 值(P<0.05)。PACA 和LAB+PACA 處理組在玉米和燕麥青貯飼料中都能夠顯著提高青貯飼料的乳酸含量(P<0.05),而LAB 處理組僅在燕麥青貯飼料中具有顯著提高效果(P<0.05)。PACA 和LAB+PACA 顯著提高了燕麥青貯飼料的乙酸含量(P<0.05)。只有PACA 和LAB+PACA處理組能夠增加兩種青貯飼料的丙酸含量(P<0.05),LAB 處理組和CK 組差別不大且含量極少。檢出的丁酸主要存在于燕麥青貯飼料當(dāng)中,LAB 組能夠降低燕麥青貯飼料中的丁酸含量,PACA 和LAB+PACA 處理組丁酸的檢出量為0。玉米青貯飼料中未檢出丁酸含量,且氨態(tài)氮含量低于10%,LAB 和LAB+PACA 處理組僅從數(shù)值上相對(duì)于CK 組較小。燕麥青貯飼料中氨態(tài)氮含量較高,CK 組達(dá)到21.38%。添加劑的使用顯著降低了燕麥青貯飼料的氨態(tài)氮含量(P<0.05)。

    表1 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響Table 1 Effects of additives on fermentation quality of corn and oat silages

    2.2 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料微生物數(shù)量的影響

    添加劑和原料對(duì)2 種青貯飼料的微生物數(shù)量(表2)均具有顯著影響(P<0.01),且添加劑和原料在乳酸菌(P<0.01)、酵母菌(P<0.05)和霉菌(P<0.01)數(shù)量上均存在顯著的互作效應(yīng)。在玉米青貯飼料中LAB+PACA 處理組顯著降低了乳酸菌、酵母菌和霉菌的數(shù)量(P<0.05),PACA 處理組對(duì)于霉菌數(shù)量也有顯著的降低效果(P<0.05)。在燕麥青貯飼料中各處理組乳酸菌和霉菌數(shù)量相差不大。燕麥青貯飼料中霉菌數(shù)量極少,只有對(duì)照組有一個(gè)重復(fù)檢出少量霉菌。添加劑的使用能夠顯著降低燕麥青貯飼料中酵母菌的數(shù)量(P<0.05),其中LAB+PACA 處理組效果最好(P<0.05)。

    表2 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料微生物數(shù)量的影響Table 2 Effects of additives on microbial counts of corn and oat silages(lg CFU·g-1)

    2.3 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯化學(xué)成分的影響

    燕麥青貯飼料的干物質(zhì)、粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、可溶性碳水化合物和淀粉含量與全株玉米均有顯著差異(P<0.01),且從整體上看,添加劑的使用顯著影響了粗蛋白(P<0.01)、中性洗滌纖維(P<0.05)、可溶性碳水化合物和淀粉含量(P<0.01)。添加劑和原料在干物質(zhì)(P<0.01)、粗蛋白(P<0.05)和可溶性碳水化合物(P<0.01)含量中存在顯著的交互效應(yīng)。LAB+PACA 顯著降低了燕麥青貯飼料的干物質(zhì)含量(P<0.05)。PACA 和LAB+PACA 降低了玉米青貯飼料的粗蛋白含量并顯著提高了可溶性碳水化合物含量(P<0.05),而對(duì)燕麥青貯飼料則無顯著影響(表3)。

    表3 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料化學(xué)成分的影響Table 3 Effects of additives on chemical composition of corn and oat silages

    2.4 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯有氧穩(wěn)定性和霉菌毒素的影響

    玉米和燕麥青貯飼料在有氧穩(wěn)定性、黃曲霉毒素B1 和玉米赤霉烯酮含量之間存在顯著差異(P<0.01)。燕麥青貯飼料的有氧穩(wěn)定性均超過168 h,而玉米青貯飼料有氧穩(wěn)定性則均低于84 h。PACA 和LAB+PACA 顯著提高了玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性(P<0.05),其中PACA 的效果最好,而LAB 則沒有提高玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。添加劑的使用從總體上對(duì)霉菌毒素?zé)o顯著影響,LAB 和LAB+PACA 顯著降低了玉米青貯飼料的黃曲霉毒素B1 的含量(表4)。

    表4 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料有氧穩(wěn)定性和青貯開封時(shí)霉菌毒素含量的影響Table 4 Effects of additives on aerobic stability of corn and oat silages and mycotoxin contents after silo opening

    燕麥青貯飼料在168 h 的溫度監(jiān)控過程中始終沒有超過室溫1 ℃(圖1)。而在玉米青貯飼料中,經(jīng)過91 h 的有氧暴露,最終所有處理組Δt均高于2 ℃。其中CK、LAB 和LAB+PACA 組最高溫度超過室溫5 ℃。單從降低溫度差角度來看,在21 h 內(nèi)LAB、PACA 和LAB+PACA 效果接近,51 h 之內(nèi)PACA 和LAB+PACA 效果相近,超過51 h 后PACA 效果最好。

    3 討論

    3.1 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響

    青貯開封后所有玉米青貯飼料感官表現(xiàn)都很好,發(fā)酵品質(zhì)也都表現(xiàn)優(yōu)良,未檢出丁酸,這主要是由于收獲和青貯加工進(jìn)行了嚴(yán)格的控制。青貯玉米收獲期控制在蠟熟期乳線達(dá)到1/2 左右的時(shí)候,干物質(zhì)含量控制在32.21%~34.21%,正是全株玉米青貯發(fā)酵的最適條件[16]。本研究所用乳酸菌制劑為復(fù)合乳酸菌制劑,里面同時(shí)包含了同型發(fā)酵乳酸菌和異型發(fā)酵乳酸菌,能夠在降低青貯飼料pH 值的同時(shí)提高乙酸等有機(jī)酸含量并抑制霉菌等有害微生物[8]。但是異型發(fā)酵乳酸菌(布氏乳桿菌)在玉米青貯飼料中未能提高乙酸產(chǎn)量,這可能是由于青貯pH 值降得太低,嚴(yán)重抑制了布氏乳桿菌在發(fā)酵穩(wěn)定階段的活性,使得復(fù)合乳酸菌制劑主要發(fā)揮了植物乳桿菌的效果,對(duì)乙酸含量無影響,這與Miao 等[17]的研究結(jié)果一致。玉米青貯飼料中缺乏丁酸菌,丁酸含量極少,本研究中丙酸含量的增加靠的是丙酸鈣的添加,這與盧冬亞等[6]的研究結(jié)果一致。

    燕麥青貯飼料緩沖能值較高,需要大量的可溶性碳水化合物來快速降低pH 值,較慢的pH 值下降速度容易導(dǎo)致丁酸梭菌等有害微生物的繁殖,從而降低青貯飼料質(zhì)量,因此燕麥青貯飼料通常需要萎蔫來抑制有害微生物[18-19]。本試驗(yàn)中燕麥青貯飼料CK 組有難聞味道,雖然經(jīng)過萎蔫使得干物質(zhì)含量提高到38%左右,但是丁酸含量仍然嚴(yán)重超標(biāo)。這與葛劍等[20]的研究結(jié)果相反,可能與燕麥品種、所在區(qū)域等不同有關(guān)。李平等[3]研究認(rèn)為燕麥青貯飼料不宜長時(shí)間萎蔫。本研究中萎蔫后CK 組的丁酸含量仍然很高。但是通過乳酸菌的添加能夠有效抑制燕麥青貯飼料中的丁酸發(fā)酵,提高燕麥青貯飼料發(fā)酵質(zhì)量。相關(guān)研究表明,植物乳桿菌等同型發(fā)酵乳酸菌能夠有效提高燕麥青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)并且降低丁酸含量[21]。而布氏乳桿菌對(duì)于燕麥青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)和丁酸含量所起作用有限[22]。丙酸鈣以及丙酸鈣和乳酸菌的復(fù)合添加劑降低丁酸的效果更為明顯,主要是因?yàn)樘岣吡搜帑溓噘A飼料中的丙酸含量,而丙酸的提高能夠降低青貯飼料中的丁酸含量[23]。

    3.2 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料微生物數(shù)量的影響

    乳酸菌是可利用碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的一類革蘭氏陽性菌的總稱。在青貯飼料中的氧氣耗盡后,乳酸菌尤其是植物乳桿菌能夠產(chǎn)生乳酸快速降低青貯飼料的pH 值。當(dāng)pH 值小于4.2 時(shí)有害微生物受到抑制,但是乳酸菌本身也會(huì)受到抑制,乳酸菌的數(shù)量也會(huì)減少[24]。玉米和燕麥青貯飼料中的乳酸菌數(shù)量均處于發(fā)酵穩(wěn)定期。其中玉米青貯飼料的pH 普遍低于4.0,乳酸含量較多,使得玉米青貯飼料中乳酸菌受到抑制從而使得數(shù)量大大減少。而燕麥青貯飼料pH 普遍高于4.2,乳酸菌數(shù)量普遍較多。酵母菌和霉菌是導(dǎo)致玉米等青貯飼料有氧變質(zhì)的主要原因[25]。在不同原料當(dāng)中,酵母菌和霉菌的差異除了發(fā)酵品質(zhì)以外,主要還有淀粉等非纖維性碳水化合物的含量。燕麥的淀粉含量僅有玉米青貯的1/3,其酵母菌和霉菌數(shù)量普遍較少。研究表明,復(fù)合乳酸菌制劑能夠有效降低青貯飼料中的酵母菌和霉菌數(shù)量[26]。同樣地,丙酸鹽對(duì)于青貯飼料中的霉菌和酵母菌也具有抑制作用。本試驗(yàn)中,添加劑的使用或多或少都對(duì)酵母菌和霉菌數(shù)量有一定的抑制作用,其中效果最好的是乳酸菌與丙酸鈣的復(fù)合添加劑。

    3.3 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料化學(xué)成分的影響

    本試驗(yàn)中所用玉米青貯飼料營養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)良。添加劑尤其是丙酸鈣或丙酸鈣和乳酸菌復(fù)合添加劑的使用顯著提高了青貯飼料的淀粉和可溶性碳水化合物含量,相應(yīng)地降低了粗蛋白和纖維組分的含量。這進(jìn)一步說明丙酸鈣等添加劑抑制了酵母菌和霉菌等的繁殖和對(duì)于淀粉、可溶性碳水化合物等能量物質(zhì)的消耗,保留了更多的非纖維類營養(yǎng)物質(zhì)。這與宗成等[27]的研究結(jié)果相一致。燕麥的粗蛋白含量豐富,許多時(shí)候超過10%[28]。但本試驗(yàn)燕麥青貯過程中蛋白質(zhì)發(fā)生降解產(chǎn)生了大量的氨態(tài)氮,使得燕麥青貯飼料的粗蛋白保持在8%左右。添加劑的使用能夠有效降低燕麥青貯飼料的氨態(tài)氮含量、提高粗蛋白含量,與張晴晴等[29]的研究結(jié)果相一致。

    3.4 添加劑對(duì)玉米和燕麥青貯飼料有氧穩(wěn)定性和霉菌毒素的影響

    孫志強(qiáng)等[30]研究表明,添加植物乳桿菌和布氏乳桿菌的復(fù)合乳酸菌添加劑對(duì)全株玉米青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)無顯著影響,但是能夠有效提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性,且受青貯玉米品種的影響。本試驗(yàn)中復(fù)合乳酸菌的使用沒有增加乙酸的含量,并且有氧穩(wěn)定性相比于對(duì)照組僅增加了約6 h,且沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著關(guān)系。這可能是受乙酸含量不足的影響,也可能是受到品種和不同地區(qū)微生物菌群的影響。而乙酸、丙酸等有機(jī)酸對(duì)于玉米青貯飼料中的有害微生物具有顯著的抑制效果[31],有助于提高玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性[4]。同型發(fā)酵乳酸菌和異型發(fā)酵乳酸菌復(fù)合使用對(duì)于提高玉米青貯飼料的有氧穩(wěn)定性具有重要作用[32],但是在一些特定條件下乳酸菌尤其是異型發(fā)酵乳酸菌的效果不穩(wěn)定,添加適合的有機(jī)酸添加劑是十分必要的。而本試驗(yàn)當(dāng)中燕麥青貯飼料有氧穩(wěn)定性好,全部超過168 h,這與賈婷婷等[33]的結(jié)果(CK 組大于168 h)相似,但是顯著高于朱九剛等[34]的研究結(jié)果(CK 組35.1 h)。玉米與燕麥青貯飼料中的黃曲霉毒素B1 和玉米赤霉烯酮含量均低于飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的限量標(biāo)準(zhǔn)[35]。玉米青貯飼料中的黃曲霉毒素含量較多,這主要是因?yàn)辄S曲霉等產(chǎn)黃曲霉毒素的真菌更容易感染玉米[36]。乳酸菌添加劑的使用能夠有效降低玉米青貯飼料中的黃曲霉毒素B1 含量。這與付浩等[37]以及Guan 等[38]的研究結(jié)果相一致。

    4 結(jié)論

    玉米青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)優(yōu)良。添加劑的使用尤其是PACA 和LAB+PACA 的使用提高了玉米青貯飼料的丙酸含量,顯著提高了玉米青貯飼料中的淀粉和可溶性糖等非纖維碳水化合物的含量及有氧穩(wěn)定性,降低了霉菌和酵母菌等有害微生物數(shù)量。LAB 及LAB+PACA 有效降低了黃曲霉毒素B1 的含量。添加劑的使用顯著提高了燕麥青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì),降低了氨態(tài)氮和丁酸含量,提高了粗蛋白含量,其中PACA 和LAB+PACA 效果較好。因此,添加劑尤其是LAB+PACA 的復(fù)合添加對(duì)于提高玉米和燕麥青貯飼料的青貯品質(zhì)和安全性具有重要作用。

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