母源性博落回提取物對(duì)宮內(nèi)發(fā)育遲緩斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、血清抗氧化和免疫功能的影響

邱全優(yōu)，李元鳳，王亞超

（1.佛山市順德區(qū)正宇飼料有限公司，廣東 佛山 528000；2.西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，四川 綿陽 621000）

博落回（Macleaya cordata, MC）是一種中草藥植物，富含血根堿和白屈菜紅堿，具有增強(qiáng)動(dòng)物免疫力、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、預(yù)防畜禽疾病的作用[1]。宮內(nèi)發(fā)育遲緩（Intrauterine growth retardation, IUGR）通常被定義為由于宮內(nèi)充血和胎盤功能障礙導(dǎo)致胎兒或產(chǎn)后生長(zhǎng)發(fā)育受損的低初生體重哺乳動(dòng)物新生兒。研究發(fā)現(xiàn)，母親在分娩期間容易出現(xiàn)生理性氧化應(yīng)激，而新生動(dòng)物在出生時(shí)由于缺乏抗氧化系統(tǒng)而遭受嚴(yán)重的氧化應(yīng)激[2]，在母體分娩期間導(dǎo)致新生仔豬承受更嚴(yán)重的壓力[3]，而膳食營(yíng)養(yǎng)可以提高IUGR存活率和生長(zhǎng)性能[4-5]。如何通過母體營(yíng)養(yǎng)提高新生兒抗應(yīng)激能力是關(guān)鍵的研究方向。前人研究還發(fā)現(xiàn)，博落回提取物（MCE）可以調(diào)節(jié)豬的先天免疫系統(tǒng)和消化功能[6]，在母豬飼糧中納米硒和博落回提取物合用可以增強(qiáng)后代IUGR新生仔豬的抵抗力[7]。但母體MCE營(yíng)養(yǎng)對(duì)IUGR斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和免疫功能是否有促進(jìn)作用尚缺乏研究。因此，在本研究中，母豬飼糧添加兩種水平的MCE，并對(duì)IUGR斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能、抗氧化和免疫功能進(jìn)行研究，以確定母源性MCE飼糧是否可以提高后代IUGR斷奶仔豬的抗應(yīng)激能力，促進(jìn)生長(zhǎng)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)使用的博落回提取物（macleaya cordata extract, MCE）為市售，含0.375%活性成分和0.15%血根堿。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和試驗(yàn)飼糧

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇60頭初產(chǎn)母豬（長(zhǎng)白×約克），按照體重相近的原則隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理20個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭母豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg和1 000 mg/kg MCE。母豬試驗(yàn)期46 d（妊娠90 d至泌乳21 d斷奶）。從每個(gè)處理母豬所產(chǎn)IUGR斷奶仔豬中隨機(jī)選取16頭21日齡（4.1±0.09） kg的仔豬進(jìn)行飼養(yǎng)，分為4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4頭IUGR斷奶仔豬，試驗(yàn)期28 d（22—49日齡）。母豬飼糧參考Li等的配方飼糧[7]進(jìn)行設(shè)計(jì)，斷奶仔豬使用養(yǎng)殖場(chǎng)統(tǒng)一外購的保育前期飼料。母豬基礎(chǔ)飼糧組成[7]見表1。

表1 母豬基礎(chǔ)飼糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)于2022年4—5月在廣東省佛山市五嶺養(yǎng)殖場(chǎng)開展。斷奶仔豬飼養(yǎng)欄舍為半封閉、塑料漏縫地板式高床保育豬舍。飼養(yǎng)管理和免疫按照該養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)范操作，試驗(yàn)豬只自由采食，鴨舌式自動(dòng)飲水器飲水。每天密切觀察斷奶仔豬采食、糞便質(zhì)量，以及死淘等異常情況，并做好記錄。每天記錄圈舍的環(huán)境情況（溫度、濕度等）。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)稱取豬只體重，記錄試驗(yàn)期間飼料的總采食量、浪費(fèi)量以及剩余量，計(jì)算平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2 IUGR仔豬血清抗氧化和免疫指標(biāo) 試驗(yàn)第28天早上，空腹12 h，每個(gè)處理隨機(jī)選取5頭接近平均體重的IUGR仔豬，前腔靜脈采血5 mL，置于未加抗凝劑的EP管中，在4 ℃條件下12 000 r/min離心10 min，分離血清，-80 ℃凍存?zhèn)溆?。超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA），以及白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素10（IL-10）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）使用ELISA試劑盒（南京建成生物工程研究所），按照制造商說明進(jìn)行分析測(cè)定。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)先用Microsoft Office Excel 2013軟件預(yù)處理， SPSS 22.0軟件進(jìn)行方差分析（ANOVA），結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 母源性MCE對(duì)IUGR斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，1 000 mg/kg MCE組平均日增重和平均日采食量分別顯著增加15.00%（P＜0.05）和15.15%（P＜0.05）。

表2 母源性MCE對(duì)IUGR斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 母源性MCE對(duì)IUGR斷奶仔豬抗氧化能力的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，1 000 mg/kg MCE組血清SOD顯著增加14.62%（P＜0.05）。500 mg/kg MCE組和1 000 mg/kg MCE組GSH-Px水平均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），MDA含量均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

表3 母源性MCE對(duì)IUGR斷奶仔豬抗氧化能力的影響

2.3 母源性MCE對(duì)IUGR斷奶仔豬免疫功能的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，500 mg/kg MCE組和1 000 mg/kg MCE組血清IL-10水平顯著增加（P＜0.05），IL-6、IL-1β和TNF-α水平均顯著降低（P＜0.05）。

表4 母源性MCE對(duì)IUGR斷奶仔豬免疫功能的影響

3 討論

3.1 IUGR斷奶仔豬生長(zhǎng)性能

本研究結(jié)果表明，母豬飼糧添加1 000 mg/kg MCE，可以顯著提高后代IUGR斷奶仔豬的日增重和日采食量，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)，但對(duì)飼料效率無改善作用。秦克蕊[8]在妊娠后期和哺乳母豬飼糧中添加500 mg/kg MCE研究發(fā)現(xiàn)，母源性MCE也可以一定程度增加哺乳期仔豬增重，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與夏超篤等[9]在斷奶仔豬飼糧中添加1 000 mg/kg MCE的結(jié)果一致。本試驗(yàn)中1 000 mg/kg MCE組能顯著提高IUGR斷奶仔豬的增重，其原因可能是MCE對(duì)IUGR仔豬的改善效果要優(yōu)于正常仔豬。MCE可能通過增強(qiáng)母豬的免疫功能，改善了后代弱仔豬的抵抗力，提高了IUGR仔豬的長(zhǎng)勢(shì)。

3.2 IUGR斷奶仔豬抗氧化和免疫功能

機(jī)體抗氧化系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，其抗氧化能力可以通過血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量來反映[10]。SOD和GSH-Px的水平反映了動(dòng)物機(jī)體清除自由基的能力[11]。MDA是自由基在動(dòng)物體內(nèi)引起脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物，其水平反映了自由基對(duì)動(dòng)物的損傷程度[12]。如果體內(nèi)自由基過多，可能會(huì)破壞抗氧化系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)平衡，影響機(jī)體健康。TNF-α是機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)中最主要的炎癥細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)其它炎癥介質(zhì)，在體內(nèi)產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，加重組織損傷[13]。IL-1β作為促炎介質(zhì)，可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)[14]。IL-6可在體內(nèi)誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥[15]。IL-10是一種多效性抗炎細(xì)胞因子，可以抗炎和調(diào)節(jié)免疫[15]。

研究發(fā)現(xiàn)，MCE具有較強(qiáng)的抗炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等生物活性，其可以通過母體的傳遞作用提高后代仔豬抗應(yīng)激能力，減少氧化損傷和炎性反應(yīng)。本研究結(jié)果表明，妊娠后期和哺乳期母豬飼糧中添加500或1 000 mg/kg MCE，均可顯著提高后代IUGR斷奶仔豬血清GSH-Px活性，顯著降低MDA含量，與夏超篤等[9]在斷奶仔豬飼糧中添加1 000 mg/kg MCE的研究結(jié)果相似。母源性MCE還能顯著提高IUGR斷奶仔豬血清IL-10水平，顯著降低IUGR斷奶仔豬血清 IL-6、IL-1β和TNF-α水平，增強(qiáng)IUGR斷奶仔豬的免疫功能。說明母體添加MCE可以顯著增強(qiáng)后代弱仔豬抗氧化和免疫功能，促進(jìn)生長(zhǎng)。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，妊娠后期和哺乳期母豬飼糧中添加MCE能提高后代IUGR斷奶仔豬日增重，提高抗氧化和免疫功能，MCE 1 000 mg/kg添加劑量要優(yōu)于500 mg/kg。