民族藥小花清風藤化學成分及藥理活性研究進展

楊 柳 楊 艷 周 浪 李齊激 楊小生 楊 娟*

1.貴州中醫(yī)藥大學，貴州 貴陽 550312；2.貴州省中國科學院天然產(chǎn)物化學重點實驗室，貴州 貴陽 550014

小花清風藤為清風藤科清風藤屬植物小花清風藤SabiaparvifloraWall. ex Roxb.的莖和葉，主要分布于廣西、貴州、云南等地。小花清風藤民間俗稱“小黃藥、黃腫藥、黃眼藥”，布依族、苗族最常用其莖、葉、根治療肝炎、黃疸、風濕病和跌打腫痛等?！吨腥A本草》載其“清熱利濕；止血。主治濕熱黃疸；外傷出血。”[1]《中國民族藥志要》記載：“治療和預防黃疸型傳染性肝炎。止刀傷出血，并能消炎?！盵2]小花清風藤具有清熱利濕、止血之功效，治療濕熱黃疸、外傷出血。其根具有祛風除濕、解毒散瘀的功效，主治風濕痹痛、跌打損傷、肝炎等[3]。近年來，對其化學成分和藥理作用方面的研究報道逐漸增多，但還未系統(tǒng)的綜述。文章旨在對小花清風藤化學成分和藥理作用方面的研究報道進行綜述和展望，以期為地區(qū)特色植物資源的深入研究和開發(fā)利用提供參考。

1 化學成分

小花清風藤的化學成分比較復雜，包括五環(huán)三萜類、生物堿類、黃酮類、苯丙素類、酰胺類、揮發(fā)油類等，還有少量二萜類、甾醇類及其他化合物[4-19]。

1.1 五環(huán)三萜類 五環(huán)三萜(Pentacyclic triterpenoid)類化合物由6個異戊二烯結(jié)構(gòu)單元聯(lián)結(jié)而成，是從小花清風藤中分離得到最多的一類成分。目前從中分離得到的五環(huán)三萜類主要有3種結(jié)構(gòu)類型，分別為齊墩果烷型、烏蘇烷型、羽扇豆烷型。其分子結(jié)構(gòu)齊墩果烷型與烏蘇烷型不同之處是E環(huán)上兩個甲基位置的不同，主要在C-19位和C-20位的區(qū)別。羽扇豆烷型與兩者的不同點是E環(huán)是由C-19和C-21連成的五元環(huán)，且在C-19位有α構(gòu)型的異丙基或異丙烯取代。從小花清風藤中分離得到的五環(huán)三萜類化合物的結(jié)構(gòu)修飾主要在A環(huán)， C-28位多被氧化為羧基、羥甲基或酯基，母核上取代基主要有羥基、羧基、羥甲基、羰基、甲氧基、酯基等。五環(huán)三萜皂苷中與苷元連接糖為2，6-二去氧糖，糖與苷元一般連接在苷元的3位羥基上?；衔锩Q及結(jié)構(gòu)見表1和圖2。結(jié)構(gòu)母核如圖1所示。

齊墩果烷型 烏蘇烷型 羽扇豆烷型

圖2 小花清風藤中五環(huán)三萜類化學結(jié)構(gòu)圖

表1 小花清風藤中五環(huán)三萜類化合物

1.2 生物堿類化合物 據(jù)文獻[11]報道，清風藤屬植物的主要活性成分為生物堿類化合物。從小花清風藤中分離得到12個生物堿，主要包括異喹啉類生物堿和吡咯類生物堿。異喹啉類生物堿是小花清風藤中發(fā)現(xiàn)最多的一類生物堿，結(jié)構(gòu)類型主要是阿樸啡類、芐基異喹啉類、苯酞異喹啉類和普托品類等，且多為叔胺堿。其母核上取代基通常在A環(huán)和D環(huán)，主要有羥基、甲氧基、亞甲二氧基等，N上取代基主要有甲基、醛基等。生物堿類成分見表2，結(jié)構(gòu)如圖3所示。

表2 小花清風藤中生物堿類化合物

圖3 小花清風藤中生物堿類化學結(jié)構(gòu)圖

1.3 黃酮類化合物 從小花清風藤中分離得到10個黃酮類化合物，以2-苯基色原酮為基本母核，主要類型為黃酮類和黃酮醇類。母核上的取代基主要有羥基、甲氧基、糖苷鍵等。黃酮類成分見表3，結(jié)構(gòu)如圖4所示。

表3 小花清風藤中黃酮類化合物

圖4 小花清風藤中黃酮類化學結(jié)構(gòu)圖

1.4 苯丙素類 從小花清風藤中分離得到15個苯丙素類成分，主要結(jié)構(gòu)類型有苯丙醇類、苯丙酸類、香豆素類及木脂素類。香豆素類成分是中藥中一個重要的類群，目前已從小花清風藤中發(fā)現(xiàn)香豆素類型包括呋喃香豆素類和吡喃香豆素類。木脂素是一類由苯丙素氧化聚合而成的天然產(chǎn)物，多以二聚體的形式存在，少數(shù)為三聚體和四聚體，多數(shù)呈游離狀態(tài)，少數(shù)與糖結(jié)合成苷。小花清風藤中木脂素類化合物包括環(huán)木脂素類、雙環(huán)氧木脂素類、苯駢呋喃類等。苯丙素類成分見表4，結(jié)構(gòu)如圖5所示。

圖5 小花清風藤中苯丙素類化學結(jié)構(gòu)圖

表4 小花清風藤中苯丙素類化合物

1.5 酰胺類化合物 酰胺類化合物是指氨或胺的氮原子上的氫被?；〈笊傻幕衔?。酰胺也可以看作羧酸分子中的羥基被氨基或胺苯基取代后生成的化合物。從小花清風藤中分離得到13個酰胺類成分，主要結(jié)構(gòu)類型有木脂酰胺、酚酰胺及阿魏酰胺，酰胺類成分見表5，結(jié)構(gòu)如圖6所示。

表5 小花清風藤中酰胺類化合物

表5(續(xù))

圖6 小花清風藤中酰胺類化學結(jié)構(gòu)圖

1.6 揮發(fā)油類化合物 小花清風藤中揮發(fā)油組成較為復雜，目前，已從小花清風藤中發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油類成分共27個，主要有烷烴類化合物、醚類化合物、雜環(huán)類化合物等成分，以烷烴類化合物為主，但相關研究較少，是否為小花清風藤的主要活性成分仍需進一步闡明。揮發(fā)油類成分見表6。

表6 小花清風藤中揮發(fā)油類化合物

表6(續(xù))

圖7 小花清風藤中其他類化學結(jié)構(gòu)圖

1.7 其他類化合物 其他類化合物包括9-芴酮(105)[4]，二萜類化合物豨薟精醇(darutigenol,106)，蔗糖(sucrose,107)[18]，1,3,5-trimethoxy benzene(108)、syringic acid-4-O-β-D-glucopyranoside (109)、(-)-(7α,8S)-erythro-1-C-syringylglycerol-4-O-β-D-glucopyranoside(110)，倍半萜內(nèi)酯 rel-5-(3S,8S-dihydroxy-1R,5S-dimethy-7-oxa-6-oxobicyclo[3,2,1]-oct-8-yl)-3-methy1-2Z,4E-penta-dienoic acid，(111)[15]，二十九烷醇(nonacosanol, 112)[12]，甾醇類化合物β-谷甾醇(113)[10]和谷甾醇(114)[8]，Zhang等[20]研究小花清風藤莖葉中含有金屬元素，包括鐵、銅、鋅、錳、鋅、鎘、鈷、鉛等元素，其中鐵、銅、鋅、錳、鋅等元素含量較高。

2 藥理活性

現(xiàn)代研究表明，從小花清風藤中分離得到的化合物具有多種生物活性，包括抗氧化、保肝作用、抗流感病毒、治療類風濕性關節(jié)炎等活性。

2.1 抗氧化 酚羥基具有易氧化的特性，可以結(jié)合過氧化物，從而起到抗氧化作用。而小花清風藤中的黃酮類和五環(huán)三萜類成分多具有酚羥基，故小花清風藤有很好的抗氧化活性。Sun等[16]采用ABTS和DPPH自由基清除法測定小花清風藤甲醇提取物中分離得到5種黃酮類化合物的抗氧化能力，結(jié)果顯示這些黃酮苷(Sabiapside A、quercetin-3-O-gentiobioside、camellianoside 、 isobariclisin-3-O-rutinoside、 tsubakioside A)對ABTS和DPPH自由基有較高的抗氧化活性，IC50值分別為2.88 ～ 5.78 μg/mL和2.41 ～ 7.95 μg/mL，且其抗氧化活性優(yōu)于維生素C。Chen等[21]采用DPPH、FRAP和ABTS抗氧化法對小花清風藤乙醇提取物的石油醚層、乙酸乙酯層和水層進行抗氧化評價，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯層和水層具有較強的抗氧化活性。

2.2 保肝作用 當肝細胞膜受到損害時，細胞內(nèi)ALT 、AST釋放入血，血清中ALT和AST的水平增高，其是評價肝臟損傷程度的常用指標[22]。有臨床研究[23]表明，小花清風藤鮮葉煎服，治療或改善病毒性甲型和乙型肝炎的有效率達到90%以上。Li等[24]發(fā)現(xiàn)小花清風藤水提取物可顯著降低過氧化損傷小鼠血清中ALT、AST活性和肝組織中MDA含量，同時升高肝組織中SOD、CSH水平，改善了肝臟的組織病理學形態(tài)，保護肝細胞并恢復肝功能。Li等[25]發(fā)現(xiàn)小花清風藤莖葉自然混合不同溶劑提取物能降低急性酒精性肝損傷小鼠血液中TC、TG含量和肝組織中ALT、AST活性及MDA含量，同時升高肝組織中SOD和GSH-Px活性，改善肝臟的組織病理學形態(tài)。Zhang等[26]通過對小花清風藤中均質(zhì)多糖(SPS60)的研究，發(fā)現(xiàn)SPS60純化后顯示出良好的肝保護活性。Yang等[27]發(fā)現(xiàn)小花清風藤膠囊各個劑量組均能降低急性肝損傷小鼠血清中ALT、AST、MDA水平和肝臟指數(shù)，升高血清中SOD含量，肝臟病理切片顯示小花清風藤膠囊各組對肝損傷均有明顯的改善作用，且以最大劑量給藥未見急性毒性反應。

2.3 抗流感病毒 Qu等[28]研究發(fā)現(xiàn)小花清風藤水提物6.5 g/kg能有效抑制甲型流感小鼠肺部病變，給藥后小鼠肺指數(shù)降低、肺組織中病毒滴度降低、存活時間延長、明顯改善感染小鼠肺組織炎癥病變，且抗流感病毒效果優(yōu)于磷酸奧司他韋。

2.4 治療類風濕性關節(jié)炎 炎性細胞因子TNF-α和 MMP-9與類風濕性關節(jié)炎(RA)密切相關，炎癥可以誘導血管的生成，而新生血管促進了血管翳的形成[29]。Xu等[30]發(fā)現(xiàn)小花清風藤醇提液對RA具有治療作用，能明顯抑制RA大鼠MMP-9、HIF-a、MMP3及 TNF-a等炎癥因子的表達，減緩炎癥發(fā)展，減輕骨與軟骨損傷，減少血管翳增生。Wang等[31]發(fā)現(xiàn)小花清風藤煎液對RA大鼠血清中炎性細胞因子MMP-9和 TNF-α具有明顯調(diào)節(jié)作用，通過HE染色結(jié)果證明了小花清風藤煎液可以減輕RA中關節(jié)滑膜炎和血管翳，同時影響類風濕關節(jié)炎大鼠血清及滑膜組織中TNF-α和MMP-9的表達，從而干預大鼠類風濕關節(jié)炎。

2.5 其他作用 小花清風藤中含有大量生物堿，Chen等[9]發(fā)現(xiàn)小花清風藤中生物堿類成分，dehydroformouregine、N-formyldehydroanonain、N-formyl-O-methylisopiline對HepG2細胞有一定抑制作用，dehydroformouregine、N-formyl-annonain (Z)、N-formyl-O-methylisopiline對MG-63細胞有一定的抑制作用。Fan等[14]采用游離脂肪酸(FFA)誘導的脂肪變性細胞模型，檢測小花清風藤莖中分離得到的11種化合物的降脂作用，結(jié)果顯示用不同濃度的化合物sabianin C、cannabisin E、N-trans-feruloyl-octopamine作用于脂肪變性的細胞模型時，隨著化合物濃度的增加，細胞內(nèi)脂質(zhì)的積累減少，具有明顯的降脂作用。

3 小結(jié)與展望

近年來，關于小花清風藤的研究報道越來越多，國內(nèi)外學者已從小花清風藤中發(fā)現(xiàn)114種化學成分，其藥效物質(zhì)基礎主要集中在五環(huán)三萜和黃酮兩大類物質(zhì)上，然而，對該植物藥的藥理活性成分及作用機制等并未有系統(tǒng)研究和探討，對其臨床療效及基礎研究比較欠缺。目前，以小花清風藤保肝作用上市的民族藥品種有“龍華清肝沖劑”“花梔清肝顆粒”，但對于保肝活性成分及其機制研究較少，具有廣闊的應用價值和開發(fā)前景。因此，本綜述綜合分析篩選小花清風藤相關藥用活性成分，系統(tǒng)報道其藥效藥理機制和構(gòu)效關系，為后期小花清風藤的全方位開發(fā)利用奠定基礎，并加快具有相關療效的新藥研發(fā)。