桑菊感冒合劑提取工藝的研究

姚 靜張 超

（1 河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,河南 鄭州 450003；2 河南中醫(yī)學(xué)院,河南 鄭州 450008）

桑菊感冒合劑提取工藝的研究

姚 靜1張 超2

（1 河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,河南 鄭州 450003；2 河南中醫(yī)學(xué)院,河南 鄭州 450008）

目的優(yōu)選桑菊感冒合劑提取工藝條件。方法以揮發(fā)油量的多少為指標(biāo)考察揮發(fā)油最佳提取時(shí)間；采用正交設(shè)計(jì)法安排試驗(yàn)，以浸膏得率和連翹的有效成分連翹苷的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行考察影響水煮的加水量、煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù)3因素。結(jié)果最佳揮發(fā)油提取條件為：蒸餾提取揮發(fā)油，且蒸餾時(shí)間確定為3 h。最佳水煮提取工藝條件為：加水煎煮3次，第1次加水10倍量，煎煮1.5 h，第2、3次分別加水8倍量，煎煮1 h。

桑菊感冒合劑；正交試驗(yàn)；工藝條件

桑菊感冒合劑為《中國(guó)藥典》[1]2010年版一部收載的品種。由桑葉、菊花、苦杏仁、連翹、薄荷、桔梗、蘆根、甘草等8味中藥組成。功能主治為疏風(fēng)清熱,宣肺止咳。用于風(fēng)熱感冒初起,頭痛,咳嗽,口干,咽痛；為風(fēng)熱感冒的良藥。本品原標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了桑葉等藥加水煎煮次數(shù)以及苦杏仁制取苦杏仁水的量,但沒(méi)有明確規(guī)定薄荷提取揮發(fā)油的時(shí)間和桑葉等每次煎煮時(shí)的加水量。本文采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選影響煎煮的主要工藝參數(shù),考察水提部分的最佳工藝條件,并考察揮發(fā)油最佳提取時(shí)間。

1 儀器與試藥

對(duì)照品:連翹苷,批號(hào)為110821-201006 （中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。所用試劑均為分析純、色譜純；水為注射用水；揮發(fā)油測(cè)定器；高效液相色譜儀（日本島津CLASS-VP 10AP）；Kromasil（250 mm×4.6 mm,5 μm）C18色譜柱。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄荷揮發(fā)油提取條件細(xì)化[2]

薄荷中所含揮發(fā)油為輕油,加水量對(duì)提油率影響不明顯,故不再做此項(xiàng)考查,僅對(duì)揮發(fā)油提取時(shí)間進(jìn)行考查。但因薄荷屬草質(zhì)類(lèi)藥材,吸水量相對(duì)較大,故在蒸餾提取揮發(fā)油之前先加適量水進(jìn)行浸泡。①試驗(yàn)方法及數(shù)據(jù):稱(chēng)取一個(gè)處方量的薄荷64 g,共三份,分別加適量水浸泡2～3 h,使其充分浸透后開(kāi)始蒸餾,用揮發(fā)油測(cè)定器（輕油）收油,并在規(guī)定時(shí)間量取,取收油量的平均值,結(jié)果見(jiàn)表1。②結(jié)論:從表1中可見(jiàn),加熱蒸餾1 h內(nèi)出油最快,已達(dá)總量的50.9%, 2 h達(dá)總量的81.1%,3 h已基本提盡。因薄荷為草質(zhì)類(lèi)藥材,不耐蒸煮,且藥渣又與煎煮藥一起煎煮,故薄荷蒸餾提取揮發(fā)油,蒸餾時(shí)間確定為3 h。

表1 薄荷中揮發(fā)油提取時(shí)間與收油率關(guān)系

2.2 水煎煮提取工藝的試驗(yàn)設(shè)計(jì)[3]

一般情況下,影響煎煮的主要因素有加水量、煎煮時(shí)間以及煎煮次數(shù)。現(xiàn)以水提液中浸膏得率和連翹的有效成分連翹苷的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),用L9（34）正交試驗(yàn)表進(jìn)行正交試驗(yàn)。

2.2.1 因素水平表:結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 煎煮因素水平表

表3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果

2.2.2 方差分析:結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 方差分析表

2.2.3 試驗(yàn)方法及數(shù)據(jù)

用L9（34）正交表安排試驗(yàn)[4],稱(chēng)取一定量的藥材,按設(shè)定方案進(jìn)行水煎煮,煎液濾過(guò)并適當(dāng)濃縮,定容至一定體積。分別對(duì)煎液中浸膏得率和連翹苷含量的進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表3。①浸膏得率的測(cè)定:精密量取各試驗(yàn)項(xiàng)下煎液20 mL,置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,在水浴上蒸干后,于105 ℃干燥3 h,移置干燥器中,冷卻30 min,迅速精密稱(chēng)定重量,計(jì)算即得。②連翹苷含量的測(cè)定:照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VID）測(cè)定。③色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（24∶76）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm。理論板數(shù)按連翹苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。④對(duì)照品溶液的制備:取連翹苷對(duì)照品適量,精密稱(chēng)定,加50%甲醇制成每1 mL含60 μg的溶液,即得。⑤供試品溶液的制備:精密量取本品2 mL,蒸至約1 mL,加入中性氧化鋁1.5 g,拌勻,置中性氧化鋁柱（100～120目,3 g,內(nèi)徑1～1.5 cm）上,用70%乙醇50 mL洗脫,收集洗脫液,濃縮至干,殘?jiān)?0%甲醇適量,溫?zé)崾谷芙?轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻,即得。⑥測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得。

2.2.4 試驗(yàn)結(jié)果:結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.5 結(jié)論:由直觀(guān)分析可見(jiàn),影響水提取效果的順序?yàn)?煎煮次數(shù)＞煎煮時(shí)間＞加水量,且煎煮次數(shù)影響最大。經(jīng)方差分析,加水量、煎煮時(shí)間對(duì)提取效果無(wú)顯著性影響（P＞0.05）,煎煮次數(shù)則有顯著性影響（P＜0.05）。可見(jiàn)提取最佳工藝為A1B2C1；鑒于加水量、煎煮時(shí)間對(duì)提取效果無(wú)顯著性影響,因此為降低生產(chǎn)成本,結(jié)合實(shí)際,將A1調(diào)整為第1次加10倍量水,第2、3次分別加8倍量水；B2即煎煮時(shí)間調(diào)整為第1次1.5 h,第2、3次各1 h。因此得煎煮工藝為:加水煎煮3次,第1次加10倍量,煎煮1.5 h,第2、3次各加8倍量水,煎煮1 h。

3 討 論

3.1 本方主要功能為疏風(fēng)清熱,處方中連翹具有清熱解毒的功效,且用量較大,因此,在提取工藝中以浸膏得率和連翹的有效成分連翹苷的含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo),進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。由于浸膏得率與療效強(qiáng)度不成量效關(guān)系,故綜合評(píng)價(jià)時(shí)權(quán)重系數(shù)應(yīng)較小,以0.3較為適宜；連翹苷含量權(quán)重系數(shù)為0.7。

3.2 考慮到實(shí)際生產(chǎn)的可操作性,結(jié)合現(xiàn)代化的生產(chǎn)設(shè)備,以保證實(shí)際生產(chǎn)的可行性。

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(2010版)(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:1061-1062.

[2] 湯科,張伏軍,尹小玲,等.高效液相色譜法測(cè)定桑菊感冒合劑中連翹苷含量[J].中國(guó)藥業(yè),2010,19(11):45.

[3] 郭若燕,李國(guó)慶.正交試驗(yàn)法優(yōu)選香菊感冒顆粒劑提取工藝[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2008,27(2):32.

[4] 柳俊,張建軍,施之琪.正交試驗(yàn)優(yōu)選桑菊合劑的提取工藝[J].海峽藥學(xué),2010,22(8):12.

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1671-8194（2014）25-0096-02