玉米酒糟作氮源工廠化栽培白色真姬菇的出菇試驗

劉巧榮 馮 占 鄭列宜 熊 艷 陳利娟

玉米酒糟作氮源工廠化栽培白色真姬菇的出菇試驗

劉巧榮 馮 占*鄭列宜 熊 艷 陳利娟

（江蘇華綠生物科技股份有限公司，江蘇 泗陽 223700）

玉米酒糟是制酒工業(yè)的廢棄物，富含氮、磷、B族維生素和生長素，是食用菌栽培中一種潛在的低成本原料。以添加玉米酒糟代替部分米糠的新配方與常規(guī)配方進行真姬菇工廠化栽培試驗，對兩個配方栽培的菌絲生長情況，以及子實體產(chǎn)量、外觀品質和生物轉化率等出菇性狀進行比較。結果，玉米酒糟的添加不僅不影響真姬菇菌絲生長及子實體的朵形、色澤、出菇均勻性和菌柄長度，而且能夠促進菌蓋直徑和菌柄直徑的增大，顯著提高產(chǎn)量和生物轉化率。

玉米酒糟；真姬菇；氮源；產(chǎn)量；品質

真姬菇（）又名玉蕈、斑玉蕈等，隸屬擔子菌亞門、層菌綱、傘菌目、白蘑科、玉蕈屬[1]。真姬菇市場化分類為純白色和淺灰色兩個品系，其中純白色品系又稱白色真姬菇、白色蟹味菇、白玉蕈、白玉菇、玉龍菇等[2,3]，淺灰色品系稱為蟹味菇、灰蟹菇、斑玉蕈、荷葉離褶傘等。真姬菇自然分布于歐洲、北美、西伯利亞和日本，我國吉林、云南等省也有野生種分布[1]?，F(xiàn)國內(nèi)主要產(chǎn)地為上海、福建、山西、山東、河南、河北等地[4,5]。真姬菇富含蛋白質、氨基酸和維生素，是一種高蛋白、低脂肪、低熱量的保健食品。真姬菇提取物具有清除人體內(nèi)自由基的作用，經(jīng)常食用可以提高人體免疫力、預防衰老、延長壽命，深受消費者青睞[6]。日本寶酒造株式會社于1972年首先獲得真姬菇人工栽培成功[7]。在我國，真姬菇是繼金針菇、杏鮑菇后，工廠化生產(chǎn)規(guī)模較大的食用菌種類[8]，其生產(chǎn)環(huán)節(jié)包括原料采購、配料攪拌、裝瓶滅菌、接種、發(fā)菌培養(yǎng)、出菇管理、采收包裝等。

酒糟是釀酒工業(yè)的副產(chǎn)物，是酒醅發(fā)酵完畢后再經(jīng)蒸餾出酒，最后殘留的混合固形物，其中含有大量的蛋白質、淀粉和脂肪。我國酒糟產(chǎn)量巨大、營養(yǎng)豐富、價格低廉，可利用酒糟生產(chǎn)高附加值的生化產(chǎn)品，如生產(chǎn)飼料、釀醋、沼氣發(fā)酵、白酒工業(yè)再利用、制糖、生產(chǎn)肥料和活性炭等[9]。生產(chǎn)中常見的酒糟主要有白酒糟和啤酒糟，而白酒糟又可按照生產(chǎn)原料分類，如高粱酒糟、玉米酒糟、青稞酒糟、薯類酒糟等。玉米酒糟多為純原糧酒糟，富含維生素、礦物質、粗蛋白、粗纖維等營養(yǎng)成分，將其作為益生菌和酵母所需的營養(yǎng)素，經(jīng)過生物轉換，可產(chǎn)出核糖核酸、勝肽及其他次級代謝物[10]。對酒糟在食用菌栽培領域的轉化應用進行研究，不僅可以節(jié)省食用菌生產(chǎn)的原料成本，提高經(jīng)濟效益，而且能夠促進酒糟附加值的提升。

本試驗采用玉米酒糟代替真姬菇工廠化栽培常規(guī)培養(yǎng)料配方中的部分米糠，通過對比試驗配方與常規(guī)配方（對照）栽培的菌絲生長情況、子實體產(chǎn)量和外觀品質等10個參數(shù)，探索玉米酒糟作為新型氮源用于真姬菇栽培中的可行性。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

玉米酒糟由泗陽酒廠提供，真姬菇菌種由江蘇華綠生物科技股份有限公司提供。

1.2 培養(yǎng)料配方

常規(guī)配方（對照）為：木屑37.04%，玉米粉3.13%，玉米芯20.07%，棉籽殼11.48%，麩皮10.72%，米糠10.53%，大豆皮3.1%，甜菜渣1.24%，營養(yǎng)土2.02%，輕質碳酸鈣0.67%。試驗配方以玉米酒糟代替常規(guī)配方中11.87%的米糠，即：木屑37.04%，玉米粉3.13%，玉米芯20.07%，棉籽殼11.48%，麩皮10.72%，米糠9.28%，玉米酒糟1.25%，大豆皮3.1%，甜菜渣1.24%，營養(yǎng)土2.02%，輕質碳酸鈣0.67%。2個配方的含水量均為58%，pH為6.5～7.5。所有原料均新鮮、潔凈、干燥、無霉爛、無蟲蛀。生產(chǎn)用水符合生活飲用水標準。

1.3 栽培試驗方法

（1）培養(yǎng)料配制及滅菌、接種。根據(jù)上述培養(yǎng)料配方、含水量、各原料容重等參數(shù)，計算出適當?shù)耐读狭亢图铀亢?，進行準確稱重。將培養(yǎng)料攪拌均勻后裝入1 400 mL栽培瓶中，每瓶裝干料量為487.1 g。裝瓶后的培養(yǎng)基放入滅菌鍋，123 ℃、1.5 kg/cm2高壓蒸汽滅菌5 h，出爐后冷卻至18～22 ℃（期間注意防止倒吸造成污染），嚴格進行無菌接種。接種時要求動作快速、敏捷，盡量縮短菌種在空間的暴露時間。每批菌種接種結束進行一次打掃，清除殘留物，保持場地潔凈[11]。保證接種量均勻一致，不少接、漏接，料面覆蓋完全。

試驗共設置3個區(qū)組，每區(qū)組每個處理3 824瓶，每處理抽取32個栽培瓶，對照栽培指標進行抽樣調(diào)查。

（2）菌絲培養(yǎng)。真姬菇培養(yǎng)期間，瓶間溫度保持18～26.5 ℃，空氣相對濕度保持55%～65%，避光，適當通風換氣。按照定植期、發(fā)熱期和后熟期3個培養(yǎng)階段進行科學培養(yǎng)。記錄各處理菌絲長至瓶頸時間、瓶底露白時間、瓶身露白時間、長滿瓶底時間、滿瓶時間等5個指標，比較試驗配方與常規(guī)配方的菌絲生長情況。最佳培養(yǎng)周期為86～90天，培養(yǎng)至達到水分70%～75%、pH 5～5.5的搔菌條件后進行搔菌，并移至生育室進入出菇管理。

（3）出菇管理。真姬菇子實體生長發(fā)育分為誘導期、現(xiàn)蕾期、伸長期和成熟期4個階段，栽培條件：溫度14～16 ℃，空氣相對濕度85%～100%，并給予適當?shù)耐L和光照，光照強度為0～500 lx。出菇期間，注意防止細菌、霉菌和線蟲等病蟲害的發(fā)生，避免因病蟲害而導致產(chǎn)量、品質降低。

出菇管理26天后開始采收，考察子實體的產(chǎn)量以及菌蓋直徑、菌柄長度、菌柄直徑、色澤、朵形和出菇均勻性等生長性狀指標。優(yōu)質菇表現(xiàn)為菌柄粗細均勻，長度11～14 cm；菌蓋呈半球狀，結實、圓整，直徑為1.0～2.5 cm。

表1 試驗配方在滅菌前、后的理化性狀比較

試驗處理水分/%pH糖分/% 滅菌前滅菌后滅菌前滅菌后滅菌前滅菌后 標準值64.5～6664～656.5～7.55.8～6.26～910～15 試驗配方65.56 64.81 6.51 5.97 6.30 10.90 常規(guī)配方(CK)65.17 64.31 6.55 5.98 6.80 11.20

注：標準值范圍來自江蘇華綠企業(yè)標準。

1.4 分析及統(tǒng)計方法

所有栽培指標的比較分析采用SPSS17的t測驗進行顯著性分析，配方和批次的方差分析和功效分析采用SPSS17.0的雙因子方差分析進行評估，圖表繪制采用Graphpad 8.3和R 3.6.3 ggplot 2進行。

2 結果與分析

2.1 添加玉米酒糟的培養(yǎng)料的理化性狀變化情況

由表1可知，與常規(guī)配方相比，試驗配方在培養(yǎng)料滅菌前后水分、pH和糖分等關鍵理化性狀方面無顯著差異，均在標準值范圍內(nèi)。說明玉米酒糟代替部分米糠，不會影響真姬菇培養(yǎng)料的各項理化指標。

2.2 兩個配方的真姬菇菌絲生長情況

試驗結果顯示，試驗配方栽培的真姬菇菌絲長至瓶頸時間、瓶底露白時間、瓶身露白時間、長滿瓶底時間及滿瓶時間等分別需要10天、10天、16.7天、29天和36.3天，與常規(guī)配方（CK）需要的10天、10天、16.3天、29天和36天相比，差異不顯著。表明在培養(yǎng)料中添加玉米酒糟代替部分米糠，對白色真姬菇的菌絲萌發(fā)、生長及滿瓶過程的影響不大。

**為統(tǒng)計學極顯著水平（P<0.01）

2.3 兩個配方的真姬菇子實體產(chǎn)量和外觀品質

圖1、圖2顯示了兩個配方的子實體產(chǎn)量、外觀及生物轉化率等指標。其中，試驗配方的單瓶產(chǎn)量為584.78±28.00 g，極顯著（=4.42942E-05）高于對照的551.88±31.79 g；其生物轉化率為120.05%±5.75%，也極顯著（=4.42473E-05）高于對照（113.3%±6.53%）。表明玉米酒糟替代部分米糠作為氮源栽培真姬菇，可以顯著提高產(chǎn)量和生物轉化率。

兩個配方栽培的真姬菇子實體均表現(xiàn)色澤白，朵形圓整、飽滿，出菇均勻性較好，菌柄長度為13.1 cm左右。但與常規(guī)配方相比，試驗配方的子實體具有菌蓋偏大、菌柄偏粗的特點，其菌蓋直徑和菌柄直徑分別為2.1 cm和1.2 cm，分別極顯著高于對照的2.0 cm（=3.31658E-11）和1.1 cm（=9.0279E-05）。

2.4 基于配方和批次的采收期指標綜合方差分析

本試驗對配方（A）、批次（B）及配方×批次互作（C）3個因素與真姬菇子實體5個性狀指標間的效應關系進行了方差分析。結果（圖3）在產(chǎn)量和生物轉化率方面，配方×批次互作（C）的效應達極顯著水平。3個因素的產(chǎn)量功效（2）分別為0.061、0.076和0.024，生物轉化率功效（2）分別為0.061、0.072和0.025。說明產(chǎn)量和生物轉化率在實際栽培中受這三方面因素的影響。在菌蓋直徑和菌柄直徑方面，配方（A）因素的效應達極顯著水平，其菌蓋直徑功效（2）為0.208，菌柄直徑功效（2）為0.078；批次（B）和配方×批次互作（C）的效應不顯著。說明配方（A）因素會對菌蓋大小和菌柄粗細產(chǎn)生極顯著的影響。在菌柄長度方面，3個因素的效應均未達顯著水平，表明培養(yǎng)料中添加玉米酒糟對真姬菇的菌柄長度影響不大。

A，試驗配方；B，對照配方

圖3 真姬菇產(chǎn)量及外觀品質的方差分析和功效分析氣泡圖

3 討 論

隨著真姬菇工廠化栽培中主要原材料價格的逐年上漲，低成本的農(nóng)業(yè)或工業(yè)廢棄物逐漸被開發(fā)應用于生產(chǎn)配方中。酒糟是制酒工業(yè)的廢棄物，其產(chǎn)量巨大、營養(yǎng)豐富，目前已在食品、化妝品及生物飼料等多個領域被循環(huán)利用；其含有粗蛋白等營養(yǎng)成分，是食用菌栽培中的潛在氮源原料。

新型原料的配方試驗一直為食用菌栽培者所熱切關注，也是食用菌生產(chǎn)的技術核心。本試驗評估多個栽培參數(shù)后發(fā)現(xiàn)，玉米酒糟作為氮源替代部分米糠栽培真姬菇，不僅不會影響菌絲定植和生長，而且能在一定程度上提升子實體產(chǎn)量、外觀品質和生物轉化率。表明玉米酒糟作為一種低成本的高效新型氮源用于真姬菇工廠化生產(chǎn)，具有較大的應用前景。此外，對真姬菇生產(chǎn)配方和生產(chǎn)批次與子實體的5個性狀指標之間的方差分析結果（圖3），明確了培養(yǎng)料中添加玉米酒糟，會顯著影響子實體產(chǎn)量、菌蓋和菌柄直徑、生物轉化率，但是菌柄長度的變化不大；生產(chǎn)批次、配方與批次互作兩方面因素則顯著影響產(chǎn)量和生物轉化率，說明生產(chǎn)過程中的其他環(huán)境參數(shù)也可能對產(chǎn)量和生物轉化率具有顯著的效應，在新配方應用之前要盡量將優(yōu)化的栽培參數(shù)固定下來，為后續(xù)新配方的應用提供條件和依據(jù)。

利用酒糟代替培養(yǎng)料中的部分米糠栽培真姬菇，不僅實現(xiàn)了制酒工業(yè)廢棄物資源的循環(huán)再利用，減少了環(huán)境污染，而且對農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展起到了積極的促進作用。但在應用中需要注意的是，玉米酒糟具有酸性較強、易霉變的缺點，難于長途運輸和保存[9]，在使用過程中須加強對原料質量的檢測，避免使用變質的原料。

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Comparative experiment on industrialized cultivationofby corn distiller's grains as a novel nitrogen-source material

Liu Qiaorong Feng Zhan*Zheng Lieyi Xiong Yan Chen Lijuan

（Jiangsu Chinagreen Biotechnology Co., Ltd., Siyang, Jiangsu 223700, China）

Corn distiller's grains, a waste of the wine industry, is rich in nitrogen, phosphorus, B vitamins and auxin, can be used as a potential low-cost raw material of edible mushrooms cultivation. In this paper, corn distiller's grains was evaluated as nitrogen source, partially replaced rice bran (11.87%,/) by mycelial growth, yield, biological efficiency and appearance quality. The results showed that the addtion of corn distiller's grains can enhance yield, biological efficiency, cap diameter and stipe diameter, and did not affect the mycelial growth, uniformity of fruiting body, fruiting-body shape, color, and the length of stipe. This result indicated that the corn distiller's grains was a novel nitrogen-source raw material for industrialized cultivation of.

corn distiller's grains;;nitrogen source; yield; quality

S646

B

2095-0934（2022）04-307-05

劉巧榮（1987—），女，從事工廠化食用菌栽培技術研究。

馮占（1985—），男，農(nóng)藝師，從事食藥用菌工廠化生產(chǎn)管理及栽培技術研究與應用。E-mail：wdyx12126@126.com。