紫花苜蓿品種苗期耐鹽性分析及評(píng)價(jià)指標(biāo)篩選

余如剛， 王雪茄， 王國(guó)良， 徐智明， 高晴晴， 杜雪玲， 張宇龍

(1. 淮北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院， 安徽 淮北 235000； 2. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院休閑農(nóng)業(yè)研究所， 山東 濟(jì)南 250010；3. 秋實(shí)草業(yè)有限公司， 安徽 五河 233300； 4.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院， 安徽 合肥 230031)

土壤鹽漬化面積逐年增加已成為全球范圍內(nèi)的農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境問題之一[1]。鹽脅迫負(fù)調(diào)控植物的生長(zhǎng)過程，包括植物的光合作用、呼吸作用及新陳代謝發(fā)生等，從而抑制植物的生長(zhǎng)，甚至導(dǎo)致死亡[2-3]。提高鹽漬化土壤的利用率已成為緊迫的全球性生態(tài)環(huán)境關(guān)注熱點(diǎn)。前人研究發(fā)現(xiàn)，種植耐鹽性較高植物不僅可以利用鹽漬化土壤，而且也提高土壤修復(fù)能力[3-4]。因此，篩選和開發(fā)更多耐鹽植物種質(zhì)資源是利用和治理鹽漬化土壤的有效生物方法。

紫花苜蓿(MedicagosativaL.)屬豆科蝶形花亞科苜蓿屬的多年生優(yōu)質(zhì)牧草，富含粗蛋白質(zhì)、維生素和多種礦物質(zhì)元素，被譽(yù)為“牧草之王”，并具有適應(yīng)性和抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)。隨著我國(guó)膳食結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變，肉、蛋和奶等動(dòng)物源食品逐漸成為食物的重要組成部分，隨之而來對(duì)養(yǎng)殖所需的優(yōu)質(zhì)牧草，特別是紫花苜蓿的需求量也大幅增加。然而，目前國(guó)產(chǎn)苜蓿無法滿足國(guó)內(nèi)市場(chǎng)需求，仍需大量進(jìn)口國(guó)外苜蓿。同時(shí)，國(guó)內(nèi)有限的耕地資源在保障口糧供給的基礎(chǔ)上，難以用于大規(guī)模種植苜蓿，成為制約苜蓿產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。研究發(fā)現(xiàn)，紫花苜蓿與其他牧草相比，具有較高的耐鹽性和改良土壤鹽漬化的作用[5-6]，是一種理想的修復(fù)和利用鹽漬化土壤的首選植物。但是，紫花苜蓿是同源四倍體，具有很高的遺傳復(fù)雜性，不易培育新品種，且不同品種間耐鹽性存在顯著差異[7-11]。因此，在有限的耕地資源條件下，挖掘紫花苜蓿本身耐鹽性強(qiáng)的種質(zhì)資源，篩選和培育耐鹽紫花苜蓿品種，不僅能有效改良和利用鹽漬化土地，而且有利于促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展。此外，不同的紫花苜蓿品種在不同的生育期對(duì)鹽脅迫的耐性具有顯著差異，幼苗期是其對(duì)鹽脅迫較為敏感的時(shí)期之一[12]。由于植物對(duì)鹽的耐受性是一個(gè)復(fù)雜的綜合性狀，因此，近年來耐鹽種質(zhì)資源篩選的方法多基于多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)方法，包括主成分分析法、隸屬函數(shù)法和回歸分析等多元分析方法[13-14]。本試驗(yàn)以17個(gè)形態(tài)和生理指標(biāo)的耐鹽系數(shù)為基礎(chǔ)，在NaCl脅迫下，通過多元分析方法對(duì)20個(gè)紫花苜蓿幼苗的耐鹽特性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，根據(jù)測(cè)定指標(biāo)與耐鹽特性的關(guān)系建立紫花苜蓿幼苗期耐鹽評(píng)價(jià)數(shù)學(xué)模型，以期為耐鹽紫花苜蓿種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及新品種選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)材料由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院休閑農(nóng)業(yè)研究所、秋實(shí)草業(yè)有限公司、北京克勞沃生態(tài)科技有限公司和北京陽光綠地生態(tài)科技有限公司提供，共計(jì)20個(gè)紫花苜蓿品種(表1)。

表1 供試紫花苜蓿品種及來源Table 1 The origins of M. sativa L. varieties in test

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

盆栽試驗(yàn)于2020年9—11月在淮北師范大學(xué)園藝專業(yè)實(shí)訓(xùn)基地進(jìn)行。挑選大小一致的種子，置于鋪兩層濾紙培養(yǎng)皿中，暗培養(yǎng)4天后，將已發(fā)芽且長(zhǎng)勢(shì)一致的紫花苜蓿轉(zhuǎn)移至口徑13 cm高12 cm的營(yíng)養(yǎng)盆中。為避免在收苗時(shí)傷害到幼苗的根系，采用清洗干凈的河沙作為培養(yǎng)基質(zhì)，曬干河沙1.2 kg/盆。移苗后每間隔1 d澆100 mL自來水。出現(xiàn)真葉時(shí)，每間隔1 d澆100 mL霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液；每盆留長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗10株。緩苗生長(zhǎng)2周后進(jìn)行鹽脅迫，共設(shè)置3個(gè)處理：無NaCl的霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液(對(duì)照)、150 mmol·L-1和300 mmol·L-1NaCl濃度的霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液處理；其后，每間隔1 d澆含不同濃度NaCl(0,150和300 mmol·L-1)的霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液100 mL。試驗(yàn)期間每盆添加營(yíng)養(yǎng)液均為上午和下午各50 mL。每品種各處理設(shè)3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。鹽處理5周后，統(tǒng)計(jì)成活率，并分別取根、莖和葉樣品進(jìn)行形態(tài)和生理指標(biāo)測(cè)定。

根據(jù)觀察不同濃度NaCl處理下紫花苜蓿形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)JG,GN3和ST在300 mmol·L-1NaCl處理5周后植株葉片萎蔫，有的甚至死亡。因此，本研究?jī)H以150 mmol·L-1NaCl處理下各指標(biāo)評(píng)價(jià)不同品種紫花苜蓿的耐鹽特性。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1形態(tài)指標(biāo)測(cè)定 鹽處理5周后從每盆隨機(jī)選取3株長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗，用直尺測(cè)量基質(zhì)表面到植株最頂部的距離作為株高(PH)；取樣時(shí)，每盆取3株，將根、莖和葉分開，利用直尺測(cè)量最長(zhǎng)根長(zhǎng)(LRL)；通過人工計(jì)數(shù)單株葉片數(shù)(LN)；分別稱量莖鮮重(SFW)、葉鮮重(LFW)和根鮮重(RFW)；然后，放于105℃烘箱中殺青1 h，再在70℃條件下烘干至恒重，分別稱量莖干重(SDW)、葉干重(LDW)和根干重(RDW)。其他生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

地上部鮮重(AFW)=莖鮮重+葉鮮重

總鮮重(TFW)=莖鮮重+葉鮮重+根鮮重

地上部干重(ADW)=莖干重+葉干重

總干重(TDW)=莖干重+葉干重+根干重

1.3.2生理指標(biāo)測(cè)定 以葉片為研究對(duì)象，分別測(cè)定對(duì)照和150 mmol·L-1NaCl處理下各項(xiàng)生理指標(biāo)。丙二醛含量的測(cè)定參照張志良等的方法[15]。葉綠素含量采用手持葉綠素儀SPAD-502Plus進(jìn)行測(cè)定；光合熒光參數(shù)F0和Fm采用FluorPen手持式葉綠素?zé)晒鈨x進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)一步計(jì)算可得量子產(chǎn)額，表示光系統(tǒng)Ⅱ的效率，等于Fv/Fm(暗適應(yīng)狀態(tài))或Yield(光適應(yīng)狀態(tài))。

Fv/Fm= (Fm-F0)/Fm

Yield=(Fm′-F0′)/Fm′

1.4 綜合評(píng)價(jià)及數(shù)據(jù)分析

利用Microsoft Excel 2010進(jìn)行原始數(shù)據(jù)處理。采用IBM SPSS 25.0軟件進(jìn)行主成分分析、相關(guān)性分析、聚類分析和逐步回歸等分析。具體指標(biāo)計(jì)算如下[13-14]：

(1)測(cè)定指標(biāo)的耐鹽系數(shù)

各單項(xiàng)指標(biāo)的耐鹽系數(shù)(STC)=
鹽脅迫處理測(cè)定值/對(duì)照處理測(cè)定值

①

(2)不同紫花苜蓿品種各綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值U(Xi)

②

式中，Xi表示第i個(gè)綜合指標(biāo)；U(Xi)表示第i個(gè)綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值，Xi max和Xi min分別表示20個(gè)品種中第i個(gè)綜合指標(biāo)的最大值和最小值。

(3)不同基因型紫花苜蓿品種綜合指標(biāo)的權(quán)重(Wi)

③

式中，Wi表示第i個(gè)綜合指數(shù)的相對(duì)重要性，即第i個(gè)綜合指數(shù)的權(quán)重，Pi表示第i個(gè)綜合指數(shù)的貢獻(xiàn)率。

(4)不同基因型紫花苜蓿品種的綜合耐鹽性評(píng)價(jià)值

④

式中，D值為各紫花苜蓿品種在鹽脅迫條件下由綜合指標(biāo)評(píng)價(jià)分析后獲得的耐鹽性綜合評(píng)價(jià)值。為了獲得各紫花苜蓿品種更科學(xué)合理的耐鹽類別，利用最小距離準(zhǔn)則對(duì)綜合評(píng)價(jià)D值進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析。同時(shí)，為了分析各單項(xiàng)指標(biāo)與耐鹽性之間的關(guān)系，篩選準(zhǔn)確的耐鹽鑒定指標(biāo)，探討可用于預(yù)測(cè)紫花苜蓿耐鹽性評(píng)價(jià)的數(shù)學(xué)模型，將各指標(biāo)的脅迫耐性系數(shù)與D值進(jìn)行相關(guān)性分析，以顯著相關(guān)指標(biāo)(P<0.05或P<0.01)的脅迫耐性系數(shù)作為自變量，綜合評(píng)價(jià)值(D值)作為因變量進(jìn)行逐步回歸分析，建立最佳評(píng)價(jià)數(shù)學(xué)模型。

2 結(jié)果與分析

2.1 紫花苜蓿品種幼苗存活率分析

存活率一般是鑒定植物耐鹽性的一個(gè)重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)在對(duì)照和150 mmol·L-1NaCl處理下，各品種存活率均接近100%。因此，本試驗(yàn)僅統(tǒng)計(jì)300 mmol·L-1NaCl處理下各品種的存活率。由圖1可知：存活率大于60%的品種有GN5,XL,JNG,TG,JN和JS；存活率在60%～40%的品種有JN995,ADN,GN9,HG,POW,SG,JN801,JL,SH和LS；存活率在40%～20%的品種有JG和INS，存活率小于20%的品種有ST和GN3。由此，我們推測(cè)GN5,XL,JNG,TG,JN和JS為耐鹽品種，ST和GN3高感品種。

圖1 300 mmol·L-1 NaCl處理下20個(gè)紫花苜蓿品種幼苗存活率Fig.1 Seedling survival rate of 20 M. sativa L. varieties under 300 mmol·L-1 NaCl treatment.

2.2 各單項(xiàng)指標(biāo)的耐鹽系數(shù)及相關(guān)性分析

耐鹽系數(shù)能夠較好顯示各指標(biāo)在處理與對(duì)照條件下比較的結(jié)果。由表2可知：各單項(xiàng)指標(biāo)的耐鹽系數(shù)在20個(gè)紫花苜蓿品種間變化顯著。變異范圍為8.90%～78.90%，其中，丙二醛的變異系數(shù)最大，變異系數(shù)較大的為莖鮮重、葉鮮重、地上部鮮重、葉片數(shù)和總鮮重指標(biāo)，說明鹽脅迫對(duì)這些指標(biāo)的影響較大。不同紫花苜蓿品種經(jīng)鹽處理后，13個(gè)形態(tài)指標(biāo)值：株高、最長(zhǎng)根長(zhǎng)、根鮮重、莖鮮重、葉鮮重、地上部鮮重、總鮮重、根干重、莖干重、葉干重、地上部干重、總干重和葉片數(shù)與對(duì)照比均有所下降(STC<1)，說明各品種在鹽脅迫下生長(zhǎng)均受到不同程度抑制。鹽處理后生理指標(biāo)值與對(duì)照比則在不同品種中呈不同程度的變化(STC>1或STC<1)。NaCl脅迫下各單項(xiàng)指標(biāo)的變化幅度不同，依據(jù)任何一個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)均難以準(zhǔn)確、直觀地評(píng)價(jià)其耐鹽性，因此，需要多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)。

表2 150 mmol·L-1 NaCl處理下20個(gè)紫花苜蓿品種測(cè)定指標(biāo)的耐鹽系數(shù)Table 2 The salinity tolerance coefficients of tested indices of 20 M. sativa L. varieties under 150 mmol·L-1 NaCl treatment

從17個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)耐鹽系數(shù)的相關(guān)性分析來看：除了株高、丙二醛含量和黑暗下量子產(chǎn)額外，其他每一個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)至少與其他1個(gè)或1個(gè)以上的單項(xiàng)指標(biāo)顯著或極顯著相關(guān)，其中，最長(zhǎng)根長(zhǎng)與莖干重、總干重、葉綠素呈顯著性正相關(guān)，根鮮重與莖鮮重、葉鮮重、地上部鮮重、總鮮重、莖干重和總干重等呈顯著性相關(guān)，莖鮮重與葉鮮重、地上部鮮重、總鮮重、莖干重和總干重等呈顯著性相關(guān)(表3)。從上述分析得知，這些單項(xiàng)指標(biāo)之間的相關(guān)性，導(dǎo)致提供的評(píng)價(jià)信息發(fā)生重疊，從而影響了各紫花苜蓿品種耐鹽性的篩選與鑒定。

表3 150 mmol·L-1 NaCl處理下紫花苜蓿幼苗各單項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)矩陣Table 3 Correlation matrix of each single index of M. sativa L. seedlings under 150 mmol·L-1 NaCl treatment

2.3 耐鹽系數(shù)的主成分分析

以不同紫花苜蓿品種各單項(xiàng)指標(biāo)的耐鹽系數(shù)為基礎(chǔ)，利用SPSS 25.0軟件計(jì)算各主成分的特征向量和貢獻(xiàn)率，并根據(jù)各特征向量的絕對(duì)值將不同指標(biāo)劃分到不同的主成分之中。同一指標(biāo)在各因子中的最大絕對(duì)值所在位置即為其所屬主成分。由表4可知：所轉(zhuǎn)換的前5個(gè)綜合指標(biāo)(CI)的貢獻(xiàn)率分別為53.40%，10.66%，8.58%，7.35%和7.08%，被分別定義為第1(CI1)至第5(CI5)主成分，累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到87.07%，表明這5個(gè)綜合指標(biāo)能代表17個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)攜帶的絕大部分信息，因此，可以用這5個(gè)主成分指標(biāo)對(duì)20個(gè)紫花苜蓿品種耐鹽性進(jìn)行分析。

表4 各綜合指標(biāo)的特征向量及貢獻(xiàn)率Table 4 Eigen vectors and percentage of accumulated contribution of comprehensive index

2.4 紫花苜蓿苗期耐鹽性的綜合評(píng)價(jià)

2.4.1隸屬函數(shù)分析 利用公式(2)，求出不同紫花苜蓿品種各綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值(表5)。對(duì)于同一綜合指標(biāo)如CI1而言，鹽處理下，GN5的U(X1)值最大，為1.0000，表明GN5在CI1綜合指標(biāo)中耐鹽性最強(qiáng)，而LS的的U(X1)值最小，為0.0000，表明其該綜合指標(biāo)上耐鹽性最弱。

表5 不同苜蓿品種綜合指標(biāo)隸屬函數(shù)分析Table 5 Subordinate function analysis of comprehensive index in different M. sativa L. varieties

2.4.2耐鹽性的綜合評(píng)價(jià)及聚類分析 利用公式(3)，計(jì)算5個(gè)綜合指標(biāo)的權(quán)重，分別為0.6133,0.1224,0.0986,0.0844和0.0813(表5)。利用公式(4)，求出不同紫花苜蓿品種的耐鹽性綜合評(píng)價(jià)值(D值)(表5)，依據(jù)D值對(duì)不同紫花苜蓿品種的耐鹽性強(qiáng)弱進(jìn)行排序，D值最高的為GN5(0.8269)，表明其耐鹽性最強(qiáng)；D值最低的為L(zhǎng)S(0.1400)和HG(0.1447)，表明其耐鹽性最弱。對(duì)D值進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，20個(gè)紫花苜蓿品種分為5類：高度耐鹽類型(GN5)、耐鹽類型(SH,ADN,ST,TG,SG,JL和JN801)、中度耐鹽類型(JS,INS,POW和JNG)、鹽敏感類型(JN,JN995,GN9,GN3,XL和JG)和高敏感類型(HG和LS)(圖2)。

圖2 20個(gè)紫花苜蓿品種D值聚類樹狀圖Fig.2 The deprogram of clusters for 20 M. sativa L. varieties based on D value

2.5 回歸分析及耐鹽鑒定指標(biāo)的選擇

為分析各單項(xiàng)指標(biāo)與耐鹽性之間的關(guān)系，篩選出可靠的耐鹽鑒定指標(biāo)，探討可用于耐鹽性評(píng)價(jià)的數(shù)學(xué)模型，以耐鹽性綜合評(píng)價(jià)值D值作為因變量，以與D值顯著相關(guān)的指標(biāo)：根鮮重、莖鮮重、葉鮮重、地上部鮮重、總鮮重、根干重、葉干重、地上部干重、總干重、葉片數(shù)、葉綠素和光照下的量子產(chǎn)額為自變量進(jìn)行線性逐步回歸分析(表6)，建立耐鹽評(píng)價(jià)數(shù)學(xué)模型：D′=-0.284+1.342×ADW+0.182×LN (R2=0.967，P=0.001)，并篩選出2個(gè)指標(biāo)對(duì)紫花苜蓿苗期耐鹽性有顯著影響，分別為地上部干重和葉片數(shù)。利用該數(shù)學(xué)模型對(duì)20個(gè)紫花苜蓿品種進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，平均估算精度為93.35%(表7)。

表6 逐步線性回歸分析結(jié)果Table 6 The results of stepwise linear regression analysis

表7 回歸方程的估計(jì)精度分析Table 7 Analysis of evaluation accuracy of equation

3 討論

紫花苜蓿是牲畜均喜食的優(yōu)質(zhì)牧草，但中國(guó)耕地資源緊缺，次生鹽漬化耕地面積逐年增加，有限的耕地資源在保障口糧供給的基礎(chǔ)上[16]，難以用以大規(guī)模種植紫花苜蓿。但是紫花苜蓿具有一定的耐鹽能力，因此，篩選和開發(fā)更多的優(yōu)質(zhì)耐鹽紫花苜蓿品種不僅有利于鹽堿地的有效利用，而且對(duì)畜牧業(yè)發(fā)展起到一定的助力作用。

植物生長(zhǎng)易受鹽脅迫的抑制，已有研究表明，鹽脅迫指的主要是含有NaCl和Na2SO4的鹽漬土，其中，NaCl是鹽漬土組成中含量最大，遷移能力最強(qiáng)，最活躍的鹽分之一[17]，因此，本研究以NaCl作為鹽處理具有一定的合理性和代表性。紫花苜蓿的耐鹽篩選已有研究，Maas和Hoffman[18]報(bào)道紫花苜蓿苗期產(chǎn)量在8.9 dS·m-1(≈ 97 mmol·L-1NaCl)時(shí)下降50%。李明雨等[19]認(rèn)為1.2%(≈205 mmol·L-1)NaCl濃度為苜蓿耐鹽性鑒定的適宜濃度?；谝陨?，為了篩選高度耐鹽紫花苜蓿品種，本研究設(shè)置3個(gè)NaCl(0，150 和300 mmol·L-1)處理水平，其中，300 mmol·L-1NaCl脅迫下，各品種植株均出現(xiàn)不同程度萎蔫和死亡現(xiàn)象，有些評(píng)價(jià)指標(biāo)難以測(cè)定，因此，最終選擇150 mmol·L-1NaCl作為本研究的篩選濃度。不同的紫花苜蓿品種間耐鹽性差異很大，不同生育時(shí)期的耐鹽性也不盡相同，幼苗期是紫花苜蓿對(duì)鹽脅迫較為敏感的時(shí)期[12]。鹽脅迫對(duì)不同苗期指標(biāo)的影響也不盡相同。目前紫花苜蓿苗期耐鹽性篩選指標(biāo)并沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，但有研究表明，鹽脅迫下株高和生物量在紫花苜蓿各品種間差異很大，可以作為指示紫花苜蓿苗期鹽脅迫響應(yīng)的指標(biāo)[12,19]；張則宇等[20]對(duì)59份紫花苜蓿品種進(jìn)行苗期耐鹽篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鹽脅迫下苗期的葉面積、葉綠素?zé)晒?、葉綠素含量和根冠比可作苗期耐鹽性鑒定指標(biāo)。田小霞等[21]通過葉綠素含量、單株綠葉數(shù)、苗高和葉片相對(duì)電導(dǎo)率等4個(gè)指標(biāo)以及Yu等[13]通過地上部鮮重、地上部干重、鮮重根冠比和K+/Na+等4個(gè)指標(biāo)建立數(shù)學(xué)評(píng)價(jià)模型，為篩選紫花苜蓿耐鹽性提供了評(píng)價(jià)指標(biāo)。同時(shí)，已有研究表明作物耐鹽性篩選中，任何單一指標(biāo)均不能準(zhǔn)確、直觀地評(píng)價(jià)其耐鹽性，因此需要多指標(biāo)來全面的進(jìn)行紫花苜蓿耐鹽性評(píng)價(jià)。研究顯示利用主成分分析、隸屬函數(shù)法及回歸分析等多元分析方法已成為作物耐鹽性品種篩選的一種可靠、有效的方法[13,20-23]。本研究選擇13個(gè)形態(tài)指標(biāo)和4個(gè)生理指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，并運(yùn)用多元分析方法對(duì)20份紫花苜蓿苗期耐鹽性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

耐鹽系數(shù)顯示了對(duì)照和鹽處理品種在各項(xiàng)指標(biāo)上的比較結(jié)果，它通常被用作評(píng)價(jià)作物耐鹽性的標(biāo)準(zhǔn)[7,9,13,20-23]。本研究以17個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)的耐鹽系數(shù)為基礎(chǔ)，利用主成分分析，將17個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)轉(zhuǎn)換為5個(gè)相互獨(dú)立的綜合指標(biāo)，并得到不同品種紫花苜蓿苗期的耐鹽性綜合評(píng)價(jià)值(D值)，依據(jù)D值進(jìn)行聚類分析，較為客觀地篩選出1個(gè)高度耐鹽、7個(gè)耐鹽、4個(gè)中度耐鹽、6個(gè)鹽敏感和2個(gè)高度鹽敏感紫花苜蓿品種。該結(jié)果與依據(jù)300 mmol·L-1NaCl脅迫下單一存活率指標(biāo)的推測(cè)結(jié)果不一致，說明不能以單項(xiàng)存活率指標(biāo)來進(jìn)行紫花苜蓿耐鹽性評(píng)價(jià)。同時(shí)，有3個(gè)品種GN3,XL和HG的評(píng)價(jià)結(jié)果與張則宇等[18]的研究結(jié)果相同，均為不耐鹽類型。此外，通過逐步回歸法建立了紫花苜蓿苗期耐鹽性預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)模型，該模型平均估算精度為93.35%，可用于篩選紫花苜蓿幼苗階段不同品種的耐鹽性。

4 結(jié)論

本研究將供試的20份紫花苜蓿品種分為高度耐鹽(1個(gè))、耐鹽(7)、中度耐鹽(4個(gè))、鹽敏感(6個(gè))和高度鹽敏感(2個(gè))5個(gè)類型，其中GN5為高度耐鹽型、SH為耐鹽型、LS和HG為高度鹽敏感型紫花苜蓿。建立了紫花苜蓿幼苗耐鹽性評(píng)價(jià)數(shù)學(xué)模型D′=-0.284+1.342×ADW+0.182×LN (R2= 0.967，P= 0.001)，篩選出地上部干重和單株葉片數(shù)為紫花苜蓿苗期耐鹽性鑒定指標(biāo)。研究結(jié)果將為紫花苜蓿耐鹽品種資源鑒定及良種選育提供科學(xué)支持。