保定地區(qū)無償獻(xiàn)血患者核酸檢測(cè)HBV感染現(xiàn)狀及影響因素分析

何久勝 王浩 胡素玲

輸血是臨床挽救急危癥患者生命的必要手段，對(duì)血液進(jìn)行生物學(xué)篩查是確保輸血安全的基礎(chǔ)。為避免輸血后感染HBV，采血站常采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)血清HBsAg等病毒標(biāo)志物，一定程度上保障血液安全。但若出現(xiàn)HBV感染窗口期獻(xiàn)血、隱匿性感染、病毒變異等，則無法準(zhǔn)確判斷HBV感染情況，增加輸血或輸注血液制品風(fēng)險(xiǎn)性[1-3]。病毒核酸檢測(cè)技術(shù)(nucleic acid amplification testing，NAT)可通過檢測(cè)獻(xiàn)血者標(biāo)本HBV DNA載量判斷HBV感染情況，有利于降低輸血相關(guān)的病毒傳播風(fēng)險(xiǎn)，但檢測(cè)流程復(fù)雜，無法滿足采血站快速篩查要求[4-5]。因此，明確ELISA快篩HBsAg陰性患者HBV陽性的危險(xiǎn)因素，對(duì)減少及預(yù)防HBV傳播具有重要意義。本研究對(duì)207 000份HBsAg快篩合格標(biāo)本分別進(jìn)行ELISA、NAT檢測(cè)，并分析HBV陽性的影響因素。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2019年1月至2020年12月保定市中心血站HBsAg快篩合格標(biāo)本207 000份，均為自愿無償獻(xiàn)血者標(biāo)本，獻(xiàn)血人員均簽訂知情同意書，無傳染病史，經(jīng)ELISA初篩HBsAg陰性，無精神系統(tǒng)疾病、局部或全身感染、合并自身免疫性疾病。

二、檢測(cè)方法

① HBsAg試紙快篩檢測(cè)，獻(xiàn)血前采用金標(biāo)快篩試劑進(jìn)行HBsAg檢測(cè)，合格后按要求采集和保存血液標(biāo)本。②ELISA檢測(cè)HBsAg，所有獻(xiàn)血者標(biāo)本同時(shí)采用廈門新創(chuàng)科技有限公司、上?？迫A生物工程股份有限公司提供的試劑盒進(jìn)行HBsAg檢測(cè)，每板設(shè)置陰性對(duì)照3孔，陽性對(duì)照2孔，陽性質(zhì)控1孔，外部陰性對(duì)照1孔，空白對(duì)照1孔。標(biāo)本檢測(cè)孔S/CO≥0.8判為不合格。③NAT檢測(cè)，采用上?？迫A全自動(dòng)核酸檢測(cè)系統(tǒng)Panter system對(duì)HBsAg 陰性患者采用混樣檢測(cè)+拆分檢測(cè)模式進(jìn)行NAT檢測(cè)，先將8份標(biāo)本(180 μL/份)匯集為1份，混樣檢測(cè)為陰性者則判斷為NAT陰性，若混樣檢測(cè)為陽性，對(duì)混合標(biāo)本進(jìn)行拆分，混檢陽性、拆分陰性的標(biāo)本判斷為陰性；混檢、拆分檢測(cè)均陽性的判斷為NAT陽性。對(duì)NAT陽性標(biāo)本采用PCR檢測(cè)HBV DNA，未檢出HBV DNA，則判斷為HBV陰性，檢出HBV DNA者記錄HBV DNA定量結(jié)果。④血清HBV標(biāo)志物檢測(cè)，HBV DNA陽性標(biāo)本采用羅氏全自動(dòng)免疫電化學(xué)發(fā)光分析儀及配合試劑檢測(cè)抗-HBs、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe。

三、觀察指標(biāo)

①HBV感染現(xiàn)狀。②不同時(shí)間HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV感染情況。③不同人群特征HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV感染情況，包括性別、年齡、民族、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、文化程度、婚姻狀況、職業(yè)、是否重復(fù)獻(xiàn)血、靜脈吸毒史、不安全性行為、與他人共用牙刷、與他人共用剃須刀、拔牙補(bǔ)牙洗牙等、輸血史、內(nèi)窺鏡史、手術(shù)史、針灸史、經(jīng)常去洗浴場(chǎng)所修腳(≥1次/月)、經(jīng)常去理發(fā)店修體剃須(≥2次/月)、創(chuàng)傷性美容。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)分析軟件。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，采用logistic回歸模型進(jìn)行多因素分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、HBV感染現(xiàn)狀

HBsAg快篩合格標(biāo)本207 000份，HBsAg篩查陰性、ELISA檢測(cè)HBsAg陽性949例，陰性206 051例，NAT陽性152例，103例HBV DNA陽性。HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性率為0.050%(103/206 051)。103例HBsAg(-)/HBV DNA(+)獻(xiàn)血者HBV DNA定量檢測(cè)結(jié)果顯示，以低病毒載量為主，其中HBV DNA<20 IU/mL 75例(72.8%)，20 IU/mL≤HBV DNA<100 IU/mL 20例(19.4%)，HBV DNA≥100 IU/mL 8例(7.8%)；其血清學(xué)模式以抗-HBs(+)/抗-HBe(-)/抗-HBc(-)為主，占34%(35/103)。見表1。

表1 HBsAg(-)/HBV DNA(+)獻(xiàn)血者血清學(xué)模式

二、不同時(shí)間HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性情況

不同時(shí)間HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者整體、男性、女性HBV DNA陽性率均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同時(shí)間HBV DNA陽性情況

三、不同人群特征HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性情況

有靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史的HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性率高于無靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史者(P<0.05)，見表3。

表3 不同人群特征HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性情況

續(xù)表3

四、賦值

將表3差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的項(xiàng)目靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史作為自變量，是否為HBV DNA陽性作為因變量，具體賦值見表4。

表4 賦值

五、多因素分析

經(jīng)logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史是HBV DNA陽性的影響因素(P<0.05)，見表5。

表5 多因素分析HBV陽性的影響因素

討 論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，2016年全球HBsAg攜帶率達(dá)3.9%[6]。HBV感染可引起急、慢性肝炎，隨著肝細(xì)胞損傷甚至可進(jìn)展為肝硬化、原發(fā)性肝癌等[7-9]。輸血為HBV的主要傳播途徑之一，隨著免疫規(guī)劃的順利進(jìn)行，HBsAg攜帶率下降[10-11]。ELISA篩查靈敏度達(dá)0.1～0.2 ng/mL，但無法完全排除HBV感染獻(xiàn)血者，需進(jìn)一步完善其篩查機(jī)制[12-13]。

為進(jìn)一步提高輸血安全，血站核酸檢測(cè)已逐漸普及，在HBV感染診斷中具有較高的敏感度、特異度。相關(guān)報(bào)道表明，我國(guó)獻(xiàn)血者經(jīng)HBsAg篩查后的HBV DNA陽性率為0.01%～0.2%，重慶地區(qū)無償獻(xiàn)血人群中HBsAg(-)但HBV DNA(﹢)的檢出率為0.097%，福州地區(qū)獻(xiàn)血者隱匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection，OBI)為0.064%，西安市獻(xiàn)血者OBI為0.06%，紹興地區(qū)無償獻(xiàn)血者中OBI為0.119%，南昌地區(qū)獻(xiàn)血者OBI為0.13%，可見我國(guó)不同地區(qū)OBI感染情況差異較大，但與國(guó)外發(fā)達(dá)地區(qū)相比仍較高，可能與感染途徑、生活習(xí)俗、免疫遺傳特征、醫(yī)療衛(wèi)生狀況等因素有關(guān)[14-19]。本研究結(jié)果顯示，HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性率為0.050%，以低病毒載量為主(<20 IU/mL)，與南昌地區(qū)調(diào)查結(jié)果相似。血清HBV標(biāo)志物檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，以抗-HBs(+)/抗-HBe(-)/抗-HBc(-)為主，占34%。因此，綜合HBsAg ELISA篩查法、NAT檢測(cè)模式，可最大限度提高輸血安全性。本研究還對(duì)不同時(shí)間HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性情況進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間變化整體及不同性別HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性率無明顯變化。

本研究中有靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史的HBsAg篩查陰性獻(xiàn)血者HBV DNA陽性率高于無靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史者，經(jīng)logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史是HBV DNA陽性的影響因素。HBV傳播途徑主要包括血液傳播、母嬰傳播、性傳播、醫(yī)源性傳播、經(jīng)破損皮膚黏膜傳播。近年來隨著人們精神壓力增加，加之對(duì)毒品錯(cuò)誤認(rèn)識(shí)，致使新型毒品使用泛濫，部分年輕人為尋求刺激靜脈吸毒，吸毒時(shí)存在共用注射器的情況，可能通過血液或破損皮損黏膜傳播。輸血患者若使用不規(guī)范的血制品或在醫(yī)療條件較差的小診所進(jìn)行輸血或手術(shù)可能會(huì)因重復(fù)性使用一次性注射器、共用注射器等引發(fā)交叉感染。不安全性行為是HBV傳播的重要方式，發(fā)生性行為的雙方可因體液交換增加HBV感染風(fēng)險(xiǎn)。疫苗的免疫保護(hù)作用可降低HBV感染風(fēng)險(xiǎn)[20]，但本研究中接種乙肝疫苗者HBV率雖低于無接種者，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，主要是因乙肝疫苗接種是國(guó)家免費(fèi)接種計(jì)劃之一，未接種的人數(shù)甚少。

針對(duì)以上影響因素，制定相關(guān)干預(yù)策略，具體如下：醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)加強(qiáng)血液及血液制品的安全性管理，規(guī)范醫(yī)療操作，同時(shí)對(duì)公眾加強(qiáng)血液安全相關(guān)知識(shí)、HBV傳播路徑等宣教，提高公眾對(duì)HBV的關(guān)注及預(yù)防程度，監(jiān)督醫(yī)護(hù)人員使用一次性注射器，避免進(jìn)行吸毒等不安全行為。同時(shí)，應(yīng)采用宣傳視頻、宣傳手冊(cè)等方式介紹不安全性行為的危害，加強(qiáng)健康文明生活方式的思想教育，或通過在社區(qū)免費(fèi)發(fā)放安全套等方式提倡安全性行為。此外，政府及醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)制定適合當(dāng)?shù)氐囊腋我呙缤茝V策略，尤其是HBV高危者應(yīng)定時(shí)進(jìn)行檢查，若抗-HBs<100，應(yīng)及時(shí)接種乙肝疫苗，確保建立免疫屏障。

綜上所述，無償獻(xiàn)血者存在一定HBV DNA陽性風(fēng)險(xiǎn)，以低病毒載量為主，主要影響因素有靜脈吸毒史、不安全性行為、輸血史，對(duì)存在以上危險(xiǎn)因素的獻(xiàn)血者可結(jié)合NAT進(jìn)一步檢測(cè)，以降低HBV傳播風(fēng)險(xiǎn)。