不同藥劑對草地貪夜蛾的室內(nèi)殺蟲活性及田間防效研究

毛永凱，李繼虎，陳艷艷，林明江，許漢亮，劉景業(yè)，孫東磊,2*

(1廣東省科學(xué)院南繁種業(yè)研究所，廣東 廣州 510316；2廣東省藥肥工程技術(shù)研究中心，廣東 廣州 510316；3廣州市南沙區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村服務(wù)中心，廣東 廣州 511455)

0 引言

草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)，又名秋黏蟲，屬于鱗翅目Lepidoptera，夜蛾科Noctuidae，灰翅夜蛾屬Spodoptera，起源于美洲熱帶和亞熱帶地區(qū)[1]，是聯(lián)合國糧農(nóng)組織向全球預(yù)警的跨國界遷飛性重大農(nóng)業(yè)害蟲[2]。2018年12月11日首次發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾成蟲從緬甸遷入我國云南西部地區(qū)[3]，隨后有報道稱2018年12月26日在云南省江城縣發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾幼蟲在田間為害[4]。草地貪夜蛾遷飛能力極強，入侵我國后在國內(nèi)迅速擴散，至2019年10月8日就蔓延到了全國的26個省（自治區(qū)、直轄市）[5]。

草地貪夜蛾是雜食性昆蟲，寄主范圍廣，已記載的就多達76科353種[6-7]。張磊等[8]分子鑒定結(jié)果表明，入侵我國的草地貪夜蛾屬于偏好取食玉米的“玉米型”，以為害玉米為主。在我國廣西、云南、廣東等主要蔗區(qū)，甘蔗也是草地貪夜蛾的寄主和冬季重要食源[9-12]。草地貪夜蛾入侵我國后，嚴(yán)重威脅著我國糧食生產(chǎn)安全[13]。據(jù)預(yù)測，如不加以防治，草地貪夜蛾對我國玉米生產(chǎn)造成的潛在經(jīng)濟損失總量為375.68億～3283.45億元[14]。

化學(xué)農(nóng)藥具有作用速度快和防效好的特點，是病蟲害應(yīng)急防控的重要措施[15]，使用化學(xué)農(nóng)藥防治草地貪夜蛾能夠快速壓低種群規(guī)模、減輕為害[16]。但有研究報道，在國外長期、頻繁的藥劑使用已導(dǎo)致草地貪夜蛾對多種新型農(nóng)藥產(chǎn)生了不同程度的抗性，如Gutiérrez-Moreno等[17]的研究表明，波多黎各的草地貪夜蛾田間種群已對氟苯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺這2種雙酰胺類殺蟲劑產(chǎn)生了高水平的抗性，抗性水平分別達500和160倍。因此，在田間防治草地貪夜蛾時要注意不同作用機制藥劑的輪替使用，以降低抗性選擇壓力。

為明確不同作用機理的藥劑對草地貪夜蛾的殺蟲效果，加快草地貪夜蛾防控藥劑的篩選，本研究選取了化學(xué)農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥和微生物農(nóng)藥等共計13種藥劑，對草地貪夜蛾開展了室內(nèi)殺蟲活性試驗。同時，對室內(nèi)殺蟲效果較好的藥劑開展了田間防效試驗，以期能為玉米田和蔗田草地貪夜蛾的防控提供更多藥劑選擇。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)殺蟲活性試驗

1.1.1 供試蟲源

2019年6月在廣東省廣州市南沙區(qū)鮮食玉米田采集草地貪夜蛾高齡幼蟲帶回實驗室飼養(yǎng)。在人工氣候箱內(nèi)用新鮮甜玉米葉片(粵甜28號-粵審玉20170004)飼養(yǎng)多代后用于試驗研究，以3齡幼蟲作為供試蟲源。飼養(yǎng)溫度為(27±1)℃，相對濕度為70%±5%，光周期為L∶D=14∶10。

1.1.2 供試農(nóng)藥

供試藥劑種類及生產(chǎn)廠商信息見表1，所有藥劑均在網(wǎng)上平臺購買。每種藥劑參考其農(nóng)藥登記時的推薦用量設(shè)置1～2個濃度。以玉米苗期450 kg/hm2的常規(guī)噴霧藥液量轉(zhuǎn)換為稀釋倍數(shù)，每個濃度配制50 mL藥液備用。

表1 供試藥劑

1.1.3 試驗器具

電子天平、量筒、移液器、燒杯、容量瓶、浸蟲籠、計時器、培養(yǎng)皿、多孔飼養(yǎng)盒、濾紙、人工氣候箱等。

1.1.4 試驗及調(diào)查方法

采用浸蟲法[18]測定化學(xué)農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥及微生物農(nóng)藥300億孢子/g球孢白僵菌的室內(nèi)殺蟲活性。選取發(fā)育整齊的3齡幼蟲，使用浸蟲籠在配制好的藥液中浸漬10 s后取出，用干凈濾紙吸去多余藥液，自然晾干后放入多孔飼養(yǎng)盒中用新鮮甜玉米葉片飼養(yǎng)；以清水處理為對照(CK1)。采用浸葉法[19]測定微生物農(nóng)藥20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑及8000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑對草地貪夜蛾幼蟲的室內(nèi)毒殺效果。將苗期新鮮甜玉米葉片剪為10 cm長葉段，在配制好的藥液中浸漬10 s后取出，自然晾干后置于放有保濕濾紙的9 cm培養(yǎng)皿中，選 取發(fā)育整齊的3齡幼蟲，饑餓處理4 h后放入培養(yǎng)皿中飼養(yǎng)；以清水處理為對照(CK2)。上述每處理各18頭幼蟲，重復(fù)4次。對照及微生物農(nóng)藥處理后1～5天，其他藥劑處理后1～3天，每天檢查幼蟲存活狀態(tài)，以毛筆輕觸幼蟲體表，無反應(yīng)判定為死亡，記錄死亡蟲數(shù)，計算死亡率。

1.1.5 數(shù)據(jù)分析

參照以下公式計算死亡率：

死亡率=死亡蟲數(shù)/處理總蟲數(shù)×100%

所有數(shù)據(jù)使用Excel整理后，使用SPSS 18.0對不同藥劑處理后的草地貪夜蛾死亡率進行統(tǒng)計分析，采用Duncan氏新復(fù)極差法進行多重比較和差異顯著性分析。

1.2 田間防效試驗

1.2.1 供試藥劑

選取室內(nèi)殺蟲效果較好的藥劑分A、B兩組開展田間防效試驗，A組藥劑為60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%四氯蟲酰胺懸浮劑；B組藥劑為5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑、20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑、4.5%高效氯氰菊酯乳油。

1.2.2 試驗田塊

試驗在廣東省廣州市南沙區(qū)萬頃沙鎮(zhèn)十四涌附近(22°38′0.24″N，113°36′7.58″E) 2塊植期不同的春玉米田塊開展，試驗地地勢平坦，水肥管理正常。所種玉米品種均為金百甜15號，試驗時玉米均處于苗期，行距80 cm，株距25 cm。植期較早田塊開展A組藥劑試驗，植期較晚田塊開展B組藥劑試驗。

1.2.3 試驗設(shè)計

試驗不設(shè)小區(qū)，每種藥劑施藥面積800 m2。以莖葉噴霧方式施藥，藥液量450 kg/hm2。施藥時天氣多云，微風(fēng)。A組設(shè)60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑1500倍液、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液、10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液3個藥劑處理，以清水為對照，試驗時間為2020年4月1日，藥械為背負式電動噴霧器(農(nóng)家園3WBD-18L)。B組設(shè)20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑500倍液、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液、4.5%高效氯氰菊酯乳油600倍液3個藥劑處理，以清水為對照，試驗時間為2020年4月15日。藥械為背負式電動噴霧器(農(nóng)家園3WBD-18L)。

1.2.4 調(diào)查方法

施藥前調(diào)查蟲口基數(shù)，施藥后1、3、5、7、9天調(diào)查防治結(jié)果，每個處理調(diào)查田塊左上部、右上部、中間、左下部、右下部5處，每處按“W”形5點取樣法調(diào)查，每點連續(xù)調(diào)查20株，每處調(diào)查100株，記錄有蟲株數(shù)、蟲口數(shù)、蟲齡。計算蟲口減退率，根據(jù)蟲口減退率計算防治效果。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

參照以下公式計算蟲口減退率、防治效果：

蟲口減退率=(藥前活蟲數(shù)-藥后活蟲數(shù))/藥前活蟲數(shù)×100%

防治效果=(處理區(qū)蟲口減退率-對照區(qū)蟲口減退率)/(1-對照區(qū)蟲口減退率)×100%

1.2.6 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)使用Excel整理，計算蟲口減退率、防治效果。使用SPSS 18.0對不同藥劑的防效進行統(tǒng)計分析，采用Duncan氏新復(fù)極差法進行多重比較，顯著性水平P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對草地貪夜蛾幼蟲的室內(nèi)殺蟲活性

由表2可知，藥后1天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液和6000倍液殺蟲活性最高，幼蟲死亡率均為100.00%；其次為60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑750倍液，幼蟲死亡率為93.05%；200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑2000倍液和10%四氯蟲酰胺懸浮劑750倍液處理后，幼蟲死亡率均為86.11%；60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑1500倍液處理，幼蟲死亡率為79.17%；10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液處理，幼蟲死亡率為70.83%；200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液處理，幼蟲死亡率為61.11%；25 g/L溴氰菊酯乳油1000倍液處理，幼蟲死亡率為54.17%。

表2 7種化學(xué)農(nóng)藥和3種植物源農(nóng)藥對草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內(nèi)殺蟲活性

藥后2天，60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑750倍 液及1500倍液、10%四氯蟲酰胺懸浮劑750倍液及1500倍液、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑2000倍液的處理效果好，幼蟲死亡率分別為100.00%、100.00%、98.61%、97.22%、97.22%；其次為200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液處理，幼蟲死亡率為93.05%；0.5%印楝素乳油同樣對3齡幼蟲表現(xiàn)出較高的殺蟲活性，其200倍液和240倍液處理后的幼蟲死亡率分別為79.17%和65.28%，200倍液處理后的幼蟲死亡率顯著高于化學(xué)藥劑25 g/L溴氰菊酯乳油1000倍液和4.5%高效氯氰菊酯乳油667倍液處理(P＜0.05)。

藥后3天，10%四氯蟲酰胺懸浮劑750倍液及1500倍液、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑2000倍液及3000倍液的處理效果最好，幼蟲死亡率均達100.00%；其次為0.5%印楝素乳油200倍液及240倍液，處理后的幼蟲死亡率分別為81.94%和75.00%；25 g/L溴氰菊酯乳油1000倍液和4.5%高效氯氰菊酯乳油667倍液處理幼蟲死亡率仍較低，分別為62.50%和51.39%。20%呋蟲胺可溶粒劑、2.5%魚藤酮乳油和2%苦參堿水劑效果均很差，幼蟲死亡率最高僅27.78%。

3種微生物藥劑中以20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑500倍液殺蟲活性最高(見表3)，處理1天后幼蟲死亡率高達100.00%。300億孢子/克球孢白僵菌可濕性粉劑250倍液的殺蟲活性一般，藥后5天幼蟲死亡率為51.39%。8000 IU/μL蘇云金桿菌100倍液的效果較差，處理5天后的幼蟲死亡率僅為6.95%。

表3 3種微生物農(nóng)藥對草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內(nèi)殺蟲活性

2.2 不同藥劑對草地貪夜蛾幼蟲的田間防治效果

A組藥劑試驗結(jié)果表明，60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑1500倍液的速效性較好，藥后1天的防效為87.90%，顯著高于10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液與200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液處理后的79.82%和78.13%(P＜0.05)。藥后3天，3種藥劑的防效均有所上升，分別達98.53%、94.24%和94.84%。藥后5天，3種藥劑的防效均升至最高，分別為99.03%、96.41%和95.36%。藥后7天，3種藥劑的防效略有下降，至藥后9天，分別降低至91.57%、88.28%和86.90%，對草地貪夜蛾仍有較好防治效果見表4。

B組藥劑試驗結(jié)果表明，藥后1、3、5、7、9天，20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒500倍液和4.5%高效氯氰菊酯乳油600倍液對草地貪夜蛾幼蟲的田間防效均很高，分別為95.23%和88.21%、98.85%和95.28%、100.00%和98.62%、98.90%和99.08%、95.06%和88.58%。藥后1天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液對草地貪夜蛾表現(xiàn)出很好的防治效果，防效達92.59%；但藥后3天蟲量增加，防效迅速降低至20.80%，至藥后5天，其防效又上升至88.67%，但仍顯著低于20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒500倍液處理和4.5%高效氯氰菊酯乳油600倍液處理(P＜0.05)。藥后7天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液的防效上升到94.73%，3種藥劑間無顯著性差異(P＞0.05)。藥后9天，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液的防效下降到80.03%，在3種藥劑中最低(表4)。

表4 不同藥劑對草地貪夜蛾幼蟲的田間防治效果

續(xù)表4 不同藥劑對草地貪夜蛾幼蟲的田間防治效果

3 結(jié)論與討論

草地貪夜蛾發(fā)育速度快，在25℃條件下，幼蟲期僅14天左右[20]，3齡以后草地貪夜蛾取食量大增，短時間內(nèi)就可對寄主作物造成較大損失，同時對藥劑的抵抗力顯著增強，若防治不及時，很容易暴發(fā)成災(zāi)[16,21-22]。因此，生產(chǎn)上要加強蟲情測報，以蟲情測報為指導(dǎo)，抓住3齡前的關(guān)鍵時期用藥防治，而且要注意不同作用機理藥劑的輪替使用，以延緩抗藥性的產(chǎn)生。

氯蟲苯甲酰胺與四氯蟲酰胺同為雙酰胺類殺蟲劑，具有觸殺和胃毒作用[23-24]。本研究表明，在田間噴施200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3000倍液和10%四氯蟲酰胺懸浮劑1500倍液3天后的防效為94.24%～94.84%，9天后的防效為86.90%～88.28%，2種藥劑對入侵我國的草地貪夜蛾仍具有很好的殺蟲活性。Bolzan等[25]發(fā)現(xiàn)室內(nèi)篩選出的抗氯蟲苯甲酰胺(237倍)的草地貪夜蛾種群對同為雙酰胺類殺蟲劑的氟苯蟲酰胺的交互抗性高達42000倍。因此，在進行田間藥劑防治時，氯蟲苯甲酰胺與四氯蟲酰胺作為相同類型的藥劑應(yīng)避免連續(xù)使用以減緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生。

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡稱甲維鹽），具有超高效、低毒、低殘留的特點，對鱗翅目害蟲具有較好的胃毒、觸殺作用[26-27]。本文室內(nèi)及田間試驗均表明5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑對草地貪夜蛾幼蟲殺蟲速效性好，但在田間試驗中藥后3天防效迅速下降，隨后又逐漸升高。在田間藥效調(diào)查時發(fā)現(xiàn)，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑處理田塊藥后3天出現(xiàn)大量1齡幼蟲，表明施藥后仍有大量卵孵化。研究表明，甲維鹽對草地貪夜蛾卵的LC50值為12.67 mg/L[28]，而且在田間草地貪夜蛾的卵以表面覆蓋鱗毛的卵塊形式存在，故5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑3000倍液(16.67 mg.a.i./L)在田間難以起到較好的殺卵效果，使得藥后仍有大量卵孵化為幼蟲，藥后3天防效表現(xiàn)為突降，孵化的幼蟲取食噴藥葉片后死亡，隨后防效逐漸上升。因此，在卵高峰期使用甲維鹽時應(yīng)注意與殺卵活性較好的藥劑復(fù)配使用，如高效氯氟氰菊酯乳油、溴氰菊酯乳油、高效氯氰菊酯乳油等擬除蟲菊酯類藥劑均具有較好的殺卵活性[16,29-30]。本研究中，盡管在室內(nèi)4.5%高效氯氰菊酯乳油對草地貪夜蛾幼蟲殺蟲活性較低，但在田間試驗中，其防效較高，藥后9天仍高達88.58%，推測這可能是與在卵高峰期用藥有關(guān)。

草地貪夜蛾已在我國完成定殖，從長遠來看，對其防控還需樹立“公共植保，綠色植?！钡睦砟頪31]。微生物藥劑具有低毒、無殘留，對人、畜安全，對環(huán)境無污染的特點，是重要的害蟲綠色防控措施。本研究表明，無論是室內(nèi)生測還是田間試驗，20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒對草地貪夜蛾都表現(xiàn)出殺蟲活性高、速效性較好。其500倍液在室內(nèi)處理3齡幼蟲1天后，死亡率高達100%；田間噴施500倍液1天后的防效高達95.23%，施藥后9天的防效仍高達95.06%。其結(jié)果與魯艷輝等[32]、馮磊等[33]以甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑對草地貪夜蛾開展的試驗結(jié)果相近。

室內(nèi)外試驗結(jié)果表明，60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑、200 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%四氯蟲酰胺懸浮劑、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑、20億PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑對草地貪夜蛾幼蟲均有良好的防治效果，上述藥劑均可用于草地貪夜蛾的田間防控。