吳新華,盧勇國
(惠東縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心,廣東 惠州 516300)
黃瓜營養(yǎng)豐富,含有大量的水分和維生素A、維生素C,有美容作用,新鮮黃瓜中的丙醇二酸能夠抑制糖類轉(zhuǎn)化為脂肪,具有減肥和預(yù)防冠心病的作用[1]??税偻且环N廣譜內(nèi)吸殺蟲殺螨劑,它與膽堿酶的結(jié)合不可逆,毒性高[2]。根據(jù)《農(nóng)藥管理條例》及食品安全國家標準的規(guī)定,克百威禁止在蔬菜、瓜果上使用[3],在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查工作中會重點監(jiān)測克百威及其衍生物3-羥基克百威的殘留情況。目前,液相色譜法檢測蔬果中克百威及3-羥基克百威的檢測多使用NY/T 761-2008標準方法[4]。該標準方法檢測準確,特別適合對復(fù)雜基質(zhì)蔬菜樣品,對于基質(zhì)簡單、檢測農(nóng)藥種類少的檢測,其前處理可以進一步簡單優(yōu)化,以提高檢測效率。當前,QuEchERS快速處理樣品的方法比較常見,但其使用的吸附材料易對部分農(nóng)藥產(chǎn)生吸附,影響檢測準確性,同時其研究多需色譜質(zhì)譜聯(lián)用[5-10],基層檢測機構(gòu)較難實現(xiàn)。因此,結(jié)合現(xiàn)有設(shè)備、針對基質(zhì)較簡單的黃瓜樣品中克百威及其衍生物3-羥基克百威的篩查,研究操作簡單、溶劑損耗小、測定快速的液相色譜儀檢測方法具有重要意義。
儀器:液相色譜儀1260Ⅱ,美國安捷倫公司;柱后衍生儀Vector PCX,美國 Pickering 公司;高速勻漿機,德國艾卡;樣品粉碎機,德國飛利浦公司;
試劑:克百威、3-羥基克百威,1000.0μg/mL, 農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(天津);氫氧化鈉溶液、OPA試劑,美國 Pickering 公司;乙腈、甲醇,均為色譜純;水為一級水;黃瓜,市售。
取黃瓜,切塊,充分混勻,放入樣品粉碎機,制成待測樣。準確稱取 20.0 g 試樣置于離心管中,加入一定量克百威、3-羥基克百威標樣,加入氯化鈉 5 g,加入 40 mL 乙腈,18200 r/min 勻漿 2 min,然后 3000 r/min 離心 6 min,使乙腈相和水相分層。吸取分層后的上層清液 4 mL,在 60 ℃ 經(jīng)氮吹至近干,加入甲醇定容至 1 mL,過濾膜裝瓶待測。
色譜柱為ZORBAX Eclipse Plus C18USP L1 Analytical, 4.6 mm×250 mm;柱溫 42 ℃,進樣體積 10 μL;熒光檢測器,入射波長 330 nm,激發(fā)波長 465 nm;梯度洗脫條件 0 min,甲醇15%,2~8 min,甲醇25%,9 min,甲醇40%,10 min,甲醇45%,19~25 min,甲醇80%,26 min,甲醇15%、流量保持 1 mL/min。
柱后衍生條件同NY/T 761-2008標準,0.05 mol/L 氫氧化鈉溶液,流速 0.3 mL/min;OPA試劑,流速 0.3 mL/min;水解溫度 100 ℃;衍生溫度為室溫。
黃瓜提取液經(jīng)勻漿、離心后取上清液,氮吹、甲醇定容、過濾后裝瓶進樣,分析液相色譜圖(圖1)。發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)對目標物峰無影響,采用無農(nóng)藥殘留黃瓜制備基質(zhì)空白,配制標準曲線,避免基質(zhì)效應(yīng)。
圖1 2種氨基甲酸酯類農(nóng)藥色譜圖
在0.02~1 μg/mL 范圍內(nèi),使用黃瓜基質(zhì)液配制標準溶液,克百威、3-羥基克百威濃度對應(yīng)峰面積有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)R均大于0.999,以信噪比等于3對應(yīng)的目標化合物濃度作為方法的檢出限,得出方法檢出限分別為 0.008 μg/mL、0.01μg/mL(表1)。
表1 標準曲線
對黃瓜樣品添加3種不同濃度標準樣品,做3個平行樣,克百威、3-羥基克百威回收率為82.7%~98.2%,相對標準偏差RSD在1.7%~5.4%(表2)。結(jié)果表明,本方法符合檢測要求。
表2 回收率、相對標準偏差
參考NY/T761-2016蔬菜水果中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測方法,對黃瓜中克百威、3羥基克百威檢測前處理進行了優(yōu)化。結(jié)果表明,直接將提取液氮吹至近干,再用甲醇定容進樣檢測,液相色譜圖中目標物不受雜質(zhì)影響,整個過程步驟少,農(nóng)藥殘留損失少,回收率較好,且方法簡單。該方法回收率在82.7%~98.2%,相對標準偏差RSD在1.7%~5.4%,滿足定量檢測要求;適合基層檢測單位黃瓜中克百威及3羥基克百威的批量檢測工作。