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    miR-33a在急性心肌梗死患者血清中表達及意義

    2022-07-30 04:25:34張明明崔佳高偉趙明胡晴川呂彩霞王超
    中國老年學雜志 2022年14期
    關鍵詞:標志物炎性心肌

    張明明 崔佳 高偉 趙明 胡晴川 呂彩霞 王超

    (河北省人民醫(yī)院 1臨研中心,河北 石家莊 050051;2檢驗科;3老年病二科)

    急性心肌梗死(AMI)近年來在我國發(fā)病率不斷上升〔1〕。雖然對AMI診治已取得很大進展〔2~4〕,但治療效果仍不令人滿意。微小RNA(miR)是一類22個核苷酸左右的非編碼調控RNAs,可通過轉錄后水平調節(jié)其靶基因的轉錄而在多種疾病中發(fā)揮作用〔5,6〕。研究表明miR-33a可通過影響脂質代謝、促進炎癥因子合成分泌等多種機制參與動脈粥樣硬化發(fā)病,與冠心病、缺血性腦卒中有關〔7,8〕。也已證實脂代謝紊亂及炎性因子的異常在AMI進展中發(fā)揮了重要作用〔9,10〕,但miR-33a與AMI、脂代謝、炎癥狀態(tài)是否有關目前報道少見。本研究檢測AMI患者血清miR-33a的表達,分析miR-33a與血脂、炎性因子的關系。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 選取2018年1月至2019年12月于河北省人民醫(yī)院就診的AMI患者202例為研究組,均確診為AMI。入組標準:①缺血性胸痛病史;②有心電圖(ECG)、24 h動態(tài)心電圖(Holter)、冠狀動脈螺旋CT(CTA)或冠狀動脈造影等資料;③心肌壞死的血清心肌標志物濃度的動態(tài)改變;④病史完整,有AMI的分類、危險性評估、煙酒史、家族史。排除標準:①其他類型的冠心病患者;②合并惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病或應用激素、免疫調節(jié)藥物者;③引起胸痛的消化系統(tǒng)疾?。虎芑颊卟煌鈪⒓友芯炕虿慌浜险?。AMI組進一步分為非ST段抬高型AMI(NSTEMI)和ST段抬高型AMI(STEMI)組:STEMI 組153例,NSTEMI組49例。另外選取同期于河北省人民醫(yī)院體檢中心體檢的180例健康體檢者為對照組,本研究得到河北省人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準,取得入組者知情同意。

    1.2標本準備 入組者均取空腹靜脈血5 ml,于促凝管中室溫下靜置30 min,低速離心機1 760 r/min離心15 min,取血清置于Eppendoff管中,于-20℃保存。肝素抗凝管抽取靜脈血6 ml,即采即做。

    1.3實時熒光定量-聚合酶鏈反應(qRT-PCR)檢測血清miR-33a的表達 從血清中提取總RNA,鑒定濃度及純度后進行PCR。TaqMan實時定量PCR試劑盒為美國Applied Biosystems公司產品,按說明書操作。以U6為內參。miR-33a和U6的PCR引物序列由上海吉凱生物公司合成。miR-33a:正義鏈5′-ACTCGCCACTCTCGACTCAAG-3′,反義鏈5′-GACGGTGCCCGAGGCCAGAC-3′;U6:正義鏈5′-CTCGCTTCGGCAGCACA-3′,反義鏈5′-AACGCTTCACGAATT-TGCGT-3′。總反應體系共20 μl,PCR條件:95℃ 5 min,95℃ 30 s,60℃15 s,60℃15 s,40個循環(huán)。2-ΔΔCt法計算miR-33a的Ct值,以miR-33a的表達水平與U6水平的比值代表miR-33a的相對表達強度。

    1.4心肌標志物測定 美國Beckman Coulter公司的生化分析儀(Backman AU680型)檢測肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB),德國羅氏診斷公司的心臟標志物檢測儀(Cobas n232)檢測肌鈣蛋白(Tn)T水平。

    1.5血脂測定 以美國Beckman Coulter公司全自動生化分析流水線(PE自動樣本處理系統(tǒng)+Backman AU5821型生化分析儀)測定血清中總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血糖(GLU)水平。

    1.6炎性因子水平測定 使用德國SIEMENS公司全自動蛋白分析儀(BNⅡ system型)檢測血清C反應蛋白(CRP)水平。使用星童醫(yī)療技術有限公司的循環(huán)增強熒光分析儀(Pylon3D)檢測血清降鈣素原(PCT)水平。

    1.7統(tǒng)計學方法 采用SPSS25.0軟件進行t檢驗、單因素方差分析、χ2檢驗、Spearman相關分析。

    2 結 果

    2.1研究組與對照組一般情況比較 兩組性別、年齡、飲酒史無統(tǒng)計學差異(P>0.05);研究組吸煙史、陽性家族史比例均明顯高于對照組(P<0.01)。見表1。

    2.2STEMI組與NSTEMI組一般情況比較 兩組性別、年齡、飲酒史無統(tǒng)計學差異(P>0.05);STEMI組吸煙史比例明顯高于NSTEMI組,而陽性家族史比例明顯低于NSTEMI組(P<0.01)。見表1。

    2.3研究組與對照組血清miR-33a表達情況 研究組血清miR-33a的相對表達水平(0.942 7±0.284 3)明顯高于對照組(0.286 4±0.126 6,P<0.05)。STEMI組miR-33a水平(0.989 5±0.298 4)明顯高于NSTEMI組(0.796 5±0.167 2,P<0.05)。

    2.4研究組與對照組血清血脂水平比較 研究組TC、TG、LDL-C、GLU水平明顯高于對照組,而HDL-C水平明顯低于對照組(P<0.001)。見表2。

    表1 研究組和對照組及STEMI組和NSTEMI組一般情況比較

    2.5STEMI組與NSTEMI組血脂水平比較 NSTEMI組TG水平明顯高于STEMI組,而LDL-C水平明顯低于STEMI組(P<0.05)。見表2。

    2.6研究組與對照組血清心肌標志物及炎性因子水平比較 研究組CK、CK-MB、TnT、CRP、PCT水平均明顯高于對照組(P<0.001)。見表3。

    2.7STEMI組與NSTEMI組血清心肌標志物及炎性因子水平比較 STEMI組CK、CK-MB、TnT、CRP、PCT水平均明顯高于NSTEMI組(P<0.001)。見表3。

    2.8研究組血清miR-33a表達水平與血脂血糖相關性 研究組血清miR-33a表達水平與LDL-C正相關(r=0.630,P<0.05),與HDL-C負相關(r=-0.519,P<0.05);miR-33a表達水平與TC、TG、GLU水平無明顯相關性(r=0.068,P=0.336;r=-0.024,P=0.735,r=0.034,P=0.626)。

    2.9研究組血清miR-33a表達水平與心肌標志物、炎性因子指標的相關性 研究組血清miR-33a表達水平與CK、CK-MB、TnT、CRP、PCT水平呈正相關(r=0.618 1,0.616 8,0.516 9,0.540 2,0.636 6,均P<0.05)。

    表3 研究組和對照組及STEMI組和NSTEMI組血清心肌標志物及炎性因子水平比較

    3 討 論

    近年來AMI發(fā)病率逐年升高〔11〕,且發(fā)病年齡逐漸下降〔12〕,病因與高血壓、高脂血癥、高血糖、抽煙、運動量減少、超重肥胖人群比例增加有關〔13〕。心肌梗死分為STEMI與NSTEMI兩型,在發(fā)病、預后方面有較大差異〔14〕。脂類代謝異常是冠心病發(fā)生的重要原因之一,AMI患者血清TC、TG、LDL-C增高,而HDL-C降低〔15~18〕,本研究也證實了這一點。本研究結果與Yandrapalli等〔19〕研究一致。究其原因可能在于雖然兩者都是屬于由急性心肌缺血引起的急性冠脈綜合征(ACS),但兩者的誘因和發(fā)病機制不同。NSTEMI患者年齡更大,更多的合并高血壓,糖尿病等冠心病的危險因素,而糖尿病更容易引起脂類代謝異?!?0〕。而STEMI更多的是由于LDL-C升高,破壞浸潤血管壁,誘發(fā)血小板聚集〔21〕。

    心肌標志物的更新提高了心血管疾病的診斷水平〔22〕。本研究結果說明靈敏度特異度高的標志物對AMI診治有重要價值。研究發(fā)現(xiàn)炎癥作用在AMI進展中也發(fā)揮了重要作用〔23,24〕。Bielas等〔25〕認為CRP與AMI的預后關系密切;Lalem等〔26〕認為炎癥因子可通過調控miR-RNA在心血管疾病發(fā)生過程中發(fā)揮了作用;Reindl等〔27〕認為PCT與AMI患者,尤其與STEMI患者的心肌損傷及預后有關。

    研究發(fā)現(xiàn)AMI與脂代謝紊亂及炎性狀態(tài)有關,但具體機制尚未完全闡明〔18,23〕。miR-33是一種調節(jié)巨噬細胞膽固醇外流和高密度脂蛋白生物合成的miR,可增加HDL-C水平〔28〕;研究發(fā)現(xiàn)miR-33a與炎癥調控有關〔7〕。本研究說明血清miR-33a水平與心肌細胞損傷程度密切相關,提示miR-33a可能在AMI的進展過程中發(fā)揮重要作用,miR-33a可能具有誘導炎癥反應發(fā)生的作用。

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