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    幾丁寡糖對(duì)茶樹生長和品質(zhì)形成的影響

    2022-07-26 05:25:14陳凱毛小濤魏平慧程薪宇張群峰
    中國茶葉 2022年7期
    關(guān)鍵詞:寡糖鮮葉乙酰

    陳凱,毛小濤,魏平慧,程薪宇,張群峰

    1.上饒師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院上饒農(nóng)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新研究院,江西 上饒 334001;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所,浙江 杭州 310008

    幾丁寡糖(Chitooligosaccharide) 是幾丁質(zhì)(Chitin)降解后的產(chǎn)物,其聚合度為2~10。幾丁質(zhì)也被稱為甲殼素,是自然界中僅次于纖維素的第二豐富的可再生資源。它是N-乙酰-β-D-葡糖胺的同聚物,廣泛存在于節(jié)肢動(dòng)物(蝦、蟹)和昆蟲的外骨骼,以及真菌的細(xì)胞壁中,其分子量可達(dá)幾十萬至幾百萬道爾頓,是迄今為止發(fā)現(xiàn)的唯一的堿性多糖[1]。殼聚糖是甲殼素脫乙?;纬傻木€性黏多糖。

    幾丁寡糖水溶性及生物相容性優(yōu)異,易被生物機(jī)體吸收,具有獨(dú)特的生物活性,是一種天然綠色的葉面肥,被廣泛應(yīng)用于農(nóng)林畜牧、保健食品及生物醫(yī)藥等方面[2]。幾丁寡糖在農(nóng)業(yè)上應(yīng)用主要表現(xiàn)有調(diào)控植物生長發(fā)育、激活植物防御反應(yīng)、殺菌防病等功能,可以提高植物光合作用,促進(jìn)碳氮循環(huán),提高作物產(chǎn)量和品質(zhì),并提高作物的抗病性[3-5]。研究表明幾丁寡糖可以提高棉花、小麥、草莓等植物體內(nèi)的防御酶活性,增強(qiáng)這些植物對(duì)病蟲害的抗性[6-7]。噴施幾丁寡糖溶液后,梨、花生和菠菜等一系列農(nóng)作物的產(chǎn)量有很大的提高,同時(shí)品質(zhì)也得到了改善[5-7]。然而,幾丁寡糖對(duì)茶樹生長和品質(zhì)的影響研究還未見報(bào)道。

    作為一種聚糖,聚合度和乙酰度是影響幾丁寡糖生物活性的兩個(gè)主要變量。由于受制備和分離技術(shù)的限制,以往經(jīng)常使用復(fù)合結(jié)構(gòu)的幾丁寡糖混合物來研究其功能。因此,不清楚幾丁寡糖農(nóng)用生物活性的功能單元是幾糖,乙酰度多少,構(gòu)效關(guān)系作用機(jī)制更不清楚。近年來,單一聚合度和單一乙酰度幾丁寡糖的制備和分離取得了重要突破,為深入研究幾丁寡糖與其性質(zhì)的構(gòu)效關(guān)系提供了物質(zhì)基礎(chǔ)[8-10]。

    本研究采用不同質(zhì)量濃度的幾丁寡糖作為葉面肥噴施茶樹,探究其對(duì)茶樹生長發(fā)育和產(chǎn)量品質(zhì)的影響。研究相同聚合度、不同乙酰度的幾丁寡糖促進(jìn)茶葉生長機(jī)制,從而明確幾丁寡糖的乙酰度與其促進(jìn)茶葉生長活性之間的構(gòu)效關(guān)系。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    試驗(yàn)茶園位于江西上饒市廣信區(qū)皂頭鎮(zhèn),為地形平整、肥力均勻的丘陵茶園。試驗(yàn)地整體為東西長、南北窄的長方形。地內(nèi)共有南北向茶壟44 行,壟長13~15 m,壟寬與壟間距約60 cm。茶樹品種為龍井43,樹齡15年。試驗(yàn)采用區(qū)組設(shè)計(jì),設(shè)置4組不同乙酰度下2種不同質(zhì)量濃度的幾丁寡糖葉面肥噴施處理,分別為:空白對(duì)照組(CK)、乙酰度90%質(zhì)量濃度為3 mg/L 和15 mg/L的幾丁寡糖,編號(hào)Ⅰ-3、Ⅰ-15;乙酰度50%質(zhì)量濃度為3 mg/L 和15 mg/L 的幾丁寡糖,編號(hào)Ⅱ-3、Ⅱ-15;乙酰度10%質(zhì)量濃度為3 mg/L 和15 mg/L的幾丁寡糖,編號(hào)Ⅲ-3、Ⅲ-15。各處理間隔1 行茶樹作為隔離,每間隔6 d噴施1次,其中空白對(duì)照組噴施相同量的水,共噴施3次。

    研究中使用的相同聚合度不同乙酰度的幾丁寡糖均由中國科學(xué)院金屬研究所提供。

    1.2 葉綠素含量的測定

    取每組處理一芽一葉鮮葉0.2 g,剪成碎條放入10 mL塑料離心管中,用80%丙酮定容至刻度,于暗柜中靜置24 h[11],取上清液在波長663 nm、652 nm、646 nm 和470 nm 下測定吸光度[12],80%丙酮為空白對(duì)照。

    1.3 葉片光合參數(shù)的測定

    使用Li-6400xt 光合儀測定不同處理的茶樹葉片凈光合速率、蒸騰速率、熒光參數(shù)。光合參數(shù)和熒光參數(shù)測定在晴朗天氣上午9:00—12:00 進(jìn)行,使用紅藍(lán)光源,光強(qiáng)設(shè)置1 500μmol/m2·s,選擇第一片完全展開的葉片進(jìn)行,每個(gè)處理測定20片葉片。

    1.4 茶多酚含量和游離氨基酸總量的測定

    采摘各處理的一芽一葉鮮葉經(jīng)過90 ℃恒溫干燥12 h 后,分別采用國標(biāo)《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測方法》(GB/T 8313—2018)和《茶 游離氨基酸總量的測定》(GB/T 8314—2013)測定茶多酚含量和游離氨基酸總量。

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    利用Excel 2010 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,利用DPS14.5 與SPSS21.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 葉綠素及類胡蘿卜素含量

    由不同處理下的鮮葉葉綠素及類胡蘿卜素含量(表1)可以看出,施用不同乙酰度的幾丁寡糖對(duì)鮮葉產(chǎn)量無顯著影響,但對(duì)鮮葉葉綠素a、葉綠素b 和類胡蘿卜素的含量大都有提高作用。與對(duì)照相比,Ⅱ-15處理顯著增加了鮮葉中葉綠素a、葉綠素b 含量(P<0.05);乙酰度90%處理鮮葉葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量有所增加,但差異不顯著(P<0.05)。不同乙酰度處理相比,在乙酰度50%情況下,噴施質(zhì)量濃度15 mg/L的幾丁寡糖對(duì)增加鮮葉葉綠素含量的作用效果最好。

    表1 鮮葉中葉綠素及類胡蘿卜素含量

    2.2 葉片光合參數(shù)

    從不同處理對(duì)茶樹葉片光合參數(shù)影響(圖1)中可見,相比對(duì)照組,不同處理均增加了茶葉凈光合速率,Ⅰ-15和Ⅲ-3處理顯著增加葉片凈光合速率。Ⅲ-15 處理顯著增加了葉片氣孔導(dǎo)度(P<0.05)。Ⅰ-3處理顯著增加了葉片胞間CO2濃度。Ⅱ-3、Ⅱ-15、Ⅲ-3 等3 個(gè)處理均極顯著降低了葉片蒸騰速率(P<0.01),Ⅲ-15 處理顯著降低了葉片蒸騰速率(P<0.05)。

    圖1 不同處理對(duì)葉片光合參數(shù)的影響

    從不同處理對(duì)茶樹葉片熒光參數(shù)的影響(圖2)可以看出,噴施幾丁寡糖處理可以顯著增加茶葉光系統(tǒng)的有效化學(xué)量子產(chǎn)量,但對(duì)光化學(xué)淬滅效率的影響不明顯。Ⅱ-15、Ⅲ-3、Ⅲ-15 處理顯著降低了非光化學(xué)淬滅效率(P<0.05)。Ⅲ-3處理顯著提高了葉片光合電子傳遞速率(P<0.05)。

    圖2 不同處理對(duì)葉片熒光參數(shù)的影響

    2.3 茶多酚含量和游離氨基酸總量

    由茶多酚、氨基酸含量檢測結(jié)果(表2)可見,與對(duì)照組相比,各處理茶葉中茶多酚含量均有不同程度的提高,其中,Ⅲ-15處理茶多酚含量增加最多。

    表2 茶多酚含量和游離氨基酸總量檢測結(jié)果 %

    與對(duì)照組相比,各處理茶葉中氨基酸總量均有不同程度的增加,Ⅱ-3處理氨基酸總量增幅最大。

    3 小結(jié)與討論

    當(dāng)前,我國茶葉產(chǎn)業(yè)已成為農(nóng)民增收的支柱產(chǎn)業(yè)和助力中西部欠發(fā)達(dá)地區(qū)鄉(xiāng)村振興的重要產(chǎn)業(yè),但在茶葉種植面積不斷擴(kuò)大,產(chǎn)能相對(duì)過剩的情況下,提質(zhì)增效是茶葉產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵技術(shù)需求。長期以來,為了提高茶葉產(chǎn)量和維持新梢氨基酸含量,茶園氮肥施用量逐年增加,施肥過量帶來嚴(yán)重的生態(tài)環(huán)境惡化、農(nóng)業(yè)面源污染等問題。因此,綠色發(fā)展成為當(dāng)前我國茶葉產(chǎn)業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展的必然選擇。

    幾丁寡糖作為一種聚糖,明確其乙酰度與其促進(jìn)茶葉生長活性之間的構(gòu)效關(guān)系有助于進(jìn)一步明確其作用機(jī)理,并在生產(chǎn)中提高應(yīng)用效率。本試驗(yàn)采用的幾丁寡糖是從蝦蟹殼中提取的天然刺激素,可作為一種綠色安全的葉面肥。通過葉面噴施不同乙酰度的幾丁寡糖來研究不同結(jié)構(gòu)的幾丁寡糖對(duì)茶樹生長的影響,據(jù)試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn),不同結(jié)構(gòu)的幾丁寡糖對(duì)茶葉品質(zhì)成分的影響作用具有顯著的差異,其中質(zhì)量濃度15 mg/L 50%乙酰度處理提高葉綠素含量的效果最好,15 mg/L 10%乙酰度處理茶多酚提高的效果最明顯,3 mg/L 50%乙酰度處理氨基酸含量增加最明顯。此外,在實(shí)際運(yùn)用中所使用的幾丁寡糖質(zhì)量濃度極低,最大僅為15 mg/L,不僅安全性更有保障,也具有極高的經(jīng)濟(jì)效益。在生產(chǎn)中,可根據(jù)茶葉實(shí)際需求,有目標(biāo)性地選擇不同乙酰度的幾丁寡糖,針對(duì)性地靶向調(diào)節(jié)茶葉新梢中品質(zhì)成分的含量。

    綜上,幾丁寡糖應(yīng)用于茶葉生產(chǎn)具有較好的品質(zhì)改善效果,可以專一性調(diào)控茶葉特定品質(zhì)成分含量,施用濃度極低、成本低、效益高,具有廣泛的應(yīng)用前景。

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