日照市種豬場(chǎng)偽狂犬凈化監(jiān)測(cè)情況分析

文│韓永平（山東省日照市五蓮縣畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心于里畜牧獸醫(yī)站）

韓勇*（山東省日照市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

為了解山東省日照市豬偽狂犬病的流行狀況，更好地開展豬偽狂犬病凈化工作，在2017—2021年選擇4個(gè)種豬場(chǎng)連續(xù)5年采集1000份血清進(jìn)行豬偽狂犬病檢測(cè)。結(jié)果顯示，2017—2021年4個(gè)種豬場(chǎng)偽狂犬群體陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率總體呈下降趨勢(shì)，但個(gè)別原種和父母代豬場(chǎng)陽(yáng)性率依然較高，需進(jìn)一步加大凈化力度。

豬偽狂犬病毒可引起豬多種急性傳染病，以發(fā)熱和腦脊髓炎為主要特征，新生仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，妊娠母豬表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等癥狀?？刹捎秘i偽狂犬gE抗體ELISA試驗(yàn)檢測(cè)豬偽狂犬感染情況。

目前豬偽狂犬病已成為危害全球養(yǎng)豬業(yè)最大的傳染病之一，既可水平傳播，也可垂直傳播，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的危害和經(jīng)濟(jì)損失。自非洲豬瘟在我國(guó)發(fā)生以來(lái)，種豬已成為當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)的稀缺資源，做好豬病防控，對(duì)主要豬病開展凈化，提高豬群健康水平是種豬場(chǎng)亟需解決的問(wèn)題。

日照市種豬品種較多，既有國(guó)外引進(jìn)的大白、長(zhǎng)白等瘦肉型品種，又有地方優(yōu)良品種五蓮黑豬。大白、長(zhǎng)白等品種引入國(guó)內(nèi)由于飼養(yǎng)環(huán)境、凈化技術(shù)等原因，PRV感染不容樂(lè)觀。五蓮黑豬是日照市的優(yōu)良地方豬種，因原產(chǎn)于日照市五蓮縣而得名，1975年命名為五蓮黑豬，屬肉脂兼用型。五蓮黑豬具有耐粗飼、繁殖力高、抗病力強(qiáng)、肉質(zhì)好、雜交優(yōu)勢(shì)明顯等特點(diǎn)。五蓮黑豬作為地方豬種先后被列入1999年10月出版的《山東省畜禽品種志》，2010年5月入選山東省畜牧獸醫(yī)局公布的《山東省畜禽遺傳資源保護(hù)名錄》。二十世紀(jì)八、九十年代，由于外來(lái)品種的引進(jìn)和雜交改良，五蓮黑豬感染PRV的病例逐漸增多，凈化工作刻不容緩。為了解日照市種豬場(chǎng)偽狂犬的流行狀況，2017—2021年選擇4個(gè)種豬場(chǎng)連續(xù)開展流行病學(xué)調(diào)查工作。

一、材料與方法

1.抽檢方法。群內(nèi)采用流行病學(xué)抽樣方式，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)考慮檢測(cè)方法的敏感性，即檢測(cè)到陽(yáng)性動(dòng)物，按照中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心設(shè)計(jì)Epi Sampling Calculator軟件，以估計(jì)流行率的抽樣方法進(jìn)行抽樣監(jiān)測(cè)，抽樣樣本量計(jì)算公式為：

其中n為抽樣個(gè)數(shù)，CL為置信水平，D為群中的陽(yáng)性動(dòng)物數(shù)（等于群內(nèi)個(gè)體數(shù)與預(yù)定流行率的乘積），N為群內(nèi)個(gè)體數(shù)，Se為檢測(cè)方法的敏感性。

原種場(chǎng)按照置信水平95%，預(yù)期流行率2%，每次采樣不少于100份。父母代場(chǎng)按照置信水平95%，預(yù)期流行率5%，每次采樣不少于50份。樣品來(lái)源于每個(gè)種豬場(chǎng)不少于4棟豬舍的豬，種公豬、育成豬和后備豬要兼顧一定比例。其中大白、長(zhǎng)白、五蓮黑豬原種場(chǎng)各1個(gè)，大白、長(zhǎng)白父母代場(chǎng)2個(gè)。每次采集血清200份，采集情況詳見(jiàn)表1。

表1 日照市種豬場(chǎng)采樣情況

2.樣品采樣和處理方法。用促凝血管采集全血2毫升，室溫靜置30分鐘以上，待析出血清后，3000轉(zhuǎn)/分，離心3～5分鐘，將0.5毫升血清放置于1.5毫升離心管內(nèi)，做好編號(hào)。

3.檢測(cè)試劑與儀器。豬偽狂犬病毒gE抗體ELISA試劑盒購(gòu)自武漢科前公司，生物安全柜購(gòu)自新西蘭公司，超純水純化系統(tǒng)（Cascada）購(gòu)自美國(guó)PALL公司，移液器購(gòu)自Eppendorf公司，酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)MD公司，離心機(jī)購(gòu)自Sigma公司。

4.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。采集的血清進(jìn)行豬偽狂犬抗體病毒ELISA試驗(yàn)，檢測(cè)PRV-gE抗體陽(yáng)性率，操作方法按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

二、結(jié)果與分析

1.監(jiān)測(cè)總體情況。2017—2021年，對(duì)4個(gè)種豬場(chǎng)開展連續(xù)監(jiān)測(cè)，共檢測(cè)血清樣品1000份。結(jié)果顯示，經(jīng)過(guò)多年的監(jiān)測(cè)凈化，豬偽狂犬總體感染率呈明顯下降趨勢(shì)，但個(gè)別原種和父母代豬場(chǎng)陽(yáng)性率仍較高，需繼續(xù)凈化。

2.不同年份豬偽狂犬檢測(cè)情況。對(duì)2017—2021年監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，2017—2021年全市檢測(cè)場(chǎng)點(diǎn)20個(gè)次，檢測(cè)樣品1000份次，豬偽狂犬個(gè)體陽(yáng)性率和群體陽(yáng)性率總體呈下降趨勢(shì)（見(jiàn)表2，表3，圖1）。

表2 2017—2021年豬偽狂犬群體陽(yáng)性情況

表3 2017—2021年豬偽狂犬樣品陽(yáng)性情況

3.五蓮黑豬和長(zhǎng)白大白豬感染情況。對(duì)全市4個(gè)場(chǎng)多年連續(xù)檢測(cè)顯示，五蓮黑豬偽狂犬的群體陽(yáng)性率和個(gè)體樣品率均較高，凈化任務(wù)依然艱巨。

三、討論

1.豬偽狂犬病呈現(xiàn)典型的潛伏感染。任何年齡段的豬感染PRV后均能形成潛伏感染，感染PRV的豬終身帶毒。在一定條件下，PRV病毒可以被激活，引起隱性豬的復(fù)發(fā)性感染和散毒。袁淑萍等在2017—2019年對(duì)河南省1384個(gè)場(chǎng)次的41755份豬血清進(jìn)行g(shù)E抗體檢測(cè)，gE抗體平均個(gè)體陽(yáng)性率和場(chǎng)群陽(yáng)性率分別為26.99%和52.53%。其中，種豬場(chǎng)gE抗體平均個(gè)體陽(yáng)性率和場(chǎng)群陽(yáng)性率分別21.81%、0.92%。

豬偽狂犬病除可水平傳播外還可垂直傳播，其中垂直傳播方式隨著種群繁育會(huì)造成病原擴(kuò)散、危害擴(kuò)大的繼代效應(yīng)。因此，從種豬場(chǎng)開展凈化顯得尤為重要。2017—2021年44個(gè)種豬場(chǎng)檢測(cè)顯示，偽狂犬總體感染率呈明顯下降趨勢(shì)，但個(gè)別原種和父母代豬場(chǎng)陽(yáng)性率仍較高，仍需繼續(xù)堅(jiān)持凈化。

養(yǎng)豬場(chǎng)要從《種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)許可證》的種豬場(chǎng)引種，國(guó)外引進(jìn)種豬應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定，優(yōu)先從獲得農(nóng)業(yè)部?jī)艋u(píng)估認(rèn)證的種豬場(chǎng)引種。對(duì)引進(jìn)豬做好抽檢，由具備資質(zhì)的第三方實(shí)驗(yàn)室出具檢測(cè)報(bào)告。

2.為了解豬場(chǎng)豬偽狂犬感染情況，科學(xué)抽樣很關(guān)鍵。本研究采用流行病學(xué)方式進(jìn)行群內(nèi)抽樣，采樣科學(xué)，在一定程度上能反應(yīng)支原體的感染狀況。但由于時(shí)間物力等原因，僅選取4個(gè)種豬場(chǎng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，數(shù)量相對(duì)較少，因此，陽(yáng)性感染率需擴(kuò)大抽樣群體。另外，由于原種場(chǎng)陽(yáng)性率較低，僅采樣100份，數(shù)量相對(duì)較少，不能最大限度的反映感染情況。

四、總結(jié)

從本次持續(xù)監(jiān)測(cè)看,五蓮黑豬這一優(yōu)良地方品種在日照市雖然進(jìn)行了很好地保種，但防控措施不到位，導(dǎo)致五蓮黑豬偽狂犬的感染率仍較高。另外，檢測(cè)結(jié)果顯示，日照市大白、長(zhǎng)白等引進(jìn)種豬偽狂犬感染率也較高。因此，下一步要把豬偽狂犬病作為豬場(chǎng)凈化的主要病種加以重視。

自2014年以來(lái)，日照市在全市大力開展種豬場(chǎng)主要垂直傳播疫病凈化工作，制定適合的凈化方案，開展豬偽狂犬、豬瘟等垂直傳播疫病凈化關(guān)鍵技術(shù)研究。經(jīng)過(guò)多年的監(jiān)測(cè)凈化，豬偽狂犬等疫病的群體陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率不斷下降，凈化成效明顯。下一步要繼續(xù)加大凈化力度，推動(dòng)豬偽狂犬病從源頭上得到凈化。