手足口病繼發(fā)細菌感染患兒病原菌分析及血炎性指標水平

王 玥，吳紅章，郄春花，李津君，孟 超 (天津市第二人民醫(yī)院檢驗科，天津 300192)

手足口病屬于丙類傳染病，嬰幼兒和兒童均為易感人群，其中5歲以下兒童感染率高，以柯薩奇病毒A組16型和腸道病毒71型感染最為常見[1]。潛伏期平均3～5 d，發(fā)熱伴有手、足、口腔等部位的斑丘疹或丘疹為主要特征表現(xiàn)，可有流涕和食欲不振等癥狀。一般7 d內(nèi)痊愈，大多數(shù)預(yù)后良好，少數(shù)累及神經(jīng)系統(tǒng)引起嚴重并發(fā)癥，部分手足口病患兒可在治療期間發(fā)生腦膜炎、心肌炎等感染。有關(guān)研究表明，白細胞(WBC)、中性粒細胞(NEUT)、血清C-反應(yīng)蛋白(CRP)和降鈣素原(PCT)等[2-3]與炎性反應(yīng)密切相關(guān)，被廣泛用于感染疾病檢測。感染性疾病診斷的金標準是病原菌分離培養(yǎng)，早期進行感染診斷，可降低疾病治療難度[4]。本研究旨在探討手足口病繼發(fā)細菌感染患兒的病原菌分布及WBC、NEUT、CRP和PCT炎性指標水平，為患兒的診療提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1資料來源：選取2016年～2020年我院收治的625例手足口病患兒，所有患兒均符合《手足口病診療指南(2018年版)》[1]。納入標準：①進行血清學(xué)檢測及病原體培養(yǎng)，確診有無細菌感染；②年齡<14歲；③病史資料完整。排除標準：①患兒入院前接受過免疫抑制劑或增強劑治療；②患有先天性心臟病、免疫缺陷疾病及肝、腎重要臟器功能不全患兒；③入院前就存在的感染，患兒入院時存在明確潛伏期的感染。

無菌操作采集患兒的呼吸道分泌物、黏膜分泌物及血、尿標本，剔除同一患兒一周內(nèi)相同部位培養(yǎng)出的相同菌株。根據(jù)患兒菌株培養(yǎng)結(jié)果,將其分別納入無感染組574例和繼發(fā)感染組51例，兩組患兒基本資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患兒基本資料比較(n)

1.2方法

1.2.1病原菌分離鑒定及耐藥性試驗：患兒培養(yǎng)標本接種于羊血平板、苯甲醇羊血平板、麥康凱平板及沙保羅平板進行孵育培養(yǎng)，血液注入血培養(yǎng)瓶35 ℃孵育。分離出的病原菌采用布魯克MADL質(zhì)譜鑒定儀、碧迪鳳凰M50全自動藥敏分析儀進行鑒定和體外藥敏實驗。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、銅綠假單胞菌ATCC 27853和金黃色葡萄球菌ATCC 29213?？股孛舾行耘卸ò碈LSI指南進行。

1.2.2外周血炎性因子檢測：入院后應(yīng)用抗菌藥物治療前采集患兒外周靜脈血，WBC、NEUT檢測采用希思美康XN-2800全自動五分類血液分析儀進行分析；CRP使用普門特定蛋白分析儀PA-990檢測，采用散射比濁法。血標本經(jīng)4 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，取血清進行PCT檢測，采用安圖A2000Plus全自動免疫分析儀進行檢測。

1.3觀察指標：觀察手足口病繼發(fā)細菌感染病原菌分布和藥敏結(jié)果，比較兩組患兒血清中WBC、NEUT、CRP和PCT水平。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS22.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料用[n(%)]表示，采用χ2檢驗；計量資料為非正態(tài)分布，選用四分位數(shù)間距、中位數(shù)(P25～P75)描述，兩組樣本比較采用Mann-WhitneyU檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1病原菌組成及標本分布：繼發(fā)感染組共分離出菌株55株，革蘭陰性桿菌27株(49.1%)，革蘭陽性球菌26株(47.3%)，真菌2株(3.6%)。以金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌為主。見表2。

表2 手足口病患兒繼發(fā)感染病原菌分布及構(gòu)成比

2.2主要病原菌耐藥情況：大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類藥物敏感，陰溝腸桿菌對頭孢唑林耐藥性高達75%，鮑曼不動桿菌對呋喃妥因耐藥率高。見表3。葡萄球菌屬對芐青霉素和紅霉素耐藥率高。見表4。

表3 主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

表4 主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

2.3兩組患兒相關(guān)炎性指標比較：手足口病繼發(fā)細菌感染組中，WBC、NEUT、CRP和PCT高于手足口病無繼發(fā)感染組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

表5 兩組患兒相關(guān)炎性指標對比

3 討論

手足口病是腸道病毒引起的全球性疾病，我國各地每年都有發(fā)生[5-7]，發(fā)病率為37/10萬～205/10萬，病死率在6/10萬～51/10萬之間[1]，重癥手足口病患兒可出現(xiàn)心肺功能衰竭、呼吸道感染、腦膜炎等嚴重并發(fā)癥[8]。研究發(fā)現(xiàn)，手足口病患兒的IgA和IgG水平相對較低，提示患兒免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，容易患有感染性疾病[9]，同時呼吸機使用和胃管插管等操作會增加感染概率。手足口病患兒機體內(nèi)感染灶致病菌，可通過血行播散至鼻咽部細胞,進而可轉(zhuǎn)送至腦膜屏障,使腦膜遭受細菌侵襲，并發(fā)細菌性腦膜炎，因此應(yīng)當高度重視患兒出現(xiàn)的感染癥狀[10]。

我院手足口病患兒繼發(fā)細菌感染率為8.2%(51/625),文獻報道的重癥手足口病繼發(fā)細菌感染率為21.1%～48.3%[11-14]，這可能與研究對象不同有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，手足口病繼發(fā)細菌感染的部位有呼吸道、皮膚、血液和泌尿道等，呼吸道感染占比最高，其次是皮膚感染和血液感染。分析原因，手足口病患者以兒童為主，低免疫力以及呼吸機的使用，導(dǎo)致呼吸道容易被空氣中病原微生物侵襲感染。皮膚分泌物感染率高的原因是，患兒多伴有手、足和口腔等小潰瘍或小皰疹，破潰易發(fā)生感染。

我院手足口病患兒繼發(fā)細菌感染的最主要病原菌為金黃色葡萄球菌，金黃色葡萄球菌存在于皮膚、呼吸道和消化道等部位，第三代頭孢菌素的廣泛使用使得凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率增多，耐藥性增高。研究結(jié)果顯示，革蘭陽性菌對萬古霉素保持敏感，耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌占8.3%。革蘭陰性菌以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主，是超廣譜β內(nèi)酰胺酶代表菌，在臨床檢出率逐年增加。體外藥敏試驗顯示，大腸桿菌對第三代頭孢呈現(xiàn)中度耐藥，與產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生有關(guān)，對碳青霉烯類藥物保持敏感。目前對手足口病繼發(fā)細菌感染，以相關(guān)病原體培養(yǎng)為診斷金標準，但是具有耗時長的缺點，期望能找到血清指標進行早期輔助診斷。PCT是由甲狀腺C細胞分泌產(chǎn)生的糖蛋白，是降鈣素的前體肽，正常狀態(tài)下含量極少。1993年Assicot等[15]首次提出，機體感染細菌時，細胞因子的釋放使PCT升高；相反，發(fā)生病毒感染時，γ干擾素的釋放使PCT的產(chǎn)生減少。嚴重細菌感染時，血清PCT特異性升高，一般在感染2～3 h后即可升高，6 h后急劇上升，24 h后血清濃度達到穩(wěn)定，對細菌感染具有早期診斷價值[16]。許多學(xué)者認為血清PCT是細菌感染的標志物，可作為兒童細菌性感染疾病的診斷指標[17]。CRP是常見的急性時相蛋白，對體液免疫的發(fā)動有重要意義。當人體機體內(nèi)出現(xiàn)炎癥時，CRP則會急劇上升，巨噬細胞釋放白細胞介素，刺激肝細胞合成CRP[18]，目前已被廣泛應(yīng)用于感染性疾病的早期診斷[19]。本研究結(jié)果顯示，繼發(fā)感染組血清WBC、NEUT、CRP和PCT水平均高于未感染組，提示血清WBC、NEUT、CRP和PCT的水平可判斷手足口病患兒是否繼發(fā)細菌感染，為醫(yī)師早期結(jié)合臨床表現(xiàn)及時進行感染診斷并準確抗感染治療提供依據(jù)，這與國內(nèi)相關(guān)研究[20]結(jié)果類似。

綜上所述，目前我院手足口病繼發(fā)細菌感染病原菌以金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌為主，且感染患兒血清WBC、NEUT、CRP和PCT水平明顯升高。臨床早期發(fā)現(xiàn)潛在的細菌感染性，參照藥敏試驗結(jié)果予以規(guī)范的抗生素治療，對減少耐藥菌產(chǎn)生、改善患兒整體預(yù)后非常重要。