食管癌患者血清中VEGF、Bcl-2表達(dá)及與放療敏感性的相關(guān)性

陳美玲 劉儒鵬 楊 軍 馮婷婷 梅志宏 李 寧

食管癌(esophageal carcinoma，EC)臨床確診時多數(shù)已處于局部進(jìn)展期或已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移，外科手術(shù)治療不佳，因而放療成為主要治療手段。但臨床研究發(fā)現(xiàn)，即使腫瘤類型、病理分級等相同，癌癥患者放射治療效果仍存在較大差異，即放射敏感性有所差異[1]。因而在臨床放療前預(yù)測放療敏感性對臨床治療方案的調(diào)整具有重要的意義。惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中伴隨著血管生成、基因突變及細(xì)胞凋亡等，且大量的細(xì)胞因子及蛋白類物質(zhì)參與其中，因而觀察相關(guān)指標(biāo)的變化可一定程度上體現(xiàn)放療敏感性。而血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是影響血管生成的重要因子，參與腫瘤淋巴管的生成[2]；B細(xì)胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma 2，Bcl-2)是抗細(xì)胞凋亡的重要基因，可促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[3]。由此推測，血清VEGF、Bcl-2水平可能與EC患者放療敏感性具有一定的關(guān)系。鑒于此，本研究旨在探討EC患者血清VEGF、Bcl-2水平與放療敏感性的相關(guān)性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會審批，選取2017年4月至2020年4月新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的100例EC患者為研究對象，均簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《內(nèi)科學(xué)(第八版)》[4]中EC相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；②均行放射治療；③預(yù)計生存時間>3個月；④美國東部腫瘤協(xié)作組(Estem cooperative oncology group，ECOG，ECOG)[5]<3分。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有食管穿孔的患者；②伴有損害免疫功能的慢性疾病的患者；③伴有嚴(yán)重性肝腎功能損傷的患者。

1.2 治療方法

參照《中國食管癌放射治療指南(2019年版)》[6]進(jìn)行放射治療，具體方案：患者取仰臥位，利用熱塑體膜或頭頸肩膜對其體位進(jìn)行固定，采用CT機(西門子，Volume Zoom型)對患者的主要腫瘤靶區(qū)進(jìn)行掃描，層厚5 mm，結(jié)合CT定位圖像，在治療計劃系統(tǒng)中勾畫出大體腫瘤體積，鄰近危及器官(包括脊髓、肺、心臟等)，確定臨床靶體積、計劃靶體積，確定治療方案后，采用6MV X線，處方劑量為57.5～70 Gy，中位數(shù)為60 Gy,2.0～2.5 Gy/次，5次/周，連續(xù)治療4周。

1.3 觀察指標(biāo)

放療前于清晨采集患者空腹肘靜脈血3 ml，以3000 r/min速度離心10 min，離心半徑為10 cm，取上層清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測血清VEGF、Bcl-2水平，試劑盒選自上海潤裕生物科技有限公司。

1.4 敏感性評定

治療4周后，參照WTO的RECIST[7]標(biāo)準(zhǔn)評估療效：①完全緩解(complete response，CR)：靶區(qū)病灶消失，且持續(xù)時間>4周；②部分緩解(partial response，PR)：病灶最大直徑之和縮小≥50%，且持續(xù)時間>4周；③疾病穩(wěn)定(stable disease，SD)：介于PR與PD之間；④疾病進(jìn)展(progressive disease，PD)：病灶最大徑之和增大>25%或出現(xiàn)新病灶。將CR+PR歸為放療敏感組，SD+PD歸為放療不敏感組。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 放療敏感性情況

100例EC患者經(jīng)放療后，CR 4例，PR 62例，SD 22例，PD 12例。放療敏感66例，占66.00%(66/100)；不敏感34例，占34.00%(34/100)。

2.2 放療敏感性不同患者基本情況、實驗室相關(guān)指標(biāo)檢查結(jié)果比較

不敏感組血清VEGF、Bcl-2水平高于敏感組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；組間其他資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 放療敏感性不同患者基本情況、實驗室相關(guān)指標(biāo)檢查結(jié)果比較

2.3 EC患者血清VEGF、Bcl-2水平與放療敏感性關(guān)系的Logistic回歸分析

將EC患者放療敏感性情況作為因變量(1=不敏感，0=敏感)，將EC患者放療前血清VEGF、Bcl-2水平作為自變量，經(jīng)Logistics回歸分析結(jié)果顯示，血清VEGF、Bcl-2高表達(dá)與EC患者放療敏感性有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 EC患者血清VEGF、Bcl-2水平與放療敏感性關(guān)系的Logistic回歸分析結(jié)果

2.4 EC患者血清VEGF與Bcl-2水平相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，EC患者血清VEGF與Bcl-2水平呈正相關(guān)(γ=0.484，P<0.001)。散點圖見圖1。

圖1 EC患者血清VEGF與Bcl-2的相關(guān)性

3 討論

EC患者在發(fā)病早期多伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因而大部分患者需接受放射治療，但癌細(xì)胞的放射抗拒性可降低放療敏感性，導(dǎo)致臨床治療失敗。因而有效評估EC患者放療敏感性具有重要意義。

目前，癌細(xì)胞的放射抗拒性的具體機制尚不明確，但惡性腫瘤在生長、轉(zhuǎn)移過程中伴隨著新生血管的生成，血管生成因子的大量表達(dá)可影響臨床療效，因而觀察相關(guān)血管生成因子的變化可一定程度上提示放療的敏感性。此外，細(xì)胞凋亡在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及在其產(chǎn)生耐藥中發(fā)揮著重要作用，其相關(guān)指標(biāo)也可提示放療的敏感性。本研究中，放療敏感性為66.00%，且不敏感組血清VEGF、Bcl-2水平高于敏感組，分析其原因可能是，VEGF是腫瘤血管生成因子，可直接刺激內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖，直接參與誘導(dǎo)腫瘤血管生成，在多種腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要的作用，其水平的高表達(dá)提示腫瘤持續(xù)性生長，且發(fā)生轉(zhuǎn)移的風(fēng)險較高，因而臨床療效相對較差，患者表現(xiàn)出對放療不敏感或者抵抗，甚至出現(xiàn)腫瘤進(jìn)展[8]。Bcl-2是調(diào)控細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白之一，在多種腫瘤組織和細(xì)胞中存在Bcl-2過表達(dá)，這種表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及治療抵抗密切相關(guān)[9]。Bcl-2可協(xié)同原癌基因ras的作用，使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，從而促進(jìn)腫瘤增長，因而Bcl-2高表達(dá)可抑制細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞生長加速，導(dǎo)致惡性腫瘤不斷增殖，影響放療效果[10]。

本研究經(jīng)Logistics回歸分析結(jié)果顯示，血清VEGF、Bcl-2高表達(dá)與EC患者放療敏感性有關(guān)，進(jìn)一步證實血清VEGF、Bcl-2水平與EC患者放療敏感性相關(guān)。因而在放療前通過檢測血清VEGF、Bcl-2水平可評估放療敏感性，以此制定更為有效的治療方案。此外，本研究還對EC患者血清VEGF、Bcl-2表達(dá)間的相關(guān)性進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，EC患者血清VEGF與Bcl-2呈正相關(guān)，提示EC患者血清VEGF與Bcl-2可能相互影響、相互作用，共同參與了放療的抗拒性機制，但目前關(guān)于EC患者中VEGF與Bcl-2之間的相關(guān)性具體機制仍未明確，且相關(guān)研究較少，仍需要在未來進(jìn)一步展開大樣本、長時間的研究加以驗證分析。

綜上所述，EC患者血清VEGF、Bcl-2過表達(dá)與放療敏感性密切相關(guān)，EC患者血清VEGF、Bcl-2高表達(dá)提示其放療敏感性低的風(fēng)險較高。