超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值

吳豪杰 張 偉 劉 瀏 程建中

乳腺癌是源自于乳腺上皮的惡性腫瘤，是婦科內(nèi)較為多見的惡性腫瘤，好發(fā)于40～55歲的女性，且近些年呈上升的趨勢[1]。目前對于乳腺癌的治療方案有多種，新輔助化療是其中一種，具有較好的療效[2]。表皮生長因子受體2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER-2)是一種絡(luò)氨酸蛋白，與細(xì)胞生長發(fā)育密切相關(guān)，參與到癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化，研究認(rèn)為其與乳腺癌的預(yù)后存在一定相關(guān)性[3]。組織多肽特異性抗原(tissue polypeptide specific antigen，TPS)是一種抗原決定簇，在惡性腫瘤的血液中呈較高濃度的表達(dá)[4]。有研究認(rèn)為，將超聲造影與腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合運(yùn)用于化療效果的預(yù)測中價(jià)值較高[5]。因此本研究選取我院收治的74例接受新輔助化療的乳腺癌患者臨床資料進(jìn)行分析，研究超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院 2019年2月至2021年3月收治的74例接受新輔助化療的乳腺癌患者作為研究對象。根據(jù)新輔助化療治療效果分為敏感組(n=49)和不敏感組(n=25)。敏感組49例，年齡36～70歲，平均年齡(50.35±10.55)歲；不敏感組25例，年齡36～71歲，平均年齡(50.43±10.61)歲。2組患者年齡一般資料差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者符合《乳腺癌臨床診斷治療實(shí)用手冊》[6]中乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者入院前未接受治療；③患者無影像學(xué)檢查禁忌證；④患者接受新輔助化療治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者有新輔助化療禁忌證；②患者合并嚴(yán)重凝血功能異常；③患者為妊娠期孕婦；④患者合并其他系統(tǒng)惡性腫瘤；⑤患者資料不完整。

1.2 方法

分組方法：參考世界衛(wèi)生組織所公布的治療標(biāo)準(zhǔn)[7]，將新輔助化療治療后達(dá)到未完全緩解和部分緩解的患者列入不敏感組，將達(dá)到完全緩解和部分緩解的患者列入敏感組。

患者于我院超聲影像科接受超聲造影檢查，采用飛利浦醫(yī)療器械有限公司的Philips EPIQ 5型超聲診斷儀，探頭頻率為12 MHz，造影探頭為9 MH中，其機(jī)械指數(shù)為0.08，動(dòng)態(tài)范圍為DR51，輸出功率控制為4 W。首先采用造影探頭動(dòng)態(tài)監(jiān)測患者病灶位置，再注射2.4 mL造影劑，采用造影探頭對病灶和周圍組織造影劑的灌注情況進(jìn)行動(dòng)態(tài)性觀察，將圖像保存后采用軟件對病灶始增時(shí)間、峰值時(shí)間、峰值強(qiáng)度進(jìn)行分析。

HER-2檢測:收集術(shù)中所獲得的乳腺癌腫瘤組織，采用上海晶抗工程有限公司的HER-2檢測試劑盒，往預(yù)先包被HER-2捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HER-2呈正相關(guān)。采用美國賽默飛公司的酶標(biāo)儀在450 nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計(jì)算樣品濃度。

TPS檢測：收集空腹靜脈血3 mL，以半徑為80 mm離心分離血清，并置于-20℃內(nèi)保存，采用上海臻科生物科技有限公司的TPS ELISA試劑盒并使用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行檢測。從室溫平衡20 min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL；樣本孔中加入待測樣本50 μL；空白孔不加，除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100 μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60 min，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350 μL)，靜置1 min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)，每孔加入底物A、B各50 μL，37℃避光孵育15 min，每孔加入終止液50 μL，15 min內(nèi)，在450 nm波長處測定各孔的OD值。

1.3 觀察指標(biāo)

2組患者均接受超聲造影檢查，同時(shí)對比2組患者HER-2、組織多肽特異性抗原(TPS)水平，繪制ROC曲線分析超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 2組患者超聲影像結(jié)果對比

2組患者峰值強(qiáng)度差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與敏感組相比，不敏感組患者病灶始增時(shí)間和峰值時(shí)間顯著更長，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者超聲影像結(jié)果對比

2.2 2組患者血清HER-2和TPS水平對比

與敏感組相比，不敏感組患者血清HER-2和TPS水平顯著更高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者HER-2和TPS水平對比

2.3 超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值分析

應(yīng)用受試者工作特征曲線評估乳腺癌新輔助化療敏感性得出：超聲造影預(yù)測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度89.8%和特異度為64.0%；HER-2預(yù)測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度為80.0%和特異度為91.8%；TPS預(yù)測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度91.9%和特異度為80.0%，三者聯(lián)合預(yù)測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度為93.8%，特異度為92.0%，經(jīng)分析得出，三者聯(lián)合的預(yù)測靈敏度和特異度均高于各項(xiàng)單獨(dú)檢測(P<0.05)。見表3、圖1。

表3 超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值分析

3 討論

乳腺癌是婦科較為常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率在世界各地仍有上升的趨勢，每年新增病例約5萬人，好發(fā)于中老年女性。但隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，對于乳腺癌的治療也更加多樣[8]。新輔助化療是在局部治療方法前的全身化療，效果較好，但目前尚無準(zhǔn)確的指標(biāo)評價(jià)其治療敏感性[9-10]。本次研究將以往研究指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測，以為臨床的治療效果的預(yù)測提供參考。

超聲造影是一種影像學(xué)檢查方式，廣泛運(yùn)用于乳腺癌的篩選和診斷當(dāng)中。腫瘤的回聲受到多種因素的影響，包括腫瘤位置、周圍的應(yīng)變性和組織特異性的影響，組織在超聲圖像上的回聲是源自于組織結(jié)構(gòu)的散射[11]。多數(shù)患者接受治療前，腫瘤多含有大量炎性細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等，其聲波傳遞性能顯著高于正常組織，當(dāng)治療后，腫瘤內(nèi)部的結(jié)構(gòu)、彈性和密度均出現(xiàn)不同程度的變化[12]。本研究表示，與敏感組相比，不敏感組患者病灶始增時(shí)間和峰值時(shí)間顯著更長。這說明，治療不敏感患者超聲造影未出現(xiàn)明顯的變化。HER-2是表皮生長因子的一種，研究認(rèn)為其是和乳腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)的基因，可通過各種方式加入跨膜信號的傳導(dǎo)，進(jìn)而對細(xì)胞分化和增殖造成影響[13]。有研究認(rèn)為，HER-2對于乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值較高[14]。本研究顯示，與敏感組相比，不敏感組患者血清HER-2水平顯著更高。TPS是人體細(xì)胞角蛋白18片段的抗原決定簇，在惡性腫瘤以及轉(zhuǎn)移腫瘤血清內(nèi)會(huì)呈較高濃度的表達(dá)[15]。腫瘤細(xì)胞增殖峰期時(shí)，TPS會(huì)劇烈升高并進(jìn)入患者的血液循環(huán)內(nèi)，因此TPS是可以作為反應(yīng)患者惡性腫瘤增殖程度的指標(biāo)[16-17]。由于乳腺癌病變多數(shù)由上皮結(jié)構(gòu)為特點(diǎn)的終末導(dǎo)管小葉單元，因此TPS在乳腺癌患者中存在較高的表達(dá)。本研究顯示，與敏感組相比，不敏感組患者血清TPS水平顯著更高。說明，通過新輔助化療治療敏感性較低的患者TPS未出現(xiàn)改善。因?yàn)門PS常在多種上皮細(xì)胞腫瘤中表達(dá)，器官組織性不高，因此特異度較低，需要與其他標(biāo)志物聯(lián)合檢測[18]。本研究顯示，三者聯(lián)合的預(yù)測靈敏度和特異度均高于各項(xiàng)單獨(dú)檢測，說明，超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS水平的檢測能夠彌補(bǔ)各項(xiàng)單獨(dú)檢測的不足，提高預(yù)測價(jià)值。本次研究首次將超聲造影與HER-2、TPS進(jìn)行聯(lián)合檢測并發(fā)現(xiàn)其對乳腺癌患者新輔助化療的敏感性預(yù)測價(jià)值較高。但本次研究病例收集較少，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能存在一定偏差。

圖1 超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值ROC分析圖

綜上所述，超聲造影聯(lián)合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預(yù)測價(jià)值較高，可有效提高預(yù)測靈敏度和特異度。