仔豬藍(lán)耳病疫苗免疫效果分析

許光勇 陳華林

（1北京奶牛中心，北京 100192；2中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193；3北京中育種豬有限責(zé)任公司，北京 100194）

豬藍(lán)耳病(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),學(xué)名為豬繁殖與呼吸綜合征,是豬藍(lán)耳病病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染后導(dǎo)致懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊、死胎和弱仔數(shù)量明顯增多,生長豬呈現(xiàn)呼吸道疾病等臨床表現(xiàn)的傳染病[1]。1987年P(guān)RRS首次在美國出現(xiàn),1990年在以德國為代表的歐洲國家發(fā)生,1995年傳入我國,隨后以日本、韓國等為代表的亞洲國家也陸續(xù)有報(bào)道,2006年P(guān)RRS在我國豬群中大面積發(fā)生與流行,近十幾年P(guān)RRS持續(xù)影響中國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展[2-5]。近期,非洲豬瘟、豬藍(lán)耳病和豬流行性腹瀉病等仍是豬場疫病防控的重點(diǎn)。此外,國內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境相對復(fù)雜,PRRS防控一般都是采取綜合措施,疫苗干預(yù)是其中一項(xiàng)重要舉措,故探索PRRS活疫苗接種PRRS陽性穩(wěn)定場的陰性仔豬群后抗體變化規(guī)律具臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 豬場背景

2020年北京中育種豬有限責(zé)任公司斥資3億元,新建一座可存欄3 000頭母豬的規(guī)模樓房豬場,2020年11月經(jīng)驗(yàn)收合格后投產(chǎn)。投產(chǎn)后轉(zhuǎn)入PRRS免疫抗體陽性的妊娠母豬,因調(diào)入豬群來源地不同,健康狀態(tài)存在差異,為與母豬群保持一致,新調(diào)入的PRRS陰性仔豬采用疫苗干預(yù)措施,以保證平穩(wěn)過渡和生產(chǎn)快速穩(wěn)定。

1.2 試驗(yàn)豬群

2021年北京中育種豬有限責(zé)任公司新建種豬場新購入仔豬600頭,經(jīng)疾病篩查表明PRRS抗原和抗體均陰性。按豬舍內(nèi)均勻分布采樣原則,挑選30頭仔豬進(jìn)行前腔靜脈采集血液,以及PRRS抗體檢測試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)束時(shí)剩余599頭。

1.3 試驗(yàn)方法

2021年5月該批次仔豬肌肉注射PRRS活疫苗(ATCC VR-2332株)1頭份。試驗(yàn)仔豬在免疫前1周、免疫后2周和免疫后4周進(jìn)行前腔靜脈采血,分離血清并于-20℃保存待用。

1.4 PRRS抗體檢測

PRRS X3抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司,批號AA101。檢測方法參照試劑盒說明書進(jìn)行操作,試驗(yàn)成立條件：陽性對照平均值減去陰性對照平均值必須≥0.15,同時(shí)陰性對照平均值必須≤0.15。結(jié)果判定：如果S/P值＜0.40,樣品判定為PRRSV抗體陰性；如果S/P值≥0.40,樣品判定為PRRSV抗體陽性。S/P值＝(樣本A650-陰性對照平均值)/(陽性對照平均值-陰性對照平均值),離散度＝(標(biāo)準(zhǔn)偏差÷樣本平均值)×100%。

2 結(jié)果與分析

2021年5—6月試驗(yàn)期間,試驗(yàn)豬共采血3次,分離血清進(jìn)行PRRS抗體檢測,結(jié)果見表1和圖1。

圖1 S/P值區(qū)間分布情況

由表1可知,仔豬在接種豬藍(lán)耳病活疫苗(PRRS MLV)前,PRRS抗體全部陰性；仔豬調(diào)入北京中育種豬有限責(zé)任公司的種豬場后免疫豬藍(lán)耳病活疫苗無應(yīng)激反應(yīng),未出現(xiàn)死亡；仔豬免疫后2周S/P平均值為0.77,抗體陽性率為66.67%,離散度為72.78%；免疫后4周S/P平均值為1.19,抗體陽性率為100%,離散度為31.06%。對比發(fā)現(xiàn),在免疫前后,隨著時(shí)間推移,PRRS免疫抗體S/P值、抗體陽性率呈現(xiàn)逐漸上升趨勢,CV值呈現(xiàn)逐漸下降趨勢。表明免疫豬藍(lán)耳病活疫苗4周的抗體水平要優(yōu)于2周。

表1 仔豬PRRS抗體統(tǒng)計(jì)結(jié)果

由圖1可知,仔豬未免疫前,S/P值全部小于0.4；接種PRRS活疫苗2周,S/P值小于0.4比例為33.33%,0.4～1.0的比例為26.67%,1.0～1.6的比例為26.67,1.6～2.0比例為13.33%；免疫4周S/P值小于0.4的比例為0%,0.4～1.0的比例為33.33%,1.0～1.6的比例為46.67%,1.6～2.0的比例為20%；3次樣品均未出現(xiàn)S/P值高于2.0的個(gè)體。由此可見,陰性仔豬接種疫苗后符合抗體消長規(guī)律,且不存在PRRSV野毒感染現(xiàn)象。仔豬成活率：試驗(yàn)期間,仔豬死亡1頭,最后剩余599頭,整個(gè)試驗(yàn)過程仔豬成活率為99.83%(599/600),符合保育豬階段預(yù)期。

3 討論

豬藍(lán)耳病抗體S/P值可以用來評判未免疫豬只的PRRSV感染狀況及陰性豬接種PRRS疫苗的免疫效果。本批次試驗(yàn)仔豬接種PRRS減毒活疫苗前PRRS抗原和抗體均為陰性,仔豬免疫2周S/P平均值為0.77,說明接種疫苗后PRRS抗體水平迅速提升；免疫4周S/P平均值上升至1.19,與施開創(chuàng)等[4]報(bào)道的接種PRRS活疫苗能夠提高抗體水平結(jié)果一致,與許光勇等[6]報(bào)道的陰性種豬免疫VR2332株P(guān)RRS活疫苗后6周S/P平均值為1.16基本一致,但所用時(shí)間差2周,這可能與豬群的階段和品種有關(guān)。由此可知,陰性仔豬在接種活疫苗后PRRS抗體S/P值在一定時(shí)間內(nèi)能夠逐漸提高,并達(dá)到1.0以上的水平。

試驗(yàn)中豬藍(lán)耳病抗體陽性率是指S/P值≥0.4的個(gè)體所占百分比,該指標(biāo)能夠直接反映未免疫豬只感染PRRSV狀況及疫苗免疫效果。未免疫時(shí),仔豬PRRS抗體全部陰性,免疫2周抗體陽性率為66.67%,免疫4周后陽性率升至100%,由此可知,免疫4周后,所有豬只產(chǎn)生了PRRS免疫抗體。與李明波等[7]報(bào)道的35日齡仔豬免疫后4周抗體陽性率為85%也有所差別,可能與采樣時(shí)間和選擇的試驗(yàn)豬種類不同有關(guān)。由結(jié)果可知,接種疫苗后,PRRS抗體陽性率逐漸升高,并于4周時(shí)間全部轉(zhuǎn)陽。

離散度即表示各個(gè)數(shù)值之間的差異,可以預(yù)測風(fēng)險(xiǎn)大小。未免疫前仔豬CV值為547.72%,主要是仔豬抗體全部陰性,1頭仔豬S/P值為0.08所導(dǎo)致。免疫2周和免疫4周的離散度值分別為72.78%和31.06%,免疫4周后比免疫2周后的離散度降低41.72%,說明隨著時(shí)間推移,仔豬PRRS抗體整齊度越來越好,且免疫4周達(dá)到了良好水平。與曾顯成等[8]報(bào)道的接種過PRRS疫苗的豬場抗體離散度明顯低于非免疫豬場的結(jié)果一致。與李明波等[7]報(bào)道的CV值在48%～56%有所差異,可能與豬場PRRSV感染背景有關(guān),本試驗(yàn)豬場為新建豬場,生物安全較高,不存在野毒感染情況。由結(jié)果可知,免疫4周仔豬群PRRS抗體整齊度較好。

豬只個(gè)體S/P值區(qū)間分布所占百分比可以反映豬群PRRSV感染狀況,為精準(zhǔn)施策提供科學(xué)依據(jù)。其中S/P值＜0.4表明PRRS抗體陰性,0.4～2.0是陽性豬場比較理想的狀態(tài),2.0～2.5為選擇性區(qū)間,高于2.5一般判定為感染PRRSV野毒或免疫了高致病性毒株疫苗。按照豬群健康程度,0.4～2.0還可細(xì)分為0.4～1.0、1.0～1.6和1.6～2.0區(qū)間,根據(jù)企業(yè)需求可以選擇不同標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作與分析。本試驗(yàn)在仔豬未免疫前抗體全部陰性；免疫2周仍有33.33%個(gè)體PRRS抗體S/P值小于0.4,說明免疫2周時(shí)間部分陰性仔豬還檢測不到PRRS抗體；免疫4周PRRS抗體能夠全部檢測到,且S/P值在1.0～1.6所占比例為46.67%,說明產(chǎn)生的PRRS抗體水平較好。免疫2周和免疫4周的S/P值均未出現(xiàn)高于2.0的個(gè)體,說明現(xiàn)場豬群健康狀況良好,不存在PRRSV野毒感染現(xiàn)象。

成活率是直接反映疫苗免疫效果和現(xiàn)場管理效率的指標(biāo)。試驗(yàn)全程仔豬成活率為99.83%,成績良好。由結(jié)果可知,陰性仔豬接種PRRS活疫苗后得到平穩(wěn)過渡,有效解決了生產(chǎn)不穩(wěn)定的難題。

4 結(jié)論

綜上所述,陰性仔豬免疫PRRS活疫苗4周抗體陽性率達(dá)到100%,S/P平均值處于1.0以上,CV值位于40%以內(nèi),S/P值處于0.4～1.6區(qū)間比例在80%。故認(rèn)為陰性仔豬免疫PRRS活疫苗4周時(shí)間達(dá)到了良好的免疫效果,豬群PRRS狀態(tài)穩(wěn)定,使豬場生產(chǎn)更加平穩(wěn)。