冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病患者血漿微小RNA-34a水平對(duì)冠狀動(dòng)脈病變程度的影響

叢琳強(qiáng)

(濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院 心內(nèi)科, 山東 煙臺(tái), 264100)

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化心臟性疾病(CHD)是嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命安全與生活質(zhì)量的世界性健康問(wèn)題，致殘率與致死率均極高[1]。CHD的病理表現(xiàn)為冠狀動(dòng)脈管腔形成斑塊，出現(xiàn)鈣化和淀粉樣變，造成管腔狹窄與血管壁毛糙，嚴(yán)重時(shí)甚至引發(fā)管腔完全閉塞并形成血栓，阻礙冠狀動(dòng)脈血流灌注，導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈病變，引發(fā)心肌細(xì)胞凋亡、壞死以及心肌纖維化[2]。冠狀動(dòng)脈慢性完全閉塞病變(CTO)作為典型的CHD病變，冠狀動(dòng)脈病變相對(duì)復(fù)雜且病變時(shí)間更長(zhǎng)，是近年來(lái)心血管疾病臨床治療的難點(diǎn)與重點(diǎn)之一[3]。微小RNA(miRNA)作為內(nèi)源性的非編碼單鏈RNA, 具有重要的生物學(xué)性質(zhì)與作用，且不同的miRNA可能參與多種調(diào)控基因的表達(dá)[4]。相關(guān)研究[5]顯示，微小RNA-34a(miR-34a)表達(dá)水平與CHD的病理生理過(guò)程密切相關(guān)。本研究分析CHD患者血漿miR-34a水平與其冠狀動(dòng)脈病變程度的相關(guān)性，以期確定miR-34a能否作為新型生物學(xué)標(biāo)志物對(duì)CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度進(jìn)行評(píng)估，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2019年12月—2020年12月入住濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科的93例患者作為研究對(duì)象。根據(jù)冠狀動(dòng)脈介入造影檢查結(jié)果，將93例患者分為對(duì)照組(非CHD患者)20例與實(shí)驗(yàn)組(CHD患者)73例，并根據(jù)病變是否為CTO將實(shí)驗(yàn)組患者分為CTO組18例與非CTO組55例。CHD患者納入標(biāo)準(zhǔn): ① 符合CHD的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)者; ② 一般資料完整者; ③ 心肌損傷標(biāo)志物水平升高者; ④ 冠狀動(dòng)脈造影檢查提示血管病變者。非CHD患者納入標(biāo)準(zhǔn): 同期體檢的各項(xiàng)指標(biāo)正常的患者。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 合并嚴(yán)重肝腎功能不全或腦卒中者; ② 合并急性肺栓塞、心肌炎等疾病者; ③ 血液系統(tǒng)疾病及自身免疫性疾病患者; ④ 使用類(lèi)固醇藥物或消炎鎮(zhèn)痛藥治療者。本研究經(jīng)濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，且所有患者簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

血漿miR-34a水平檢測(cè): ① 采集患者靜脈血(6 mL), 使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管保存并進(jìn)行2次離心處理。② 將離心后的血漿移至無(wú)菌EP管，并標(biāo)注操作時(shí)間及患者所屬組別。③ 采用血漿microRNA快速提取試劑盒Ⅲ型進(jìn)行基因提取，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)[6]進(jìn)行，并將收集到的純miRNA保存于-80 ℃環(huán)境待用。④ 采用紫外分光光度法[7]進(jìn)行miRNA濃度測(cè)量，并將獲得的血漿miR-34a濃度轉(zhuǎn)化為相對(duì)定量值。

冠狀動(dòng)脈病變程度評(píng)估: 采用SYNTAX評(píng)分和Gensini評(píng)分對(duì)CHD患者的冠狀動(dòng)脈病變程度進(jìn)行評(píng)估，并以此為基礎(chǔ)進(jìn)一步分析血漿miR-34a水平與CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度的相關(guān)性。SYNTAX系統(tǒng)作為衡量冠狀動(dòng)脈病變風(fēng)險(xiǎn)的工具，可通過(guò)SYNTAX評(píng)分的高低評(píng)估術(shù)前風(fēng)險(xiǎn)與預(yù)后。Gensini評(píng)分法是對(duì)冠狀動(dòng)脈狹窄程度進(jìn)行評(píng)分的方法，各病變血管評(píng)分為病變部分系數(shù)與其冠狀動(dòng)脈狹窄基本評(píng)分的乘積，總評(píng)分為各病變血管評(píng)分的總和[8]。

1.3 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)實(shí)驗(yàn)組73例CHD患者實(shí)施冠狀動(dòng)脈造影術(shù)，并結(jié)合造影結(jié)果評(píng)估SYNTAX評(píng)分和Gensini評(píng)分。SYNTAX評(píng)分按照評(píng)分高低可分為高評(píng)分(>32分)、中評(píng)分(>22～32分)和低評(píng)分(0～22分)。Gensini評(píng)分標(biāo)準(zhǔn): 狹窄直徑<25%, 1分; 狹窄直徑25%～<50%, 2分; 狹窄直徑50%～<75%, 4分; 狹窄直徑75%～<90%, 8分; 狹窄直徑90%～<99%, 16分; 狹窄直徑99%～<100%, 32分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 各組患者臨床資料及血漿miR-34a表達(dá)水平比較

非CTO組、CTO組的年齡、收縮壓、舒張壓和白細(xì)胞、血漿miR-34a水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); CTO組有高血壓病史者、有糖尿病史者占比和血小板水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); CTO組血漿miR-34a水平高于非CTO組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 3組體質(zhì)量指數(shù)、性別和甘油三酯、總膽固醇、空腹血糖水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組患者臨床資料及血漿微小RNA-34a表達(dá)水平比較

2.2 CHD患者SYNTAX評(píng)分與Gensini評(píng)分的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示, CHD患者SYNTAX評(píng)分與Gensini評(píng)分呈顯著正相關(guān)(r=0.361,P<0.001), 表明SYNTAX評(píng)分與Gensini評(píng)分的一致性較好，見(jiàn)圖1。

圖1 CHD患者SYNTAX評(píng)分與Gensini評(píng)分的相關(guān)性分析圖

2.3 不同SYNTAX評(píng)分組CHD患者血漿miR-34a水平及病變血管分布情況比較

根據(jù)SYNTAX評(píng)分將實(shí)驗(yàn)組73例患者分為低評(píng)分組(0～22分)33例、中評(píng)分組(>22～32分)20例和高評(píng)分組(>32分)20例。高評(píng)分組多血管病變、CTO者占比和病變血管為左主干、左旋支、右冠狀動(dòng)脈者占比均高于低評(píng)分組，中評(píng)分組多血管病變、CTO者占比和病變血管為左主干者占比均高于低評(píng)分組，高評(píng)分組CTO者占比高于中評(píng)分組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 低評(píng)分組、中評(píng)分組、高評(píng)分組CHD患者的血漿miR-34a表達(dá)水平呈梯度上升趨勢(shì)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 不同SYNTAX評(píng)分組患者血漿微小RNA-34a水平及病變血管分布情況比較

2.4 不同Gensini評(píng)分組CHD患者血漿miR-34a水平及病變血管分布情況比較

根據(jù)Gensini評(píng)分將實(shí)驗(yàn)組73例患者分為G1組(0～32分)29例、G2組(>32～68分)21例、G3組(>68～110分)13例和G4組(>110～256分)10例。G4組病變血管為左主干、左旋支者占比高于G1組, G2組、G3組、G4組多血管病變者占比高于G1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); G3組、G4組CTO者占比均高于G1組、G2組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); G1組、G2組、G3組、G4組CHD患者血漿miR-34a表達(dá)水平呈梯度上升趨勢(shì)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 不同Gensini評(píng)分組患者血漿微小RNA-34a水平及病變血管分布情況比較

2.5 CHD患者血漿miR-34a水平診斷冠狀動(dòng)脈病變的ROC曲線及與SYNTAX評(píng)分、Gensini評(píng)分的相關(guān)性

ROC曲線顯示，血漿miR-34a水平診斷冠狀動(dòng)脈病變(SYNTAX評(píng)分)的曲線下面積(AUC)為0.786, 95%CI為0.739～0.829, 敏感度為0.533, 特異度為0.892, 見(jiàn)圖2A; ROC曲線顯示，血漿miR-34a水平診斷冠狀動(dòng)脈病變(Gensini評(píng)分)的AUC為0.793, 95%CI為0.745～0.835, 敏感度為0.739, 特異度為0.746, 見(jiàn)圖2B; 相關(guān)性分析顯示, CHD患者血漿miR-34a表達(dá)水平與SYNTAX評(píng)分、Gensini評(píng)分均呈顯著正相關(guān)(r=0.084、0.076,P<0.001), 見(jiàn)圖2C、圖2D。

A: 血漿miR-34a水平診斷冠狀動(dòng)脈病變(SYNTAX評(píng)分)的ROC曲線; B: 血漿miR-34a水平診斷冠狀動(dòng)脈病變(Gensini評(píng)分)的ROC曲線; C: 血漿miR-34a水平與SYNTAX評(píng)分的相關(guān)性; D: 血漿miR-34a水平與Gensini評(píng)分的相關(guān)性。圖2 CHD患者血漿miR-34a水平診斷冠狀動(dòng)脈病變的ROC曲線及相關(guān)性分析圖

3 討 論

CHD具有極高的致殘率與致死率，不僅嚴(yán)重威脅患者的生命安全與生活質(zhì)量，而且會(huì)對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)等造成重大負(fù)面影響[9]。miRNA作為內(nèi)源性的非編碼單鏈RNA, 具有重要的生物學(xué)性質(zhì)與作用[10]。研究[11-13]表明，血漿miR-34a作為小分子非編碼RNA, 對(duì)多種心血管疾病具有重要的診斷價(jià)值[14]。鑒于此，作者猜想血漿miR-34a與CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度存在正相關(guān)性，并在此基礎(chǔ)上展開(kāi)研究。本研究結(jié)果顯示，對(duì)照組、非CTO組、CTO組患者血漿miR-34a水平呈梯度上升趨勢(shì)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。miR-34a在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的表達(dá)水平較高，故血管病變更為嚴(yán)重的CHD患者體內(nèi)血漿miR-34a表達(dá)水平顯著更高[15-16], 這也解釋了非CTO組與CTO組患者血漿miR-34a表達(dá)水平的差異性。

本研究發(fā)現(xiàn), CHD患者血漿miR-34a水平隨著SYNTAX評(píng)分、Gensini評(píng)分的升高呈現(xiàn)梯度上升趨勢(shì)，且血漿miR-34a水平與SYNTAX評(píng)分、Gensini評(píng)分均呈顯著正相關(guān)性(P<0.001)。由此表明，通過(guò)SYNTAX評(píng)分、Gensini評(píng)分判斷血漿miR-34a水平與CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度的相關(guān)性，可驗(yàn)證本研究的猜想，即血漿miR-34a與CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度密切相關(guān)[17-18]。但由于樣本收集時(shí)間較短且樣本量較少，本研究的樣本統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果可能存在誤差，未來(lái)還需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，血漿miR-34a水平與CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度呈正相關(guān)，有望作為評(píng)估CHD患者冠狀動(dòng)脈病變程度的新型生物學(xué)指標(biāo)，建議臨床人員繼續(xù)深入研究。