模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚行為、游泳能力及應(yīng)激水平的影響

王莉平 張 東 劉 鑫 林聽聽 劉聲宇 王孝杉 李思平

(1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)科學(xué)國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心,上海 201306;2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所,上海 200090)

在自然環(huán)境中,魚類經(jīng)常需要改變其行為以應(yīng)對(duì)變化的環(huán)境,來提高生存幾率[1],而捕食者是影響個(gè)體生存最強(qiáng)烈的環(huán)境因素之一[2—5]。魚類識(shí)別和躲避捕食者的能力不僅受遺傳因素影響,而且其行為特征還能通過環(huán)境發(fā)生改變[6—8]。研究表明,動(dòng)物早期的生活環(huán)境可能會(huì)對(duì)其行為產(chǎn)生終身的影響[9],這取決于早期的經(jīng)歷能否滿足個(gè)體后期的生存需求,如果遇到類似的情境,個(gè)體可以根據(jù)早期經(jīng)驗(yàn),輕松應(yīng)對(duì)[10,11]。Robin等[12]將三刺魚(Gasterosteus aculeatus)分別養(yǎng)殖在模擬捕食者環(huán)境、復(fù)雜環(huán)境和變化的社會(huì)環(huán)境中時(shí),發(fā)現(xiàn)早期環(huán)境壓力能夠影響魚的行為表型。由于在沒有捕食壓力的人工養(yǎng)殖環(huán)境中魚類的行為可能無法得到充分的發(fā)育,因此,Brown等[13]指出,在養(yǎng)殖水體中利用抄網(wǎng)模擬捕食者對(duì)魚類進(jìn)行追趕訓(xùn)練,可以使人工養(yǎng)殖的魚獲得與野生個(gè)體相當(dāng)?shù)目共妒痴咝袨?。Mirza 和Chivers[14]也證明了放流前進(jìn)行適當(dāng)?shù)囊盎?xùn)練能夠提高放流魚的成活率。

人工增殖放流已成為恢復(fù)魚類自然資源的重要手段,人工養(yǎng)殖魚放流效果不佳的狀況也日益受到重視,因此,放流前對(duì)魚苗進(jìn)行馴化使其具備應(yīng)對(duì)多種風(fēng)險(xiǎn)的能力已成為共識(shí)。抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練已被證實(shí)能夠改變一些魚類的行為特征,使其更好地應(yīng)對(duì)復(fù)雜多變的外界環(huán)境,因而此類訓(xùn)練已作為魚類放流前馴化的手段之一。此外,運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)于提高魚類的游泳能力也有一定的作用[15,16]。研究已證實(shí),抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練可綜合性地改善魚類的行為特征及運(yùn)動(dòng)表現(xiàn),是一種高效并且容易操作的馴化方式[17]。然而,抄網(wǎng)追趕對(duì)魚類來說也是一種脅迫,脅迫對(duì)魚類造成的影響可能是直接致死的,也可能是亞致死的。亞致死強(qiáng)度的脅迫會(huì)使魚類產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)[18],長期處于應(yīng)激狀態(tài),會(huì)對(duì)魚類的生長、抗病力等產(chǎn)生負(fù)面影響[19—22]。因此,不合理的訓(xùn)練設(shè)置可能導(dǎo)致魚體生長受損、免疫能力和生存能力下降等[23,24]。

大黃魚(Larimichthys croceaRichardson,1846),隸屬于鱸形目(Perciformes)、石首魚科(Sciaenidae)、黃魚亞科(Larimichthysinae)、黃魚屬(Larimichthys),為我國傳統(tǒng)“四大海產(chǎn)”之一,是我國福建和浙江等省重要的海洋經(jīng)濟(jì)魚類之一。由于20世紀(jì)60、70年代的過度捕撈,導(dǎo)致其資源急劇衰退。盡管自1987年以來每年都會(huì)通過增殖放流對(duì)野外資源進(jìn)行補(bǔ)充,然而收效并不理想[25]。主要原因可能是放流魚苗沒有獲取足夠的野外生存經(jīng)驗(yàn),存在著一些行為特征以及運(yùn)動(dòng)能力上的缺陷,使得成活率較低,這也是目前魚類增殖放流中普遍存在的問題[26—28]。雖然抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)是一種高效并且容易操作的馴化方式,但由于不同魚類對(duì)脅迫的敏感程度不同[29],因而針對(duì)不同種,操作方式也不同。大黃魚對(duì)于機(jī)械操作脅迫的反應(yīng)較為敏感且強(qiáng)烈,不管是幼魚還是成魚只要受到異常擾動(dòng),就會(huì)慌亂不安,嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)劳鯷30],因此亟需對(duì)抄網(wǎng)追趕設(shè)置進(jìn)行深入研究。本研究以80 dpf (Days post fertilization)的大黃魚幼魚為研究對(duì)象,探究了大黃魚幼魚在不同水平的追趕刺激下其生長、行為、游泳能力及應(yīng)激水平的變化,以確定合理的刺激水平,旨在為后續(xù)研究大黃魚的行為及對(duì)大黃魚放流前的馴化奠定基礎(chǔ),同時(shí)本研究可為深入了解不同生態(tài)類型魚類受到此類刺激后的反應(yīng)機(jī)制提供更多案例。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

實(shí)驗(yàn)中所使用的大黃魚魚苗由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所福建福鼎研究中心自行孵育,魚卵購自于福建省福鼎市沙埕鎮(zhèn)大白鷺村閩海農(nóng)業(yè)專業(yè)合作社。將魚卵放入孵化桶中,20h左右即孵化出仔魚,孵化水溫為23℃,鹽度為18.2,孵化后第3天開始投喂輪蟲,第8天開始投喂豐年蟲,第12天開始投喂橈足類,第19天開始投喂配合飼料。暫養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)期間均投喂沉性顆粒飼料,每日投喂3次,分別在8:00—9:00、12:00—13:00和18:00—19:00進(jìn)行,每天下午5:00—6:00排污換水,養(yǎng)殖期間水溫為（20.43±1.55）℃,鹽度為18.2,光照為1000 lx。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

將80日齡(dpf)的大黃魚幼魚[體長:(3.71±0.48) cm,體重:(1.27±0.42) g]隨機(jī)分配到12個(gè)圓柱形養(yǎng)殖桶(直徑×高=80 cm×80 cm),每桶100尾,暫養(yǎng)1周。實(shí)驗(yàn)設(shè)置抄網(wǎng)刺激對(duì)照組和處理組[2.5、5.0和7.5min/(F·D)][minute/(Frequency·Day),(分鐘/次·天)],每天分別進(jìn)行2次處理,每組3個(gè)重復(fù),各養(yǎng)殖桶隨機(jī)編號(hào)。

抄網(wǎng)刺激前,將所有養(yǎng)殖桶同時(shí)停氣,并排水至30 cm深,用手抄網(wǎng)(直徑:30 cm,網(wǎng)長:15 cm,網(wǎng)孔直徑:2 mm,顏色:黑色,柄長:1 m)環(huán)繞桶周,速度為6 s/r,追逐魚群,分別在每天上午9:00—11:00,下午14:00—17:00各進(jìn)行1次抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練,各組刺激時(shí)間分別為0、2.5min、5.0min和7.5min。在刺激過程中保證每條魚都受到追趕,并避免網(wǎng)掛到魚,對(duì)魚造成損傷。且每日喂食前后至少超過1h再進(jìn)行抄網(wǎng)追趕,避免刺激對(duì)魚的攝食及消化造成影響。每日記錄各養(yǎng)殖桶的死魚數(shù)及魚苗的游動(dòng)情況,刺激結(jié)束后同時(shí)開氣、加水,所有使用的工具前期均使用次氯酸鈉消毒。刺激15d后,各桶隨機(jī)撈出20尾暫養(yǎng)于另一養(yǎng)殖桶中進(jìn)行后續(xù)分析,剩余幼魚繼續(xù)進(jìn)行抄網(wǎng)追趕刺激,直至30d。在30d處理結(jié)束后,將魚暫養(yǎng)7d,進(jìn)行二次抄網(wǎng)追趕,追趕時(shí)間為10min(刺激強(qiáng)度同上),測試前期抄網(wǎng)追趕對(duì)大黃魚幼魚后期壓力應(yīng)對(duì)的影響。

1.3 取樣及測定

分別對(duì)刺激15d和30d的大黃魚幼魚進(jìn)行采樣。采樣時(shí),使用丁香酚將停止刺激并暫養(yǎng)3d后的幼魚麻醉,稱量體長體重,并采集血樣。同時(shí),為探究不同水平的抄網(wǎng)追趕對(duì)大黃魚幼魚行為的影響,實(shí)驗(yàn)對(duì)停止刺激3d后的大黃魚幼魚分別進(jìn)行行為測試,包括新環(huán)境測試、恢復(fù)性測試、壓力應(yīng)對(duì)方式測試和回避測試,還進(jìn)行了游泳能力測試。此外,所有實(shí)驗(yàn)魚在行為測試以及采樣前均禁食24h。同上,二次刺激結(jié)束后立即麻醉取血樣。

1.4 行為測試方法

所有行為測試均在長×寬×高=70 cm×35 cm×30 cm的玻璃缸中進(jìn)行,測試水溫及光照強(qiáng)度均與養(yǎng)殖環(huán)境相同。玻璃缸的底部及四周用白色防水紙粘貼,避免人為因素的干擾。底部平均劃分成50個(gè)正方形小格(7 cm×7 cm),并進(jìn)行分區(qū):玻璃缸四個(gè)角的正方形小格代表角區(qū)域,距離缸壁一個(gè)正方形小格去除角區(qū)域部分為邊區(qū)域,除去邊角區(qū)域剩下的為中間區(qū)域。在玻璃缸頂端架一臺(tái)攝像頭(螢石云),全程拍攝記錄,實(shí)驗(yàn)魚都未被重復(fù)測試。

新環(huán)境測試(Novel environment test) 為了測試抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能否提高大黃魚幼魚對(duì)陌生環(huán)境的探索性,實(shí)驗(yàn)對(duì)不同水平抄網(wǎng)追趕下的大黃魚幼魚進(jìn)行了新環(huán)境測試(圖 1)。將距離玻璃缸一端14 cm處放置一塊白色雪弗板,隔出35 cm×14 cm×30 cm的區(qū)域作為適應(yīng)區(qū)。測試開始前,使用100 mL燒杯將魚輕輕撈出,帶水轉(zhuǎn)移至玻璃缸的適應(yīng)區(qū)適應(yīng)30min,隨后輕輕提起隔板,使魚自由游出,共記錄10min[31,32]。記錄的指標(biāo)包括變換區(qū)域的次數(shù)、進(jìn)入邊區(qū)域的次數(shù)、進(jìn)入角區(qū)域的次數(shù)、出適應(yīng)區(qū)的次數(shù)、在邊區(qū)域待的總時(shí)間(s)、在角區(qū)域待的總時(shí)間(s)和在角區(qū)域單次持續(xù)的最長時(shí)間(s)。

圖1 新環(huán)境測試裝置Fig.1 Schematic diagrams of the experimental procedures for the novel environment test

恢復(fù)性測試(Emergence test)為了測試抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能否影響大黃魚幼魚脅迫恢復(fù)后的運(yùn)動(dòng)活躍能力,實(shí)驗(yàn)對(duì)不同水平抄網(wǎng)追趕下的大黃魚幼魚進(jìn)行了恢復(fù)性測試(圖 3)。按照壓力應(yīng)對(duì)測試相同的方法先將魚在小抄網(wǎng)上于空氣中暴露60s,放入適應(yīng)區(qū)恢復(fù)6min,隨后輕輕抬起隔板至水面的2/3處,觀察10min[13,17]。記錄的指標(biāo)包括:首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間、首次回適應(yīng)區(qū)的時(shí)間(s)和在適應(yīng)區(qū)外待的時(shí)間(s)。

圖3 恢復(fù)性測試裝置Fig.3 Schematic diagrams of the experimental procedures for the emergence test

壓力應(yīng)對(duì)方式測試(Stress coping style test)為了測試抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能否改善大黃魚幼魚對(duì)脅迫的應(yīng)激恢復(fù)能力,實(shí)驗(yàn)對(duì)不同水平抄網(wǎng)追趕下的大黃魚幼魚進(jìn)行了缺氧應(yīng)激測試(圖 2)。將單尾魚轉(zhuǎn)移至手抄網(wǎng)(直徑15 cm)于空氣中暴露3min,隨后將魚輕輕放入水中,直至恢復(fù)穩(wěn)定,判定標(biāo)準(zhǔn)為魚能夠正立身體、無傾斜、不亂竄、正常緩慢游動(dòng)。記錄指標(biāo):魚恢復(fù)正常游動(dòng)所需要的時(shí)間(s)[33]。

圖2 壓力應(yīng)對(duì)方式測試裝置Fig.2 Schematic diagrams of the experimental procedures for the stress coping style test

回避測試(Avoidance test)為了測試抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能否提高大黃魚幼魚逃避追捕的能力,本實(shí)驗(yàn)對(duì)不同水平抄網(wǎng)追趕下的大黃魚幼魚進(jìn)行了回避測試(圖 4)?；乇軠y試在恢復(fù)性測試后進(jìn)行,恢復(fù)性測試完成20min后,當(dāng)魚出現(xiàn)在魚缸對(duì)面時(shí),用一個(gè)和抄網(wǎng)追趕刺激中顏色、大小不同的手抄網(wǎng)(直徑:10 cm,柄長:25 cm),給予其一個(gè)新的信號(hào)刺激,迅速捕撈魚,并停留15s,15s內(nèi)魚逃回適應(yīng)區(qū)則認(rèn)為魚有回避行為,比較各組魚的回避情況[17]。

圖4 回避測試裝置Fig.4 Schematic diagrams of the experimental procedures for the avoidance test

1.5 游泳速度測定方法

為了探究抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練對(duì)大黃魚幼魚游泳能力的影響,實(shí)驗(yàn)對(duì)不同水平抄網(wǎng)追趕下大黃魚幼魚的絕對(duì)臨界游泳速度(Absolutely critical swimming speed,Ucrita)和相對(duì)臨界游泳速度(Relatively critical swimming speed,Ucritr)進(jìn)行了測定。設(shè)備購于丹麥Loligo Systems公司,實(shí)驗(yàn)中臨界游泳速度的測定采用Brett流速遞增法[34,35],測定方法參照王曉等[36]在探究溫度梯度對(duì)四大家魚臨界游泳速度的影響中的操作。正式實(shí)驗(yàn)開始之前需要預(yù)先評(píng)估實(shí)驗(yàn)魚的絕對(duì)臨界游泳速度(Ue),操作方法為先將魚用容器轉(zhuǎn)移至泳道中,在低流速(5 cm/s)下適應(yīng)15min,隨后每2min增加0.4 BL/s (BL=Body length=體長)的速度,直至魚力竭。表現(xiàn)為無游泳狀態(tài),貼在后方鋼絲網(wǎng)上持續(xù)超過20s,此時(shí)的流速即為Ue,從而確定正式實(shí)驗(yàn)時(shí)絕對(duì)臨界游泳速度實(shí)際值的增量ΔU(15%Ue)。

正式實(shí)驗(yàn)時(shí),同樣將魚先在低流速(5 cm/s)下適應(yīng)15min,隨后每5min增加0.5 BL/s至60%Ue,之后每15min增加15%Ue,直至魚疲勞力竭,貼在后方鋼絲網(wǎng)上持續(xù)超過20s。此時(shí)的流速即為設(shè)定時(shí)間段的最大游泳速度(Umax)。

計(jì)算公式如下:

1.6 應(yīng)激水平測定方法

為探究抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練對(duì)大黃魚幼魚應(yīng)激水平的影響,同時(shí)探究停訓(xùn)后大黃魚幼魚再次面對(duì)追趕脅迫時(shí)的應(yīng)激水平,本實(shí)驗(yàn)采用南京建成生物研究所生產(chǎn)的試劑盒對(duì)大黃魚幼魚血漿中皮質(zhì)醇水平進(jìn)行測定。測定原理是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),按照試劑盒的說明書進(jìn)行操作,在酶標(biāo)儀450 nm波長下測定各孔的吸光度。根據(jù)濃度和吸光度算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程,使用ELISA Calc軟件選用logistic 四參數(shù)進(jìn)行曲線擬合,然后代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算皮質(zhì)醇濃度。

1.7 數(shù)據(jù)處理

為了避免觀察者不同所導(dǎo)致的系統(tǒng)誤差,本實(shí)驗(yàn)行為學(xué)數(shù)據(jù)均由同一人進(jìn)行采集和分析[37]。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用IBM SPSS Statistics 26和JASP16.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)先使用Shapiro-Wilk法進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),如果不符合正態(tài)分布,使用blom法進(jìn)行轉(zhuǎn)換,之后使用單因素方差分析(Analysis of Variance,ANOVA)進(jìn)行檢驗(yàn),如果ANOVA結(jié)果顯著,將用Tukey(T)法進(jìn)行多重比較。為了彌補(bǔ)顯著性檢驗(yàn)的不足,對(duì)效應(yīng)量(η2)和貝葉斯因子(BF10)也進(jìn)行了分析。低、中和高效應(yīng)對(duì)應(yīng)的η2分別為0.010、0.059和0.138,評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為小效應(yīng)(0.010≤η2＜0.059)、中等效應(yīng)(0.059≤η2＜0.138)和大效應(yīng)(η2≥0.138)[38]。使用JASP16.1軟件進(jìn)行貝葉斯統(tǒng)計(jì)分析,貝葉斯因子(BF10)決策標(biāo)準(zhǔn)參考Jefferys(1961)[39]。由于樣本量較少,回避測試結(jié)果采用Fisher’s exact test進(jìn)行分析。本研究的零假設(shè)(H0)為抄網(wǎng)刺激對(duì)大黃魚幼魚的各項(xiàng)指標(biāo)無顯著影響,對(duì)應(yīng)的備擇假設(shè)(H1)為有顯著影響。

2 結(jié)果

2.1 模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚生長的影響

實(shí)驗(yàn)開始時(shí)及處理15d和30d后實(shí)驗(yàn)魚的體長和體重結(jié)果見表 1,數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布和方差齊性。結(jié)果表明不同強(qiáng)度抄網(wǎng)刺激未對(duì)體長及體重造成顯著影響(P＞0.05;表 2)。每天記錄各處理是否有死亡,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后比較各組魚的死亡率,結(jié)果表明各組死亡率之間無顯著差異(P＞0.05),各處理組魚的生長發(fā)育及健康狀況良好。顯著性檢驗(yàn)接受H0;效應(yīng)量表明15d刺激效應(yīng)較弱,貝葉斯因子以中等程度的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量表明30d的刺激效應(yīng)中等,貝葉斯因子表明支持H0的證據(jù)較弱。

表1 模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚生長的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)Tab.1 Body length and wet body weight of the large yellow croaker at different treatments (mean±SD)

表2 生長相關(guān)數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.2 Growth-related data analysis results

2.2 模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚行為的影響

新環(huán)境測試結(jié)果列于表 3。刺激15d后(圖 5A和5B),各刺激水平下的大黃魚幼魚在變換區(qū)域次數(shù)(A)、進(jìn)入邊區(qū)域的次數(shù)(B)、進(jìn)入角區(qū)域的次數(shù)(C)、出適應(yīng)區(qū)的次數(shù)(D)、在邊區(qū)域待的時(shí)間(E)均無顯著差異(P值均大于0.05;具體見表 3)。角區(qū)域待的時(shí)間(F),顯著性檢驗(yàn)(P=0.008)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:5.0min/(F·D)組顯著(P＜0.05)高于7.5min/(F·D)組,其他各組之間差異不顯著(P＞0.05);貝葉斯因子(BF10=6.451)以中等程度的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.276)表明不同刺激強(qiáng)度對(duì)大黃魚幼魚在角區(qū)域所待時(shí)間的影響較大。在角區(qū)域單次持續(xù)的最長時(shí)間(G),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0,但效應(yīng)量(η2=0.168)較大,貝葉斯因子(BF10=1.067)以較弱的證據(jù)支持H1。

圖5 第15天新環(huán)境測試行為參數(shù)Fig.5 The behavioral parameters of the large yellow croaker in the novel environment test after15-day chase treatment

表3 新環(huán)境測試相關(guān)數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.3 Novel environment test related data analysis results

刺激30d后(圖 6A和6B),關(guān)于變換區(qū)域的次數(shù)(A),顯著性檢驗(yàn)(P=0.017)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:7.5min/(F·D)組顯著(P＜0.05)高于2.5min/(F·D)組;貝葉斯因子(BF10=3.656)以中等程度的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.244)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚變換區(qū)域次數(shù)的影響較大。進(jìn)入邊區(qū)域的次數(shù)(B),顯著性檢驗(yàn)(P=0.017)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:7.5min/(F·D)組顯著(P＜0.05)高于2.5min/(F·D)組;貝葉斯因子(BF10=3.695)以中等程度的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.245)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚進(jìn)入邊區(qū)域次數(shù)的影響較大。進(jìn)入角區(qū)域的次數(shù)(C),顯著性檢驗(yàn)(P=0.009)接受H1,多重比較結(jié)果顯示7.5min/(F·D)組顯著(P＜0.05)高于2.5min/(F·D)組;貝葉斯因子(BF10=6.146)以中等程度的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.273)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚進(jìn)入角區(qū)域的次數(shù)影響較大。在角區(qū)域待的時(shí)間(F),顯著性檢驗(yàn)(P=0.023)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:7.5min/(F·D)組顯著(P＜0.05)高于2.5min/(F·D)組;貝葉斯因子(BF10=2.897)以較弱的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.231)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚在角區(qū)域待的時(shí)間影響較大。另外,出適應(yīng)區(qū)的次數(shù)(D),在角區(qū)域單次持續(xù)的最長時(shí)間(G),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.399、0.359)以較弱的證據(jù)支持H0,效應(yīng)量(η2=0.096、0.088)中等。在邊區(qū)域待的時(shí)間(E),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=1.244)以較弱的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.178)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚在邊區(qū)域待的時(shí)間影響較大。

圖6 第30天新環(huán)境測試行為參數(shù)Fig.6 The behavioral parameters of the large yellow croaker in the novel environment test after 30-day chase treatment

恢復(fù)性測試結(jié)果列于表 4。刺激15d后(圖 7A),各個(gè)刺激水平下的大黃魚幼魚首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間(A),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=4.114)以較弱的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.250)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間影響較大。在適應(yīng)區(qū)外待的時(shí)間(B),顯著性檢驗(yàn)P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.295)以中等程度的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.070)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚在適應(yīng)區(qū)外待的時(shí)間影響中等。首次回適應(yīng)區(qū)的時(shí)間(C),顯著性檢驗(yàn)(P=0.015)接受H1,多重比較的結(jié)果顯示5.0min/(F·D)組，首次回適應(yīng)區(qū)的時(shí)間顯著(P＜0.05)長于對(duì)照組;貝葉斯因子(BF10=4.114)以中等程度的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.147)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚首次回適應(yīng)區(qū)的時(shí)間影響較大。

表4 恢復(fù)性測試相關(guān)數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.4 Emergence test related data analysis results

追趕刺激30d后(圖 7B),首次回適應(yīng)區(qū)的時(shí)間(A)顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.970)以非常弱的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.148)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間影響較大。在適應(yīng)區(qū)外待的時(shí)間(B),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.513)以較弱的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.110)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚在適應(yīng)區(qū)外待的時(shí)間影響中等。首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間(C),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.258)以中等程度的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.059)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間影響中等。

圖7 刺激15d（A）和30d（B）恢復(fù)性測試行為參數(shù)Fig.7 The behavioral parameters of the large yellow croaker in the emergence test after 15-day (A) and 30-day (B) chase treatment

壓力應(yīng)對(duì)方式測試結(jié)果列于表 5。刺激15d后(圖 8),各個(gè)刺激強(qiáng)度下的大黃魚幼魚在壓力后的恢復(fù)時(shí)間上不存在顯著差異,顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.224)以中等程度的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.049)較小,表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚壓力后恢復(fù)時(shí)間影響不大。刺激30d后(圖 8),各個(gè)刺激水平下的壓力后恢復(fù)時(shí)間顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.378)以較弱的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.098)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚壓力后恢復(fù)時(shí)間影響中等。

圖8 刺激壓力應(yīng)對(duì)方式測試行為參數(shù)Fig.8 The behavioral parameters of the large yellow croaker in the emergence test after chase treatment

表5 壓力應(yīng)對(duì)方式相關(guān)數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.5 Stress coping style test related data analysis results

回避測試結(jié)果表明,刺激15d和30d,各個(gè)刺激水平下的大黃魚幼魚回避率的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著(P＞0.05;圖 9)。

圖9 刺激回避測試行為參數(shù)Fig.9 The behavioral parameters of the large yellow croaker in the avoidance test after chase treatment

2.3 模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚游泳能力的影響

隨機(jī)選取各處理組樣本進(jìn)行游泳能力測試,數(shù)據(jù)分析結(jié)果列于表 6。刺激15d后,關(guān)于Ucrita(圖 10),顯著性檢驗(yàn)(P=0.007)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:5.0和7.5min/(F·D)組的Ucrita顯著低于(P＜0.05)處理組及2.5min/(F·D)組,其他各組之間差異不顯著(P＞0.05);貝葉斯因子(BF10=8.083)以中等程度的證據(jù)支持 H1;效應(yīng)量(η2=0.651)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚Ucrita的影響很大。各組的Ucritr(圖 10)顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=1.057)以較弱的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.377)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚Ucritr的影響較大。

圖10 刺激15d后所測得的絕對(duì)和相對(duì)臨界游泳速度Fig.10 The absolute and relative critical swimming speed of the large yellow croaker after 15-day chase treatment

表6 游泳能力相關(guān)數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.6 Swimming ability related data analysis results

刺激30 d后,不同刺激水平下的Ucrita差異不顯著(圖 11),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=1.217)以較弱的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.447)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚Ucrita的影響較大。不同刺激水平下的Ucritr(圖 11),顯著性檢驗(yàn)(P＞0.05)接受H0;貝葉斯因子(BF10=0.907)以較弱的證據(jù)支持H0;效應(yīng)量(η2=0.380)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚Ucritr的影響較大。

圖11 刺激30d后所測得的絕對(duì)和相對(duì)臨界游泳速度Fig.11 The absolute and relative critical swimming speed of the large yellow croaker after 30-day chase treatment

2.4 模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚應(yīng)激水平的影響

皮質(zhì)醇數(shù)據(jù)分析結(jié)果列于表 7。刺激15d后(圖 12),皮質(zhì)醇水平顯著性檢驗(yàn)(P=0.049)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:7.5min/(F·D)組的大黃魚幼魚皮質(zhì)醇濃度顯著(P＜0.05)低于其他組;貝葉斯因子(BF10=2.101)以較弱的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.606)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚皮質(zhì)醇水平的影響很大。

表7 皮質(zhì)醇水平數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.7 Cortisol concentration data analysis results

刺激30d后(圖 12),皮質(zhì)醇水平顯著性檢驗(yàn)(P=0.028)接受H1,多重比較結(jié)果顯示:2.5min/(F·D)組的皮質(zhì)醇水平顯著(P＜0.05)低于其他組;貝葉斯因子(BF10=3.018)以中等程度的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.661)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚皮質(zhì)醇水平的影響很大。

圖12 刺激15d和30d后各組皮質(zhì)醇濃度Fig.12 The cortisol concentration of the large yellow croaker after15-day and 30-day chase treatment

2.5 早期模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚后期應(yīng)激水平的影響

停止刺激后第8天,再次給予刺激,皮質(zhì)醇水平分析結(jié)果列于表 8。顯著性檢驗(yàn)接受H1(P=0.0004),多重比較結(jié)果顯示各處理組皮質(zhì)醇水平均顯著低于對(duì)照組(圖 13),除5.0和7.5min/(F·D)組之間差異不顯著外,其余各組之間均存在顯著差異;貝葉斯因子(BF10=59.843)以非常強(qiáng)的證據(jù)支持H1;效應(yīng)量(η2=0.968)表明不同刺激水平對(duì)大黃魚幼魚二次應(yīng)激反應(yīng)的影響非常大。

圖13 再次刺激后皮質(zhì)醇濃度Fig.13 The cortisol concentration of the large yellow croaker stimulated again at a 7-day interval after terminating the 30-day stimulation

表8 二次刺激后皮質(zhì)醇數(shù)據(jù)分析結(jié)果Tab.8 The cortisol concentration data analysis results of second stimulation

3 討論

抄網(wǎng)追趕能夠模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn),常用于增殖放流野化訓(xùn)練。大黃魚是我國增殖放流的重要目標(biāo)物種[1],現(xiàn)如今并未取得可觀成效,主要原因可能是人工養(yǎng)殖的放流苗種在一些行為特征及運(yùn)動(dòng)能力上存在缺陷,使其成活率較低[26—28]。本實(shí)驗(yàn)通過不同水平抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)發(fā)現(xiàn),大黃魚幼魚行為、游泳能力及應(yīng)激反應(yīng)均受到一定的影響。特別是停訓(xùn)后第8天再次接受刺激時(shí),大黃魚幼魚的應(yīng)激水平顯著提高,為后續(xù)探究大黃魚的行為以及放流前的馴化奠定了行為學(xué)研究的基礎(chǔ)。

3.1 抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚生長的影響

有研究表明,養(yǎng)殖期間的一些脅迫會(huì)使魚類產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),進(jìn)而影響生長。例如,付成等[40]研究發(fā)現(xiàn)短期捕食脅迫會(huì)降低鯉(Cyprinus carpio)幼魚的生長率;翁朝紅等[41]研究發(fā)現(xiàn)操作脅迫會(huì)抑制大黃魚幼魚的生長。本研究發(fā)現(xiàn)(表 1),雖然顯著性檢驗(yàn)顯示15d的抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練未對(duì)大黃魚幼魚的體重及體長產(chǎn)生顯著負(fù)面影響,但貝葉斯因子和效應(yīng)量都顯示30d刺激訓(xùn)練的影響已不容忽視。本研究的結(jié)果不甚顯著,可能是刺激強(qiáng)度不夠所致,也或者處于溫和應(yīng)激狀態(tài)下的魚,經(jīng)歷一段時(shí)間追趕刺激后,自身能夠?qū)ν庠创碳ぷ龀鲞m應(yīng)性調(diào)整[17]。雖然總體影響不顯著,但有意思的是2.5min/(F·D)組的魚生長最慢,7.5min/(F·D)組的魚生長最快,這是否意味著大黃魚對(duì)應(yīng)激的適應(yīng)力強(qiáng),值得進(jìn)一步研究。

3.2 抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚行為的影響

在自然環(huán)境中,魚類經(jīng)常面臨著被捕食的風(fēng)險(xiǎn),尤其是在幼魚階段,捕食脅迫常常會(huì)導(dǎo)致魚類的大量死亡[42]。同樣,捕食脅迫也是放流魚進(jìn)入野外環(huán)境后所面臨的主要生存威脅之一,在眾多影響放流魚存活率的因素中,攝食-反捕食能力不足被認(rèn)為是直接導(dǎo)致死亡率高的重要因素[27,44]。Brown等[13]指出持續(xù)的抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能夠提高來自高捕食或者低捕食壓力地區(qū)埃氏短棒鳉(Brachyrhaphis episcopi)后代的大膽性。Moscicki 等[45]也證明了網(wǎng)追趕處理能夠增強(qiáng)黑帶嬌麗魚(Amatitlania nigrofasciata)的大膽性,并誘導(dǎo)提高魚的應(yīng)激恢復(fù)能力。

經(jīng)歷了15d的追趕訓(xùn)練后(圖 5),變換區(qū)域次數(shù)(A)、進(jìn)入邊區(qū)域的次數(shù)(B)、進(jìn)入角區(qū)域的次數(shù)(C)、出適應(yīng)區(qū)的次數(shù)(D)、在邊區(qū)域待的時(shí)間(E)的數(shù)據(jù)分析結(jié)果支持H0，在角區(qū)域待的時(shí)間(F)接受H1；在角區(qū)域單次持續(xù)的最長時(shí)間(G)，顯著性檢驗(yàn)接受H0，但效應(yīng)量較大，從效應(yīng)量角度考慮，抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能夠在一定程度上影響大黃魚幼魚在角區(qū)域待的時(shí)間，整體水平上，5min/(F.D)組在角區(qū)域待的時(shí)間最長。綜合分析，抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練并沒有對(duì)大黃魚幼魚對(duì)陌生環(huán)境探索性產(chǎn)生較大影響。追趕刺激30d(圖 6)后的結(jié)果,可看出一定強(qiáng)度的刺激訓(xùn)練可以降低大黃魚的冒險(xiǎn)性。7.5min/(F·D)組的大黃魚幼魚在變換區(qū)域的次數(shù)、進(jìn)入邊區(qū)域的次數(shù)、進(jìn)入角區(qū)域的次數(shù)都要顯著高于2.5min/(F·D)。

恢復(fù)性測試中,追趕訓(xùn)練15d后(圖 7A),顯著性檢驗(yàn)及效應(yīng)量均以較強(qiáng)的證據(jù)支持抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)會(huì)對(duì)大黃魚幼魚首次回適應(yīng)區(qū)的時(shí)間產(chǎn)生顯著消極影響的結(jié)論。顯著性檢驗(yàn)顯示首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間接受H0,但效應(yīng)量較大,從效應(yīng)量的角度分析,抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)會(huì)對(duì)大黃魚幼魚首次出適應(yīng)區(qū)的時(shí)間產(chǎn)生較大影響。追趕訓(xùn)練30d后(圖 7B),各刺激強(qiáng)度間無顯著差異,可能與魚已適應(yīng)了刺激有關(guān)。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果也從另一方面佐證了經(jīng)過抄網(wǎng)刺激訓(xùn)練后的大黃魚更加謹(jǐn)慎。

壓力應(yīng)對(duì)測試中,追趕訓(xùn)練15d或30d后(圖 8),不管是顯著性檢驗(yàn),還是效應(yīng)量和貝葉斯因子,都顯示各組之間的壓力耐受水平無顯著差異,唯一異常點(diǎn)是30d刺激后,5.0min/(F·D)組的壓力耐受水平(和恢復(fù)時(shí)間成反比)反而降低了(圖 8),可能是個(gè)體差異所致,30d刺激后的數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)差明顯高。魚對(duì)壓力的耐受水平應(yīng)該和受刺激魚運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度對(duì)魚的呼吸(Excess post exercise oxygen consumption,EPOC,過量耗氧)能力影響有關(guān)。例如,力竭追趕訓(xùn)練對(duì)巖原鯉(Procypris rabaudi)幼魚的 EPOC無顯著性影響,但卻顯著提高了中華倒刺鲃(Spinibar-bus sinensis)幼魚的EPOC和運(yùn)動(dòng)后恢復(fù)時(shí)間[45];持續(xù)4周的有氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練使虹鱒(Oncorhynchus mykiss)的心臟搏動(dòng)能力和心輸出量顯著提高[46];以1.5 BL/s的速度訓(xùn)練8個(gè)月,能使大鱗大馬哈魚(Oncorhynchus tshawytscha)的靜止耗氧率提高50%[47]。本研究在刺激30d后,除了5.0min/(F·D)組略高于對(duì)照組外,2.5組和7.5min/(F·D)組的刺激后恢復(fù)時(shí)間均要低于對(duì)照組,這說明隨著追趕訓(xùn)練的持續(xù),大黃魚幼魚的有氧呼吸能力得到了鍛煉,進(jìn)而提高了其低氧耐受水平。回避性測試中,不管是15d還是30d (圖 9)的追趕訓(xùn)練,都對(duì)其回避率無顯著影響,說明該訓(xùn)練方式可能對(duì)大黃魚幼魚回避危險(xiǎn)的能力影響不大。

3.3 抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚游泳速度的影響

游泳能力關(guān)乎魚類的生存、避敵、捕食、棲息地的選擇等[48—51]。因此,魚類的游泳能力決定著其對(duì)自然環(huán)境的適應(yīng)能力[50—53]。研究表明,追趕訓(xùn)練能夠在一定程度上塑造魚類的游泳能力,而臨界游泳速度(Critical swimming speed,Ucrit)是評(píng)定魚類游泳能力強(qiáng)弱極為重要的指標(biāo)[36,53]。

本研究中,刺激15d后(圖 10),顯著性檢驗(yàn)和效應(yīng)量都以較強(qiáng)的證據(jù)支持H1,5.0和7.5min/(F·D)組大黃魚幼魚的Ucrita顯著低于對(duì)照組,2.5min/(F·D)組顯著高于7.5min/(F·D),雖然顯著性檢驗(yàn)顯示各組的Ucritr不存在顯著差異,但效應(yīng)量較大,從效應(yīng)量的角度來講,抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)會(huì)對(duì)大黃魚幼魚的Ucritr產(chǎn)生較大影響。另外,Ucrita和Ucritr與刺激強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)性,這說明隨著刺激強(qiáng)度的增大,大黃魚幼魚的Ucrit反而降低了,這與周龍艷等[54]對(duì)胭脂魚進(jìn)行的追趕訓(xùn)練得到的游泳速度結(jié)果一致?？赡苁谴簏S魚生性敏感,應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)烈,從而導(dǎo)致應(yīng)激反應(yīng)所產(chǎn)生的負(fù)面影響抵消了追趕訓(xùn)練對(duì)Ucrit的正面效應(yīng)。

刺激30d后(圖 11),P表明各組的Ucrita和Ucritr均無顯著差異,但從效應(yīng)量角度來講,抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)會(huì)對(duì)大黃魚幼魚的Ucrita和Ucritr產(chǎn)生較大影響。趨勢上,除了2.5min/(F·D)組的Ucrita和Ucritr略低于對(duì)照組外,5.0和7.5min/(F·D)組的均高于對(duì)照組,并且5.0min/(F·D)組的Ucrita和Ucritr分別要比對(duì)照組高約52%和39%,7.5min/(F·D)組的Ucrita和Ucritr分別要比對(duì)照組高約13%和20%。類似的訓(xùn)練結(jié)果在前人的研究中已有出現(xiàn),Farrel等[55]對(duì)虹鱒(Oncorhynchus mykiss)進(jìn)行了為期28—52d的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的魚游泳速度要比那些沒有經(jīng)過訓(xùn)練的魚快12%。Li 等[56]以瀕危魚類厚頜魴(Megalobrama pellegrini)為研究對(duì)象,每天進(jìn)行一次為期5min的抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練,持續(xù)5周,最終的游泳測試結(jié)果表明雖然力竭性追趕訓(xùn)練組和對(duì)照組魚的游泳速度不存在顯著差異,但力竭訓(xùn)練組的Ucrit值要比對(duì)照組高5%。本實(shí)驗(yàn)中,在進(jìn)行15d的追趕訓(xùn)練后,訓(xùn)練組的Ucrit低于對(duì)照組,而在30d后,和對(duì)照組相比,Ucrit得到了不同程度的改善,說明15d的訓(xùn)練時(shí)間還沒有達(dá)到提高大黃魚幼魚Ucrit的程度。追趕訓(xùn)練效果也因種而已,例如Liu等[57]對(duì)瓦氏黃顙魚(Pelteobagrus vachelli)僅進(jìn)行了為期14d的追趕訓(xùn)練,訓(xùn)練組魚的Ucrit就顯著高于對(duì)照組。這說明不同魚的游泳能力可塑性也不同,要依具體的研究對(duì)象確定訓(xùn)練時(shí)間。

3.4 抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚應(yīng)激水平的影響

在環(huán)境脅迫導(dǎo)致的應(yīng)激狀態(tài)下,魚體血液指標(biāo)會(huì)發(fā)生一系列變化,其中血液皮質(zhì)醇水平的升高是魚類應(yīng)激反應(yīng)的主要特征,通常用來評(píng)估應(yīng)激反應(yīng)的強(qiáng)度[58,18]。過多的皮質(zhì)醇會(huì)造成生長停止,肌肉消退及脂肪合成減少,機(jī)體消瘦[60]。有研究表明,動(dòng)物幼體長期暴露在高捕食壓力下通常會(huì)導(dǎo)致更加積極的應(yīng)對(duì)方式,表現(xiàn)為皮質(zhì)醇水平的降低。Fischer 等[61]分別比較了來自高捕食壓力和低捕食壓力地區(qū)孔雀魚(Poecilia reticulata)的皮質(zhì)醇含量,表明高捕食壓力地區(qū)的孔雀魚皮質(zhì)醇含量顯著低于低捕食壓力地區(qū)。但也有研究發(fā)現(xiàn)了相反的結(jié)果,例如Hope等[9]對(duì)黑帶嬌麗魚(A.nigrofasciata)的追趕刺激實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)刺激組皮質(zhì)醇水平要顯著高于非處理組。在本研究中,刺激15d后(圖 12),顯著性檢驗(yàn)以及效應(yīng)量都以較強(qiáng)的證據(jù)支持H1,多重比較結(jié)果顯示7.5min/(F·D)組的大黃魚幼魚皮質(zhì)醇水平顯著低于對(duì)照組及其他處理組,2.5和5.0min/(F·D)組和對(duì)照組無顯著差異。刺激30d后(圖 12),顯著性檢驗(yàn)以及效應(yīng)量也都以較強(qiáng)的證據(jù)支持H1,多重比較結(jié)果顯示2.5min/(F·D)組的大黃魚幼魚皮質(zhì)醇水平顯著低于對(duì)照組及其他處理組,5.0和7.5min/(F·D)組和對(duì)照組無顯著差異。這說明在短期內(nèi),大黃魚幼魚對(duì)較強(qiáng)刺激適應(yīng)能力強(qiáng),而一旦適應(yīng)后,長期的低水平刺激反而有利于降低皮質(zhì)醇水平。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是在短期內(nèi),較高水平的刺激實(shí)際上是增加了大黃魚幼魚的訓(xùn)練時(shí)間,從而更早達(dá)到降低其應(yīng)激水平的目的。而刺激30d后,較低水平的刺激也達(dá)到了能夠降低其應(yīng)激水平的目的,但較高水平的刺激可能略微超過了實(shí)驗(yàn)魚的承受范圍,反而使其皮質(zhì)醇水平又恢復(fù)到了和對(duì)照組相近的水平,此現(xiàn)象有待未來進(jìn)一步研究。

3.5 早期抄網(wǎng)追趕模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)對(duì)大黃魚幼魚后期應(yīng)激水平的影響

目前經(jīng)濟(jì)水生生物的放流方式主要有海面直接放流和船載滑道放流。由于放流個(gè)體的游泳能力及規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)能力較差,在放流過程中受到水面沖擊、水流及捕食者等因素的影響[61],及放流過程中的運(yùn)輸、碰撞等物理刺激和進(jìn)入一個(gè)完全陌生的環(huán)境中的不適應(yīng)性[62,63]會(huì)使放流魚產(chǎn)生一定的應(yīng)激反應(yīng),這種應(yīng)激反應(yīng)進(jìn)而會(huì)影響放流魚的存活率,降低增殖放流的效果。在本實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)30d刺激結(jié)束后的第8天對(duì)大黃魚幼魚進(jìn)行再次刺激時(shí)(圖 13),顯著性檢驗(yàn)、效應(yīng)量以及貝葉斯因子都以極強(qiáng)的證據(jù)支持H1,這說明網(wǎng)追趕個(gè)體對(duì)壓力具有較高的容忍度,對(duì)于提高放流大黃魚的適應(yīng)性來說具有十分重要的意義。Takahashi 等[17]以真鯛(Pagrus major)幼魚為研究對(duì)象探究了抄網(wǎng)追趕對(duì)其攝食行為的影響。結(jié)果表明,投喂飼料90min后,來自抄網(wǎng)追趕組的真鯛幼魚攝取飼料的數(shù)量更多,進(jìn)行攝食的魚的數(shù)量也更多,這說明每天受到輕微壓力脅迫的魚類對(duì)環(huán)境變化引起的壓力更具有抵抗力。此外,Archard等[64]也揭示了輕微的壓力脅迫(轉(zhuǎn)移到新環(huán)境)后暴露在高捕食者壓力的埃氏短棒鳉(B.episcopi)要比來自低捕食者壓力的魚應(yīng)激激素(皮質(zhì)醇)的釋放率低,和本研究的結(jié)果一致。說明用來模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)的抄網(wǎng)追趕訓(xùn)練能夠降低大黃魚幼魚再次面對(duì)風(fēng)險(xiǎn)時(shí)的應(yīng)激水平,這對(duì)于其快速適應(yīng)放流后的自然環(huán)境來說具有重要意義。

綜上所述,本研究進(jìn)一步證明了模擬捕食者風(fēng)險(xiǎn)訓(xùn)練能夠在一定程度上提高大黃魚幼魚對(duì)陌生環(huán)境的適應(yīng)能力,同時(shí)在改善個(gè)體的游泳能力方面也發(fā)揮了一定的作用。此外,這種訓(xùn)練方式能夠顯著降低個(gè)體再次面對(duì)壓力時(shí)的應(yīng)激水平,對(duì)于提高增殖放流個(gè)體的適應(yīng)性來說具有極為重要的意義。