腦血栓患者血清Dickkopf相關(guān)蛋白1、骨硬化蛋白表達(dá)水平及其與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系

王偉偉, 徐家萍, 賈軍輝, 張浩亮

(延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院 新生兒重癥監(jiān)護(hù)室, 陜西 咸陽(yáng), 712000)

腦血栓是一種缺血性腦血管疾病，死亡率較高，同時(shí)還存在失語(yǔ)、偏癱等后遺癥[1-2]。腦血栓易損斑塊的整個(gè)發(fā)病過(guò)程與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)[3]。Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK-1)是一種血漿蛋白，具有2個(gè)富含半胱氨酸的區(qū)域。研究[4]表明, DKK-1可以參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)(增殖、遷移、侵襲)、胚胎發(fā)育期間的頭部形成、破骨細(xì)胞生成、炎癥反應(yīng)等各種生理和病理過(guò)程。DKK-1在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病患者血清中表達(dá)上調(diào)，參與炎癥反應(yīng)，加重動(dòng)脈粥樣硬化程度[5]。

骨硬化蛋白(SOST)主要由骨細(xì)胞分泌，能夠抑制骨生長(zhǎng)，并可在血清或血漿中鑒定到[6]。SOST的遺傳缺陷或缺失會(huì)導(dǎo)致罕見(jiàn)的高骨量硬化癥和范布赫姆病，抑制SOST水平會(huì)增加骨形成并減少骨吸收，導(dǎo)致骨量、骨礦物質(zhì)密度和骨強(qiáng)度增加，降低骨折風(fēng)險(xiǎn)[7]。研究[8]顯示, SOST通過(guò)ERK1/2-MARK通路參與調(diào)控鼓室硬化過(guò)程中的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)鼓室硬化的形成。Wnt信號(hào)通路參與調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化和多種炎癥性疾病, DKK-1、SOST均為Wnt信號(hào)通路中重要的內(nèi)源性抑制蛋白[9]。但DKK-1、SOST與腦血栓患者疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系尚未闡明。本研究探究腦血栓患者血清DKK-1、SOST表達(dá)水平與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月—2021年6月收治的110例腦血栓患者(腦血栓組)為研究對(duì)象，其中男78例，女32例; 平均年齡(65.70±7.20)歲。根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)[10]將110例患者分為3組: NIHSS<4分為輕度組(33例), NIHSS 4～<10分為中度組(55例), NIHSS≥10分為重度組(22例)。另選取同期一般資料相匹配的體檢健康者110例為對(duì)照組，男81例，女29例; 平均年齡(64.80±8.60)歲。納入標(biāo)準(zhǔn): 發(fā)病后72 h內(nèi)就診者; 符合腦血栓診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]者; 年齡58～78歲者。排除標(biāo)準(zhǔn): 有敗血癥、風(fēng)濕病者; 合并腎臟、肝臟疾病者; 合并心力衰竭者?；颊呒凹覍僮栽竻⒓?，且本研究通過(guò)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

入組患者均采集10 mL外周血，分別使用血清DKK-1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒(貨號(hào): EK0867, 武漢博士德生物公司)和SOST ELISA試劑盒(貨號(hào): EK0968, 武漢博士德生物公司)檢測(cè)血清DKK-1、SOST水平。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)總膽固醇、超敏C反應(yīng)蛋白、高密度脂蛋白等生化指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 對(duì)照組與腦血栓組患者基線資料比較

2組患者年齡、高血壓病、超敏C反應(yīng)蛋白等資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組研究對(duì)象基線資料

2.2 腦血栓組與對(duì)照組患者血清DKK-1、SOST水平比較

腦血栓組血清DKK-1、SOST水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 腦血栓組與對(duì)照組血清DKK-1、SOST比較 pg/mL

2.3 各組腦血栓患者血清DKK-1、SOST水平及NIHSS評(píng)分比較

輕度、中度、重度組患者血清DKK-1、SOST水平及NIHSS評(píng)分呈升高趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 各組腦血栓患者血清DKK-1、SOST水平及NIHSS評(píng)分比較

2.4 腦血栓患者血清DKK-1、SOST水平的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，腦血栓患者血清DKK-1與SOST水平呈正相關(guān)(r=0.705,P=0.001)。見(jiàn)圖1。

圖1 血清DKK-1、SOST的相關(guān)性

2.5 血清DKK-1、SOST水平分別與NIHSS評(píng)分的相關(guān)性

腦血栓患者血清DKK-1水平與NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.625,P<0.001); 血清SOST水平與NIHSS評(píng)分也呈正相關(guān)(r=0.674,P<0.001)。

2.6 DKK-1、SOST診斷重度腦血栓的效能

ROC曲線分析結(jié)果顯示, DKK-1診斷重度腦血栓的曲線下面積(AUC)為0.879(95%CI: 0.808～0.950), 最佳截?cái)嘀禐?01.69 pg/mL, 特異度為73.90%, 敏感度為90.90%; SOST診斷重度腦血栓的AUC為0.815(95%CI: 0.710～0.919), 敏感度為86.40%, 特異度為72.70%, 最佳截?cái)嘀禐?80.51 pg/mL; DKK-1聯(lián)合SOST診斷的AUC為0.911(95%CI: 0.849～0.973), 敏感度和特異度分別為86.40%、84.10%。見(jiàn)圖2。

圖2 DKK-1、SOST診斷重度腦血栓的ROC曲線

3 討 論

腦血栓是因動(dòng)脈粥樣硬化使血管增厚、管腔狹窄等造成局部供血不足，從而出現(xiàn)局部腦組織壞死[12]。動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展離不開(kāi)炎癥反應(yīng)，研究[13]發(fā)現(xiàn)，炎癥因子與老年急性腦梗死頸動(dòng)脈粥樣硬化嚴(yán)重程度相關(guān)。Wnt信號(hào)通路參與調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化和多種炎癥性疾病, DKK-1、SOST是Wnt通路中被研究最多的因子[9]。然而, DKK-1、SOST與腦血栓之間的關(guān)系尚不清楚。

DKK-1屬于DKK家族的一種分泌蛋白，能夠與LRP5/6結(jié)合以抑制Wnt信號(hào)通路，從而調(diào)節(jié)骨細(xì)胞分化。研究[14]表明, DKK-1與缺血性心臟病、腦血管疾病、冠狀動(dòng)脈鈣化以及炎癥有關(guān)。據(jù)報(bào)道[5], DKK-1在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病中高表達(dá)，加重了炎癥反應(yīng)，并使病情惡化。研究[9]表明，冠心病患者血漿DKK-1及炎癥指標(biāo)超敏 C 反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素(IL)-6水平增加, DKK-1的高表達(dá)與冠心病患者冠狀動(dòng)脈病變程度有關(guān)。一項(xiàng)前瞻性研究[15]發(fā)現(xiàn)，血清DKK-1與未來(lái)心血管事件存在獨(dú)立關(guān)聯(lián)。此外，在感染性疾病(支氣管炎、肺炎以及病毒感染)或血液疾病(骨髓衰竭和范可尼貧血)中，外周血DKK-1水平也會(huì)急劇增加[16]。結(jié)合本研究結(jié)果，輕度、中度、重度組DKK-1水平逐步升高，并且與NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)性，說(shuō)明DKK-1與腦血栓發(fā)展有關(guān)。上述研究進(jìn)展提示, DKK-1可能通過(guò)誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)，加快腦血栓炎癥反應(yīng)，推動(dòng)與該病相關(guān)的炎癥循環(huán)。

SOST是由SOST基因編碼的分泌型糖蛋白，通過(guò)介導(dǎo)Wnt/β-鏈蛋白信號(hào)通路抑制骨形成[17]。研究[18]發(fā)現(xiàn)，終末期腎臟病患者血清SOST水平升高，且SOST水平與患者血管鈣化積分呈正相關(guān)。有關(guān)維持血液透析患者的研究[19]顯示，患者體內(nèi)SOST表達(dá)異常上調(diào)，并且與血管鈣化程度有關(guān)。趙俊麗等[20]研究顯示，隨著SOST水平的升高，冠狀動(dòng)脈鈣化率顯著增加、鈣化程度加重。SOST還參與炎癥反應(yīng)。ERK1/2-MAPK通路在炎癥反應(yīng)中處于關(guān)鍵地位，而SOST可以磷酸化ERK1/2, 介導(dǎo)鼓室硬化發(fā)生發(fā)展中的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)鼓室硬化[8]。本研究中，腦血栓組患者血清SOST水平顯著高于對(duì)照組; 隨著患者腦血栓病變程度的加重，血清SOST水平逐步增高，提示SOST與腦血栓發(fā)病過(guò)程密切相關(guān)。血清SOST水平與腦血栓患者NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.674,P≤0.001)。提示SOST一方面可能通過(guò)調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子參與腦血栓的發(fā)病過(guò)程，另一方面SOST在腦血栓中也可能受到其他因子調(diào)控，參與動(dòng)脈粥樣硬化的血管鈣化，介導(dǎo)腦血栓的發(fā)生發(fā)展，然而其具體機(jī)制有待探究。血清DKK-1、SOST水平或可作為預(yù)測(cè)腦血栓患者疾病嚴(yán)重程度的潛在指標(biāo)，本研究ROC曲線顯示, DKK-1、SOST診斷重度腦血栓的AUC分別為0.879(95%CI: 0.808～0.950)、0.815(95%CI: 0.710～0.919); DKK-1聯(lián)合SOST診斷的AUC為0.911(95%CI: 0.849～0.973), 優(yōu)于DKK-1、SOST單獨(dú)診斷效能，說(shuō)明DKK-1、SOST聯(lián)合檢測(cè)有助于臨床診斷重度腦血栓。

綜上所述，腦血栓患者血清中DKK-1、SOST水平較高，均與腦血栓嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。DKK-1聯(lián)合SOST診斷重度腦血栓的效能較好, DKK-1、SOST水平變化具有作為臨床評(píng)估腦血栓疾病嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物的潛能。但本研究存在局限性，樣本量較小，且DKK-1、SOST在腦血栓發(fā)生發(fā)展中的機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。