調(diào)節(jié)三高類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物及其檢測(cè)研究進(jìn)展

李文斌，張 萍，徐 瑩

(1.天津迪科馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司，天津 300499； 2.蕪湖市食品藥品檢驗(yàn)中心，安徽 蕪湖 241006)

高血壓、高血脂、高血糖統(tǒng)稱為“三高癥”，這三者可以單獨(dú)存在，也可以共同發(fā)生，嚴(yán)重危害人們的身體健康和生活質(zhì)量.臨床上用于治療高血壓常用的化學(xué)藥物有氫氯噻嗪、阿替洛爾、氨氯地平、美托洛爾、纈沙坦、螺內(nèi)酯、培哚普利等[1].用于治療高血糖的化學(xué)藥物有二甲雙胍、格列美脲、阿卡波糖、諾和靈、優(yōu)泌林等[2].用于治療高血脂的化學(xué)藥物有阿托伐他汀、瑞舒伐他汀、辛伐他汀等[3].“三高癥”屬于慢性疾病，患者必須長(zhǎng)期服用藥物.雖然西藥藥物的療效明確，但是容易出現(xiàn)胃腸道不適、肝腎疾病等明顯的副作用，不利于長(zhǎng)期服用[4].傳統(tǒng)中醫(yī)藥治療此類疾病已有兩千多年的歷史，臨床經(jīng)驗(yàn)豐富，使用中藥及其制品不良反應(yīng)少、副作用小、療效穩(wěn)定，有著不可替代的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，已經(jīng)成為治療慢性病非常好的選擇.除此之外，現(xiàn)代人對(duì)健康的重視程度越來(lái)越高，具有調(diào)節(jié)血脂、調(diào)節(jié)血糖等功能的中藥保健品也應(yīng)運(yùn)而生，由于能夠用于日常保健以預(yù)防“三高癥”的發(fā)生而倍受消費(fèi)者的青睞.近年來(lái)，常有不法分子為利益所驅(qū)，向純天然的中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥品，使療效緩和的中成藥具有了暫時(shí)的速效，以此來(lái)增加銷量[5].由于中藥制劑的組成成分復(fù)雜，且非法添加的化學(xué)物質(zhì)及添加量未知，檢測(cè)難度很大，患者在不知情下長(zhǎng)期使用“此類藥物”，將產(chǎn)生不可預(yù)知的嚴(yán)重不良反應(yīng)，給群眾用藥安全帶來(lái)極大的威脅[6-8].因此，非法添加化學(xué)藥品已成為近年來(lái)政府打擊的重要內(nèi)容，并且急需有系統(tǒng)的檢測(cè)手段及方法對(duì)其進(jìn)行監(jiān)控.由于調(diào)節(jié)“三高癥”的藥物之間具有協(xié)同作用，使得不法分子為逃避監(jiān)管，會(huì)選擇跨適應(yīng)癥進(jìn)行非法添加，使非法添加藥物的檢測(cè)具有了更強(qiáng)的隱蔽性，因此有必要針對(duì)調(diào)節(jié)“三高癥”中成藥中非法添加的化學(xué)藥物及其檢測(cè)進(jìn)展進(jìn)行全面的總結(jié)，為進(jìn)一步的檢測(cè)工作提供文獻(xiàn)支持.本文針對(duì)調(diào)節(jié)“三高癥”中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物的種類及其檢測(cè)研究情況進(jìn)行總結(jié)闡述.

1 非法添加化學(xué)藥物分類

1.1 降血壓類化學(xué)藥物

高血壓是最常見(jiàn)的心血管疾病，合理使用降血壓類藥物可使腦卒中病死率減少35%～40%，心肌梗死病死率減少15%～20%[9].高血壓是機(jī)制復(fù)雜的循環(huán)系統(tǒng)疾病，目前降壓藥物種類很多，根據(jù)藥理作用可分為利尿劑、β受體阻滯劑、α受體阻滯劑、鈣拮抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張素受體拮抗劑、交感神經(jīng)抑制劑，其對(duì)應(yīng)代表性的降壓類化學(xué)藥物總結(jié)于表1[10].

表1 降血壓類代表性化學(xué)藥物

1.2 降血脂類化學(xué)藥物

高血脂癥是一種慢性代謝性疾病，主要集中人群為中老年人，由于現(xiàn)代人們生活方式的改變，生活水平的提高，此病有明顯的年輕化趨勢(shì).降血脂的藥物主要包含他汀類、貝特類、膽固醇吸收抑制劑類、煙酸類藥物，目前他汀類是市場(chǎng)上降血脂藥物的主流品種.其對(duì)應(yīng)代表性的降血脂類化學(xué)藥物總結(jié)于表2[3].

表2 降血脂類代表性化學(xué)藥物

1.3 降血糖類化學(xué)藥物

糖尿病是以慢性高血糖為特征的一組異質(zhì)性代謝性疾病，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜.目前具有降血糖作用的藥物多種多樣，根據(jù)作用機(jī)制可以分為磺酰脲類、非磺酰脲類、雙胍類、α-葡萄糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、二肽基肽酶-4抑制劑、GLP-1受體激動(dòng)劑、醛糖還原酶抑制劑等[11].其對(duì)應(yīng)代表性的降血糖類化學(xué)藥物總結(jié)于表3.

表3 降血糖類代表性化學(xué)藥物

2 調(diào)節(jié)“三高癥”中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物檢測(cè)方法研究情況

中藥制劑的組成成分極其復(fù)雜，同時(shí)非法添加行為具有隱蔽性，不利于潛在風(fēng)險(xiǎn)的發(fā)現(xiàn)，對(duì)監(jiān)管部門的日常檢測(cè)工作造成了一定的難度[12].目前，最常用的檢測(cè)非法添加化學(xué)藥品的手段有薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)等，以下從國(guó)家發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和以往學(xué)者的研究成果兩個(gè)方面，分別對(duì)常用的檢測(cè)調(diào)節(jié)“三高癥”中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的方法進(jìn)行總結(jié).

2.1 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法

2012年12月14日，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布了保健食品中可能非法添加的物質(zhì)名單(第一批)，并逐步發(fā)布了違法添加化學(xué)藥物的補(bǔ)充檢測(cè)方法.目前針對(duì)降壓類中成藥及調(diào)節(jié)血壓類保健食品中非法添加藥物檢測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)有國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法2009032、2014008[13-14]，其中涉及阿替洛爾、鹽酸可樂(lè)定、氫氯噻嗪、卡托普利、硝苯地平等化學(xué)藥品的篩查和驗(yàn)證.針對(duì)降糖類中成藥及調(diào)節(jié)血糖類保健食品中非法添加藥物檢測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)有國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法2009029、2011008、2013001[15-17]，其中涉及甲苯磺丁脲、格列本脲、瑞格列奈、鹽酸吡格列酮、鹽酸二甲雙胍等化學(xué)藥品的篩查和驗(yàn)證.針對(duì)降血脂類的保健食品中非法添加藥物檢測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食藥監(jiān)辦許2010[114號(hào)][18]，利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)洛伐他汀、辛伐他汀、煙酸.

以上補(bǔ)充檢驗(yàn)方法中，多是利用TLC作為初步的篩查方法，HPLC進(jìn)行定性分析和定量測(cè)定，對(duì)于疑似陽(yáng)性樣品再使用LC-MS做進(jìn)一步驗(yàn)證.具體檢測(cè)化學(xué)藥物成分及其色譜分析條件總結(jié)于表4.

表4 國(guó)家批準(zhǔn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法涉及的非法添加化學(xué)藥物及其分析條件

2.2 研究成果

2.2.1 薄層色譜法

TLC法被用于非法添加物的初步篩查，操作簡(jiǎn)單、成本較低，在國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充方法中常作為第一法.近些年來(lái)，很少有學(xué)者單純使用TLC對(duì)降糖、降壓等中成藥及保健食品中非法添加的化學(xué)藥物進(jìn)行分析.早期研究中，施亞琴等[19]建立了快速篩查中成藥及保健食品中添加5種磺酰脲類化學(xué)降糖藥的TLC方法，利用該方法對(duì)16種18個(gè)批次的市售降糖中成藥及保健食品進(jìn)行篩查，檢出有3種4個(gè)批次的降糖中成藥及保健食品中分別添加有格列本脲和格列吡嗪.張宏蓮等[20]建立了降糖中藥及保健品非法添加雙胍類成分(二甲雙胍、苯乙雙胍)的薄層色譜檢測(cè)方法，利用該方法對(duì)6種中藥降糖藥進(jìn)行檢測(cè)，檢出3種保健品中非法添加了雙胍類成分.

2.2.2 高效液相色譜法

常用檢測(cè)分析手段中，HPLC法簡(jiǎn)便、快速，具有較高的分辨能力，使用二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，對(duì)于鑒定非法添加的化學(xué)藥品具有較高的準(zhǔn)確度[21].

尚士博等[22]建立了高效液相色譜-紫外(HPLC-UV)檢測(cè)具有調(diào)節(jié)血糖功能袋泡茶中4種非法添加化學(xué)藥物含量的分析方法，并采集了市場(chǎng)上7種該類保健品，有一種檢測(cè)出含有格列吡嗪.李榮等[23]利用二極管陣列高效液相色譜(HPLC-DAD)法，在國(guó)家藥品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法涉及13種法定降糖類化學(xué)藥物的基礎(chǔ)上，新增3種易添加降糖類化學(xué)藥物，實(shí)現(xiàn)了16種降糖類化學(xué)藥物的同時(shí)測(cè)定.黎雋等[24]對(duì)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局頒布的降糖類中成藥和保健食品HPLC法進(jìn)行了改進(jìn)，建立了測(cè)定降糖類中成藥中13種非法添加成分的HPLC方法，使用簡(jiǎn)單易制取的流動(dòng)相，分析時(shí)間大幅度縮短，節(jié)約了檢測(cè)成本、提高了檢測(cè)效率.劉敏敏等[25]選擇12種調(diào)脂類化學(xué)藥物作為目標(biāo)物，采用亞3 μm填料核殼色譜柱，建立了高通量的二極管陣列超高效液相色譜(UPLC-DAD)快速分析方法用于測(cè)定降血脂類中成藥及保健食品中的非法添加成分.利用該方法對(duì)抽檢的30批降血脂類中成藥或保健食品進(jìn)行檢測(cè)，其中2批檢岀含有洛伐他汀、去羥基洛伐他汀、洛伐他汀羥酸鈉.

2.2.3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

LC-MS法在非法添加的研究中應(yīng)用得越來(lái)越普遍，具有分辨率高、專屬性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，而且分析需要的樣品量少、分析速度快、結(jié)果可靠，是目前檢測(cè)非法添加藥物的主要確證方法.

陳林等[26]基于亞3 μm色譜柱，建立了降壓類中成藥及保健食品中21種非法添加化學(xué)藥物的HPLC快速檢測(cè)方法及LC-MS確證方法.孟麗等[27]建立了同時(shí)測(cè)定降糖類中成藥中9種非法添加化學(xué)藥物的HPLC方法，并采用LC-MS法對(duì)可疑成分進(jìn)行確認(rèn).利用建立的方法對(duì)養(yǎng)陰降糖片、降糖寧、消糖靈片進(jìn)行檢測(cè)，檢出降糖寧中非法添加了格列本脲.覃娟等[28]建立了同時(shí)檢測(cè)保健食品中非法添加的13種化學(xué)降糖藥物的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析方法，并用于實(shí)際檢測(cè)，結(jié)果從11種降血糖保健食品樣品中檢測(cè)出有5種含非法添加化學(xué)藥物，且均為復(fù)合添加.2種樣品添加二甲雙胍，5種樣品添加苯乙雙胍，2種樣品添加羅格列酮，1種樣品添加甲苯磺丁脲，1種樣品添加吡格列酮，5種樣品添加格列本脲.吳俊輝等[29]采用LC-MS/MS檢測(cè)中藥保健品中的非法添加物質(zhì)，建立了同時(shí)測(cè)定某種“純天然藥食產(chǎn)品”中非法添加4種降糖藥的方法.鄭文燕等[30]建立了同時(shí)測(cè)定減肥類、降糖類中成藥以及保健品中14種非法添加藥物含量的LC-MS/MS方法.嚴(yán)華等[31]建立了超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)用來(lái)對(duì)不同劑型降糖產(chǎn)品中14種降血糖類藥物進(jìn)行檢測(cè)的分析方法.黃柳倩等[32]建立了LC-MS/MS法對(duì)易添加至輔助降血糖、輔助降血脂、輔助降血壓類保健食品中的45種化學(xué)藥品進(jìn)行同時(shí)測(cè)定，在一定程度上擴(kuò)大了對(duì)違法添加化學(xué)藥品的打擊面.并采用該法對(duì)300批輔助降血糖、輔助降血脂、輔助降血壓類保健食品進(jìn)行了測(cè)定，共檢出3批陽(yáng)性樣品，檢出物分別是苯乙雙胍、格列本脲、氫氯噻嗪和氨氯地平.

王琤帥等[33]利用液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(LC-QTOF/MS)技術(shù)，建立了對(duì)降壓類中成藥及保健品中非法添加18種化學(xué)藥物的定性檢測(cè)方法，采用該方法對(duì)本地市場(chǎng)上銷售的12種降壓類中成藥和保健品進(jìn)行快速篩查，有一批檢測(cè)到添加了利血平.姜春來(lái)等[34]利用LC-QTOF/MS法建立了快速、準(zhǔn)確的方法用來(lái)測(cè)定降糖類中成藥及保健食品中14種非法添加藥物.利用該方法對(duì)20種降糖類中成藥和保健品進(jìn)行了快速篩查，共篩查出5份陽(yáng)性樣品，其中2份檢出鹽酸二甲雙胍、1份檢出鹽酸苯乙雙胍、1份檢出格列本脲、1份檢出格列本脲和格列美脲.韓智等[35]采用超高效液相色譜-靜電場(chǎng)軌道肼高分辨質(zhì)譜建立了保健食品中73種非法添加成分的高通量定性篩查和定量分析方法，拓寬了數(shù)據(jù)的可利用性，提高了檢測(cè)效率.

根據(jù)以上報(bào)道，對(duì)檢測(cè)分析方法研究較多的非法添加降血壓成分有阿替洛爾、鹽酸可樂(lè)定、氫氯噻嗪、卡托普利、哌唑嗪、利血平、硝苯地平、氨氯地平、尼群地平、尼莫地平、尼索地平、非洛地平、吲達(dá)帕胺等.非法添加降血脂及降血糖成分有苯扎貝特、阿托伐他汀鈣、吉非貝齊、洛伐他汀、辛伐他汀、非諾貝特、二甲雙胍、苯乙雙胍、阿卡波糖、吡格列酮、格列吡嗪、瑞格列奈、格列齊特、格列本脲、格列美脲、格列喹酮等.調(diào)節(jié)“三高癥”中成藥及保健食品中非法添加藥物成分及其檢測(cè)方法如表5所列.

表5 已發(fā)布研究成果涉及的非法添加化學(xué)藥物及其分析條件

續(xù)表5

3 結(jié)論與展望

高血壓、高血糖、高血脂三者之間關(guān)系密切，治療“三高癥”的藥物之間也會(huì)存在協(xié)同作用，有些不法分子為了逃避監(jiān)管，還會(huì)跨適應(yīng)癥違法添加化學(xué)藥物，所添加的藥物種類也逐年增多，然而目前國(guó)家批準(zhǔn)的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法所檢測(cè)的化合物種類較少，檢測(cè)技術(shù)也不便于基層藥品監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)管抽查時(shí)快速應(yīng)用.因此需要建立能同時(shí)實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)三高類中成藥及保健食品中多種違法添加藥物成分的高通量快篩方法，同時(shí)加強(qiáng)中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物檢測(cè)分析方法的基礎(chǔ)研究，不斷充實(shí)違法添加藥物的檢測(cè)范圍，提高日常檢測(cè)水平，將對(duì)打擊不法行為、加強(qiáng)市場(chǎng)監(jiān)管及保障人民群眾健康起到積極作用.