三峽大老嶺地區(qū)幾種野生重樓屬植物馴化栽培研究

田風(fēng)雷，李道新，譚家林，杜宵，余長蓉，彭洪林，曾百林，王功芳，張永翠

(宜昌三峽大老嶺自然保護區(qū)管理局，湖北 宜昌 443000)

0 引言

重樓屬Paris植物,是百合科重樓屬植物的統(tǒng)稱.根狀莖可入藥，為我國珍貴中藥材植物，其藥用功效早在《神農(nóng)本草經(jīng)》與《本草綱目》上就有記載,具有悠久的歷史[1].近年來，隨著中藥市場對重樓資源需求量的增加，藥材價格大幅攀升，亂采濫挖現(xiàn)象嚴重，而野生七葉一枝花生長周期長，更新慢，且人工種植七葉一枝花起步晚，規(guī)模小，導(dǎo)致野生資源采挖量超過了生長量，野生資源幾近枯竭[2].據(jù)報道，現(xiàn)在七葉一枝花國內(nèi)市場需求量達到3 000 t左右，市場價格已達800元/kg以上，而現(xiàn)有供應(yīng)量僅為1 500多噸，供需矛盾突出[3].

宜昌地處湖北西南部，中高山區(qū)為以七葉一枝花為代表的重樓屬植物的集中分布區(qū)域，據(jù)不完全統(tǒng)計，大老嶺野生重樓及其變種資源共7種[4].由于重樓屬藥用需求量較大, 且野生資源占絕大多數(shù), 受利益驅(qū)動,藥農(nóng)滅絕性亂采濫挖導(dǎo)致野生資源破壞嚴重，幾近枯竭,急需開展資源保護和人工馴化種植工作. 在前期資源調(diào)查的基礎(chǔ)上,本研究通過對本地野生重樓進行選優(yōu)和馴化研究，以期解決宜昌野生重樓引種和馴化栽培技術(shù)難點，為更好地保護和利用宜昌野生珍貴中藥材資源服務(wù)，推進宜昌林下中藥材種植產(chǎn)業(yè)發(fā)展.

1 研究方法與材料

1.1 試驗材料來源結(jié)合前期調(diào)查[4]，我們選擇七葉一枝花、華重樓、球藥隔重樓3種重樓開展馴化栽培試驗.參試種蔸來源于野生種源,苗齡3年以上.栽植前，分種類、地點、重復(fù)調(diào)查測量地下莖長、粗、稱重，用電子天平分別稱量各小區(qū)每個種蔸重量，單位為g，保留2位小數(shù).地下莖長、粗采取游標卡尺量取，單位為cm，保留2位小數(shù).

1.2 試驗設(shè)計試驗設(shè)兩個影響因素，分別是種類和地點；其中種類分別是七葉一枝花、華重樓、球藥隔重樓,地點為千斤園(海拔1 000 m)、雞公埡(海拔1 350 m)、新宮(海拔1 200 m),每個條件下分別設(shè)置3次重復(fù)[5].定植時間2016年1月.

1.2.1 選擇試驗基地 試驗基地要求地勢平坦或溝谷，灌溉方便同時排水良好；土壤要求土層深厚、肥沃疏松、腐殖質(zhì)或有機質(zhì)含量豐富，保水保肥良好，具偏酸性的砂質(zhì)壤土或壤土.利用人工蔭棚或常綠闊葉林、針闊混交林自然遮陰，遮陰程度達到70%～80%.

1.2.2 整地 栽植地提前一個月左右將土壤深翻30 cm以上，并暴曬以利消滅蟲卵、病菌，結(jié)合整地每1 m2施入3～4.5 kg農(nóng)家肥作為基肥.在塊莖移栽之前，認真清除基地里的雜灌、雜草、雜質(zhì)和殘渣.

1.2.3 作畦 將栽植地的土壤反復(fù)耙碎、整平，根據(jù)地塊的坡向進行作畦，達到畦面不能積水的標準即可.畦面要求寬100 cm，高25～30 cm，畦溝和圍溝寬30 cm，四周排水溝相通并有出水口.

1.2.4 移栽 將收集到的野生重樓種質(zhì)資源事先進行分類，每一品種分別按株行距20 cm × 20 cm分塊栽植，并對每一個塊狀種植區(qū)域做好相應(yīng)標簽以及數(shù)據(jù)記錄.在畦面上縱向開溝，溝深4～6 cm，將塊莖的長邊順著開溝的方向放置，使得根系在溝內(nèi)舒展開，用開第二溝的土覆蓋在前一溝，栽植完成后可在畦面上覆蓋松針或腐殖土，厚度以不露土為宜.最后澆透定根水，以后隨時保持土壤濕潤.另外，移栽應(yīng)盡量選擇在陰天或午后陽光弱時進行.

1.2.5 后期管理 移栽完成后，首先要注意植株病蟲害的防治，尤其是地老鼠的防治；其次是要依據(jù)基地的植株生長情況，定期做好除草與培土、灌溉與排水、追肥等措施，必要時對生長明顯瘦弱、病蟲害嚴重以及死亡的植株進行更換，同時更換相關(guān)數(shù)據(jù)[6].

1.3 數(shù)據(jù)調(diào)查與觀測

1.3.1 形態(tài)學(xué)特征觀測 形態(tài)學(xué)特征觀察指標：根狀莖粗、株高、莖粗、葉片數(shù)量、葉長、葉寬、葉型、葉著生方式、花序類型、花梗長、萼片數(shù)、花藥長、花藥數(shù)及種子顏色等[7].生物學(xué)特征觀察方法：于七葉一枝花的根、莖、葉、花、果等器官基本穩(wěn)定時進行.每一品種隨機抽取5個樣點，每樣點抽取20株，編號后固定連續(xù)觀測各性狀特征并記錄試驗數(shù)據(jù).根據(jù)相關(guān)經(jīng)驗及查閱資料，地上莖、葉、花的觀測于4月底左右進行，果實觀測于10月左右進行，根狀莖觀測于12月底左右進行.

1.3.2 物候期觀察 物候期觀察指標：按照時間先后順序，從植株出苗后開始到下一季植株出苗為止，主要觀測植株發(fā)芽出苗期(出苗期)、莖桿快速伸長期(伸長期)、展葉期、開花期、結(jié)果期、莖桿倒伏枯死期(枯死期)、地上莖葉枯死同時地下塊莖長出新芽期(萌芽期)、越冬期等[8].觀測頻率出苗期-莖桿倒伏枯死期7天一次，枯死期-越冬期15天一次，持續(xù)觀測一個生長周期.

1.3.3 生長數(shù)據(jù)調(diào)查 2017年3月20日，分種類、地點、重復(fù)調(diào)查測量地下莖長、粗、稱重，用電子天平分別稱量各小區(qū)每個種蔸重量，單位為g，保留2位小數(shù).地下莖長、粗采取游標卡尺量取單位為 cm，保留2位小數(shù).

1.3.4 數(shù)據(jù)整理 分種類、地點、重復(fù)測量計算得到的地下莖長、粗、稱重等凈生長量，運用Spss 22.0軟件統(tǒng)計分析[9-10].

2 結(jié)果與分析

2.1 生長節(jié)律對比分析觀測表明，3種重樓生長期(出苗期-枯死期)長短排序為華重樓>球藥隔重樓>七葉一枝花.

表1 大老嶺地區(qū)不同海拔重樓屬植物生長節(jié)律比較

根據(jù)上述數(shù)據(jù)，繪制不同地點不同種類的物候期條形圖(圖1).盡管從整個生長周期來看華重樓生長期最長，但是從開花-結(jié)實期來看,七葉一枝花開花結(jié)實期最長，球藥隔重樓次之，華重樓最短.

圖1 不同海拔重樓屬植物生長節(jié)律條形圖

2.2 主要形態(tài)學(xué)特性經(jīng)觀察對比統(tǒng)計，3種重樓植物主要形態(tài)學(xué)特性如下(表2).

表2 不同種類重樓主要生物學(xué)特性

2.3 主要生長指標對比分析根據(jù)小區(qū)面積,對比各小區(qū)地下莖,長、粗原始量,分別計算單位面積種蔸莖,長、粗凈生長量.開展3種重樓多變量統(tǒng)計分析,如表3.

表3 不同種類重樓馴化栽培試驗多元方差檢驗表a

表3顯示了分別用Pillai、Wilks’ Lambda、Hotelling的軌跡和、Roy’s 最大根4種方法進行檢驗，且這4種檢驗方法的結(jié)果其截距項的檢驗統(tǒng)計量的顯著性均為0.000，即P<0.01，表示各組變量間的數(shù)據(jù)存在顯著性差異，需進一步檢驗由哪一個因素造成的影響(表4).

表4 不同種類重樓馴化栽培試驗主體間效應(yīng)的方差分析表

表4顯示了方差分析中各要素樣本的差異程度及顯著性.由表可知，不同種類重樓根莖增長數(shù)的統(tǒng)計量F為2 433.568，顯著性為0.000，即P<0.01，差異極顯著；根莖增粗數(shù)的統(tǒng)計量F為808.763，顯著性為0.000，即P<0.01，差異極顯著；根莖增粗數(shù)的統(tǒng)計量F為446.581，顯著性為0.000，即P<0.01，差異極顯著.不同地點重樓根莖增長數(shù)的統(tǒng)計量F為1 080.386，顯著性為0.000，即P<0.01，差異極顯著；根莖增粗數(shù)的統(tǒng)計量F為2 566.132，顯著性為0.000，即P<0.01，差異極顯著；根莖增粗數(shù)的統(tǒng)計量F為132.935，顯著性為0.001，即P<0.01，差異極顯著.在種類和地點交互作用下,重樓根莖增長數(shù)的統(tǒng)計量F為131.648，顯著性為0.114，即P>0.01，差異不顯著；根莖增粗數(shù)的統(tǒng)計量F為100.724，顯著性為0.126，即P>0.01，差異不顯著；根莖增粗數(shù)的統(tǒng)計量F為63.909，顯著性為0.174，即P>0.01，差異不顯著.

采用LDS多重比較法對不同種類、不同地點各變量樣本均數(shù)間的多重比較結(jié)果表明，不同種類影響因子條件下，地下莖增長在各種類中的顯著性P均小于0.05，差異顯著；地下莖增粗在華重樓與七葉一枝花中顯著性0.028，即0.010.05，差異不顯著，其他兩種各變量之間的顯著性P均小于0.01，差異極顯著.不同地點影響因子條件下，地下莖增長在新宮與雞公埡中顯著性0.515，即P>0.05，差異不顯著，在其他兩種各變量之間的顯著性P均小于0.01，差異極顯著；地下莖增粗在各地點中的顯著性P均小于0.01，差異極顯著；地下莖增重在新宮與雞公埡中顯著性0.365，即P>0.05，差異不顯著，其他兩種各變量之間的顯著性P均小于0.01，差異極顯著(表5).

表5 不同種類重樓馴化栽培試驗不同影響因子各變量的多重比較

從種類上看，七葉一枝花地下莖年增長均值、年增重均值最大，分別達到4.584 cm、9.271 g，球藥隔重樓花地下莖年增粗均值最大，達到0.518 cm.說明，七葉一枝花栽培表現(xiàn)型最優(yōu)，球藥隔重樓次之，可作為重點栽培繁殖品種.從地點上看，千斤園(海拔1 000 m)地下莖年增長均值、年增重均、增粗均值均優(yōu)于其他兩個地點，可作為重點推廣區(qū)域(表6).

表6 不同種類重樓馴化栽培試驗不同種類各變量的均值

3 討論

本試驗基于大老嶺區(qū)域收集的野生華重樓、七葉一枝花、球藥隔重樓種源，苗齡3年以上，對以種子為來源的實生苗表現(xiàn)還需要進一步研究.同時,在生長節(jié)律觀測方面,還需要對比觀測從種子到發(fā)育成心形單葉幼苗的數(shù)據(jù),為今后本區(qū)域有針對性開展豐產(chǎn)栽培技術(shù)研究打好基礎(chǔ).

4 結(jié)語

重樓的主要藥用成分為多種甾體皂苷，已成為多種中成藥和新藥的主要原料藥[11]，巨大的需求缺口和經(jīng)濟利益刺激驅(qū)動，導(dǎo)致野生重樓資源嚴重枯竭，發(fā)展人工種植產(chǎn)業(yè)依靠野生種源杯水車薪.大老嶺野生重樓資源豐富，應(yīng)該加強資源保護措施和宣傳工作,增強人們對重樓保護重要性的認識.同時,開展重樓的科學(xué)規(guī)范的人工繁育試驗，針對種子繁育、田間管理、病蟲害防治等進行研究，借鑒已有研究基礎(chǔ)，爭取早日總結(jié)出一套完整的重樓高效豐產(chǎn)栽培技術(shù)規(guī)程，為促進宜昌市重樓的產(chǎn)業(yè)化栽培創(chuàng)造條件.