• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    黃皮疣柄牛肝菌多糖結(jié)構(gòu)鑒定及對小鼠盲腸與糞便中短鏈脂肪酸的影響

    2022-07-02 03:49:26樊瑩潤鄭婷婷李澤林沈曉靜王雪峰谷大海肖智超范江平
    食品科學(xué) 2022年11期
    關(guān)鍵詞:酵解牛肝菌戊酸

    樊瑩潤,鄭婷婷,李澤林,沈曉靜,王雪峰,谷大海,肖智超,范江平,*

    (1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院,云南 昆明 650201;2.普洱茶研究院,云南 普洱 665000)

    近年來,隨著人工馴化菌和野生菌的食用頻率以及開發(fā)利用率的提高,人們對真菌的研究越來越多,特別是其菌多糖的生物活性得到了研究者的廣泛關(guān)注;大量研究表明,香菇、銀耳、金針菇、靈芝、云芝、茯苓、冬蟲夏草、黑木耳、猴頭菇等食用或藥用真菌中的多糖組分具有提高身體免疫等功能,部分還具有抗腫瘤、抗衰老、降血糖和血脂、保肝、抗凝血等作用。黃皮疣柄牛肝菌又稱黃癩頭((Letellier.)Watliag),屬真菌界(Fungi)、擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、傘菌綱(Agaricomycetes)、牛肝菌目(Boletales)、牛肝菌科(Boletaceae)、疣柄牛肝菌屬(),其菌肉細嫩、味道鮮美,富含蛋白質(zhì)、多糖以及人體所需的8種必需氨基酸,其中以谷氨酸含量最高。本研究團隊前期采用水提醇沉法提取了黃皮疣柄牛肝菌多糖(polysaccharides from(Letellier.) Watliag,LCP),提取率達18.44%,對其純化后進行免疫活性以及抗氧化活性探究,發(fā)現(xiàn)具有較好的免疫調(diào)節(jié)活性和抗氧化活性。但是對LCP維持腸道健康相關(guān)的研究還很少。

    多糖類物質(zhì)由于分子質(zhì)量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜,不易被胃腸消化酶消化。未被消化的多糖進入大腸,被厭氧菌進一步降解及發(fā)酵,主要降解和代謝產(chǎn)物為寡糖及短鏈脂肪酸,這些寡糖和短鏈脂肪酸可以被人體直接吸收并發(fā)揮各種生理功能,對人體健康產(chǎn)生有益的影響。多糖作為一種天然的“免疫調(diào)節(jié)劑”及“微生態(tài)調(diào)節(jié)劑”,可通過免疫調(diào)節(jié)來改善腸道免疫系統(tǒng)紊亂所導(dǎo)致的機體炎癥反應(yīng),也可通過調(diào)節(jié)腸道菌群、改善腸道組織、促進短鏈脂肪酸的產(chǎn)生來緩解代謝綜合征、減輕炎癥、增強免疫反應(yīng)以及改善腸道黏膜屏障等,為腸道提供一個良好的內(nèi)部環(huán)境。短鏈脂肪酸作為特定腸道厭氧菌在膳食纖維和抗性淀粉發(fā)酵后產(chǎn)生的主要細菌代謝產(chǎn)物,具有許多生理作用,如乙酸可以通過調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄因子與信號通路促進脂肪細胞分化、抑制脂肪沉積和改善肥胖引發(fā)的胰島素抵抗;丙酸主要由腸道菌群中的優(yōu)勢菌群擬桿菌門參與代謝生成,經(jīng)結(jié)腸吸收后由肝臟代謝參與糖異生作用并用作能源;丁酸被認為是維持結(jié)腸穩(wěn)態(tài)的主要因素,能被腸道迅速吸收,是結(jié)腸上皮的主要能量來源,在預(yù)防某些疾?。ㄈ缒[瘤、炎癥障礙、糖尿病、心血管疾病等)方面具有潛在價值。張冠亞對鐵皮石斛多糖保持腸道健康作用進行研究,發(fā)現(xiàn)該多糖能有效地降低小鼠盲腸結(jié)腸內(nèi)容物、體外糞便的pH值以及增加盲腸、結(jié)腸、糞便中的短鏈脂肪酸的含量。胡婕倫發(fā)現(xiàn)車前子多糖能減緩葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium,DSS)引起的結(jié)腸炎癥狀,使患結(jié)腸炎小鼠糞便中短鏈脂肪酸含量的下降趨勢減緩。段萌萌發(fā)現(xiàn)褐藻多糖可以改善高脂飲食誘發(fā)的代謝綜合征,包括使高脂小鼠糞便中短鏈脂肪酸含量的下降趨勢減緩。宋倩倩對綠豆皮多糖對小鼠腸道健康影響進行研究,發(fā)現(xiàn)綠豆皮多糖灌胃增加了小鼠結(jié)腸長度和短鏈脂肪酸含量,綠豆皮多糖可能通過酵解產(chǎn)生的短鏈脂肪酸改善腸道微環(huán)境并有益于提高小鼠的腸道健康狀態(tài)。

    目前,對LCP的研究主要集中在提取工藝以及體外抗氧化和調(diào)節(jié)免疫活性等方面。前期研究發(fā)現(xiàn)LCP能夠增加小鼠糞便含水率、降低糞便pH值、縮短排便時間、促進小腸蠕動及結(jié)腸發(fā)育。因此,本實驗旨在對LCP結(jié)構(gòu)進行表征并研究其對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸的調(diào)節(jié)作用,以期對LCP維持腸道健康及其構(gòu)效的深入研究提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 動物、材料與試劑

    BALB/c雄性小鼠(體質(zhì)量16~18 g)(生產(chǎn)許可證號:SCXK(滇)K2020-0004)。

    新鮮黃皮疣柄牛肝菌產(chǎn)自楚雄彝族自治州南華縣,從云南省易門縣康源菌業(yè)有限公司采購。

    AB-8大孔樹脂 河北美凱化工有限公司;鹽酸、氯仿 成都市科隆化學(xué)品有限公司;氫氧化鈉、正丁醇、苯酚 天津風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;無水乙醇四川西隴科學(xué)有限公司;1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP) 上海瀚思化工有限公司;透析袋MD34(7 000 D)、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、巖藻糖、半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、核糖、葡聚糖 上海源葉生物科技有限公司;低聚果糖(fructo-oligosaccharides,F(xiàn)OS) 上海麥克林生化科技有限公司;磷酸、乙醚、三氟乙酸 國藥集團化學(xué)試劑有限公司;木糖、葡萄糖、異丁酸、正丁酸 美國TMstandard公司;乙酸 德國Dr.Ehrenstorfer公司;丙酸瑞士Fluka公司;異戊酸、正戊酸 德國CNW公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    UV-2450紫外分光光度計 島津儀器(蘇州)有限公司;1200型高效液相色譜儀(紫外檢測器)、7890B-7000D氣相色譜-質(zhì)譜儀 美國Agilent公司;ELEOS凝膠色譜儀 美國Wyatt公司;激光檢測器、示差檢測器 美國Warers公司;Tensor27傅里葉變換紅外光譜儀 德國Bruker公司。

    1.3 方法

    1.3.1 LCP的制備

    黃皮疣柄牛肝菌洗凈、切片、凍干、打粉過80 目篩后,采用熱水法提取LCP,按液料比34∶1(/)混勻,51 ℃水浴3.1 h,4 000 r/min離心10 min得到提取液,50 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/5,加入4 倍體積的無水乙醇(注意需要緩慢加入,邊攪拌邊加入),置于4 ℃冰箱中靜置過夜,4 000 r/min離心10 min,取沉淀用適量的去離子水溶解,得到多糖溶液,冷凍干燥后得到粗多糖。配制100 mL質(zhì)量濃度為2 mg/mL的粗多糖溶液,添加7 g大孔樹脂后,放入53.3 ℃、130 r/min的恒溫振蕩箱中振蕩5.3 h,以達到脫色的效果。過濾得到濾液,50 ℃進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/2,將Sevag溶液((氯仿)∶(正丁醇)=4∶1)與多糖溶液按一定比例混合(1∶4,/),劇烈振蕩20 min,4 000 r/min離心10 min,取上層水層,重復(fù)此步操作,直至沒有白色蛋白沉淀層產(chǎn)生為止,旋蒸去除有機溶劑,透析48 h,冷凍干燥得到精多糖LCP。采用苯酚-硫酸法對LCP的多糖質(zhì)量分數(shù)進行測定,確定其純度。

    1.3.2 LCP紫外光譜分析

    將LCP配制成質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的多糖溶液,在波長190~400 nm下進行紫外全波長掃描。

    1.3.3 LCP的單糖組成分析

    稱取適量樣品于水解管中,加1 mL去離子水和1 mL 4 mol/L三氟乙酸,充氮,110 ℃水解2 h,冷卻至室溫,取0.1 mL水解液于4 mL離心管中,在60 ℃真空干燥箱中干燥2 h。向4 mL離心管中加入0.3 mol/L NaOH和0.5 mol/L PMP甲醇溶液各0.5 mL,充氮,70 ℃水浴60 min,冷卻至室溫,加0.5 mL 0.3 mol/L HCl、0.75 mL去離子水、1.5 mL氯仿,振蕩搖勻后靜置分層,棄去下層氯仿,萃取3 次,水層過膜上機(高效液相色譜儀)。液相色譜條件:檢測波長245 nm,SHISEIDO C色譜柱(250 mmh4.6 mm,5 μm),流速1.0 mL/min,柱溫為25 ℃,進樣量10 mL。

    1.3.4 LCP分子質(zhì)量測定

    LCP分子質(zhì)量采用凝膠滲透色譜法測定。色譜條件為:Shodex OHpak系列SB-806和SB-803兩根GPC色譜柱串聯(lián),ELEOS凝膠色譜儀,檢測器采用激光檢測器和示差檢測器串聯(lián)使用,流動相為0.05 mol/L硫酸鈉+0.02% NaN,流速1 mL/min,柱溫40 ℃,進樣量500 mL。測定方法:取葡聚糖制成標(biāo)準品溶液,過濾后,在上述色譜條件下進樣,記錄色譜峰保留時間,以響應(yīng)值為縱坐標(biāo),以保留時間為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準曲線。樣品配制成溶液在同樣的色譜條件下進樣,根據(jù)保留時間計算分子質(zhì)量。

    1.3.5 LCP紅外光譜分析

    稱取1 mg LCP,采用KBr壓片法壓片后,利用傅里葉變換紅外光譜儀進行掃描。掃描范圍為3 800~600 cm,分辨率為4 cm,掃描次數(shù)為16。

    1.3.6 LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸的影響

    1.3.6.1 動物分組與給藥

    60只雄性BALB/c小鼠適應(yīng)7 d后隨機分為空白對照(blank control,CON)組、陽性對照(FOS)組、LCP高劑量(HIGH)組、LCP中劑量(MED)組、LCP低劑量(LOW)組,每組12只。CON組每天按10 mL/kg灌胃去離子水,共30 d。陽性對照FOS組按80 mg/kg灌胃FOS,共30 d。LCP高、中、低劑量組每天分別按160、80、40 mg/kg灌胃LCP,共30 d。

    1.3.6.2 樣本采集

    在第30天收集小鼠糞便進行短鏈脂肪酸含量測定。第30天灌胃結(jié)束后,處死各組小鼠,解剖,取出盲腸,用取樣勺取出盲腸內(nèi)容物用于短鏈脂肪酸含量測定。

    1.3.6.3 短鏈脂肪酸含量測定

    取適量樣品加入2 mL磷酸溶液((磷酸)∶(去離子水)=1∶3),渦旋均漿2 min,加入2 mL乙醚萃取10 min,4 000 r/min低溫離心20 min;離心后取出乙醚相,再加入2 mL乙醚萃取,4 000 r/min低溫離心10 min,離心后再次取出乙醚相,將兩次萃取液合并揮發(fā)定容至2 mL,進樣進行氣相色譜-質(zhì)譜分析。色譜條件:色譜柱為HP-INNOWAX色譜柱(25 mh0.20 mm,0.40 mm);柱溫為初溫100 ℃保持5 min,以5 ℃/min升至150 ℃,再以30 ℃/min升至240 ℃,保持30 min;進樣口溫度為240 ℃;載氣流速為1.0 mL/min;不分流。質(zhì)譜條件:電子轟擊離子源;離子源溫度為200 ℃;傳輸線溫度為250 ℃;轟擊電壓為70 eV;單離子掃描模式為定量離子60、73。短鏈脂肪酸的含量按下式計算。

    式中:為試樣中短鏈脂肪酸的含量/(mmol/g);為試樣測定液中短鏈脂肪酸的質(zhì)量濃度/(mg/L);為定容體積/mL;為稀釋倍數(shù);為試樣的質(zhì)量/g;為摩爾質(zhì)量/(g/mol)。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

    數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準差表示,應(yīng)用SPSS 21.0軟件中Duncan檢驗進行差異顯著性分析,<0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義,表示差異顯著,使用Graphpad prism 5軟件作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 LCP結(jié)構(gòu)分析

    經(jīng)過苯酚-硫酸法測定LCP多糖質(zhì)量分數(shù)達到89.11%,純度較高,后續(xù)對LCP進行結(jié)構(gòu)分析。

    2.1.1 LCP紫外光譜分析

    如圖1所示,在波長190~400 nm內(nèi),LCP在波長200 nm附近具有特征吸收峰,表明該樣品屬于多糖類物質(zhì);在波長260 nm處有一個較小的吸收峰,表明含有少量核酸,在波長280 nm處有也具有較小吸收峰,表明該多糖含有少量蛋白質(zhì)。說明黃皮疣柄牛肝菌作為一種富含蛋白質(zhì)的食用菌,采用單一的Sevag方法,不能完全脫掉其中的蛋白成分,因此后期實驗需進行多種方式結(jié)合法進行脫蛋白處理。

    圖1 LCP的紫外吸收光譜圖Fig.1 UV-visible absorption spectra of LCP

    2.1.2 LCP單糖組成分析

    由圖2可知,LCP由7種單糖組成,分別為甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、巖藻糖,其物質(zhì)的量比為4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80;其中,葡萄糖質(zhì)量百分比大約占56.3%,甘露糖質(zhì)量百分比大約占18.2%,半乳糖質(zhì)量百分比大約占14.1%,巖藻糖質(zhì)量百分比大約占6.9%,說明LCP主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖3 類單糖組成。

    圖2 LCP高效液相色譜圖Fig.2 High performance liquid chromatogram of LCP

    2.1.3 LCP分子質(zhì)量

    結(jié)合圖3、表1可知,LCP有一個色譜峰,其分散系數(shù)較大,屬于寬分布的多分散體系。重均分子質(zhì)量為1.540h10Da。

    圖3 LCP凝膠色譜圖Fig.3 Gel permeation chromatogram of LCP

    表1 LCP分子質(zhì)量及其分布Table 1 Molecular mass and distribution of LCP

    2.1.4 LCP紅外光譜分析

    如圖4所示,LCP在3 800~600 cm范圍內(nèi)具有多糖典型特征吸收峰。在3 325.00 cm處為OüH的伸縮振動;2 925.32 cm處的吸收峰為CüH鍵的伸縮振動;1 652.07 cm處的吸收峰是C=O鍵伸縮振動;1 424.68 cm處的吸收峰為C=O對稱伸縮振動,是糖醛酸中質(zhì)子化羧基特征峰,說明LCP含有糖醛酸,與單糖組成分析結(jié)果一致;1 373.1 cm處的吸收峰是CüH的彎曲振動;在1 200.76 cm及1 063.16 cm處的吸收峰由CüOüH和糖環(huán)CüOüC的兩種CüO鍵伸縮振動所引起,且1 200.76 cm及1 063.16 cm處吸收峰為吡喃糖苷特征吸收峰,說明結(jié)構(gòu)中存在-(1→6)糖苷鍵;在916.11 cm處出現(xiàn)的微弱吸收峰表明-型糖苷鍵的存在,表明多糖是吡喃型多糖;652.06 cm處為C≡CH鍵的彎曲振動峰的基頻峰。以上結(jié)果說明LCP是含有-(1→6)糖苷鍵以及-型糖苷鍵的吡喃型多糖。

    圖4 LCP的傅里葉變換紅外光譜圖Fig.4 Fourier transform infrared (FTIR) spectrum of LCP

    2.2 LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸的影響

    2.2.1 LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量的影響

    圖5為灌胃30 d后,各組小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的含量,與CON組對比,高劑量LCP能顯著增加小鼠盲腸中乙酸、丙酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸含量(<0.05);陽性對照FOS僅對小鼠盲腸內(nèi)容物中正丁酸含量有顯著增加的作用(<0.05),中劑量LCP能顯著增加小鼠盲腸內(nèi)容物中異丁酸、正戊酸含量(<0.05)??傮w來看,LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的影響有一定量效關(guān)系。高劑量LCP能顯著增加盲腸內(nèi)容物中除正丁酸外的其他各類短鏈脂肪酸的含量。

    圖5 LCP對小鼠盲腸短鏈脂肪酸含量的影響Fig.5 Effect of LCP on short-chain fatty acid production in mouse cecum contents

    2.2.2 LCP對糞便中短鏈脂肪酸含量的影響

    各組小鼠在經(jīng)過30 d的灌胃后糞便中的短鏈脂肪酸含量如圖6所示。高、中、低劑量LCP組陽性對照FOS組乙酸含量與CON組各短鏈脂肪酸含量之間都具有顯著性差異(<0.05),其中高劑量LCP組乙酸含量最高,達到9.28 mmol/g,其次是陽性對照FOS組的乙酸含量較高,達到8.51 mmol/g,高、中、低劑量LCP 3 組乙酸含量呈劑量依賴性上升,CON組乙酸含量最低,為7.33 mmol/g。對比丙酸含量,低劑量LCP組丙酸含量最低(3.59 mmol/g),其次為CON組、陽性對照FOS組和中劑量LCP組,高劑量LCP組的丙酸含量最高,達到4.38 mmol/g。對比各組正丁酸的含量,高、中、低劑量LCP 組以及陽性對照FOS組都顯著高于CON組(<0.05),且小鼠糞便中正丁酸含量與LCP呈劑量依賴性,正戊酸含量結(jié)果與該結(jié)果一致。從異丁酸及異戊酸結(jié)果看,高劑量LCP組糞便中異丁酸及異戊酸含量顯著高于其他各組(<0.05),陽性對照FOS組糞便中異丁酸及異戊酸含量顯著低于CON組(<0.05)。

    圖6 LCP對小鼠糞便短鏈脂肪酸含量的影響Fig.6 Effect of LCP on short-chain fatty acid production in the feces of mice

    3 討 論

    由單糖組成可以發(fā)現(xiàn)LCP主要是由葡萄糖、甘露糖、半乳糖組成;對比其他牛肝菌科的多糖,可以發(fā)現(xiàn)其主要單糖也是以上3種,如日本海氏牛肝菌、海南黃肉牛肝菌、橙牛肝菌、長頸金牛肝菌、褐黃牛肝菌等。不同種類的牛肝菌多糖的分子質(zhì)量存在較大的差異,其分子質(zhì)量跨度較大,目前研究發(fā)現(xiàn),海南黃肉牛肝菌(最小)的分子質(zhì)量為5 286 Da,白牛肝菌(最大)則大于2.00h10Da;對比LCP的分子質(zhì)量1.540h10Da,可以發(fā)現(xiàn)LCP的分子質(zhì)量適中,分子質(zhì)量的大小會影響多糖被腸道微生物的酵解情況,分子質(zhì)量太大會造成微生物酵解較困難;較小分子質(zhì)量的多糖可能在胃腸道就被降解不能進入大腸被腸道微生物利用;分子質(zhì)量適中更有利于被腸道微生物利用,將其降解為寡糖和短鏈脂肪酸供腸道上皮細胞吸收及利用。

    盲腸內(nèi)容物和糞便中短鏈脂肪酸是由腸道微生物在厭氧條件下對未消化的可溶性碳水化合物酵解而轉(zhuǎn)化來的。多糖類物質(zhì)基本不能被消化道消化,需要進入大腸被腸道菌群酵解,由于其結(jié)構(gòu)以及單糖組成不同,在酵解過程中將會轉(zhuǎn)化為不同的短鏈脂肪酸。綜合近年來體外模擬人體結(jié)腸酵解多糖的研究可發(fā)現(xiàn),乙酸主要由葡萄糖醛酸、木糖、果膠、半乳糖、半乳糖醛酸酵解產(chǎn)生,丙酸由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖酵解產(chǎn)生,丁酸由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、半乳糖醛酸產(chǎn)生,木糖對丁酸產(chǎn)生影響最大,單糖含量中甘露糖與葡萄糖含量更高,可以產(chǎn)生更高的丁酸。

    根據(jù)小鼠灌胃30 d后糞便中短鏈脂肪酸含量來看,高劑量LCP可以顯著增加小鼠糞便中乙酸、丙酸、正丁酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸的含量(<0.05);FOS可以增加小鼠糞便中乙酸、丙酸、正丁酸的含量。對比小鼠灌胃30 d后盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量,高劑量LCP可以增加小鼠盲腸內(nèi)容物中乙酸、丙酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸的含量,對異丁酸、正戊酸的影響最為明顯;FOS只對小鼠盲腸內(nèi)容物中正丁酸促進作用,這可能與FOS作用劑量以及作用時間有關(guān)系。通過LCP對小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中短鏈脂肪酸影響以及LCP的單糖組成,可以發(fā)現(xiàn)乙酸含量的增加可能是由葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、木糖被酵解,丙酸含量的增加可能是葡萄糖、木糖被酵解,丁酸、戊酸含量的增加可能與木糖、甘露糖有很大關(guān)系,與其他種類的多糖相比,LCP的單糖組成中甘露糖與葡萄糖的質(zhì)量百分比更高;有研究表明,猴頭菇多糖消化過程中發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生大量的游離甘露糖,對其酵解時也產(chǎn)生了戊酸,并且酵解一些不含甘露糖的多糖時幾乎不產(chǎn)生戊酸。研究表明靈芝多糖體內(nèi)酵解乙酸、丙酸和丁酸含量的增加可能是由于在大腸中發(fā)酵葡萄糖、半乳糖和甘露糖所致。

    目前,由于對LCP的研究相對較少,所以參考一些其他菌類多糖,對其結(jié)構(gòu)研究沒有深入到糖苷鍵類型確定方面,在下一階段可以通過進行甲基化、高碘酸氧化、Smith降解、核磁共振等來進一步確定。另外,有研究發(fā)現(xiàn)靈芝多糖誘發(fā)結(jié)腸中乙酸、丙酸和丁酸的生成增加,可能對2型糖尿病和相關(guān)疾病的治療具有應(yīng)用潛力,高脂血癥小鼠通過腸道微生物群將海參多糖轉(zhuǎn)化為短鏈脂肪酸參與肝臟的脂質(zhì)代謝,因此對于LCP的研究可以深入到進一步確定該多糖在小鼠腸道結(jié)腸還是盲腸或者哪一段發(fā)生酵解,可以通過肝臟以及血液中短鏈脂肪酸變化來確定LCP對小鼠代謝影響,體內(nèi)及體外實驗結(jié)合研究LCP對肥胖、糖尿病、腸炎等疾病的影響。

    4 結(jié) 論

    LCP的結(jié)構(gòu)中單糖組成為甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、巖藻糖,其物質(zhì)的量之比為4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80;重均分子質(zhì)量為1.540h10Da;是含有-(1→6)糖苷鍵以及-型糖苷鍵的吡喃型多糖;LCP能顯著增加小鼠盲腸內(nèi)容物及糞便中乙酸、丙酸、正丁酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸6 類短鏈脂肪酸的含量,且呈劑量依賴性。在糞便中,LCP表現(xiàn)出對正丁酸、異丁酸、正戊酸、異戊酸影響更大,在盲腸內(nèi)容物中,LCP表現(xiàn)出對異丁酸、正戊酸影響更大。不同劑量的LCP中,高劑量LCP對小鼠產(chǎn)生短鏈脂肪酸的影響最大。

    猜你喜歡
    酵解牛肝菌戊酸
    酶法制備瓜爾膠水解物的體外酵解特性分析
    不消化性葡聚糖體外酵解液對RAW 264.7巨噬細胞的免疫調(diào)節(jié)作用
    黃花蒿酵解液聯(lián)合多西他賽對乳腺癌耐藥細胞MCF-7/DTX 逆轉(zhuǎn)作用的研究
    體外模擬柴達木大肥菇胞內(nèi)多糖在幼齡腸道的消化特征
    云南發(fā)現(xiàn)4.2公斤野生牛肝菌
    柴胡桂枝湯聯(lián)合戊酸雌二醇片治療更年期綜合征的臨床觀察
    牛肝菌的功效
    中國食用菌(2017年2期)2017-01-14 03:18:24
    最好的老年人食譜——牛肝菌扒菜心
    丙戊酸鎂合并艾司西酞普蘭治療抑郁癥對照研究
    基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)
    狂野欧美激情性bbbbbb| 国产男女超爽视频在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲精品第二区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 午夜福利免费观看在线| 欧美日韩福利视频一区二区| 日本av手机在线免费观看| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲欧美色中文字幕在线| 岛国毛片在线播放| 操出白浆在线播放| 午夜免费鲁丝| 久久久精品区二区三区| 热99久久久久精品小说推荐| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产高清videossex| 岛国在线观看网站| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲人成77777在线视频| 制服诱惑二区| 日本av手机在线免费观看| 久久久精品区二区三区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | av超薄肉色丝袜交足视频| 午夜福利免费观看在线| 深夜精品福利| 久久久精品免费免费高清| 人妻一区二区av| 性高湖久久久久久久久免费观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 又大又爽又粗| 国产成人av教育| 中文字幕色久视频| 国产高清国产精品国产三级| 国产99久久九九免费精品| 午夜91福利影院| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产精品久久久久久精品古装| 精品亚洲成国产av| 欧美黄色片欧美黄色片| 成在线人永久免费视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 91精品三级在线观看| 91国产中文字幕| 国产免费现黄频在线看| 一区在线观看完整版| 青青草视频在线视频观看| 日韩一区二区三区影片| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 91国产中文字幕| 青青草视频在线视频观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久欧美国产精品| 男女边摸边吃奶| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品久久久久久精品古装| 十八禁网站免费在线| 香蕉国产在线看| 国产精品 欧美亚洲| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 青春草视频在线免费观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产激情久久老熟女| 在线 av 中文字幕| 另类亚洲欧美激情| 亚洲美女黄色视频免费看| av天堂久久9| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| a级毛片在线看网站| 夫妻午夜视频| 国产精品免费视频内射| 亚洲精品美女久久av网站| 久久精品亚洲av国产电影网| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 午夜两性在线视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 香蕉国产在线看| 亚洲色图综合在线观看| 午夜免费成人在线视频| 精品福利永久在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频 | 男女下面插进去视频免费观看| 国产精品免费大片| 日韩中文字幕欧美一区二区| 人妻一区二区av| 美女主播在线视频| 久久青草综合色| 欧美 日韩 精品 国产| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲国产av新网站| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 新久久久久国产一级毛片| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品国产色婷婷电影| 99热全是精品| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲精品一区蜜桃| 天天操日日干夜夜撸| 一级毛片电影观看| 亚洲熟女毛片儿| 高清视频免费观看一区二区| 操美女的视频在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 男人爽女人下面视频在线观看| tube8黄色片| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲精品乱久久久久久| 国产老妇伦熟女老妇高清| av欧美777| 国产成人影院久久av| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 涩涩av久久男人的天堂| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久ye,这里只有精品| 欧美日韩黄片免| 国产在线免费精品| 人妻久久中文字幕网| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 精品乱码久久久久久99久播| 极品人妻少妇av视频| 老司机亚洲免费影院| 男人添女人高潮全过程视频| 免费高清在线观看视频在线观看| 丁香六月欧美| 精品亚洲成a人片在线观看| 在线看a的网站| 男女高潮啪啪啪动态图| 91字幕亚洲| 成人亚洲精品一区在线观看| e午夜精品久久久久久久| 热99国产精品久久久久久7| 人妻 亚洲 视频| 日本av免费视频播放| 午夜日韩欧美国产| 在线观看一区二区三区激情| 老鸭窝网址在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美精品av麻豆av| 亚洲精品一区蜜桃| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 99国产精品99久久久久| 午夜福利视频在线观看免费| 永久免费av网站大全| 精品一区在线观看国产| 乱人伦中国视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 久9热在线精品视频| 精品欧美一区二区三区在线| 精品一区在线观看国产| 91九色精品人成在线观看| 12—13女人毛片做爰片一| kizo精华| 久久久久久久久久久久大奶| 三级毛片av免费| 久久热在线av| 成年人午夜在线观看视频| 自线自在国产av| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲av国产av综合av卡| 老司机午夜福利在线观看视频 | 亚洲欧洲日产国产| 午夜福利影视在线免费观看| 国产欧美日韩一区二区三 | 一二三四在线观看免费中文在| 深夜精品福利| 精品欧美一区二区三区在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产伦人伦偷精品视频| 黄片播放在线免费| 老熟妇仑乱视频hdxx| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 搡老岳熟女国产| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 51午夜福利影视在线观看| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲精品一区蜜桃| 国产av又大| 色播在线永久视频| 黄片小视频在线播放| 日本wwww免费看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 一二三四社区在线视频社区8| 成人国产av品久久久| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久久久国内视频| 亚洲av成人一区二区三| 久久av网站| 操美女的视频在线观看| 婷婷色av中文字幕| 老鸭窝网址在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频 | av网站免费在线观看视频| 国产av国产精品国产| 日韩视频在线欧美| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 夫妻午夜视频| videos熟女内射| 国产成人影院久久av| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久国产精品人妻蜜桃| 日本91视频免费播放| 超色免费av| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美变态另类bdsm刘玥| 日韩有码中文字幕| 又紧又爽又黄一区二区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久 成人 亚洲| 久热这里只有精品99| 在线观看免费午夜福利视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美xxⅹ黑人| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 他把我摸到了高潮在线观看 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲精品一区蜜桃| 久久久久国产精品人妻一区二区| 一个人免费看片子| 亚洲av电影在线进入| 色婷婷av一区二区三区视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 一个人免费看片子| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 一本色道久久久久久精品综合| 搡老熟女国产l中国老女人| 丁香六月天网| 日韩视频一区二区在线观看| 久久这里只有精品19| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲伊人色综图| 俄罗斯特黄特色一大片| 狂野欧美激情性xxxx| 曰老女人黄片| 日韩电影二区| 又大又爽又粗| 日日夜夜操网爽| 亚洲 国产 在线| 国产成人影院久久av| 老司机深夜福利视频在线观看 | 高清欧美精品videossex| 日韩欧美一区视频在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 99久久人妻综合| 国产成人影院久久av| 欧美性长视频在线观看| 国产在线视频一区二区| 亚洲国产精品一区三区| 青春草视频在线免费观看| 久久这里只有精品19| 99热全是精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 黄色视频在线播放观看不卡| 午夜福利在线免费观看网站| 99国产精品99久久久久| 国产欧美日韩精品亚洲av| 午夜激情久久久久久久| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久久国产成人免费| 欧美精品亚洲一区二区| cao死你这个sao货| 亚洲欧美清纯卡通| 大陆偷拍与自拍| 久久99热这里只频精品6学生| 一区福利在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 久久人人爽人人片av| 狠狠狠狠99中文字幕| 男男h啪啪无遮挡| 美女午夜性视频免费| 日韩有码中文字幕| 午夜视频精品福利| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 久久香蕉激情| 精品福利观看| 国产福利在线免费观看视频| 中文字幕高清在线视频| 深夜精品福利| 亚洲国产精品一区三区| 宅男免费午夜| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 久久av网站| 女警被强在线播放| 夜夜夜夜夜久久久久| 嫁个100分男人电影在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| a级毛片黄视频| 国产淫语在线视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 黑人猛操日本美女一级片| 国产精品一二三区在线看| 国产在线免费精品| 三级毛片av免费| 亚洲自偷自拍图片 自拍| av欧美777| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 91九色精品人成在线观看| 精品人妻在线不人妻| 国产精品成人在线| 亚洲成人手机| 国产在线观看jvid| 最近最新免费中文字幕在线| 国产精品熟女久久久久浪| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产人伦9x9x在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 美女中出高潮动态图| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲精品乱久久久久久| 午夜影院在线不卡| 美女主播在线视频| 美女国产高潮福利片在线看| 欧美在线黄色| 悠悠久久av| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产在线视频一区二区| 老司机午夜福利在线观看视频 | 国产高清国产精品国产三级| 纯流量卡能插随身wifi吗| 永久免费av网站大全| 久久青草综合色| 国产真人三级小视频在线观看| 最新的欧美精品一区二区| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久热这里只有精品99| 日韩制服骚丝袜av| av免费在线观看网站| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久久久精品国产欧美久久久 | 国产男女超爽视频在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久 | 在线看a的网站| av在线播放精品| 欧美黑人精品巨大| 99热国产这里只有精品6| 色老头精品视频在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| av又黄又爽大尺度在线免费看| 欧美日韩黄片免| 天堂中文最新版在线下载| 黄片播放在线免费| 在线观看人妻少妇| 亚洲五月婷婷丁香| 午夜91福利影院| 日本精品一区二区三区蜜桃| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产成人欧美| 大型av网站在线播放| 黄色毛片三级朝国网站| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日本vs欧美在线观看视频| 日韩免费高清中文字幕av| 精品人妻在线不人妻| 99香蕉大伊视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 免费日韩欧美在线观看| 国产免费av片在线观看野外av| 中亚洲国语对白在线视频| 久久 成人 亚洲| 日本91视频免费播放| 啪啪无遮挡十八禁网站| 看免费av毛片| 搡老岳熟女国产| 国产欧美日韩一区二区精品| 五月天丁香电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产精品欧美亚洲77777| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美少妇被猛烈插入视频| 老熟女久久久| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品乱码久久久久久99久播| 大码成人一级视频| 午夜视频精品福利| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 女人精品久久久久毛片| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲国产av新网站| 亚洲成人免费av在线播放| 操美女的视频在线观看| 天天影视国产精品| 夫妻午夜视频| 国产伦理片在线播放av一区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产免费视频播放在线视频| 国产男女超爽视频在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 国产一区二区 视频在线| 国产主播在线观看一区二区| 国产高清国产精品国产三级| 十八禁网站免费在线| 一区二区三区四区激情视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 久久性视频一级片| 久久人人97超碰香蕉20202| 免费不卡黄色视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品欧美一区二区三区在线| 国产欧美日韩一区二区三 | 欧美黑人精品巨大| 人人澡人人妻人| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国精品久久久久久国模美| 亚洲av电影在线进入| 欧美人与性动交α欧美软件| 中亚洲国语对白在线视频| 日韩一区二区三区影片| 美女主播在线视频| 亚洲精品一区蜜桃| 午夜激情久久久久久久| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产一区二区激情短视频 | 亚洲精华国产精华精| 欧美成人午夜精品| 麻豆国产av国片精品| 中文字幕制服av| 两人在一起打扑克的视频| 搡老岳熟女国产| www.熟女人妻精品国产| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产国语露脸激情在线看| 一级,二级,三级黄色视频| 99久久综合免费| 久久久久精品人妻al黑| 制服人妻中文乱码| 午夜免费观看性视频| 777米奇影视久久| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产成人av教育| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 91国产中文字幕| 国产亚洲av高清不卡| 男女下面插进去视频免费观看| 高清欧美精品videossex| 国产成人精品在线电影| 丁香六月欧美| 一二三四社区在线视频社区8| 久久影院123| 另类亚洲欧美激情| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 在线观看人妻少妇| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 欧美精品啪啪一区二区三区 | 欧美中文综合在线视频| 亚洲精品一二三| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国产成人啪精品午夜网站| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 热re99久久国产66热| 丝袜喷水一区| 免费av中文字幕在线| 99re6热这里在线精品视频| 丰满少妇做爰视频| 国产精品 国内视频| 丝袜在线中文字幕| 久久久久视频综合| 国产一卡二卡三卡精品| 国产免费视频播放在线视频| 永久免费av网站大全| 不卡一级毛片| e午夜精品久久久久久久| 国产一区有黄有色的免费视频| 伦理电影免费视频| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 亚洲精品第二区| 日本一区二区免费在线视频| 美女中出高潮动态图| 国产成人av激情在线播放| 亚洲九九香蕉| 亚洲三区欧美一区| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产精品国产av在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 大型av网站在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 狂野欧美激情性xxxx| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 午夜两性在线视频| 女人精品久久久久毛片| 黄片小视频在线播放| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲精华国产精华精| 亚洲专区中文字幕在线| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品.久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产黄频视频在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 黑人欧美特级aaaaaa片| 黄频高清免费视频| 在线观看www视频免费| 在线av久久热| 国产精品二区激情视频| 色播在线永久视频| 久久久久国内视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美久久黑人一区二区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 超色免费av| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲情色 制服丝袜| 91av网站免费观看| 不卡一级毛片| 人妻久久中文字幕网| 啦啦啦 在线观看视频| 美女国产高潮福利片在线看| 日本一区二区免费在线视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 午夜福利视频精品| 男女边摸边吃奶| 午夜免费成人在线视频| 亚洲国产精品一区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 老汉色∧v一级毛片| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久久水蜜桃国产精品网| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 日本欧美视频一区| 一级毛片精品| av网站免费在线观看视频| 自线自在国产av| 欧美精品av麻豆av| 日韩欧美免费精品| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 两人在一起打扑克的视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 美女主播在线视频| 久久久精品免费免费高清| 国产免费一区二区三区四区乱码| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产成人系列免费观看| 窝窝影院91人妻| 色精品久久人妻99蜜桃| 新久久久久国产一级毛片| 人人澡人人妻人| 国产成人精品无人区| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美另类一区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产亚洲一区二区精品| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产一区二区激情短视频 | 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产一卡二卡三卡精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 色老头精品视频在线观看| 国产国语露脸激情在线看| 1024香蕉在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 日本一区二区免费在线视频| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲国产看品久久| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久性视频一级片| 精品视频人人做人人爽| 国产免费一区二区三区四区乱码| 成人手机av| 精品一品国产午夜福利视频| 99九九在线精品视频| 欧美日韩视频精品一区| 青春草视频在线免费观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美精品一区二区免费开放| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 成人手机av| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 成人黄色视频免费在线看| 成年动漫av网址| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 久9热在线精品视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 一区二区三区激情视频| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产av精品麻豆| 欧美亚洲日本最大视频资源| 黑人猛操日本美女一级片| 国产亚洲精品久久久久5区|