豆豉和淡豆豉微生物組與功能成分研究進(jìn)展

徐菁雯，王偉明，史海粟，陳麗艷，胡心玉，趙 悅，烏日娜*

（1.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院 遼寧省食品發(fā)酵技術(shù)工程研究中心，遼寧 沈陽(yáng) 110866；2.黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150036）

豆豉和淡豆豉都是主要以完整豆粒為原料，微生物發(fā)酵獲得的中國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品。從南宋開(kāi)始，淡豆豉作為中藥材進(jìn)入了人們的生活，豆豉則逐漸轉(zhuǎn)化為食品食用[1]。豆豉多以黃豆為原料，根據(jù)地區(qū)和工藝不同，可大致分為細(xì)菌型豆豉、毛霉型豆豉、根霉型豆豉和曲霉型豆豉，多用作調(diào)味品。淡豆豉則以黑豆為原料，通過(guò)青蒿和桑葉輔助發(fā)酵，相比于豆豉發(fā)酵多一個(gè)再悶過(guò)程，作為中藥具有解表、除煩、宣發(fā)郁熱的功效，常用于治療感冒、寒熱頭痛、煩躁胸悶、虛煩不眠等病癥[2]。

多年來(lái)，食品領(lǐng)域主要針對(duì)豆豉的工藝、風(fēng)味和品質(zhì)等方面進(jìn)行研究和應(yīng)用，對(duì)其中功能成分的研究和開(kāi)發(fā)尚在起步階段，而中醫(yī)藥領(lǐng)域研究者則主要關(guān)注淡豆豉功效成分提取和療效，對(duì)其形成機(jī)制和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)不足。隨著淡豆豉被列入《既是食品又是藥品的物品名單》，豆豉和淡豆豉其中功能成分的臨床研究和在功能性食品研發(fā)中的潛力受到關(guān)注。尤其在新冠疫情期間，大豆發(fā)酵食品對(duì)新冠病毒的預(yù)防功效，也成為新興研究關(guān)注的方向之一[3]。本文對(duì)近年來(lái)關(guān)于豆豉和淡豆豉微生物組學(xué)分析與功能性成分相關(guān)研究進(jìn)行綜述，總結(jié)在豆豉和淡豆豉發(fā)酵過(guò)程中微生物組成和活性物質(zhì)變化間的相關(guān)規(guī)律，為后續(xù)研究提供理論依據(jù)，期望可以用于優(yōu)化豆豉和淡豆豉的生產(chǎn)利用。

1 豆豉和淡豆豉發(fā)酵微生物組研究

豆豉和淡豆豉多為自然發(fā)酵生產(chǎn)，參與發(fā)酵微生物種類(lèi)繁多，且由于我國(guó)幅員遼闊，地區(qū)間環(huán)境條件相差巨大，因此不同地區(qū)不同發(fā)酵工藝所生產(chǎn)的豆豉和淡豆豉中含有豐富微生物資源，包括很多中國(guó)特有的微生物群落。但自然發(fā)酵易受雜菌污染等問(wèn)題也是不可避免的，要在合理利用傳統(tǒng)發(fā)酵食品中微生物資源的同時(shí)，優(yōu)化發(fā)酵過(guò)程，采取純種發(fā)酵，最大限度的保證豆豉和淡豆豉原先的風(fēng)味、功效并且提高產(chǎn)品質(zhì)量。

高通量測(cè)序、擴(kuò)增子分析、宏基因組學(xué)和宏轉(zhuǎn)錄組學(xué)以及宏蛋白質(zhì)組學(xué)和高分辨率代謝組學(xué)等組學(xué)技術(shù)在探索傳統(tǒng)發(fā)酵食品微生物群落動(dòng)態(tài)和功能表征方向上的應(yīng)用在近幾年來(lái)飛速發(fā)展，在探索了食品發(fā)酵的潛在機(jī)制的同時(shí)，揭示了發(fā)酵食品是有價(jià)值基因和生物活性物質(zhì)的重要來(lái)源[4]。

在過(guò)去的一段時(shí)間中，通過(guò)分離篩選的方法，已經(jīng)對(duì)于豆豉和淡豆豉在不同發(fā)酵階段和不同地區(qū)之間微生物組成進(jìn)行過(guò)一些研究對(duì)比。如通過(guò)對(duì)不同產(chǎn)地淡豆豉成品進(jìn)行分離篩選，從河北、黑龍江等七地樣品中都有發(fā)現(xiàn)毛霉（Mucorsp.），從甘肅樣品中還各分離出了一株青霉（Penicilliumsp.）、在廣州樣品中還分離出一株根霉（Rhizopussp.），而在甘肅、安徽和廣州樣品中還篩選出曲霉菌（Aspergillussp.），僅在甘肅和廣州樣品中各分理出一株微球菌（Streptococcussp.），說(shuō)明主要還是以真菌為主[5-6]。而在神農(nóng)架采集的豆豉樣本中也篩選出4株枯草芽孢桿菌，但未分離出乳酸菌[7]。分離篩選的方式有助于解豆豉和淡豆豉中存在的菌，但由于分離篩選條件及菌種之間抑制等原因，并不能完全分離所有菌種，并且如果對(duì)發(fā)酵過(guò)程菌種進(jìn)行分析對(duì)比，以分離篩選的方式操作起來(lái)較為復(fù)雜且可能不夠全面。

隨著高通量測(cè)序和宏組學(xué)等飛速發(fā)展，將組學(xué)技術(shù)應(yīng)用于分析發(fā)酵食品在發(fā)酵過(guò)程中微生物組成動(dòng)態(tài)變化的研究也越來(lái)越深入。在國(guó)外，組學(xué)技術(shù)在發(fā)酵食品中的應(yīng)用對(duì)發(fā)酵大豆食品微生物菌落分析做出了很大貢獻(xiàn)，如對(duì)印度、不丹、尼泊爾等地區(qū)的傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品kinema中的細(xì)菌和真菌中的組成進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)了每個(gè)國(guó)家樣本中獨(dú)特的屬，同時(shí)發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）是共同的核心細(xì)菌，并對(duì)其進(jìn)行功能預(yù)測(cè)，最大功能主要是谷氨酸的代謝[8]。在韓國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品Doenjang和Ganjang中通過(guò)比較研究，發(fā)現(xiàn)以嗜鹽或耐鹽微生物為主要優(yōu)勢(shì)，在Doejang中德巴利菌（Debaryomyces）和葡萄球菌（Staphylococcus）占優(yōu)勢(shì)，而最終產(chǎn)物多為異黃酮、大豆皂苷和氨基酸，而在干醬中生物胺和類(lèi)苯基丙烷含量豐富，可能由于其主要優(yōu)勢(shì)菌為酵母（Meyerozyma）和四聯(lián)球菌（Tetragenococcus）[9]。

代謝組學(xué)分析有利于了解發(fā)酵食品中微生物群落變化[10]，近期組學(xué)分析豆豉和淡豆豉發(fā)酵過(guò)程中優(yōu)勢(shì)菌種的動(dòng)態(tài)變化見(jiàn)表1[11-20]。

表1 不同地區(qū)豆豉和淡豆豉微生物差異Table 1 Microbial differences of Douchi and Dan-douchi in different regions

續(xù)表

以曲霉型豆豉為代表，在發(fā)酵前期葡萄球菌屬占優(yōu)勢(shì)地位，在中期乳酸菌細(xì)菌屬會(huì)逐漸占據(jù)優(yōu)勢(shì)，而在發(fā)酵后期，葡萄球菌屬（Staphylococcus）和腸桿菌屬（Enterobacter）又會(huì)重新成為優(yōu)勢(shì)微生物[12，21]。毛霉型豆豉在制曲過(guò)程中主要由細(xì)菌、真菌進(jìn)行作用。在細(xì)菌中，魏斯氏菌（Weissella）是發(fā)酵前期的優(yōu)勢(shì)菌屬，芽孢桿菌（Bacillus）、乳酸桿菌（Lactobacillus）是后期的優(yōu)勢(shì)菌屬；在真菌中，總狀毛霉（Phycomycetes）是優(yōu)勢(shì)菌屬，另外幾種根霉也在豆豉的糖化中起到重要作用[22]。細(xì)菌型豆豉則是以假絲酵母（Candida）等酵母菌以及曲霉（Aspergillus）、毛孢子菌屬（Trichosporon）、米根霉屬（Rhizopus）為真菌優(yōu)勢(shì)菌種，芽孢桿菌屬（Bacillus）、魏斯氏菌屬（Weissella）、片球菌屬（Pediococcus）、葡萄球菌屬（Staphylococcus）等多種細(xì)菌為優(yōu)勢(shì)菌種[23]。

從淡豆豉中篩選出的菌種大多為霉菌，還有少部分細(xì)菌[5]，可能是因?yàn)榈刽l(fā)酵過(guò)程中，高溫環(huán)境較多，導(dǎo)致在整體環(huán)境下，細(xì)菌比較難存活，而霉菌占據(jù)主要優(yōu)勢(shì)。分析淡豆豉不同發(fā)酵時(shí)期的菌種變化，隨著發(fā)酵過(guò)程進(jìn)展，畢赤酵母（Pichia pastoris）、桔青霉（Penicillium tangerinii）、米根霉（Rhizopus oryzae）、羅倫隱球酵母（Saccharomyces lorendii）等菌種逐漸出現(xiàn)，總發(fā)酵前期主要是微球菌和酵母菌占優(yōu)勢(shì)，在中期時(shí)，推測(cè)由于發(fā)酵溫度較高，不利于細(xì)菌和酵母菌的生長(zhǎng)，或者由于不同菌種的生長(zhǎng)速度不同，霉菌生長(zhǎng)的速度慢于酵母，而在霉菌占據(jù)優(yōu)勢(shì)后，抑制酵母菌的生長(zhǎng)，從而使霉菌在發(fā)酵中期成為優(yōu)勢(shì)菌，后期細(xì)菌和酵母菌再度成為主要優(yōu)勢(shì)菌種，但整體過(guò)程中粗糙脈孢菌（Neurospora crassa）、煙曲霉（Aspergillus fumigatus）、黑曲霉（Aspergillus niger）、日本曲霉（Aspergillus nippon）始終占較高比例，所以推測(cè)粗糙脈孢菌和曲霉為主要優(yōu)勢(shì)菌種[5，13]。

2 功能成分及其機(jī)制研究進(jìn)展

豆豉和淡豆豉是以豆類(lèi)為原料，在多種微生物混合發(fā)酵后，獲得累積大豆異黃酮、大豆低聚糖、活性肽等多種活性物質(zhì)的最終產(chǎn)品。通過(guò)研究發(fā)酵前后功能成分變化規(guī)律，根據(jù)相關(guān)成分在疾病保健功能研究和臨床研究中的進(jìn)展，進(jìn)一步利用其功能成分開(kāi)發(fā)相關(guān)產(chǎn)品。

2.1 發(fā)酵前后功能成分變化

大豆中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，含有皂苷、異黃酮等生物活性物質(zhì)，具有預(yù)防心血管疾病、抗腫瘤等作用[24，25-26]，但大豆中異黃酮（soy isoflavone，SI）和皂苷等活性物質(zhì)多以糖基取代形式存在，難以被人體吸收利用，而通過(guò)發(fā)酵，可以將異黃酮苷、皂苷等分解為異黃酮苷元、低糖鏈皂苷存在，更有助于人體吸收利用[27]。通過(guò)對(duì)大豆發(fā)酵前后物質(zhì)含量的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵后，SI含量不變，大豆苷元和染料木苷含量減少，而可以通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，起到抗病毒的作用[28]，更易被人體吸收[29]的大豆苷元和染料木素含量增加[30]。

另外發(fā)酵也會(huì)產(chǎn)生一些新物質(zhì)，如γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）也是近年來(lái)深受大家關(guān)注的一種功能性物質(zhì)，有一定的抗抑郁、改善失眠等作用[31-32]，在黑豆中未有被檢出的報(bào)道，但是經(jīng)過(guò)發(fā)酵后，在淡豆豉中檢測(cè)出GABA，并且含量相對(duì)較高[33]。陳青峰[34]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，GABA的形成主要在淡豆豉發(fā)酵的再悶階段，推測(cè)乳酸菌、大腸桿菌（Escherichia coli）、真菌、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）等可能是GABA生產(chǎn)的主要發(fā)酵微生物。

此外關(guān)于發(fā)酵前后，大豆中的一些酶在人體中的利用和代謝效率存在一定區(qū)別也深受關(guān)注。很多研究表明，發(fā)酵后大豆的抗氧化性和血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)移酶（angiotensin transferase，ACE）抑制活性得到了進(jìn)一步提升[35-36]。另外隨著發(fā)酵過(guò)程進(jìn)展，微生物的代謝產(chǎn)物不斷累積，增加活性，很多研究也說(shuō)明發(fā)酵豆制品中異黃酮的利用率和代謝率的提高[29]，其主要機(jī)理也可能是隨著發(fā)酵時(shí)間變長(zhǎng)，β-葡萄糖苷酶的活性增加，由于β-葡萄糖苷酶對(duì)于異黃酮苷元和酚類(lèi)的消化吸收有一定的促進(jìn)作用，對(duì)于人體更好的吸收大豆中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有很大的幫助[35]。

2.2 功能成分在慢性疾病防治中的應(yīng)用

現(xiàn)代社會(huì)，由于環(huán)境及人們自身的原因，慢性病的發(fā)病率越來(lái)越高，但目前在臨床醫(yī)學(xué)上，對(duì)于慢性病的治療還缺乏快速有效的治療手段，只能通過(guò)長(zhǎng)時(shí)間服用藥物進(jìn)行慢性治療。相較于帶有不良副作用的藥物，食品中對(duì)于預(yù)防和控制慢性病的有效功能成分物質(zhì)，能夠通過(guò)飲食攝入，再被人體吸收利用，從而對(duì)慢性病起到防治的效果。

2.2.1 在心血管疾病治療中的應(yīng)用

發(fā)酵大豆中含有很多對(duì)控制血壓和改善血管功能有效的物質(zhì)，如多酚、降壓肽、GABA等[36]，所以被認(rèn)為對(duì)于心血管疾病有一定的預(yù)防和改善作用。如豆豉和淡豆豉中都含有的SI對(duì)心血管疾病就存在積極作用[25-26]，研究表明，在補(bǔ)充SI后，因?yàn)檠装Y因子水平降低，活性氧生成減少，抑制轉(zhuǎn)酮醇酶（transketolase，TKT），激活依賴于環(huán)腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）的蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）、調(diào)節(jié)血管舒張因子和收縮因子比例等途徑，在一定程度上改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，降低血管通透性[26]。同時(shí)，SI對(duì)于修復(fù)神經(jīng)損傷也有一定的作用[37]，所以對(duì)于腦卒中這類(lèi)沒(méi)有特效藥的神經(jīng)疾病，也可以充分提取利用豆豉和淡豆豉中的相關(guān)有效成分進(jìn)行預(yù)防性功能產(chǎn)品的研發(fā)。

由于ACE可以催化血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅱ，從而導(dǎo)致高血壓，所以ACE是高血壓預(yù)防和治療中一個(gè)重要的抑制位點(diǎn)，合成ACE抑制劑被廣泛用于控制高血壓，但長(zhǎng)時(shí)間使用這些合成藥物會(huì)造成腎功能下降、肺癌風(fēng)險(xiǎn)增加等副作用，所以天然來(lái)源的ACE抑制肽可以提供更安全的治療手段[38]。大豆也被認(rèn)為是很好的ACE抑制肽天然植物來(lái)源，很多發(fā)酵大豆食品都被證實(shí)含有豐富的ACE抑制肽，包括豆豉等[39-40]，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，大豆中ACE抑制活性在發(fā)酵后明顯增強(qiáng)[36]，是良好的食物源性ACE抑制肽生產(chǎn)來(lái)源。

除此之外，異黃酮中的金雀異黃酮、染料木黃酮等都能一定程度抑制脂肪的生成[41]，有效地預(yù)防肥胖引發(fā)的健康問(wèn)題，如肝炎、脂肪肝等，也可以減少心血管疾病并發(fā)的幾率，對(duì)預(yù)防心血管疾病起到重要作用。

2.2.2 在神經(jīng)疾病治療中的應(yīng)用

隨著人口老齡化越來(lái)越嚴(yán)重，阿茲海默癥也成為近年引起人們重視的一種最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性病變，研究證明大豆異黃酮（SI）可以通過(guò)抗氧化應(yīng)激，抗神經(jīng)毒物性物質(zhì)損傷，促進(jìn)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)，保護(hù)血腦屏障，降低炎性反應(yīng)達(dá)到抗阿爾茲海默癥的作用[26]。JANG C H等[42]通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明大豆異黃酮改善了大鼠卵巢切除模型的認(rèn)知功能，且通過(guò)抗氧化活性減輕一氧化氮生成，減輕β-淀粉樣蛋白肽（beta amyloid peptide，β-AP）毒性，改善β-AP導(dǎo)致的阿茲海默癥動(dòng)物模型神經(jīng)元死亡的損傷，還可以通過(guò)抗炎活性、調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)通路和抗氧化活性減少神經(jīng)元死亡并防止神經(jīng)系統(tǒng)退化[42]?？寡趸瘎?duì)氧化應(yīng)激密切相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病產(chǎn)生有益影響。

同時(shí)異黃酮被證明對(duì)另一種同樣常見(jiàn)的神經(jīng)性退行性疾病帕金森癥也具有一定的防治作用，金雀異黃素可保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元免受帕金森模型中脂多糖誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥的影響，同時(shí)異黃酮對(duì)多種組織中線粒體生物發(fā)生和自噬具有影響，帕金森被證明與線粒體自噬失調(diào)有關(guān)，從而說(shuō)明大豆產(chǎn)品中的異黃酮為帕金森提供了治療和一定的預(yù)防潛力[42]。

另外，通過(guò)芽孢桿菌發(fā)酵的大豆發(fā)酵品中因?yàn)楹懈吆康摩?聚-L-谷氨酸（γ-polyglutamic acid，γ-PGA），可以有效地提高葡萄糖代謝和記憶功能，也可以改善記憶功能[43]，基于此結(jié)論可以研發(fā)相關(guān)提高記憶力的功能產(chǎn)品，GABA經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也被證實(shí)對(duì)抑郁癥有一定的作用，可以很好的改善小鼠的快感缺失、行為絕望等抑郁癥狀[44]，但具體作用機(jī)制和與淡豆豉中其他物質(zhì)協(xié)同相關(guān)，還是只與GABA相關(guān)需要進(jìn)一步研究探索。

2.2.3 其他臨床研究及功能成分

發(fā)酵大豆食品對(duì)于糖尿病、癌癥這類(lèi)疾病也有一定的預(yù)防和治療作用。在發(fā)酵過(guò)程中，大豆的α-葡萄糖苷的活性顯著增加，尤其是在中后期有大幅增加達(dá)到較高水平，可以對(duì)高血糖和二型糖尿病起到治療作用[35]。除此之外，γ-氨基丁酸（GABA）通過(guò)試驗(yàn)表明，對(duì)于糖尿病也有一定的治療和預(yù)防作用[45-46]，可以通過(guò)阻止脾細(xì)胞和MHC-Ⅱ蛋白識(shí)別來(lái)為治療一型糖尿病提供臨床靶點(diǎn)和其他治療資料[45]。

從發(fā)酵大豆中分離出異黃酮對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病有一定的治療和預(yù)防作用，因?yàn)楫慄S酮可以誘導(dǎo)K562細(xì)胞周期停止，自噬甚至凋亡，通過(guò)對(duì)異黃酮抗白血病作用的轉(zhuǎn)基因組學(xué)研究，為白血病靶向治療等提供了新的治療方向[47]。淡豆豉中的提取物對(duì)癌細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)和促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡有一定的效果，最新研究發(fā)現(xiàn)[48-51]，大豆異黃酮中的金雀異黃素可以通過(guò)使非編碼核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）失調(diào)，達(dá)到抗腫瘤作用。

豆豉和淡豆豉作為中國(guó)傳統(tǒng)的兩種大豆發(fā)酵食品，有較高的藥用價(jià)值和食用價(jià)值，但是目前在食品領(lǐng)域關(guān)于豆豉的研究較多，主要集中于菌群、發(fā)酵工藝上，相關(guān)淡豆豉的研究較少，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域相關(guān)臨床研究方面存在不足，尤其是物質(zhì)轉(zhuǎn)化和功能性成分研究比較單一，大部分還集中在異黃酮，近年我國(guó)來(lái)關(guān)于GABA的相關(guān)分析逐漸增多，但是相比于其他國(guó)家，我國(guó)在大豆發(fā)酵產(chǎn)品相關(guān)功能活性研究方面還有明顯差距。在日本，關(guān)于納豆臨床應(yīng)用起步早，并已經(jīng)取得了一定成果，而在韓國(guó)發(fā)酵食品作為功能性食品在多種疾病上的治療作用也被不斷強(qiáng)調(diào)[52]，而豆豉和淡豆豉其中的活性成分價(jià)值還未被完全開(kāi)發(fā)，尤其是淡豆豉，作為歷史悠久的藥食兩用食材，需要對(duì)發(fā)酵過(guò)程中物質(zhì)變化情況進(jìn)行了解和掌握，研究功能物質(zhì)在不同疾病的具體臨床使用，對(duì)充分利用傳統(tǒng)發(fā)酵食品資源提供進(jìn)一步的參考依據(jù)。

3 豆豉與淡豆豉工藝改良進(jìn)展

隨著生物組學(xué)技術(shù)在食品中不斷深入應(yīng)用，逐步解釋了發(fā)酵食品中微生物作用機(jī)理，通過(guò)改良菌種，采用純菌發(fā)酵逐漸成為發(fā)酵工藝改進(jìn)的方向。

現(xiàn)在多有通過(guò)采用高活性菌發(fā)酵或多種菌種混合發(fā)酵，來(lái)提高產(chǎn)品中活性物質(zhì)含量。例如在細(xì)菌型豆豉中，通過(guò)利用前期篩選出的貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）進(jìn)行豆豉發(fā)酵，可以得到低生物胺水平的豆豉，在優(yōu)化發(fā)酵條件后，以最佳工藝參數(shù)進(jìn)行發(fā)酵后，得到的豆豉產(chǎn)品品質(zhì)優(yōu)異，具有典型的豉香味，生物胺含量降低，尤其是其中的精胺、酪胺、苯乙胺，提升了產(chǎn)品的安全性[53]。

豆豉纖溶酶作為從發(fā)酵豆制品中獲取高產(chǎn)菌種來(lái)生產(chǎn)的代謝產(chǎn)物，發(fā)展時(shí)間較長(zhǎng)，相對(duì)工業(yè)發(fā)展也較為完善，最早是從豆豉中分離得到的具有溶纖能力的蛋白酶[54]，在淡豆豉的炮制過(guò)程中也有發(fā)現(xiàn)[55]，這幾年多用于降壓或預(yù)防高血壓相關(guān)藥物研究，以及應(yīng)用于針對(duì)高血壓人群研發(fā)的食品中。如通過(guò)前期篩選獲得優(yōu)良的貝萊斯芽孢桿菌進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)出的水豆豉，在優(yōu)化發(fā)酵條件中，其中豆豉纖溶酶活性約為市售水豆豉的400倍[56]。

除此之外，研究表明，通過(guò)從豆豉中分離出的貝萊斯枯草芽孢桿菌確定了表達(dá)蛋白酶的相關(guān)基因，采用基因工程技術(shù)對(duì)大腸桿菌進(jìn)行改造后，可將其作為工程菌大量生產(chǎn)蛋白纖溶酶這種天然溶栓劑，因?yàn)槠鋬r(jià)廉、安全、活性高，生產(chǎn)成本低，生長(zhǎng)周期短的特點(diǎn)，應(yīng)用前景廣闊且市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力強(qiáng)[57]。

GABA作為淡豆豉中具有一定抗抑郁作用的活性成分，被認(rèn)為可能是淡豆豉解表除煩的主要成分[32]，近年來(lái)備受關(guān)注，陳青峰[34]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，GABA的形成主要在淡豆豉發(fā)酵的再悶階段，推測(cè)乳酸菌、大腸桿菌、真菌、枯草芽孢桿菌等可能是GABA生產(chǎn)的主要發(fā)酵微生物。如果可以通過(guò)進(jìn)一步的研究確定生產(chǎn)GABA的菌種，并從淡豆豉中分離獲取優(yōu)秀生產(chǎn)菌種，對(duì)生產(chǎn)GABA并且用于其他功能性食品研發(fā)或優(yōu)化發(fā)酵菌種增強(qiáng)淡豆豉中GABA含量也有很大的幫助。

4 結(jié)論

豆豉和淡豆豉作為我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品，在食品應(yīng)用領(lǐng)域范圍主要集中于發(fā)酵菌種改良，向低鹽化發(fā)展，二者中含有的微生物資源豐富，含有多種優(yōu)勢(shì)細(xì)菌和真菌，包括很多當(dāng)?shù)赝辽N，是可以充分進(jìn)行利用的菌種資源，并且很多菌種在功能性成分產(chǎn)生過(guò)程中起到了重要作用，也更具有開(kāi)發(fā)和利用的價(jià)值。但對(duì)于不同地區(qū)淡豆豉中的發(fā)酵過(guò)程不同階段微生物組，以及各個(gè)階段優(yōu)勢(shì)菌種及相關(guān)代謝作用還有待進(jìn)一步研究。