孕期血清維生素A、E和氧化應(yīng)激損傷指標(biāo)與子癇前期的相關(guān)性

李洪英， 丁雪梅， 高潔， 余俊峰， 符錦， 馬霞， 沈亞娟

(昆明醫(yī)科大學(xué)附屬曲靖醫(yī)院 曲靖市第一人民醫(yī)院產(chǎn)科，云南省曲靖市 655000)

子癇前期(preeclampsia，PE)是孕20周后出現(xiàn)的以蛋白尿、血壓升高為特征的臨床綜合征，發(fā)病率約9.4%[1]。PE可累及孕婦臟器，引起抽搐、肺水腫等并發(fā)癥，且可導(dǎo)致早產(chǎn)、胎兒生長(zhǎng)受限及新生兒窒息、死亡，是危及母嬰健康及生命的重要原因[2]。PE病理生理機(jī)制復(fù)雜，有研究報(bào)道氧化應(yīng)激介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能損傷參與PE病理變化[3]。維生素(vitamin，Vit)A、E是非酶類抗氧化劑，具有預(yù)防自由基損傷、維持新陳代謝等作用，有研究發(fā)現(xiàn)二者與機(jī)體抗氧化能力關(guān)系密切[4]。為此，本研探討孕婦孕期血清VitA、E水平和氧化應(yīng)激損傷指標(biāo)與PE發(fā)生及病情進(jìn)展的相關(guān)性，為VitA、E在PE臨床研究和治療中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取本院2018年9月—2020年9月住院分娩的PE孕婦704例(PE組)，其中輕度PE組358例，重度PE組346例；非PE的正常孕婦6 293例(對(duì)照組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①PE診斷符合《婦產(chǎn)科學(xué)》(第8版)[5]標(biāo)準(zhǔn)；②>20歲；③自然受孕、單胎妊娠；④孕期21～32周；⑤孕婦及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重心、肝、肺、腎等器質(zhì)性疾?。虎诟哐獕翰∈?、先兆流產(chǎn)病史；③合并代謝性疾病、感染性疾病及血液、免疫、內(nèi)分泌、消化、神經(jīng)系統(tǒng)疾??；④伴良惡性腫瘤；⑤其他妊娠并發(fā)癥(肝內(nèi)膽汁淤積癥等)；⑥子宮先天畸形；⑦近3個(gè)月有VitA、E應(yīng)用史；⑧精神疾病、認(rèn)知障礙；⑨吸煙、飲酒。本研究符合《赫爾辛基宣言》要求，方案經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 PE病情程度判定

依據(jù)《婦產(chǎn)科學(xué)》(第8版)[5]，輕度PE：孕20周后舒張壓≥90 mmHg和(或)收縮壓≥140 mmHg，同時(shí)尿蛋白≥0.3 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白≥(+)。重度PE為有下述任一項(xiàng)表現(xiàn)即可判定：①蛋白尿≥2 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白≥(+++)；②頭痛或其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)失常；③舒張壓≥110 mmHg和(或)收縮壓≥160 mmHg；④腎臟功能失常；⑤低蛋白血癥；⑥肝功能失常；⑦肺水腫；⑧血小板<100×109/L。

1.3 VitA、E的檢測(cè)和缺乏判定標(biāo)準(zhǔn)

采集孕婦空腹外周靜脈血4～5 mL，靜置0.5 h后常規(guī)離心取血清，-20 ℃存留備測(cè)。采用美國(guó)Agilent UPLCl290型高效液相色譜儀，分別以高效液相色譜法、液相串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血清VitA、E水平，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線方程(標(biāo)準(zhǔn)偏差相對(duì)值<15%)，計(jì)算樣本(待測(cè)與質(zhì)控樣本)VitA、E水平，各批次樣本雙質(zhì)控。VitA正常范圍0.3～0.7 mg/L，<0.3 mg/L判定為VitA缺乏；VitE正常范圍5.0～20.0 mg/L，<5.0 mg/L判定為VitE缺乏[6]。

1.4 氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè)

采用AU-5800型全自動(dòng)生化儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特)測(cè)定血清總抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平(試劑購(gòu)自南京建成生物工程研究所)，操作遵循說(shuō)明書操作完成。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 各組臨床資料的比較

PE組VitA、E缺乏率高于對(duì)照組，重度PE組VitA、E缺乏率高于輕度PE組(P<0.05)。各組其他臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05；表1)。

表1 各組臨床資料的比較

2.2 各組VitA、E和氧化應(yīng)激指標(biāo)的比較

PE組血清VitA、E及T-AOC、MMP-9、SOD水平低于對(duì)照組，ROS水平高于對(duì)照組；重度PE組血清VitA、E及T-AOC、MMP-9、SOD水平低于輕度PE組，ROS水平高于輕度PE組(P<0.05；表2)。

表2 各組VitA、E和氧化應(yīng)激指標(biāo)的比較

2.3 PE發(fā)生及進(jìn)展Logistic回歸分析結(jié)果

Logistic回歸分析顯示，VitA、E缺乏及ROS是PE發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P<0.05)，VitA、E缺乏及ROS、年齡≥35歲是重度PE的危險(xiǎn)因素(P<0.05)，T-AOC、MMP-9、SOD是PE及重度PE的保護(hù)因素(P<0.05；表3)。

表3 PE發(fā)生及進(jìn)展的影響因素Logistic回歸分析結(jié)果

2.4 VitA、E與氧化應(yīng)激指標(biāo)的相關(guān)性

Pearson相關(guān)分析顯示，血清VitA、E與T-AOC、MMP-9、SOD呈正相關(guān)，與ROS呈負(fù)相關(guān)(P<0.05；表4)。

表4 血清VitA、E與氧化應(yīng)激指標(biāo)的相關(guān)性

2.5 VitA、E和氧化應(yīng)激指標(biāo)與PE病情程度的相關(guān)性

Spearman秩相關(guān)分析顯示，血清VitA、E、T-AOC、MMP-9、SOD與PE病情程度呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，ROS與PE病情程度呈正相關(guān)(P<0.05；圖3)。

圖3 血清VitA、E和氧化應(yīng)激指標(biāo)與PE病情程度的相關(guān)性

3 討 論

PE發(fā)病的病理生理機(jī)制復(fù)雜，目前以兩階段學(xué)說(shuō)為主。第一階段滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)功能降低，浸潤(rùn)子宮螺旋動(dòng)脈淺，致使胎盤缺氧、缺血，分泌過多胎盤因子；第二階段胎盤因子入血后激活氧化應(yīng)激，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，誘發(fā)病變[7]。故有研究認(rèn)為氧化應(yīng)激反應(yīng)是PE病理變化的重點(diǎn)[8]。

國(guó)內(nèi)有研究報(bào)道，PE組孕婦血清MMP-9、T-AOC等氧化應(yīng)激水平低于正常組孕婦[9]，本研究結(jié)果驗(yàn)證了上述研究，提示氧化應(yīng)激與PE的發(fā)生存在關(guān)聯(lián)性。T-AOC是反映總抗氧化水平及內(nèi)皮細(xì)胞損害情況的常用指標(biāo)，其水平降低提示抗氧化能力下降；MMP-9水平降低可引起胎盤絨毛細(xì)胞缺血缺氧，誘發(fā)PE生理改變[10]；SOD可催化超氧陰離子自由基、對(duì)抗氧化反應(yīng)，其活性上升能夠減少細(xì)胞組織的過氧化損害[11]；ROS參與胎盤細(xì)胞生長(zhǎng)，其過量生成可引起抗氧化防御水平下調(diào)，加重氧化應(yīng)激損傷[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，ROS是重度PE的危險(xiǎn)因素，T-AOC、MMP-9、SOD是重度PE的保護(hù)因素，提示氧化應(yīng)激與PE病情進(jìn)展有關(guān)。分析認(rèn)為：PE孕婦機(jī)體氧化產(chǎn)物增加狀態(tài)下，抗氧化物減少，加之局部炎癥大量釋放，促使胎盤氧化應(yīng)激被激活，形成氧自由基釋放、脂質(zhì)過氧化狀態(tài)，誘發(fā)血管內(nèi)皮損傷，進(jìn)而加重PE[13]。

有研究指出VitA、E水平在PE發(fā)病中具有監(jiān)測(cè)價(jià)值[14]。本研究結(jié)果提示VitA、E與PE的發(fā)生及病情程度有關(guān)，VitA、E缺乏的孕婦發(fā)生PE及PE病情進(jìn)展的危險(xiǎn)性更大。分析認(rèn)為VitA抗氧化，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的調(diào)節(jié)、維持胚胎發(fā)育，影響生殖與免疫系統(tǒng)，并能參與合成糖蛋白；當(dāng)VitA缺乏時(shí)會(huì)加速細(xì)胞分裂，對(duì)胚胎發(fā)育及抵抗氧化損害不利，更易發(fā)生并加重PE[15]。VitE兼具清除氧自由基與抗氧化功能，孕期婦女體內(nèi)代謝旺盛，自由基生成過多，若VitE缺乏則自由基清除減少，引起或加重PE[16]；同時(shí)，在抗氧化能力下降狀態(tài)下的巨噬細(xì)胞泡沫化可加重缺氧缺血[17]，也可能加重PE。

郭冰杰等[18]研究發(fā)現(xiàn)，T-AOC、MMP-9是VitE缺乏的危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清VitA、E與T-AOC、MMP-9、SOD均呈正相關(guān)，與ROS呈負(fù)相關(guān)，提示VitA、E與氧化應(yīng)激指標(biāo)存在相關(guān)性。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，血清VitA、E、T-AOC、MMP-9、SOD與PE病情程度呈負(fù)相關(guān)，ROS與PE病情程度呈正相關(guān)，提示VitA、E、氧化應(yīng)激指標(biāo)與PE進(jìn)展有關(guān)。因此，調(diào)節(jié)VitA、E與氧化應(yīng)激指標(biāo)水平可能成為PE防治的重要靶點(diǎn)。此外，益敏輝等[19]研究表明，高齡是孕婦PE的危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，年齡≥35歲是PE重度的危險(xiǎn)因素，提示適齡妊娠的重要性。

綜上所述，PE孕婦血清VitA、E含量相對(duì)缺乏，且VitA、E水平及氧化應(yīng)激指標(biāo)與PE的發(fā)生及病情進(jìn)展均密切相關(guān)。臨床可在常規(guī)治療基礎(chǔ)上補(bǔ)充VitA、E，進(jìn)而改善PE孕婦妊娠結(jié)局。