骨化三醇聯(lián)合奧美沙坦酯治療早期2 型糖尿病腎病的效果及對(duì)腎病足細(xì)胞損傷的機(jī)制探討

黃 程 邵云俠 吳 艷 邢昌贏

1.安徽省蕪湖市第二人民醫(yī)院腎內(nèi)科，安徽蕪湖 241000；2.南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 江蘇省人民醫(yī)院腎內(nèi)科，江蘇南京 210029

2 型糖尿病腎?。╰ype 2 diabetic nephropathy，T2DN）具有發(fā)病率高等特點(diǎn)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1-4]。奧美沙坦酯能夠有效擴(kuò)張腎出球小動(dòng)脈，可用于治療早期T2DN，但部分患者效果仍不滿(mǎn)意[5-7]。骨化三醇能夠改善機(jī)體免疫功能，調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)鈣離子濃度，延緩腎損傷[8-9]?；钚跃S生素D3可改善糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）患者腎足細(xì)胞損傷[10]。國(guó)內(nèi)有關(guān)骨化三醇聯(lián)合奧美沙坦酯對(duì)早期T2DN 的效果及對(duì)足細(xì)胞損傷機(jī)制的研究尚少，為此，本研究采用前瞻性研究進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年1 月至2019 年12 月安徽省蕪湖市第二人民醫(yī)院收治的82 例早期T2DN 患者為研究對(duì)象，依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法將其分為研究組與對(duì)照組，每組各41 例。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

表1 兩組一般資料比較

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合早期T2DN 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]（通過(guò)糖耐量、尿糖、血糖檢查；在糖尿病的基礎(chǔ)上，尿蛋白排出＞300 g；眼底有糖尿病視網(wǎng)膜病變），且Mogensen分期為Ⅲ期；②尿蛋白/血肌酐（serum creatinine，SCr）30～300 mg/g；③均簽署知情同意書(shū)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并泌尿系腫瘤等；②伴有高血壓、心臟疾??；③肝功能障礙；④對(duì)本研究治療藥物過(guò)敏；⑤近1 個(gè)月內(nèi)泌尿系統(tǒng)感染或糖尿病酮癥酸中毒；⑥甲狀腺功能障礙；⑦合并繼發(fā)性/原發(fā)性腎??；⑧妊娠期或哺乳期婦女。

1.2 治療方法

入院后，所有患者均給予調(diào)節(jié)生活方式、糖尿病飲食等基礎(chǔ)治療。對(duì)照組另給予奧美沙坦酯片（上海第一三共制藥有限公司，批號(hào)：20150706，規(guī)格為20 mg/片）治療，口服，20 mg/次，1 次/d。研究組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上另給予骨化三醇軟膠囊（青島正大海爾制藥有限公司，批號(hào)：20030491，規(guī)格：0.25 μg）治療，口服，0.25 μg/次，1 次/d。兩組均持續(xù)治療8 周后觀察效果。

1.3 觀察指標(biāo)

①臨床療效。顯效：24 h 尿蛋白定量下降幅度＞50%，臨床癥狀基本消除，尿白蛋白排泄率下降幅度＞50%；有效：24 h 尿蛋白定量下降幅度≤50%，臨床癥狀有所好轉(zhuǎn)，尿白蛋白排泄率下降幅度≤50%；無(wú)效：尿白蛋白排泄率、24 h 尿蛋白定量、臨床癥狀基本上無(wú)變化甚至加重[12]。②Scr：治療前（T0）、治療后第1 周（T1）、4 周（T2）、8 周（T3）分別采集兩組患者清晨靜脈血4 ml，離心轉(zhuǎn)速3500 r/min，離心半徑13 cm，其上清液采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)兩組血清SCr 水平，貨號(hào)為WLA120，試劑盒購(gòu)自武漢益普生物科技有限公司。③微RNA-30（microRNAs-30，miR-30）水平：T0、T1、T2、T3分別采集兩組患者晨起中段尿5 ml，離心轉(zhuǎn)速為1000 r/min，離心半徑為6 cm，離心10 min，吸取300 μl上清液放置離心管中（無(wú)RNA）酶，采用miR 提取試劑盒（貨號(hào)：B1804，哈爾濱新?；驒z測(cè)有限公司）提取尿液中總RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)兩組尿液標(biāo)本中miR-30 水平，試劑盒均購(gòu)自上?？泼羯锟萍加邢薰?，貨號(hào)為rno-miR-30b-3p。④安全性比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，不同時(shí)間點(diǎn)的測(cè)量采用重復(fù)測(cè)量方差分析；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)理論頻數(shù)＜5 時(shí)采用校正χ2檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較

研究組臨床療效優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組臨床療效比較[例（%）]

2.2 兩組不同時(shí)間點(diǎn)Scr 水平比較

整體分析發(fā)現(xiàn)：患者Scr 組間比較、時(shí)間點(diǎn)比較及交互作用差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）；進(jìn)一步兩兩比較，組內(nèi)比較：T1、T2、T3時(shí)刻，兩組Scr 水平低于T0時(shí)刻（P ＜0.05）；T2、T3時(shí)刻，兩組Scr 水平低于T1時(shí)刻（P ＜0.05）；T3時(shí)刻，兩組Scr 水平低于T2時(shí)刻（P ＜0.05）；組間比較：T1、T2、T3時(shí)刻，研究組Scr 水平低于對(duì)照組（P ＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 兩組不同時(shí)間點(diǎn)Scr 水平比較（μmol/L，±s）

表3 兩組不同時(shí)間點(diǎn)Scr 水平比較（μmol/L，±s）

注 與本組T0 比較，aP ＜0.05；與本組T1 比較，cP ＜0.05；與本組T2比較，cP ＜0.05；與對(duì)照組同期比較，d P ＜0.05。Scr：血肌酐

2.3 兩組不同時(shí)間點(diǎn)miR-30 水平比較

整體分析發(fā)現(xiàn)：患者miR-30 組間比較、時(shí)間點(diǎn)比較及交互作用差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）；進(jìn)一步兩兩比較，組內(nèi)比較：T1、T2、T3時(shí)刻，兩組miR-30水平低于T0時(shí)刻（P ＜0.05）；T2、T3時(shí)刻，兩組miR-30水平低于T1時(shí)刻（P ＜0.05）；T3時(shí)刻，兩組miR-30 水平低于T2時(shí)刻（P ＜0.05）；組間比較：T1、T2、T3時(shí)刻，研究組miR-30 水平低于對(duì)照組（P ＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 兩組不同時(shí)間點(diǎn)miR-30 水平比較（±s）

表4 兩組不同時(shí)間點(diǎn)miR-30 水平比較（±s）

注 與本組T0 比較，aP ＜0.05；與本組T1 比較，cP ＜0.05；與本組T2比較，cP ＜0.05；與對(duì)照組同期比較，d P ＜0.05。miR-30：微RNA-30

2.4 兩組安全性比較

對(duì)照組中1 例胃腸道反應(yīng)、1 例肝功能異常，研究組中1 例皮疹，2 例肝功能異常、1 例胃腸道反應(yīng)，治療期間兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（校正χ2=0.180，P=0.672）。

3 討論

目前，已有大量文獻(xiàn)報(bào)道奧美沙坦酯治療T2DM具有一定的療效[13-16]，骨化三醇可改善DN 患者的腎功能，調(diào)節(jié)血清學(xué)指標(biāo)水平[17]。足細(xì)胞普遍存在于腎小球臟層，一旦足細(xì)胞損傷，可引發(fā)大量蛋白尿產(chǎn)生[18]，但是目前國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)骨化三醇聯(lián)合奧美沙坦酯對(duì)早期T2DN 患者足細(xì)胞損傷機(jī)制的相關(guān)報(bào)道。

本研究中，研究組療效優(yōu)于對(duì)照組，隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，兩組miR-30、Scr 均降低，T1、T2、T3時(shí)刻，研究組miR-30、Scr 水平更低，提示骨化三醇聯(lián)合奧美沙坦酯治療早期T2DN 患者可增強(qiáng)療效，改善腎足細(xì)胞損傷情況，保護(hù)腎臟。miR-30 在DN 等多種腎臟疾病中異常表達(dá)，且與疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[19-20]。Scr 作為反映腎功能的常見(jiàn)指標(biāo)，在早期T2DN 患者中異常表達(dá)，且與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[21]。奧美沙坦酯可改善早期T2DN 患者的臨床癥狀，在抑制氧化應(yīng)激、降壓、抑制炎癥因子釋放等方面具有重要作用[22]。骨化三醇是一種維生素D3的活性產(chǎn)物，參與糖脂代謝、炎癥反應(yīng)等多種生理、病理過(guò)程，本研究中能夠與奧美沙坦酯通過(guò)多靶點(diǎn)治療T2DM，產(chǎn)生協(xié)同作用，可能通過(guò)改善腎功能，降低腎足細(xì)胞損傷來(lái)增強(qiáng)治療效果，從而發(fā)揮保護(hù)腎臟的作用[23]。骨化三醇能夠降低腎素基因的表達(dá)，保護(hù)人體足細(xì)胞足突裂孔隔膜的完整性，可在一定程度上減輕腎功能損傷[24]。骨化三醇能夠提高胰島素的敏感性，從而調(diào)節(jié)血糖水平，進(jìn)而改善人體內(nèi)的高糖反應(yīng)，最終延緩腎功能的進(jìn)一步惡化[25]。

綜上所述，骨化三醇聯(lián)合奧美沙坦酯治療早期T2DN 效果顯著，改善腎足細(xì)胞損傷情況，且安全性良好，抑制miR-30 可保護(hù)早期T2DN 患者的足細(xì)胞損傷，其機(jī)制可能與骨化三醇的藥物特性有關(guān)。