安乃近殘留溶劑甲醛的氣相色譜檢測法

王曉鳳，王莉莉，焦銀蕾，康 倩，李煥君，張曉燦，張 云，王 麗，何曉晨，劉曉蓮，馬寧寧

（河北冀衡藥業(yè)股份有限公司，河北 衡水 053400）

0 引言

安乃近是重要的老牌解熱鎮(zhèn)痛藥，由于其療效確切，使用方便，價格低廉，在醫(yī)學(xué)上發(fā)揮了重大作用，在世界上被廣泛用于發(fā)熱、急性關(guān)節(jié)炎、頭痛等癥的治療，其在解熱鎮(zhèn)痛類藥中是為數(shù)不多的既能口服又可注射的品種。

安乃近還可以用于滴鼻，尤其小兒鼻腔內(nèi)毛細(xì)血管豐富，藥液接觸面大，易于吸收，使用時藥效快，作用強。

安乃近極易溶于水，作用較為迅速，解熱鎮(zhèn)痛作用強而快。

安乃近合成工藝一般以吡唑酮為基礎(chǔ)原料，經(jīng)甲基化反應(yīng)制得安替比林；再經(jīng)亞硝化、還原成4- 氨基安替比林，然后經(jīng)甲?；?、甲基化得4- 甲氨基安替比林；再經(jīng)縮合反應(yīng)得到安乃近。

安乃近最后工序縮合反應(yīng)用到的原料為甲醛、焦亞硫酸鈉，因要保證主原料4- 甲氨基安替比林完全反應(yīng)，所以操作中甲醛、焦亞硫酸鈉一般過量，而后期純化工序焦亞硫酸鈉隨母液離心與產(chǎn)品分離，過量甲醛不易去除，可能殘留到安乃近產(chǎn)品中。但是中國藥典、歐盟藥典、美國藥典等均沒有相于殘留溶劑甲醛檢測方法的報道，按照國際制藥指南ICHQ3C，甲醛屬于對人體有害的有機溶劑，所以非常有必要對該殘留溶劑給予控制，本實驗開發(fā)了安乃近殘留溶劑甲醛的定量檢測方法，為安乃近生產(chǎn)提供重要的理論依據(jù)，同時也達(dá)到提高安乃近質(zhì)量的目的。

1 實驗儀器與試劑

1.1 實驗儀器

CIarus 580 氣相色譜儀，珀金埃爾默企業(yè)管理（上海） 有限公司。

PURELAB flex 型超純水儀，威立雅水處理技術(shù)（上海） 有限公司。

BSA224S 型電子分析天平，賽多利斯科學(xué)儀器（北京） 有限公司。

KQ-250DB 型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司。

SPN-300 高純度氮氣發(fā)生器，北京中惠普分析技術(shù)研究所。

SPH-300 高純度氫氣發(fā)生器，北京中惠普分析技術(shù)研究所。

SPB-3 全自動空氣源（北京中惠普分析技術(shù)研究所）。

1.2 試 劑

甲醛，煙臺遠(yuǎn)東精細(xì)化工有限公司。

N,N- 二甲基甲酰胺，天津市大茂化學(xué)試劑廠。均為色譜純試劑。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

柱子：DB-WAX 柱（30 m×0.32 mm×0.50 μm）。

柱溫：80 ℃。

進(jìn)樣器溫度：200 ℃。

檢測器溫度：350 ℃。

載氣：高純氮氣。

載氣流速：2 mL/min。

氫氣流速：35 mL/min。

空氣流速：300 mL/min。

進(jìn)樣體積：1.0 uL。

量程：1。

衰減：-3。

檢測器：FID。

計算方法：外標(biāo)法。

2.2 溶液配制

供試品溶液：精密稱取0.5 g 樣品于10 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺溶解，超聲處理。用離心機處理不溶性部分，取上清液作為供試品溶液。

甲醛儲備溶液：精密稱取0.1 g 甲醛于100 mL容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺溶解，并稀至刻度作為儲備液。

甲醛對照液：取10 mL 甲醛儲備液于50 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺至刻度，搖勻，既得200 μg/mL 甲醛對照液。

2.3 操作步驟

分別吸取1.0 μL 甲醛對照液和供試品溶液注入氣相色譜儀，對照溶液進(jìn)5 針，供試液（1）、（2） 進(jìn)平行樣各進(jìn)一針，按外標(biāo)法計算甲醛的含量：

按外標(biāo)法計算甲醛的含量：

計算公式如下：

式中，As 為樣品溶液中甲醛的峰面積；Ar 為標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲醛的峰面積；Wr 為配制標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取甲醛的質(zhì)量；Ws 為稱取樣品的質(zhì)量。

2.4 氣相色譜方法學(xué)考察

2.4.1 專屬性考察

取空白溶劑1 μL，按照“2.1”項下的色譜條件，注入氣相色譜儀，檢測結(jié)果表明，無其它色譜雜峰，對安乃近殘留溶劑甲醛的含量測定無明顯干擾，證明該方法專屬性良好。

2.4.2 線性關(guān)系考察

精密稱取58.8948-58.5948=0.3000 g 甲醛（含量為33.10%） 于100 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺溶解，并稀至刻度作為甲醛儲備液。取10 mL 甲醛儲備液于50 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺至刻度，搖勻，既得甲醛對照液。

自甲醛的定量限至限度的150%，稀釋成濃度為50、100、150、200、250 和300 μg/mL 6 個不同甲醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液，并依次編號。取上述各濃度的溶液1μL，按照“2.1”項下的色譜條件，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖并計算峰面積。得出的數(shù)據(jù)以峰面積為縱坐標(biāo)，以甲醛溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在50 ～300 μg/mL 的線性范圍內(nèi)，具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R2=0.9998，線性方程為：y=49.426 x-1900.9。甲醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液不同濃度峰面積表見表1。

表1 甲醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液不同濃度峰面積表Table 1 Table of peak areas of different concentrations of formaldehyde standard solution

甲醛溶液線性關(guān)系如圖1 所示。

圖1 甲醛溶液線性關(guān)系Fig.1 Linear relationship of the formaldehyde solution

2.4.2 重復(fù)性考察

精密稱定甲醛標(biāo)準(zhǔn)品適量，配制成甲醛標(biāo)準(zhǔn)品0.2 mg/mL 的溶液，取上述溶液1 μL，按照“2.1”項下的色譜條件，注入氣相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6針。結(jié)果表明，檢測氣相檢測重復(fù)性良好，各峰面積RSD＜5.0%，符合分析方法學(xué)要求。甲醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液峰面積表見表2。

表2 甲醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液峰面積表Table 2 Peak area of formaldehyde standard solution

2.4.3 穩(wěn)定性考察

精密稱定甲醛標(biāo)準(zhǔn)品適量，加N,N 二甲基甲酰胺稀釋劑稀釋成適當(dāng)濃度的甲醛對照品溶液，分別于0、2、4、8、12、18、24 h 各1μL，按照“2.1”項下的色譜條件，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，與0 h 相比，24 h 溶液穩(wěn)定，峰面積RSD＜5%，符合方法學(xué)要求。且系統(tǒng)適用性實驗表明，溶劑峰和甲醛峰分離度較好，分離度符合要求。

2.4.4 樣品的檢測

按“2.2”項下溶液的配制標(biāo)準(zhǔn)，取六批樣品進(jìn)行有關(guān)殘留溶劑甲醛的檢測，雜質(zhì)的量分別為10-4、8.9×10-5、5×10-5、7×10-5、6×10-5和8×10-5，均符合控制標(biāo)準(zhǔn)甲醛不得超過5×10-4要求。

3 結(jié)語

本文以DB-WAX 柱（30 m×0.32 mm×0.50 um），F(xiàn)ID 檢測器，在程序升溫條件下進(jìn)行檢測安乃近殘留溶劑甲醛的含量，具有操作簡單、耗時小和誤差小等優(yōu)點，使用N,N 二甲基甲酰胺作溶劑，溶劑峰與甲醛峰能很好分離，該氣相色譜法檢測甲醛溶液線性關(guān)系良好，線性方程：y=49.426 x-1900.9，相對系數(shù)R2=0.9998，相對誤差RSD＜5%。該方法能準(zhǔn)確可靠的測定安乃近殘留溶劑甲醛的含量，為提高安乃近產(chǎn)品的質(zhì)量提供了保障。