冠心病患者抗心磷脂抗體和β糖蛋白 抗體分析

馬麗娟 陶婭琳 孫繼芹 呂金娥 尹春瓊 冷麗 丁容 代嬌

作者單位：655000 云南曲靖，曲靖市第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科 （馬麗娟、陶婭琳、孫繼芹、呂金娥、尹春瓊、冷麗、丁容）

655000 云南曲靖，曲靖市醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校（代嬌）

冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是常見的心血管疾病，其發(fā)病機(jī)制為冠狀動(dòng)脈（冠脈）出現(xiàn)粥樣硬化斑塊，造成血管腔狹窄或閉塞，導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟?。?］?！?020年中國心血管病報(bào)告》［2］指出，我國現(xiàn)有心血管病患者3.30億，其中，腦卒中1300萬，CHD 1139萬，肺源性心臟病500萬，心力衰竭890萬，風(fēng)濕性心臟病250萬，先天性心臟病200萬，高血壓2.45億。CHD在心血管疾病中占比僅次于腦卒中和高血壓，暫居第三。CHD是心血管疾病的主要致死因素，其發(fā)病率和病死率自2012年以來呈上升趨勢(shì)。目前CHD診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”為冠脈血管CT影像和選擇性冠脈造影（coronary angiography，CAG），診斷的可靠依據(jù)是ST段上升或降低、異常Q波、T波改變等［3-4］。但以上檢查方法價(jià)格昂貴，檢查時(shí)間長，且有創(chuàng)傷性，在早期診斷中應(yīng)用有限。因此，尋找具有高敏感度與特異度的生物標(biāo)志物對(duì)有效診斷和治療CHD有非常重要的作用。CHD的主要病因是動(dòng)脈粥樣硬化，目前已被臨床公認(rèn)的致動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素有吸煙、飲酒、遺傳、高血壓、高脂血癥等，以及一些引起繼發(fā)性高脂血癥的疾?。ㄈ缣悄虿　⒛I病綜合征）和其他因素（如高齡、肥胖）。有研究表明，抗心磷脂（anti-cardiolipin，ACL）抗體異常是動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素〔優(yōu)勢(shì)比（odds ratio，OR）＝1.30，95%可信區(qū)間（95% confidence interval，95%CI）為1.15～1.49〕［5］，且作為誘導(dǎo)ACL抗體與心磷脂結(jié)合的輔助因子β2糖蛋白1，其抗體也與動(dòng)脈粥樣硬化存在緊密聯(lián)系。本研究對(duì)100例CHD患者的血清ACL抗體、β糖蛋白抗體進(jìn)行檢測(cè)，旨在探討上述指標(biāo)在CHD中的應(yīng)用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集本院2019年11月—2020年 6月因胸悶、胸痛且經(jīng)CAG檢查確診的100例CHD患者作為研究組，另外選擇同期本院90名健康體檢者作為對(duì)照組。

1.1.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：① 生命體征平穩(wěn)；② 經(jīng)CAG檢查確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：① 凝血功能異常；② 合并肝腎功能障礙；③ 非動(dòng)脈硬化性疾病。

1.1.2 倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批（審批號(hào)：2022-003-01），所有檢測(cè)均獲得過患者或家屬的知情同意。

1.2 研究方法 采集兩組受檢者清晨空腹靜脈血2～3 mL（不加入抗凝劑），分離血清，置于2～8 ℃冰箱，保存時(shí)間不超過7 d。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)血清ACL抗體（ACL-IgG/IgA/IgM、ACL-IgG、ACL-IgM） 和β糖蛋白抗體（β-IgG/IgA/IgM、β-IgG、β-IgM），試劑盒購自德國胡曼公司，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 研究組男性62例，女性38例；年齡33～91歲，平均（67.0±12.5）歲。對(duì)照組男性42例， 女性48例，年齡14～94歲，平均（41.0±17.1）歲。兩 組一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

2.2 兩組血清ACL抗體和β糖蛋白抗體水平比較 研究組ACL抗體和β糖蛋白抗體水平均明顯高于對(duì)照組（均P＜0.05）。見表1。

表1 研究組與對(duì)照組ACL抗體和β糖蛋白抗體 水平比較（±s）

表1 研究組與對(duì)照組ACL抗體和β糖蛋白抗體 水平比較（±s）

注：ACL為抗心磷脂，Ig為免疫球蛋白

ACL-IgM（kU/L）研究組 100 36.24±18.39 39.31±7.29 28.17±8.59對(duì)照組 90 29.96±15.64 32.94±9.21 24.03±9.51 t值 2.525 5.310 3.157 P值 0.012 0.000 0.020組別 例數(shù)（例）ACL-IgG/IgA/IgM（kU/L）ACL-IgG（kU/L）β-IgG（kU/L）組別 例數(shù)（例）β-IgG/IgA/IgM（kU/L）β-IgM（kU/L）研究組 100 5.02±0.83 7.98±2.95 8.02±1.48對(duì)照組 90 3.59±1.28 6.02±0.78 5.98±1.89 t值 9.235 6.128 8.327 P值 0.000 0.000 0.000

2.3 兩組ACL抗體和β糖蛋白抗體陽性率比較 對(duì)照組ACL-IgG/IgA/IgM、ACL-IgG陽性率均明顯低于研究組（均P＜0.05），兩組ACL-IgM陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；對(duì)照組β糖蛋白抗體陽性率均明顯低于研究組（均P＜0.05）。見表2。

表2 研究組與對(duì)照組ACL抗體和β糖蛋白抗體陽性率比較

3 討論

CHD的病理基礎(chǔ)是冠脈粥樣硬化。動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性病理改變，脂質(zhì)類物質(zhì)在動(dòng)脈內(nèi)膜上不斷沉積，血管壁上出現(xiàn)粥樣斑塊，動(dòng)脈壁厚度增加，彈性降低，動(dòng)脈管腔變得狹窄，從而影響組織供血［6］。若病變部位在腦部，患者則會(huì)出現(xiàn)腦部缺血、腦血管破裂或腦萎縮等；若病變部位在冠脈，則會(huì)引起心肌梗死（心梗）、心律失常，嚴(yán)重者甚至?xí)l(fā)生猝死；若病變部位在腎臟，則可能會(huì)導(dǎo)致頑固性高血壓，甚至造成腎功能不全。動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（atherogenicindex，AI）自1981年被首次報(bào)道以來，國內(nèi)進(jìn)行過大量研究，并在第9屆全國脂蛋白學(xué)術(shù)會(huì)議上被認(rèn)為是預(yù)測(cè)和衡量動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)度的可靠指標(biāo)之一［7-8］。Willis和Bradford［9］研究表明，ACL抗體水平升高是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且作為誘導(dǎo)ACL抗體與心磷脂結(jié)合的輔助因子β2糖蛋白1，其抗體也與動(dòng)脈粥樣硬化存在緊密聯(lián)系。Willemze等［10］研究也表明，β2糖蛋白1與β2糖蛋白Ⅰ抗體（β2 glycoproteinⅠantibody，Antiβ2GPI）形成的復(fù)合物在動(dòng)脈粥樣硬化、心梗和卒中等心血管疾病中發(fā)揮重要作用。本研究表明，研究組與對(duì)照組ACL-IgG/IgA/IgM、ACL-IgG、ACL-IgM、 β-IgG、β-IgM、β-IgG/IgA/IgM水平均明顯高于對(duì)照組，與既往研究一致［9-10］。

ACL抗體是一類自身免疫性抗體，以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂作為靶抗原，是抗血小板抗體（antiplatelet antibody，APA）成員之一。ACL抗體與血栓形成之間存在一定關(guān)系：① ACL抗體可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子產(chǎn)生，促進(jìn)血小板黏附、聚集，誘導(dǎo)血栓形成［11］；② ACL抗體可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)組織因子（tissue factor，TF），并通過增強(qiáng)其促凝作用，激活TF途徑凝血反應(yīng)，促進(jìn)血栓形成；③ 當(dāng)血小板膜被破壞時(shí)，ACL抗體與血小板膜結(jié)合，使血小板被激活而促進(jìn)血栓形成；④ ACL抗體通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞釋放纖溶酶原致活物，降低纖溶活性，從而促進(jìn)血栓形成ACL抗體并與磷脂蛋白結(jié)合，可以使血栓調(diào)節(jié)蛋白的構(gòu)象發(fā)生改變，抑制蛋白C在內(nèi)皮細(xì)胞和血小板表面的活化，導(dǎo)致抗凝功能缺陷，促進(jìn)血栓形成［12］。

Anti-β2GPI于1961年被首次發(fā)現(xiàn)，命名為載脂蛋白（apolipoprotein H，apoH）。β2糖蛋白1是由肝細(xì)胞合成的血漿糖蛋白，其與凝血酶原結(jié)合而成的復(fù)合物是Anti-β2GPI的靶抗原。ACL抗體在執(zhí)行免疫活動(dòng)時(shí)依賴于靶抗原的輔助，β2糖蛋白1是其中最主要的成員之一，從多種途徑參與調(diào)節(jié)機(jī)體凝血和纖溶系統(tǒng)，在病理?xiàng)l件下，通過多種機(jī)制促進(jìn)機(jī)體血栓形成。本研究結(jié)果顯示，研究組的ACL-IgG、 ACL-IgG/IgA/IgM、β-IgG/IgA/IgM、β-IgG、β-IgM陽性率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且研究組，這也再次驗(yàn)證了以上觀點(diǎn)。

綜上所述，研究組ACL-IgG/IgA/IgM、ACL-IgG、 ACL-IgM、β-IgG/IgA/IgM、β-IgG、β-IgM水平和ACL-IgG、ACL-IgG/IgA/IgM、β-IgG、β-IgM、β-IgG/IgA/IgM陽性率均較高。聯(lián)合檢測(cè)這兩大類抗體有利于對(duì)CHD進(jìn)行早預(yù)防、早診斷、早治療。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突