用液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)滅多威、多菌靈及嘧霉胺等20種農(nóng)藥殘留

楊琳琳

（鞍山市檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心，遼寧鞍山 114000）

1 試劑及樣品前處理的原理

1.1 原理

試樣用色譜純乙腈提取，提取液經(jīng)過(guò)分散固相萃取凈化處理過(guò)后，用Waters TQD檢測(cè)，外標(biāo)法（標(biāo)準(zhǔn)曲線）定量。

1.2 藥品

水：在實(shí)驗(yàn)中水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。乙腈：色譜純。甲酸：色譜純。提取鹽包內(nèi)含4 g無(wú)水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸三鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉倍半水合物。含除水劑和凈化材料的塑料離心管：提取液使用無(wú)水硫酸鎂150 mg/ml、PSA 25 mg/ml和GCB 2.5 g/ml。陶瓷均質(zhì)子：2 cm（長(zhǎng)）×1 cm（外徑）。有機(jī)相微孔濾膜：13 mm×0.22 μm。

2 儀器和設(shè)備

液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）Waters TQD。分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。

3 試樣制備

3.1 試樣制備

食用菌、熱帶和亞熱帶水果（皮可食）隨機(jī)取樣1 kg，水生蔬菜、莖菜類蔬菜豆類蔬菜、核果類水果熱帶和亞熱帶水果（皮不可食）隨機(jī)取樣2 kg，瓜類蔬菜和水果取4～6個(gè)個(gè)體（取樣量不少于1 kg），其他蔬菜和水果隨機(jī)取樣3 kg。取后的樣品將其切碎，充分混勻，用四分法取一部分或全部用組織搗碎機(jī)勻漿后，放入樣品儲(chǔ)存瓶中。

3.2 樣品的儲(chǔ)存

將樣品按照測(cè)試和備用分開存放，于-18℃冰柜中保存。

4 分析步驟

稱取10 g（精確至0.01 g）試樣（蔬菜、水果、食用菌）于50 ml塑料離心管中，加入10 ml乙腈及1顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min，加入4 g無(wú)水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物，劇烈振蕩1 min后4 200 r/min離心5 min。定量吸取上清液至內(nèi)含除水劑和凈化材料的塑料離心管中（提取液使用無(wú)水硫酸鎂150 mg/ml、PSA 25 mg/ml）；對(duì)于顏色較深的試樣，離心管中另加入GCB（提取液使用2.5 mg/ml），渦旋混勻1 min。4 200 r/min離心 5 min，吸取上清液過(guò)微孔濾膜。

5 測(cè)定

5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取空白試樣按樣品處理方法制備空白基質(zhì)溶液，然后準(zhǔn)確量取適量20種農(nóng)藥混標(biāo)溶液，用空白基質(zhì)溶液稀釋配制成濃度為20μg/L、40μg/L、60μg/L、100μg/L、150μg/L、200μg/L的系列基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，供Waters TQD測(cè)定。分別以20種農(nóng)藥的定量離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的基質(zhì)匹配標(biāo)液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)曲。

5.2 液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜參考條件

5.2.1 液相色譜參考條件。色譜柱：C182.1×50 mm，1.7 μm。流速：0.4 mL/min。流動(dòng)相：A為0.1%甲酸水溶液，C為乙腈溶液。進(jìn)樣量：2 μL。流動(dòng)相梯度洗脫程序（圖1）。

圖1 流動(dòng)相梯度洗脫程序

5.2.2 質(zhì)譜參考條件。Waters TQD的離子源：電噴霧離子源（ESI）。Waters TQD的掃描方式：正離子掃描。Waters TQD的質(zhì)譜掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描（MRM）。Waters TQD的離子源溫度：150℃。參考監(jiān)測(cè)離子參數(shù)情況（表1）。

表1 監(jiān)測(cè)離子參數(shù)

6 定性及定量

6.1 保留時(shí)間

被測(cè)樣品中目標(biāo)農(nóng)藥色譜峰的RT與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的RT相比較，相對(duì)誤差應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。

6.2 離子豐度比

在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，目標(biāo)化合物選擇的子離子均出現(xiàn)，而且同一檢測(cè)批次，對(duì)同一化合物，樣品中目標(biāo)化合物的離子豐度比與質(zhì)量濃度相當(dāng)?shù)幕|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液相比，其允許偏差不超過(guò)規(guī)定的范圍（表1），則可判斷樣品中存在目標(biāo)農(nóng)藥[1]。

6.3 定量

采用外標(biāo)（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）定量。

7 結(jié)果計(jì)算

ω=（ρ×V）/m

式中，ω為試樣中被測(cè)物殘留量的數(shù)值（mg/kg）；

ρ為從基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中得到的試樣溶液中被測(cè)物質(zhì)量的濃度（mg/L）；

V為提取液體積（mL）；

m為試樣的質(zhì)量（g）。

8 結(jié)論

經(jīng)多次反復(fù)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)對(duì)色素復(fù)雜的樣品過(guò)兩次含除水劑和凈化材料的塑料離心管，精密度和回收率都好于一次過(guò)濾的樣品。綜上所述，農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作在整體開展的過(guò)程當(dāng)中，需要用到液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，以此可以有效保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和科學(xué)性，從而提升檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量[2]。