SOD、MDA和IL-6在Hp相關(guān)性胃病患者血清中的表達(dá)

祁子楠，王桂君

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，遼寧 錦州 121000)

幽門螺桿菌(Hp)是一種寄生于胃黏膜上皮內(nèi)的革蘭陰性桿菌[1]，全球人群感染率達(dá)到50%，我國人群Hp感染率約為 50%～90%[2]。Hp感染可以導(dǎo)致消化道潰瘍、萎縮性胃炎等消化系統(tǒng)疾病，是胃癌的主要致病因素[3]，被世衛(wèi)組織列為I類致癌因子[4]。Hp可通過分泌多種毒力因子，如空泡毒素A(vacuolating cytotoxin A，VacA)、細(xì)胞毒素相關(guān)基因A(cytotoxin associated gene A，CagA)等損傷上皮細(xì)胞，導(dǎo)致胃黏膜細(xì)胞增生與凋亡的失衡，促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展[5-6]但其具體發(fā)病機(jī)制目前尚不十分清楚。

幽門螺桿菌誘導(dǎo)的胃病涉及多種機(jī)制，目前氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)在Hp致病機(jī)制中的作用被人們?nèi)找嬷匾?。研究表明Hp感染會引發(fā)炎性反應(yīng)，分泌多種炎癥因子和細(xì)胞因子，如 白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-8、腫瘤壞死因子-α等，炎癥因子和細(xì)胞因子會進(jìn)一步加重胃部炎癥程度[7]。同時感染后會使機(jī)體大量中性粒細(xì)胞聚集、活化，可進(jìn)一步引起機(jī)體氧化應(yīng)激水平增高，從而導(dǎo)致大量活性氧(reactive oxygen species，ROS)和活性氮(reactive nitrogen species，RNS)產(chǎn)生，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激產(chǎn)物和抗氧化物質(zhì)生成，如丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase)等，進(jìn)而導(dǎo)致胃上皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致胃粘膜炎癥加重，甚至引發(fā)胃癌[8-9]。

但是目前有關(guān)Hp與氧化應(yīng)激相關(guān)性的研究還較少，氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)與Hp相關(guān)性胃病的關(guān)系目前尚未詳盡闡述。本研究通過觀察非萎縮性胃炎、萎縮性胃炎、胃潰瘍、早期胃癌及進(jìn)展期胃癌患者中Hp的感染情況及血清中SOD、MDA及IL-6表達(dá)水平的相應(yīng)變化，探討氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)在Hp感染中的作用，并進(jìn)一步觀察血清SOD、MDA及IL-6在Hp相關(guān)性胃病中的表達(dá)，從而探討氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)在Hp相關(guān)性胃病中的作用，為Hp相關(guān)性胃病的臨床診療提供理論依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2019年10月至2021年8月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院門診就診及住院部收治的患者共225人，依據(jù)內(nèi)鏡及病理檢查結(jié)果分為：非萎縮性胃炎43人為非萎縮組，萎縮性胃炎47人為萎縮組，胃潰瘍48人為潰瘍組，早期胃癌46人為早癌組，進(jìn)展期胃癌41人為進(jìn)展組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有的患者均經(jīng)胃鏡及內(nèi)鏡下組織病理學(xué)檢查明確診斷；(2)所有研究對象均同意完善Hp檢查及血清學(xué)SOD、MDA和IL-6檢查，知曉本次研究目的并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近1個月內(nèi)接受過質(zhì)子泵抑制劑治療或行放射治療及化學(xué)藥物治療的患者；(2)近期接受過輸血治療，或者近期曾服用鴉片類、類固醇、抗氧化等藥物的患者；(3)患有高血壓、糖尿病、肝腎疾病、高脂血癥、心腦血管疾病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)核、感染以及自身免疫性疾病等疾病的患者；(4)既往患有其他惡性腫瘤疾病患者。本項研究經(jīng)過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)(批件號：202129)。

1.2 檢測方法

Hp檢測：所有患者在空腹?fàn)顟B(tài)下，或者在禁食、禁飲2 h后接受13C呼氣試驗檢測，囑患者于測試前漱口，口服尿素13C膠囊，靜坐30 min后，再向樣氣袋內(nèi)吹滿氣體，最后對氣體進(jìn)行檢測，13C呼氣試驗檢測值≥4判定為Hp陽性。

血清SOD、MDA及IL-6檢測：采集標(biāo)本：叮囑患者空腹，使用真空采血管抽取 5 mL外周靜脈血，室溫下靜置 30 min，確保2 h內(nèi)以3000 r/min 速度離心 20 min，分離血清2～3 mL，并保存于-20 ℃的冰箱中待用。通過NBT核黃素比色法測定5組患者血清中SOD活性水平，酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay)測定五組患者血清中MDA和IL-6水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用 SPSS 23.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示，采用χ2檢驗。計量資料經(jīng)檢驗服從正態(tài)分布，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間差異比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。統(tǒng)計結(jié)果以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 患者一般資料比較

選取2019年10月至2021年8月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院門診就診及住院部收治的患者共225人，依據(jù)內(nèi)鏡及病理檢查結(jié)果分為：非萎縮性胃炎43人為非萎縮組，男19例、女24例，平均年齡為(43.60±7.48)歲；萎縮性胃炎47人為萎縮組，男27例、女20例，平均年齡為(44.09±7.76)歲；胃潰瘍48人為潰瘍組，男25例、女23例，平均年齡為(43.79±8.06)歲；早期胃癌46人為早癌組，男20例、女26例，平均年齡為(43.22±7.81)歲；進(jìn)展期胃癌41人為進(jìn)展組，男23例、女18例，平均年齡為(45.41±9.27)歲。5組研究對象的性別、年齡比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，見表1。

表1 患者一般資料比較

2.2 各組患者Hp感染情況的觀察

非萎縮組Hp陽性8例，陰性35例，陽性率18.60%；萎縮組Hp陽性18例，陰性29例，陽性率38.30%；潰瘍組Hp陽性29例，陰性19例，陽性率60.42%；早癌組Hp陽性38例，陰性8例，陽性率82.61%；進(jìn)展組Hp陽性38例，陰性3例，陽性率95.12%。

5組患者間Hp感染陽性率進(jìn)行比較：與非萎縮組相比：萎縮組(χ2=4.239)、潰瘍組(χ2=16.435)、早癌組(χ2=36.459)及進(jìn)展組(χ2=46.491)的Hp陽性率均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與萎縮組相比：潰瘍組(χ2=3.873)、早癌組(χ2=17.448)及進(jìn)展組(χ2=26.214)的Hp陽性率均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與潰瘍組相比：早癌組(χ2=5.650)和進(jìn)展組(χ2=12.371)的Hp陽性率均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與早癌組相比進(jìn)展組(χ2=1.992)的Hp陽性率升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 各組患者Hp感染情況[n(%)]

2.3 各組中Hp陽性與陰性患者血清SOD表達(dá)水平比較

非萎縮組Hp陽性SOD水平(10.6±2.64)，Hp陰性SOD水平(8.6±1.65)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；萎縮組Hp陽性SOD水平(13.20±2.93)，Hp陰性SOD水平(11.52±2.42)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；潰瘍組Hp陽性SOD水平(13.87±2.56)，Hp陰性SOD水平(12.03±1.24)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；早癌組Hp陽性SOD水平(17.40±2.57)，Hp陰性SOD水平(15.46±0.62)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；進(jìn)展組Hp陽性SOD水平(20.94±3.06)，Hp陰性SOD水平(18.77±0.15)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.4 各組中Hp陽性與陰性患者血清MDA表達(dá)水平比較

非萎縮組Hp陽性MDA水平(4.73±1.00)，Hp陰性MDA水平(3.56±0.80)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；萎縮組Hp陽性MDA水平(5.89±1.41)，Hp陰性MDA水平(4.92±1.13)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；潰瘍組Hp陽性MDA水平(5.72±1.61)，Hp陰性MDA水平(4.62±0.80)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；早癌組Hp陽性MDA水平(9.08±1.20)，Hp陰性MDA水平(8.10±0.29)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；進(jìn)展組Hp陽性MDA水平(12.28±1.42)，Hp陰性MDA水平(10.83±0.23)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

2.5 各組中Hp陽性與陰性患者血清IL-6表達(dá)水平比較

非萎縮組Hp陽性IL-6水平(16.64±6.10)，Hp陰性IL-6水平(11.64±5.33)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；萎縮組Hp陽性IL-6水平(39.23±5.43)，Hp陰性IL-6水平(35.55±4.51)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；潰瘍組Hp陽性IL-6水平(38.72±6.10)，Hp陰性IL-6水平(34.34±3.46)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；早癌組Hp陽性IL-6水平(49.26±8.02)，Hp陰性IL-6水平(42.21±2.32)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；進(jìn)展組Hp陽性IL-6水平(69.58±7.31)，Hp陰性IL-6水平(68.72±0.12)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表5。

2.6 各組間Hp陽性者血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)水平比較

各組患者Hp陽性者組間比較患者血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)：與非萎縮組相比，萎縮組、潰瘍組、早癌組、進(jìn)展組血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)均明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；萎縮組及潰瘍組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；早癌及進(jìn)展組與其余各組相比血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)均明顯升高，且升高程度為進(jìn)展組>早癌組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表6。

表3 各組中Hp陽性與陰性患者血清SOD的表達(dá)水平比較

表4 各組中Hp陽性與陰性患者血清MDA的表達(dá)水平比較

表5 各組中Hp陽性與陰性患者血清IL-6的表達(dá)水平比較

表6 各組間Hp感染者血清SOD、MDA及IL-6表達(dá)水平比較

3 討 論

胃癌的病因?qū)W研究已成為當(dāng)下研究熱點，幽門螺桿菌(Hp)感染與慢性胃炎、消化性潰瘍以及胃癌等疾病密切相關(guān)[4]1034-1041，而且幽門螺桿菌相關(guān)性胃炎是胃癌的主要危險因素之一[3]3486-3489。

20世紀(jì)初，Hp的致病機(jī)制受到人們的關(guān)注，研究證實Hp分泌的CagA、VacA等多種毒力因子具有致癌潛力[10]；Hp通過將尿酸分解成氨氣，在胃部形成有利于其生存的中性環(huán)境，使其可在胃上皮細(xì)胞大量繁殖，引發(fā)多種毒素和炎性因子的形成，進(jìn)一步破壞胃上皮細(xì)胞，導(dǎo)致胃粘膜發(fā)生病理變化，從而引發(fā)多種胃粘膜病變，甚至導(dǎo)致胃癌的發(fā)生[2,8,11]101-104,782-786。

本研究結(jié)果顯示，非萎縮組、萎縮組、潰瘍組、早癌組及進(jìn)展組5組患者隨著疾病嚴(yán)重程度增加Hp感染率逐漸增加，分別為非萎縮組48.84%，萎縮組53.19%，潰瘍組60.42%，早癌組82.61%，進(jìn)展組95.12%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。各組胃病患者中Hp陽性患者較陰性患者血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示Hp感染可導(dǎo)致SOD、MDA及IL-6表達(dá)明顯升高，提示Hp感染可能與氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)有關(guān)。

進(jìn)一步比較各組Hp陽性患者之間血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)，結(jié)果表明：與非萎縮組相比，萎縮組、潰瘍組、早癌組、進(jìn)展組血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)均明顯升高(P<0.05)；萎縮組及潰瘍組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；早癌及進(jìn)展組與其余各組相比血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)均明顯升高，且升高程度為進(jìn)展組>早癌組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。提示隨著疾病嚴(yán)重程度增加，血清SOD、MDA及IL-6的表達(dá)增加更明顯，表明非萎縮性胃炎、胃潰瘍、早期胃癌及進(jìn)展期胃癌患者的氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)程度逐級升高。

相關(guān)臨床研究[16]表明Hp可以誘導(dǎo)SOD的分泌，SOD活性水平在Hp陽性患者中明顯高于Hp陰性患者，且SOD活性水平隨著Hp密度和Hp陽性率的增加而顯著升高。趙偉[17]等人的研究表明隨著患者胃部黏膜病損程度的增加，其組織中IL-8及IL-6的水平也在隨之增加，這些均與本研究結(jié)果相一致。

研究發(fā)現(xiàn)[18-20]，Hp感染持續(xù)存在會導(dǎo)致慢性炎癥狀態(tài)，先天和獲得性炎癥反應(yīng)被激活，中性粒細(xì)胞活化，促使ROS和RNS產(chǎn)生，使得組織內(nèi)的氧化應(yīng)激持續(xù)存在，從而誘導(dǎo)MDA和SOD產(chǎn)生，同時刺激IL-6的產(chǎn)生和釋放，進(jìn)一步導(dǎo)致胃上皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致胃粘膜炎癥加重，長期的炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)可能導(dǎo)致胃癌的發(fā)生。

綜上所述，我們的研究發(fā)現(xiàn)Hp感染與氧化應(yīng)激指標(biāo)及炎癥介質(zhì)同趨勢變化，并且隨著病變嚴(yán)重程度進(jìn)展，胃炎(非萎縮性、萎縮性)、胃潰瘍、早期胃癌及進(jìn)展期胃癌患者的Hp感染率明顯增加，血清中SOD、MDA與IL-6的表達(dá)升高程度也明顯增加，提示氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)可能在Hp感染及其相關(guān)性胃病的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。我們推測血清SOD、MDA及IL-6水平的變化可用于評估Hp相關(guān)性胃病的嚴(yán)重程度，氧化應(yīng)激的評估和抗氧化防御系統(tǒng)的增強(qiáng)可能對Hp相關(guān)性胃病的預(yù)防和治療至關(guān)重要，為其臨床診療提供理論依據(jù)。但其深入的機(jī)制尚待進(jìn)一步探討研究。