大黃素對肉仔雞生長性能、肉品質(zhì)、抗氧化能力及免疫機能的影響

劉旭樂，蘇瑩瑩，趙淑敏，雒愛玲，焦喜蘭,2，景亞岐,2，王成章,2，李振田,2*

（1.河南農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，河南鄭州 450046；2.河南省草地資源創(chuàng)新與利用重點實驗室，河南鄭州 450046）

世界范圍內(nèi)對雞肉需求的不斷增長使得肉雞養(yǎng)殖壓力不斷上升，這需要通過提高肉雞的生長速度、飼料轉(zhuǎn)化率來提高養(yǎng)殖經(jīng)濟效益，但也可能因此使雞肉品質(zhì)降低，營養(yǎng)物質(zhì)流失。肉仔雞生長周期短，免疫器官等發(fā)育不完全，可能會因大規(guī)模養(yǎng)殖密度過高或傳染性疾病造成應激或死亡。許多研究表明，中草藥提取物可用于改善畜禽生長性能、肉品質(zhì)以及免疫機能等。

大黃素，學名1,3,8-三羥基-6-甲基蒽醌，以游離和苷的形式存在于蓼科植物掌葉大黃、大黃、唐古特大黃的根莖及根中，屬于蒽醌類衍生物。近幾年來，隨著研究不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)蒽醌類衍生物在抑菌、抗炎、抗氧化應激等方面有顯著功效。目前，大黃素在醫(yī)學和水產(chǎn)動物的應用中較為廣泛。曹麗萍等研究表明，在建鯉的飼料中添加3～5 g/kg 大黃素可以提高其生長性能，清除自由基、提高超氧化物歧化酶（SOD）活性，并抑制丙二醛（MDA）的生成。楊維維等研究發(fā)現(xiàn)，大黃素也能顯著提高克氏螯蝦的免疫機能。此外，大黃素可以提高大鼠的抗氧化能力。但關于大黃素在畜禽應用上的研究較少，而大黃素在肉仔雞方面的研究還未見報道。因此，本試驗旨在研究日糧中添加不同水平的大黃素對肉仔雞生長性能、肉品質(zhì)、抗氧化性能和免疫機能的影響，以期為大黃素在肉仔雞生產(chǎn)中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.2 試驗動物及日糧 采用單因素試驗設計，選擇320只健康狀況良好、體重（42±2 ）g、1 日齡商品代艾拔益加（AA）肉仔雞，公母各半，隨機分為4 組，每組5個重復，每個重復16 只雞，試驗期為49 d。0～21 日齡，大黃素組在飼喂基礎日糧的基礎上均添加50 mg/kg 大黃素；21～49 日齡，各組飼糧大黃素水平分別為0（對照組）、100、200、400 mg/kg。參 照NRC（1994）配制玉米-豆粕型基礎日糧，基礎日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 肉仔雞基礎日糧組成及營養(yǎng)成分（飼喂基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)管理嚴格按照標準執(zhí)行。進雛前清理雞舍，打掃雞舍周圍環(huán)境。進雛后，1～4 d 充分做好飲水、開食、溫度、光照等因素的調(diào)控。進雛時，將舍內(nèi)溫度設置為33℃左右，之后隨著雛雞的生長，每周降低2℃左右，5 周之后將舍內(nèi)溫度穩(wěn)定在21℃左右。初始舍內(nèi)光照時長設置為23 h，黑暗1 h；從4 d 起每天光照18 h，黑暗6 h。之后將光照時長穩(wěn)定為自然光照時長。此外，檢查舍內(nèi)風機濕簾的正常運轉(zhuǎn)從而保持舍內(nèi)良好的通風條件，防止廢氣積累。所有肉仔雞在試驗期間均可自由進行飲食。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能 試驗期間共進行4 次稱重。進雛時對所有肉仔雞進行稱重，記錄其平均體重；在21、35 d時以重復為單位，隨機挑選8 只雞測定其平均體重，此為第2、3 次稱重；第49 天出欄時記錄每個處理組平均末體重。每次稱重時同時記錄其采食量。試驗結(jié)束后，計算日均采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及耗料增重比（F/G）。

1.4.2 肉品質(zhì) 試驗結(jié)束時，每重復選擇體重接近分組肉仔雞體重平均值的2 只雞進行屠宰。取其左側(cè)的胸肌和腿肌，取完后立即放置于自封袋內(nèi)-30℃保存，取一部分樣品懸掛放在4℃冰箱中保存24 h 后，擦干表面水分計算滴水損失；采用高溫干燥法，計算肌肉水分和失水率；用C-LM3 型數(shù)顯式嫩度儀測定肌肉剪切力；采用凱氏定氮儀（杭州綠博儀器有限公司產(chǎn)KDN）測定肌肉粗蛋白質(zhì)含量；采用乙醚浸提法測定胸肌和腿肌內(nèi)脂肪含量；按照國家標準《肉與肉制品 膽固醇含量測定》（GB/T 9695.24-2008）測定肌肉膽固醇。

1.4.3 肌肉抗氧化指標 肌肉抗氧化指標的肉樣處理同肉品質(zhì)測定。SOD（黃嘌呤氧化酶法）和MDA（硫代巴比妥酸法）的測定方法嚴格按照南京建成生物工程研究所的試劑盒說明書進行操作。

1.4.4 免疫器官指數(shù) 屠宰時取肉仔雞的脾臟、胸腺和法氏囊并稱重，計算各臟器指數(shù)。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)用Excel 2010 記錄整理，采用SAS 8.12 統(tǒng)計軟件，對各項指標進行單因素方差分析（ANOVA），Duncan's 法進行多重比較，并按照添加劑量進行一次線性、二次曲線性分析，顯著水平定為<0.05，結(jié)果用平均值±標準差來表示。

2 結(jié)果

2.1 不同水平大黃素對肉仔雞生長性能的影響 在整個飼喂期間，添加大黃素對肉仔雞的ADFI、ADG 及F/G 的改善作用不明顯（表2），但所有大黃素飼喂組的ADFI和ADG 均高于對照組，且400 mg/kg 大黃素組各階段的ADFI、ADG 均為4 組最高，F(xiàn)/G 則相反。在21～35 d時肉仔雞的ADFI 和ADG 隨著大黃素添加水平的提高呈線性升高（<0.05），其ADFI 呈二次升高，F(xiàn)/G 呈二次降低（<0.05）。在35～49 d 時，200 mg/kg 大黃素組和400 mg/kg 大黃素組ADG 高于對照組（<0.05）。1～49 d，肉仔雞的ADFI 隨大黃素添加水平的提高呈線性提高（<0.05），ADG 隨大黃素添加水平的提高呈二次提高（<0.05）。

國內(nèi)對于新聞漫畫的多模態(tài)隱喻研究已經(jīng)取得的成果有： 俞燕明基于認知語言學隱喻映射理論，對政治漫畫中隱喻表征方式展開研究，將漫畫模態(tài)實現(xiàn)和配置進行了分類。[8] 趙秀鳳、朱嫣然以認知語言學中的概念整合理論為基礎，分別探討了政治漫畫多模態(tài)隱喻的動態(tài)建構(gòu)過程[9，10]； 趙秀鳳、馮德正通過以《經(jīng)濟學人》中94篇涉華政治漫畫語篇為例，系統(tǒng)分析了多模態(tài)語篇中隱轉(zhuǎn)喻的互動與融合對于中國形象構(gòu)建產(chǎn)生的影響。[11]

表2 不同水平大黃素對肉仔雞生長性能的影響

2.2 不同水平大黃素對肉仔雞肉品質(zhì)的影響 如表3 所示，大黃素組胸肌的各項物理學特性指標均低于對照組，且當大黃素添加量為400 mg/kg 時，4 組所有指標均最低（>0.05）。100、200、400 mg/kg 大黃素組腿肌的滴水損失和失水率均低于對照組（>0.05），以400 mg/kg 大黃素組的各項指標為最低（>0.05）。200、400 mg/kg 大黃素組腿肌的剪切力低于對照組（<0.05），100 mg/kg 大黃素組與對照組間差異不顯著。其中，胸肌的滴水損失隨著大黃素添加水平的提高呈線性升高（<0.05），其剪切力和失水率則呈線性降低（<0.05）。胸肌和腿肌的滴水損失均隨著大黃素添加水平的提高呈二次降低（<0.05）。

表3 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉物理學特性的影響

如表4 所示，大黃素組胸肌和腿肌的水分、粗脂肪以及粗蛋白質(zhì)均高于對照組。200、400 mg/kg 大黃素組胸肌含水量、粗蛋白質(zhì)含量高于對照組（<0.01），400 mg/kg 大黃素組腿肌粗蛋白質(zhì)含量也高于對照組（<0.01）。胸肌的粗脂肪以及腿肌的水分和粗蛋白質(zhì)均隨大黃素添加水平的提高呈線性提高（<0.05），腿肌的水分隨大黃素添加水平的提高呈二次提高（<0.05）。此外，200、400 mg/kg 大黃素組膽固醇含量低于對照組（<0.05），100 mg/kg 大黃素組則與對照組差異不顯著。胸肌粗脂肪、腿肌的水分和粗脂肪組間差異不顯著。

表4 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉化學成分的影響

2.3 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉抗氧化功能的影響由表5 可見，400 mg/kg 大黃素組腿肌SOD 活性高于其他3 組（<0.05），其他組胸肌和腿肌的SOD 活性高于對照組、MDA 含量低于對照組（>0.05）。胸肌中MDA 含量隨著大黃素添加水平的提高呈線性降低（<0.05），腿肌中SOD 活性隨著大黃素添加水平的提高呈線性提高（<0.05），腿肌中MDA 含量隨大黃素添加水平的提高呈二次降低（<0.05）。

表5 不同水平大黃素對肉仔雞肌肉抗氧化功能的影響

2.4 不同水平大黃素對肉仔雞免疫功能的影響 由表6可見，200、400 mg/kg 大黃素組肉仔雞的脾臟指數(shù)高于對照組和100 mg/kg 大黃素組（<0.05）。4 個處理組胸腺指數(shù)差異不顯著。400 mg/kg 大黃素組法氏囊指數(shù)高于其他3 組（<0.05）。

表6 不同水平大黃素對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響 g/kg

3 討論

3.1 大黃素對肉仔雞生長性能的影響 肉仔雞在育雛期時由于自身體溫調(diào)節(jié)機制、免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等不完善，容易因應激或疾病造成死亡率升高。研究表明，低劑量的大黃素具有良好的保肝作用，而高劑量大黃素則能導致肝毒性、腎毒性。臨床中大黃總蒽醌人用治療劑量為420 mg/d，當換算成大鼠用量時為44.1 mg/kg。由于中藥具有作用緩慢、作用時間持久的特點。因此，本試驗中1～21 d 時試驗組均添加50 mg/kg 的大黃素，以提高肉仔雞的適應性；當肉仔雞轉(zhuǎn)入快速生長期后，將大黃素組的大黃素水平分別提高到100、200、400 mg/kg。以往研究顯示，大黃素僅在水產(chǎn)動物方面表現(xiàn)出良好的促生長作用。如大黃素可以提高羅氏沼蝦的生長性能，也可以顯著提高被氧化魚油刺激的武昌魴的最終體重和增重率。本試驗中，添加大黃素對肉仔雞的生長性能影響與對照組無顯著差異，但大黃素組肉仔雞的ADG 和ADFI 較對照組有所提高，F(xiàn)/G有所降低，采食量增加可能是由于大黃可促進胃腸蠕動，加快了食糜的排空速度，且大黃素可以提高小腸內(nèi)胃動素并降低生長抑素含量；這可能促進了肉仔雞的生長。在35～49 d 時，200 mg/kg 大黃素組和400 mg/kg大黃素組ADG 顯著高于對照組，表明添加大黃素對肉仔雞育肥期的生長有一定影響。而Straub 等試驗發(fā)現(xiàn)，當仔豬飼喂添加0.25% 大黃的飼糧時31 d 時，其ADG 和ADFI 均較對照組顯著增加，但當大黃含量提高至0.5%～1%時，會導致其ADG 和ADFI 逐漸降低，并提高其F/G。因此，大黃素對動物的促生長作用可能與其大黃素含量有關。

3.2 大黃素對肉仔雞肉品質(zhì)的影響 肉品質(zhì)對于確保消費者滿意至關重要。剪切力可反映肌肉嫩度，剪切力越小，則雞肉的嫩度越好。滴水損失和失水率是肌肉保水能力的重要指標之一，反映了肉的多汁性。明建華研究表明，大黃素對團頭魴的魚體肥滿度并無顯著影響。在本試驗中，不同大黃素組肉仔雞的胸肌剪切力、滴水損失和失水率均低于對照組，且200、400 mg/kg 大黃素組腿肌的剪切力顯著低于對照組。肌纖維直徑與肉的柔嫩度呈負相關。研究發(fā)現(xiàn)，中草藥添加劑可以降低生長育肥豬的肌纖維直徑，提高其肌纖維密度，從而提高肌肉的保水性能。因此，大黃素可能是通過改變?nèi)庾须u肌纖維直徑來改變其肌肉剪切力。

雞肉中粗蛋白質(zhì)和粗脂肪是反映雞肉常規(guī)營養(yǎng)的基礎指標。研究表明，大黃素可以顯著降低肝臟中粗脂肪的積累，也能促進小鼠腹股溝白色脂肪棕色化并減少白色脂肪的積累。張磊等研究表明，不同大黃素、大黃酸和蘆薈大黃素配比可抑制大鼠體內(nèi)膽固醇的生成。本試驗中，200、400 mg/kg 大黃素組顯著提高了肉仔雞的胸肌水分以及胸肌和腿肌中粗蛋白質(zhì)含量，并顯著降低了肌肉中膽固醇含量；從整體上看，處理組肌肉的水分、粗脂肪和粗蛋白質(zhì)含量均高于對照組。研究發(fā)現(xiàn)，大黃素一方面可以通過抑制甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-2（SREBP-2）轉(zhuǎn)錄活性，從而抑制膽固醇的生物合成；另一方面，大黃素可以通過促進膽固醇7-羥化酶的活性，加速膽固醇向膽鹽的轉(zhuǎn)化，從而降低機體內(nèi)膽固醇含量。

3.3 大黃素對肉仔雞抗氧化機能和免疫機能的影響 氧化應激是一種細胞狀態(tài)或疾病，其發(fā)生是由于抗氧化劑和氧化劑（自由基或反應性物質(zhì)）水平與之間的生理失衡。一些健康疾?。ㄈ缣悄虿?、腦損傷、神經(jīng)退行性疾病等）的發(fā)生和發(fā)展與通過氧化應激產(chǎn)生的自由基或反應性物質(zhì)有關。而氧化應激的第一道防線即為SOD、CAT、谷胱甘肽過氧化氫酶（GPX）等。以往研究證明，低劑量的制首烏游離蒽醌可以顯著上調(diào)大鼠體內(nèi)SOD mRNA 的相關表達。Nemmar 等則發(fā)現(xiàn)，大黃素對大鼠肺部的氧化應激有較好的改善作用。本試驗中，添加大黃素一定程度上提高了肉仔雞肌肉中SOD 活性，降低了肌肉中MDA 含量。有研究表明，大黃素可以提高血清SOD 活性，通過抑制核因子（NF）-B 的結(jié)合活性，抑制血清炎癥因子的表達從而起到抗氧化作用。此外，大黃素也能通過Nrf2/TLR4/NF-B 產(chǎn)生抗氧化作用。

在健康動物中，免疫器官的重量也是反映機體免疫機能狀態(tài)的重要參考。家禽免疫器官的快速發(fā)育提高了其免疫功能和抗病能力。脾臟中含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，可以產(chǎn)生免疫球蛋白等物質(zhì)參與機體的免疫過程。法氏囊是禽類動物獨有的免疫器官，與胸腺共同構(gòu)成了機體免疫的中樞器官，隨著胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)的增大，機體的免疫力也會有一定程度增強。王珅等發(fā)現(xiàn)，1.0%的虎杖蒽醌提取物可使小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)分別提高23.66%和46.73%。本試驗結(jié)果也表明，與對照組相比，添加大黃素后肉仔雞的免疫器官指數(shù)均有所升高，其中400 mg/kg 大黃素組和對照組脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著提高。蒽醌衍生物被證明可以通過促進小鼠脾臟T、B 淋巴細胞的增殖，增強巨噬細胞吞噬中性紅的能力，提高自然殺傷細胞活性及分泌腫瘤壞死因子的活性，從而提高機體的免疫能力。此外，大黃素也可以通過抑制TLR2 介導的NF-B 信號通路來促進脂多糖誘導的急性腎損傷大鼠的免疫炎癥調(diào)節(jié)作用。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，在肉仔雞飼糧中添加大黃素可提高肉仔雞育肥期的平均日增重，提高肉仔雞的生長性能；可降低雞肉剪切力，改善雞肉口感；提高雞肉水分和粗蛋白質(zhì)含量，降低膽固醇含量，提高雞肉營養(yǎng)價值；可以改善肉仔雞的抗氧化功能，顯著提高了其肌肉中SOD 活性，并降低MDA 含量；顯著提高了肉仔雞的免疫器官指數(shù)，提高了肉仔雞的免疫功能。