無托槽隱形矯治患者與固定矯治患者齦溝液中白細(xì)胞介素變化的對比研究

駱厚卓 方世殊 劉倩 黨薇 王艷麗

1.空軍軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科，西安 710032；2.西安交通大學(xué)口腔醫(yī)院修復(fù)科，西安 710004；3.西安市中心醫(yī)院口腔科，西安 710004

1 材料和方法

1.1 臨床資料

選取2019年1月—2020年1月在空軍軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院（口腔醫(yī)院）正畸科接受無托槽隱形矯治的67 例患者作為觀察組（observation group），接受固定矯治的40 例患者作為對照組（control group），收集患者臨床資料及齦溝液樣本進(jìn)行研究。選取的患者符合以下標(biāo)準(zhǔn)：1）患者無牙齦腫脹或出血、無牙周袋形成、無牙槽骨吸收、無牙齒松動(dòng)及移位、無探診出血等情況；2）患者不存在牙列擁擠或牙列擁擠程度＜4 mm；3）2 個(gè)月內(nèi)未服用抗生素或可能引起牙齦增生的藥物；4）接受正畸治療前未接受過細(xì)胞因子治療；5）接受正畸治療前血常規(guī)檢驗(yàn)及凝血功能檢驗(yàn)正常；6）未感染過乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）、艾滋病病毒（human immunodeficiency virus，HIV）、巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus，CMV）等，2 個(gè)月內(nèi)未有發(fā)熱或細(xì)菌感染；7）不合并任何形式的腫瘤；8）不合并有嚴(yán)重的心、腦、肺、肝、腎等臟器疾?。?）依從性良好，能按時(shí)進(jìn)行復(fù)診。齦溝液樣本由同一醫(yī)師在患者的第一恒磨牙遠(yuǎn)中齦溝內(nèi)采集并凍存以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)。齦溝液的采集不會(huì)影響患者正常就診活動(dòng)，且該樣本僅用于科研用途，患者及家屬均知情同意。

1.2 正畸治療及復(fù)診要求

患者正畸治療前3 d 進(jìn)行口腔衛(wèi)生宣教，指導(dǎo)患者正確使用正畸牙刷、牙線保持口腔衛(wèi)生，并收集齦溝液樣本檢測相關(guān)IL 水平作為基線資料。記錄接受正畸治療當(dāng)日的就診結(jié)束時(shí)間，并作為起始時(shí)間，要求患者分別于治療后24 h 和12 個(gè)月來院復(fù)診檢查正畸治療效果，并于治療后24 h 和12個(gè)月收集齦溝液樣本用于相關(guān)IL水平檢測。

1.3 Luminex液相芯片檢測IL

定制檢測IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18的Luminex Assay Human Premixed Multi-Analyte Kit（R&D systems）試劑盒。在實(shí)驗(yàn)滴定板中加入Assay Buffer 預(yù)濕，封閉振蕩10 min 后充分移除Assay Buffer 并干燥滴定板。在適當(dāng)孔位滴加樣本、標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)量控制樣本各20 μL，加入20 μL Assay Buffer 等比稀釋。加入預(yù)混的抗體標(biāo)記微球并封閉孵育過夜，用Wash Buffer 清洗2 次后加入鞘液充分懸浮微球，在Luminex 200 儀器上進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)通過SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件和Graph Pad Prism 8 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理、分析及繪圖。一般資料采用描述性分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。計(jì)量資料比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者正畸治療前基線資料的比較

2 組患者正畸治療前基線資料的比較見表1。結(jié)果表明，2組患者的年齡、性別、探診深度及齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16、IL-18的表達(dá)水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 2組患者正畸治療前基線資料的比較Tab 1 Comparison of basic characteristic of patients before orthodontics treatment between two groups

2.2 2 組患者正畸治療24 h 后齦溝液中IL 水平的比較

2 組患者正畸治療24 h 后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表達(dá)水平的比較見表2。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，2 組患者正畸治療24 h后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 表達(dá)水平均升高（P＜0.05），IL-16 則均無明顯變化（P＞0.05），但所有IL 因子表達(dá)水平在2 組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 2 組患者正畸治療24 h 后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表達(dá)水平的比較Tab 2 Comparison of expression levels of IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-16 and IL-18 after 24 hours treatment between two groups pg·mL-1

2.3 2 組患者正畸治療12 個(gè)月后齦溝液中IL 水平的比較

2 組患者正畸治療12 個(gè)月后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表達(dá)水平的比較見表3。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，正畸治療12 個(gè)月后，觀察組齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和IL-18的表達(dá)水平低于對照組（P＜0.05），但I(xiàn)L-16 表達(dá)水平2組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 2組患者正畸治療12個(gè)月后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16和IL-18表達(dá)水平的比較Tab 3 Comparison of expression levels of IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-16 and IL-18 after 12 months treatment between two groups pg·mL-1

3 討論

在正畸治療的過程中，往往會(huì)伴隨有炎癥反應(yīng)的發(fā)生，其中IL 作為一類炎癥相關(guān)因子發(fā)揮了重要影響。探究這類細(xì)胞因子在正畸治療后的變化趨勢對于了解患者機(jī)體狀態(tài)及免疫功能水平有重要意義。IL 發(fā)揮的作用廣泛，根據(jù)其主要性質(zhì)分為IL-1、IL-2、趨化因子、IL-10、IL-12以及IL-17 等亞族，其中與免疫激活、炎癥相關(guān)性較大的有IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18。IL-1β 是一種重要的炎癥細(xì)胞因子，主要由外周血單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生，以往研究[9]表明其與細(xì)胞凋亡具有密切聯(lián)系。在炎癥、感染等刺激下往往會(huì)誘導(dǎo)IL-1β 水平升高，如在牙周炎患者齦溝液中，IL-1β 的表達(dá)水平較健康人會(huì)明顯升高[10]。IL-6 是一種促炎細(xì)胞因子，參與調(diào)節(jié)多種生理過程，特別是在急性炎癥反應(yīng)和從急性炎癥向慢性炎癥的轉(zhuǎn)變中起關(guān)鍵作用[11]，也有研究[12]表明，在牙周炎癥患者齦溝液中IL-6 水平會(huì)有所增加，進(jìn)而促進(jìn)生成急性反應(yīng)期蛋白，加重對牙槽骨的損傷作用。IL-8 是一種淋巴細(xì)胞趨化因子，同時(shí)可促進(jìn)中性粒細(xì)胞的聚集。作為CD4 的天然可溶性配體，具有促炎癥和免疫調(diào)節(jié)特性，對CD4+T 細(xì)胞、單核細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞也具有趨化作用[13]。有研究[14]表明，IL-8可提高氧化物的釋放，從而加重口腔局部炎癥反應(yīng)。IL-10 被認(rèn)為是可以由多種類型的免疫細(xì)胞產(chǎn)生的Th2型細(xì)胞因子，具有間接抑制Th1 反應(yīng)的能力。IL-10 可以直接作用于抗原提呈細(xì)胞，減少刺激分子的表達(dá)，阻止初始T細(xì)胞的成熟，或直接作用于T細(xì)胞以限制其增殖、功能分化，通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫功能進(jìn)而影響局部或全身炎癥水平[5]。IL-18 是一種促炎癥、促凋亡和致動(dòng)脈粥樣硬化的細(xì)胞因子，屬于IL-1 細(xì)胞因子家族。有研究[7]認(rèn)為，IL-18 通過誘導(dǎo)嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生IL-4、IL-5等Th2型細(xì)胞因子，間接誘導(dǎo)口腔局部炎癥的發(fā)生，但其具體作用機(jī)制仍有待研究。

本研究對67 例無托槽隱形矯治患者和40 例固定矯治患者治療前及治療后不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表達(dá)水平進(jìn)行檢測，比較患者接受不同形式正畸治療前后齦溝液中IL表達(dá)水平的差異。研究結(jié)果表明，不論哪種矯治方式，IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 在治療24 h 后表達(dá)水平均顯著升高，且組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這可能是由于在正畸治療過程中正畸力對牙周組織的影響，進(jìn)而誘發(fā)局限性急性炎癥反應(yīng)。本研究對不同矯治方式患者治療12 個(gè)月后齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-16 和IL-18 表達(dá)水平進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)無托槽隱形矯治患者齦溝液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10 和IL-18 的表達(dá)水平更低。結(jié)果表明，相比于傳統(tǒng)固定矯治，無托槽隱形矯治對患者造成的口腔炎癥水平更低，更有利于患者口腔微環(huán)境的恢復(fù)。

利益沖突聲明：作者聲明本文無利益沖突。