MSI檢測在結直腸癌病人免疫治療中的應用研究

黃科峰

【關鍵詞】MSI;結直腸癌;免疫治療

【中圖分類號】R574.63 【文獻標識碼】A 【文章編號】2026-5328（2022）03--01

結直腸癌（CRC）是癌細胞出現(xiàn)在結腸和直腸部位的腫瘤，對于人們的身體健康有著較大的危害，嚴重影響患者的生活質(zhì)量，根據(jù)惡性腫瘤發(fā)病率統(tǒng)計數(shù)據(jù)我國居民中CRC的發(fā)病率為第三名[1]。隨著時代的發(fā)展，CRC患病年齡呈低齡化趨勢，而患病人數(shù)逐年上漲。對于CRC的早發(fā)現(xiàn)，早診斷與及時治療非常重要。微衛(wèi)星不穩(wěn)定（Microsatellite instability，MSI）是CRC發(fā)生的一個重要的因素，DNA 錯配修復（MMR）、基因突變及表觀遺傳沉默綜合作用的結果是MSI出現(xiàn)的原因，出現(xiàn)MSI導致細胞基因調(diào)控被擾亂進而成為腫瘤細胞。MSI一般分為三種狀態(tài)：分別是高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI-H），低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI-L）和微衛(wèi)星穩(wěn)定性（MSS）[2]。本文通過檢測病人組織的MSI狀態(tài)來確定MSI在結直腸癌病人免疫治療中作用。

1 材料與方法

1.1樣本收集

收集2021年1月至12月手術切除的結腸腺癌標本120例，其中男性75例（62.5%），女性45例（37.5%）;患者的年齡范圍是27～85歲，平均年齡為57.1±16.3歲。依據(jù)UICC分期委員會提出的TNM分期標準，Ⅰ期30例;Ⅱ期45例;Ⅲ期28例;Ⅳ期17例。此次研究所有病例都是原發(fā)性腫瘤，手術前都沒有進行治療，而且排除非腫瘤性死亡病例。本次研究獲得病人的知情同意。

1.2多重熒光PCR毛細管電泳檢測微衛(wèi)星穩(wěn)定狀況

取用5張白片放置在乙醇中浸泡5分鐘，用水沖洗后晾干，使用刀片刮下組織至EP管內(nèi)，提取DNA，檢測6個單核核苷酸重復標記物（BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24、NR-27、 Mono-27），2個五核苷酸重復標記物（Penta C與Peta D）和性別位點（Amel），PCR擴增反應后，在一代測序儀進行毛細管電泳檢測，分析數(shù)據(jù)。

1.3結果判定

大于等于2個單核苷酸位點的片段大小發(fā)生改變?yōu)槲⑿l(wèi)星高度不穩(wěn)定（ microsatellite instablehigh，MSI-H），1個單核苷酸位點的片段大小發(fā)生改變?yōu)槲⑿l(wèi)星低度不穩(wěn)定（ microsatellite instable-low，MSI-L），沒有單核苷酸位點的片段大小發(fā)生改變?yōu)镸SS。

1.4免疫治療

對選取的病人采用特瑞普利單抗免疫治療，治療方案240 mg，1次/3周，治療周期5次，觀察記錄病人的癥狀，每次治療后進行檢查，，參照實體瘤近期療效評價（ RECIST） 對患者近期療效進行評估，可以分為：完全緩解（CR），部分緩解（PR），穩(wěn)定（SD），進展（PD），計算客觀緩解率（ORR）與疾病控制率（DCR），計算方式ORR=（CR+PR）/總例數(shù)×100%;DCR=（CR+PR+SD）/總例數(shù)×100%。

1.5統(tǒng)計學方法

使用SPSS 25.0統(tǒng)計學軟件對收集到的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料以n/百分數(shù)（%）表示，使用χ2 檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1MSI檢測狀態(tài)分析

通過對120例樣本進行檢測，MSI-H有28例（23.3%），MSI-L有20例（16.7%），MSS有72例（60%）。

2.2免疫治療效果分析

對病人進行治療后，MSI不同狀態(tài)的ORR和DCR差異較大，MSI-H的病人使用免疫治療后ORR和DCR顯著高于MSI-L/MSS的病人，差異具有統(tǒng)計意義（P<0.05），MSI-H的病人經(jīng)過治療后沒有出現(xiàn)明顯不良反應，生活質(zhì)量良好，安全耐受性高。

3 討論

隨著科技的不斷發(fā)展，人們的飲食方式也在變化，外賣，奶茶的流行，造成結直腸癌的發(fā)病率越來越高，且呈現(xiàn)年輕化趨勢。近年來隨著基因檢測的廣泛應用，越來越多的病理科使用分子診斷進行腫瘤的篩查與診斷，為臨床的治療提供依據(jù)。1993年最早發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)存在MSI現(xiàn)象。隨著研究的進行，2017年FDA批準帕博麗珠單抗用于治療CRC患者，開啟免疫治療時代。隨后國內(nèi)也相繼獲批很多款用于免疫治療的單抗藥物。有研究表明使用PD-1單抗治療MSI-H的CRC患者的ORR比MSI-L/MSS要好[3]，張杰等人研究使用免疫治療1例MSI-H的CRC患者，使用單抗藥物治療五周后觀察各項指標滿足全完緩解的標準，說明對于MSI-H的CRC患者使用免疫治療很有效[4]，Manz等人研究發(fā)現(xiàn)對于MSI-H的CRC患者，使用免疫檢查點藥物能夠提高病人的治療效果[5]。本研究檢測120例CRC患者的樣本，MSI-H的CRC患者比例為23.3%，使用免疫治療后的ORR為78.6%，DCR為92.9%，結果表明對于MSI-H的CRC患者使用免疫治療效果很好，提示MSI檢測的狀態(tài)能夠作為免疫治療的一個生物標志物。

綜上所述，對于CRC病人應該進行MSI狀態(tài)檢測，根據(jù)MSI狀態(tài)進行后續(xù)治療方案的選擇，國內(nèi)外多個指南（NCCN，ESMO，CSCO）都有推薦MSI檢測作為CRC患者的必檢項目，基于之前的研究和本次研究的結果，MSI-H可以作為結直腸癌病人免疫治療的潛在生物標志物。

參考文獻：

[1] 鄭榮壽，孫可欣，張思維，等.2015 年中國惡性腫瘤流行情況分析[J]. 中華腫瘤雜志，2019，41（1）：19-28.

[2] 王曉迎，由繼君，張永大，等. 結直腸癌中腫瘤浸潤性淋巴細胞與微衛(wèi)星不穩(wěn)定的相關性分析及預后價值評估[J]. 解剖科學進展，2022， 28（1）： 96-99.

[3] Idos GE， Kwok J， Bonthala N， et al. The prognostic implications of tumor infiltrating lymphocytes in colorectal cancer： A systematic review and meta-analysis [J]. Sci Rep， 2020， 10（1）： 3360.

[4] 張杰，甘露，張濤. 微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定局部晚期直腸癌免疫治療1例報道[J]. 腫瘤綜合治療，2022，8（1）：117-120.

[5] Manz SM， Losam， Fritsch R， et al. Efficacy and side effects of immune checkpoint inhibitors in the treatment of colorectal cancer[J]. Therap Adv Gastroenterol， 2021， 14： 17562848211002018.