超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速分析環(huán)境水樣中的碘海醇和碘帕醇?xì)埩袅?/h1>
2022-06-05 09:18:50宋寧慧范義鋒
分析科學(xué)學(xué)報 2022年2期
張 爽， 宋寧慧， 范義鋒， 李 旦
(1.江南大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室，江蘇無錫 214122；2.生態(tài)環(huán)境部南京市環(huán)境科學(xué)研究所，江蘇南京 210042；3.廣州智達(dá)實驗室科技有限公司，廣東廣州 510535；4.無錫分子橋科技有限公司，江蘇無錫 214021)
碘海醇(Iohexol)和碘帕醇(Iopamidol)屬于第二代碘造影劑，是目前最為暢銷的造影劑[1]，其結(jié)構(gòu)式如圖1所示。通常在進行CT造影診斷前注入靜脈，用于血管、泌尿系統(tǒng)、脊髓及股關(guān)節(jié)、淋巴系統(tǒng)造影，具有造影密度低，毒性低，耐受性好等優(yōu)點，在發(fā)達(dá)國家已全面取代了離子型造影劑[1,2]。根據(jù)Newport數(shù)據(jù)，2018年全球碘海醇制劑規(guī)模超過12億美元。中國醫(yī)藥工業(yè)信息中心數(shù)據(jù)顯示，2019年國內(nèi)X射線造影劑市場規(guī)模約為139.45億元，其中碘帕醇的市場規(guī)模約為15.13億元。然而，已有國外研究報道非離子型X射線造影劑，通過醫(yī)療廢水、工業(yè)廢水、患者尿液等途徑進入地表水體，并在自然水環(huán)境中表現(xiàn)出持久性[3 - 5]。Pérez等[4]報道碘帕醇在原水、二級出水、地下水和地表水等水體中被檢出，質(zhì)量濃度分別為2.7 μg/L、15 μg/L、2.4 μg/L和0.49 μg/L。亦有研究[6 - 9]表明，碘帕醇易在飲用水處理過程中生成具有毒性轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，但其在環(huán)境中的遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律尚未明確。因此，需要對環(huán)境中，尤其是水體中典型碘化造影劑進行監(jiān)測。
圖1 碘海醇和碘帕醇的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formulas of iohexol and iopamidol
已有的檢測方法主要集中在碘海醇的檢測中，包括高效液相色譜法(HPLC)[10 - 14]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)[15 - 22]，檢測對象為注射液和血液樣品。在血漿和血清的碘海醇檢測中，利用HPLC法分析的時間為13～60 min，檢出限在700～1 000 μg/L之內(nèi)[10 - 13]；利用LC-MS/MS法的分析時間為7.3～31 min，檢出限在10.5～300 μg/L之內(nèi)[17 - 22]。在注射液樣品的碘海醇檢測中，利用HPLC法的分析時間為13～30 min，檢出限在500 μg/L之內(nèi)[14,15]；利用LC-MS/MS的分析時間為30 min，檢出限在25 μg/L之內(nèi)[16]。張美微等[22]利用LC-MS/MS法對血漿中的碘帕醇進行了檢測，方法使用含0.1%甲酸-5 mmol九氟戊酸-10%乙腈水溶液為流動相進行等度洗脫，定量限為1 000 μg/L。在水質(zhì)風(fēng)險監(jiān)測中，潛在危害物的量級往往在μg/L或者ng/L水平，因此針對地表水水樣，建立了碘海醇和碘帕醇的液-液萃取前處理，結(jié)合LC-MS/MS檢測方法，適合水樣中有害物的快速、準(zhǔn)確、高通量定性定量分析，尤其適合轉(zhuǎn)化為全自動在線處理與檢測系統(tǒng)。
1 實驗部分
1.1 主要儀器與試劑
QTRAP 5500三重四極桿復(fù)合線性離子阱液-質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)(美國，AB Sciex公司)；Vortex Genie2渦旋混合器(美國，Scientific Industries公司)；Eppendorf移液器(德國，Eppendorf公司)。
碘海醇(純度98.0%)、碘帕醇(純度98.0%)標(biāo)準(zhǔn)品購自默克美國Sigma試劑公司。分別準(zhǔn)確稱量100.0 mg碘帕醇、碘海醇標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL容量瓶中，用50%乙腈水溶液溶解后，配制成1.0 g/L混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液，于-20 ℃儲存。混合標(biāo)準(zhǔn)品工作溶液：用50%乙腈水溶液將混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液稀釋為0.01、0.05、0.2、0.5、2、10、50、100 μg/L混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，待用。乙腈(質(zhì)譜純，美國Fisher公司)，甲酸(質(zhì)譜純，默克美國Sigma試劑公司)。實驗室用水為Millipore純水系統(tǒng)制備(電阻率為18.2 MΩ·cm)。
地表水和地下水水樣均取自造影劑生產(chǎn)企業(yè)所在工業(yè)園區(qū)周邊的河流、地下水中。其中，基質(zhì)空白樣品，取自該工業(yè)園區(qū)50公里外的上游河流、地下水采樣點。
1.2 樣品前處理
準(zhǔn)確移取5 mL水樣于15 mL離心管中，加入5 mL乙腈，渦旋提取2 min，4 ℃下12 000 r/min離心10 min，取上清液過0.22 μm聚四氟乙烯濾膜，待上機檢測。
1.3 色譜分析條件
色譜柱為PHNOMON Kinetex F5(100 mm×3 mm，2.6 μm)；柱溫40 ℃；流動相A為0.1%甲酸水溶液，B為乙腈。梯度洗脫程序為：0.0～0.5 min，95%A；0.5～3.5 min，95%A～35%A；3.5～4 min，35%～5%A，4～5 min，5%A；5～6.5 min 95%A。流速為0.4 mL/min。
1.4 質(zhì)譜分析條件
電噴霧離子源(ESI)：正離子掃描；氣簾氣：241 kPa，霧化氣：414 kPa，加熱氣：414 kPa，源溫：550 ℃，電噴霧電壓：5 500 V。多反應(yīng)檢測(MRM)條件如表1所示。
表1 碘海醇和碘帕醇的MRM質(zhì)譜參數(shù)
優(yōu)化條件下，碘海醇和碘帕醇的定性、定量離子色譜圖如圖2所示。由圖2可見，峰形尖銳，每個離子對檢測下色譜峰中采集點數(shù)均大于25個，滿足準(zhǔn)確定量要求。
圖2 碘海醇和碘帕醇的提取離子色譜圖Fig.4 Extraction ion chromatogram of iohexol and iopamidol
2 結(jié)果與討論
2.1 碘海醇與碘帕醇的質(zhì)譜分析條件的優(yōu)化
分別將濃度為0.1 mg/L的碘海醇和碘帕醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用針泵注射進樣。在正離子模式下，分別得到碘帕醇準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+m/z777.8，碘海醇準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+m/z821.8。在碰撞能量為30 eV下進行二級質(zhì)譜分析，碘海醇和碘帕醇的前體離子經(jīng)過碰撞誘導(dǎo)解離(CID)后，分別產(chǎn)生了9個和5個碎片離子。碘海醇形成了顯著的脫水峰[M+H-H2O]+m/z803.8。準(zhǔn)分子離子峰脫去乙?；纬蒣M+H-C2H3O]+m/z779.8，再脫去鄰位碘形成[M+H-C2H3O-I]+m/z652.9。準(zhǔn)分子離子峰脫去1個2,3-二羥基丙基形成[M+H-C3H7O2]+m/z730.8，脫去1個2,3-二羥基丙基和1個氫碘酸形成[M+H-C3H7O2-C6H10O3N]+m/z602.9。碎片離子m/z602.9和m/z652.9均為重排的成環(huán)離子，相對穩(wěn)定，是除脫水峰外相應(yīng)最強的兩個碎片離子。因此，選擇m/z821.8/m/z602.9為定量離子對，m/z821.8/m/z652.9為定性離子對，建立碘海醇的MRM質(zhì)譜檢測方法。碘帕醇同樣形成了脫水峰[M+H-H2O]+m/z759.8。碘帕醇準(zhǔn)分子離子峰脫去1,3-二羥基丙胺形成[M+H-C3H8O2N]+m/z686.8，再脫去一個氫碘酸，形成[M+H-C5H8O3N-HI]+m/z558.5。選擇m/z777.8/m/z558.8為定量離子對，m/z777.8/m/z686.8為定性離子對。
2.2 色譜分離條件的選擇
首先，在流動相中添加了0.1%的甲酸，以增強ESI正離子模式下碘海醇和碘帕醇的準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+離子化程度，并使色譜峰峰形更加尖銳和對稱。碘海醇和碘帕醇均含碘，為強鹵代極性化合物。PHNOMON Kinetex F5色譜柱(PFP柱)的填料顆粒是在硅烷基上鍵合一個五氟苯基，對于碘海醇和碘帕醇的保留機制與WATERS AQUITY BEHC18柱(C18)柱相似，但選擇性不同。PFP色譜柱對極性目標(biāo)的保留能力強，特別是對鹵族化合物。因此，分別采用C18色譜柱和PFP色譜柱進行色譜分離，利用碘海醇和碘帕醇的定性離子對和定量離子對進行掃描監(jiān)測。實驗結(jié)果如圖3所示，C18色譜柱分離碘海醇和碘帕醇的保留時間分別為0.75 min和0.72 min，而PFP色譜柱分別為1.31 min和1.16 min，說明兩種色譜柱對目標(biāo)物的保留能力不同，PFP色譜柱對碘海醇和碘帕醇的保留能力更強。同時，在兩種色譜柱分離下，碘海醇與碘帕醇的色譜峰半峰寬具有顯著差異。在PFP色譜柱分離下，碘海醇和碘帕醇的定量離子對色譜峰的半峰寬分別為0.042、0.035 min，相較于C18色譜柱分離下分別減少了63.2%和44.4%。因此，說明PFP色譜柱更適合用于含碘、具有多重共軛結(jié)構(gòu)、強極性的碘海醇和碘帕醇的分析。最終，將色譜方法優(yōu)化為總時長6.5 min，有效洗脫分離時間為3.5 min，有利于大規(guī)模環(huán)境樣品的高通量、快速、準(zhǔn)確的定性定量分析。
圖3 碘海醇和碘帕醇的色譜分離條件的優(yōu)化Fig.3 Effect of C18 column and pentaflurophenyl (PFP) column on separation of iohexol and iopamidol
2.3 基質(zhì)效應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量限
分別以地下水、地表水基質(zhì)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率與溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率之比評估基質(zhì)效應(yīng)(ME)[23]。當(dāng)0.8≤ME≤1.2時為無明顯基質(zhì)效應(yīng)，ME<0.8時為基質(zhì)抑制效應(yīng)，ME>1.2時為基質(zhì)增強效應(yīng)。結(jié)果表明，碘海醇(0.01～20 μg/L)和碘帕醇(0.2～50 μg/L)在3種基質(zhì)內(nèi)線性良好，相關(guān)性系數(shù)(r)≥0.9956。地下水基質(zhì)中，碘海醇和碘帕醇的ME分別為1.02和0.95，在地表水基質(zhì)中分別為0.88和1.00，表明地表水和地下水基質(zhì)對碘海醇和碘帕醇的定量結(jié)果不存在顯著影響，可以直接采用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量分析。通過對標(biāo)準(zhǔn)溶液進行逐級稀釋進樣，本方法對碘海醇的檢出限(S/N=3)為0.004 μg/L，定量限(S/N=10)為0.01 μg/L；對碘帕醇的檢出限為0.05 μg/L，定量限為0.50 μg/L。結(jié)果見表2。
表2 線性方程和重現(xiàn)性
2.4 準(zhǔn)確度和精密度
分別向地下水、地表水空白樣品中添加0.5、5、10 μg/L碘海醇和碘帕醇標(biāo)準(zhǔn)，進行3個添加水平的加標(biāo)回收試驗，每個水平重復(fù)5次，計算回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果見表3，兩種目標(biāo)物在不同地表水樣品中的回收率在84.1%～109.1%之間，RSD為4.1%～9.3%。
表3 回收率實驗結(jié)果(n=5)
2.5 實際樣品的檢測
利用建立的UPLC-MS/MS分析方法，對某工業(yè)園區(qū)及周邊河流、地下水等40個采樣位點的水樣進行了檢測，在工業(yè)園區(qū)地下水水樣中檢出碘海醇1.2 μg/L，碘帕醇5.1 μg/L。
3 結(jié)論
本研究解析了碘海醇、碘帕醇的質(zhì)譜行為，選擇了最具結(jié)構(gòu)代表性的特征離子對作為定性、定量離子對。優(yōu)化了碘海醇和碘帕醇的色譜分離條件，建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定水體中碘化造影劑的方法。該方法前處理簡便，檢測限低，靈敏度高，重現(xiàn)性好。為水體中碘化造影劑的監(jiān)測提供了方法學(xué)依據(jù)，為相關(guān)全自動在線處理與檢測系統(tǒng)提供了支持方案。
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碘海醇(Iohexol)和碘帕醇(Iopamidol)屬于第二代碘造影劑，是目前最為暢銷的造影劑[1]，其結(jié)構(gòu)式如圖1所示。通常在進行CT造影診斷前注入靜脈，用于血管、泌尿系統(tǒng)、脊髓及股關(guān)節(jié)、淋巴系統(tǒng)造影，具有造影密度低，毒性低，耐受性好等優(yōu)點，在發(fā)達(dá)國家已全面取代了離子型造影劑[1,2]。根據(jù)Newport數(shù)據(jù)，2018年全球碘海醇制劑規(guī)模超過12億美元。中國醫(yī)藥工業(yè)信息中心數(shù)據(jù)顯示，2019年國內(nèi)X射線造影劑市場規(guī)模約為139.45億元，其中碘帕醇的市場規(guī)模約為15.13億元。然而，已有國外研究報道非離子型X射線造影劑，通過醫(yī)療廢水、工業(yè)廢水、患者尿液等途徑進入地表水體，并在自然水環(huán)境中表現(xiàn)出持久性[3 - 5]。Pérez等[4]報道碘帕醇在原水、二級出水、地下水和地表水等水體中被檢出，質(zhì)量濃度分別為2.7 μg/L、15 μg/L、2.4 μg/L和0.49 μg/L。亦有研究[6 - 9]表明，碘帕醇易在飲用水處理過程中生成具有毒性轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，但其在環(huán)境中的遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律尚未明確。因此，需要對環(huán)境中，尤其是水體中典型碘化造影劑進行監(jiān)測。
圖1 碘海醇和碘帕醇的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formulas of iohexol and iopamidol
已有的檢測方法主要集中在碘海醇的檢測中，包括高效液相色譜法(HPLC)[10 - 14]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)[15 - 22]，檢測對象為注射液和血液樣品。在血漿和血清的碘海醇檢測中，利用HPLC法分析的時間為13～60 min，檢出限在700～1 000 μg/L之內(nèi)[10 - 13]；利用LC-MS/MS法的分析時間為7.3～31 min，檢出限在10.5～300 μg/L之內(nèi)[17 - 22]。在注射液樣品的碘海醇檢測中，利用HPLC法的分析時間為13～30 min，檢出限在500 μg/L之內(nèi)[14,15]；利用LC-MS/MS的分析時間為30 min，檢出限在25 μg/L之內(nèi)[16]。張美微等[22]利用LC-MS/MS法對血漿中的碘帕醇進行了檢測，方法使用含0.1%甲酸-5 mmol九氟戊酸-10%乙腈水溶液為流動相進行等度洗脫，定量限為1 000 μg/L。在水質(zhì)風(fēng)險監(jiān)測中，潛在危害物的量級往往在μg/L或者ng/L水平，因此針對地表水水樣，建立了碘海醇和碘帕醇的液-液萃取前處理，結(jié)合LC-MS/MS檢測方法，適合水樣中有害物的快速、準(zhǔn)確、高通量定性定量分析，尤其適合轉(zhuǎn)化為全自動在線處理與檢測系統(tǒng)。
1 實驗部分
1.1 主要儀器與試劑
QTRAP 5500三重四極桿復(fù)合線性離子阱液-質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)(美國，AB Sciex公司)；Vortex Genie2渦旋混合器(美國，Scientific Industries公司)；Eppendorf移液器(德國，Eppendorf公司)。
碘海醇(純度98.0%)、碘帕醇(純度98.0%)標(biāo)準(zhǔn)品購自默克美國Sigma試劑公司。分別準(zhǔn)確稱量100.0 mg碘帕醇、碘海醇標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL容量瓶中，用50%乙腈水溶液溶解后，配制成1.0 g/L混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液，于-20 ℃儲存。混合標(biāo)準(zhǔn)品工作溶液：用50%乙腈水溶液將混合標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液稀釋為0.01、0.05、0.2、0.5、2、10、50、100 μg/L混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，待用。乙腈(質(zhì)譜純，美國Fisher公司)，甲酸(質(zhì)譜純，默克美國Sigma試劑公司)。實驗室用水為Millipore純水系統(tǒng)制備(電阻率為18.2 MΩ·cm)。
地表水和地下水水樣均取自造影劑生產(chǎn)企業(yè)所在工業(yè)園區(qū)周邊的河流、地下水中。其中，基質(zhì)空白樣品，取自該工業(yè)園區(qū)50公里外的上游河流、地下水采樣點。
1.2 樣品前處理
準(zhǔn)確移取5 mL水樣于15 mL離心管中，加入5 mL乙腈，渦旋提取2 min，4 ℃下12 000 r/min離心10 min，取上清液過0.22 μm聚四氟乙烯濾膜，待上機檢測。
1.3 色譜分析條件
色譜柱為PHNOMON Kinetex F5(100 mm×3 mm，2.6 μm)；柱溫40 ℃；流動相A為0.1%甲酸水溶液，B為乙腈。梯度洗脫程序為：0.0～0.5 min，95%A；0.5～3.5 min，95%A～35%A；3.5～4 min，35%～5%A，4～5 min，5%A；5～6.5 min 95%A。流速為0.4 mL/min。
1.4 質(zhì)譜分析條件
電噴霧離子源(ESI)：正離子掃描；氣簾氣：241 kPa，霧化氣：414 kPa，加熱氣：414 kPa，源溫：550 ℃，電噴霧電壓：5 500 V。多反應(yīng)檢測(MRM)條件如表1所示。
表1 碘海醇和碘帕醇的MRM質(zhì)譜參數(shù)
優(yōu)化條件下，碘海醇和碘帕醇的定性、定量離子色譜圖如圖2所示。由圖2可見，峰形尖銳，每個離子對檢測下色譜峰中采集點數(shù)均大于25個，滿足準(zhǔn)確定量要求。
圖2 碘海醇和碘帕醇的提取離子色譜圖Fig.4 Extraction ion chromatogram of iohexol and iopamidol
2 結(jié)果與討論
2.1 碘海醇與碘帕醇的質(zhì)譜分析條件的優(yōu)化
分別將濃度為0.1 mg/L的碘海醇和碘帕醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用針泵注射進樣。在正離子模式下，分別得到碘帕醇準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+m/z777.8，碘海醇準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+m/z821.8。在碰撞能量為30 eV下進行二級質(zhì)譜分析，碘海醇和碘帕醇的前體離子經(jīng)過碰撞誘導(dǎo)解離(CID)后，分別產(chǎn)生了9個和5個碎片離子。碘海醇形成了顯著的脫水峰[M+H-H2O]+m/z803.8。準(zhǔn)分子離子峰脫去乙?；纬蒣M+H-C2H3O]+m/z779.8，再脫去鄰位碘形成[M+H-C2H3O-I]+m/z652.9。準(zhǔn)分子離子峰脫去1個2,3-二羥基丙基形成[M+H-C3H7O2]+m/z730.8，脫去1個2,3-二羥基丙基和1個氫碘酸形成[M+H-C3H7O2-C6H10O3N]+m/z602.9。碎片離子m/z602.9和m/z652.9均為重排的成環(huán)離子，相對穩(wěn)定，是除脫水峰外相應(yīng)最強的兩個碎片離子。因此，選擇m/z821.8/m/z602.9為定量離子對，m/z821.8/m/z652.9為定性離子對，建立碘海醇的MRM質(zhì)譜檢測方法。碘帕醇同樣形成了脫水峰[M+H-H2O]+m/z759.8。碘帕醇準(zhǔn)分子離子峰脫去1,3-二羥基丙胺形成[M+H-C3H8O2N]+m/z686.8，再脫去一個氫碘酸，形成[M+H-C5H8O3N-HI]+m/z558.5。選擇m/z777.8/m/z558.8為定量離子對，m/z777.8/m/z686.8為定性離子對。
2.2 色譜分離條件的選擇
首先，在流動相中添加了0.1%的甲酸，以增強ESI正離子模式下碘海醇和碘帕醇的準(zhǔn)分子離子峰[M+H]+離子化程度，并使色譜峰峰形更加尖銳和對稱。碘海醇和碘帕醇均含碘，為強鹵代極性化合物。PHNOMON Kinetex F5色譜柱(PFP柱)的填料顆粒是在硅烷基上鍵合一個五氟苯基，對于碘海醇和碘帕醇的保留機制與WATERS AQUITY BEHC18柱(C18)柱相似，但選擇性不同。PFP色譜柱對極性目標(biāo)的保留能力強，特別是對鹵族化合物。因此，分別采用C18色譜柱和PFP色譜柱進行色譜分離，利用碘海醇和碘帕醇的定性離子對和定量離子對進行掃描監(jiān)測。實驗結(jié)果如圖3所示，C18色譜柱分離碘海醇和碘帕醇的保留時間分別為0.75 min和0.72 min，而PFP色譜柱分別為1.31 min和1.16 min，說明兩種色譜柱對目標(biāo)物的保留能力不同，PFP色譜柱對碘海醇和碘帕醇的保留能力更強。同時，在兩種色譜柱分離下，碘海醇與碘帕醇的色譜峰半峰寬具有顯著差異。在PFP色譜柱分離下，碘海醇和碘帕醇的定量離子對色譜峰的半峰寬分別為0.042、0.035 min，相較于C18色譜柱分離下分別減少了63.2%和44.4%。因此，說明PFP色譜柱更適合用于含碘、具有多重共軛結(jié)構(gòu)、強極性的碘海醇和碘帕醇的分析。最終，將色譜方法優(yōu)化為總時長6.5 min，有效洗脫分離時間為3.5 min，有利于大規(guī)模環(huán)境樣品的高通量、快速、準(zhǔn)確的定性定量分析。
圖3 碘海醇和碘帕醇的色譜分離條件的優(yōu)化Fig.3 Effect of C18 column and pentaflurophenyl (PFP) column on separation of iohexol and iopamidol
2.3 基質(zhì)效應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量限
分別以地下水、地表水基質(zhì)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率與溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率之比評估基質(zhì)效應(yīng)(ME)[23]。當(dāng)0.8≤ME≤1.2時為無明顯基質(zhì)效應(yīng)，ME<0.8時為基質(zhì)抑制效應(yīng)，ME>1.2時為基質(zhì)增強效應(yīng)。結(jié)果表明，碘海醇(0.01～20 μg/L)和碘帕醇(0.2～50 μg/L)在3種基質(zhì)內(nèi)線性良好，相關(guān)性系數(shù)(r)≥0.9956。地下水基質(zhì)中，碘海醇和碘帕醇的ME分別為1.02和0.95，在地表水基質(zhì)中分別為0.88和1.00，表明地表水和地下水基質(zhì)對碘海醇和碘帕醇的定量結(jié)果不存在顯著影響，可以直接采用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量分析。通過對標(biāo)準(zhǔn)溶液進行逐級稀釋進樣，本方法對碘海醇的檢出限(S/N=3)為0.004 μg/L，定量限(S/N=10)為0.01 μg/L；對碘帕醇的檢出限為0.05 μg/L，定量限為0.50 μg/L。結(jié)果見表2。
表2 線性方程和重現(xiàn)性
2.4 準(zhǔn)確度和精密度
分別向地下水、地表水空白樣品中添加0.5、5、10 μg/L碘海醇和碘帕醇標(biāo)準(zhǔn)，進行3個添加水平的加標(biāo)回收試驗，每個水平重復(fù)5次，計算回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果見表3，兩種目標(biāo)物在不同地表水樣品中的回收率在84.1%～109.1%之間，RSD為4.1%～9.3%。
表3 回收率實驗結(jié)果(n=5)
2.5 實際樣品的檢測
利用建立的UPLC-MS/MS分析方法，對某工業(yè)園區(qū)及周邊河流、地下水等40個采樣位點的水樣進行了檢測，在工業(yè)園區(qū)地下水水樣中檢出碘海醇1.2 μg/L，碘帕醇5.1 μg/L。
3 結(jié)論
本研究解析了碘海醇、碘帕醇的質(zhì)譜行為，選擇了最具結(jié)構(gòu)代表性的特征離子對作為定性、定量離子對。優(yōu)化了碘海醇和碘帕醇的色譜分離條件，建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定水體中碘化造影劑的方法。該方法前處理簡便，檢測限低，靈敏度高，重現(xiàn)性好。為水體中碘化造影劑的監(jiān)測提供了方法學(xué)依據(jù)，為相關(guān)全自動在線處理與檢測系統(tǒng)提供了支持方案。
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