佛山地區(qū)無償獻血者紅細胞血型不規(guī)則抗體篩查結(jié)果分析*

唐元春,招淑文,卓創(chuàng)近（佛山市中心血站機采科，廣東 佛山 528000）

隨著臨床輸血技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床在進行輸血治療過程中需確保患者血液與輸注血液的相容性，避免引起患者的輸血反應(yīng)。臨床認為在輸血前進行不規(guī)則抗體篩查，可有效預(yù)防患者在輸血后或輸血過程中發(fā)生輸血反應(yīng)。不規(guī)則抗體是人體在妊娠或者異體輸血等免疫刺激作用下生成的抗-A、抗-B 及抗-AB 之外的紅細胞血型抗體，主要包括免疫球蛋白G（IgG）及免疫球蛋白M（IgM）。不規(guī)則抗體的存在會增加交叉配血或者血型鑒定的難度，也會誘發(fā)自身免疫性溶血性疾病、免疫溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病及紅細胞輸注無效等不良反應(yīng)，嚴重影響臨床輸血安全及有效性［1-3］。因此，對獻血者實施不規(guī)則抗體篩查以明確有臨床意義的抗體對于保證輸血效果及安全有重要意義［4-6］。本次研究選取2018年1月至2021年5月佛山地區(qū)無償獻血者紅細胞血型不規(guī)則抗體的篩查結(jié)果。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2021年5月我中心血站無償獻血者的血液標本共計90 000份。所有獻血者均符合《獻血者健康檢查要求》且自愿獻血。其中男47342例、女42658例；年齡18～60（35.45±3.23）歲。

1.2 方法 所用儀器及試劑如下：恒溫孵育器（FYQ型）、血型卡離心機（TD-3 型）、全自動血型儀（PK7300），產(chǎn)自上海血液生物公司的抗體篩選細胞、抗體鑒定譜細胞、ABO反定型紅細胞、抗A/抗B單克隆標準血清及巰基試劑，產(chǎn)自長春博訊的微柱凝膠抗人球蛋白卡。于全自動血型分析儀96孔U型微板上實施ABO 正反定血型檢查，通過反定型“O”細胞對獻血者標本不規(guī)則抗體進行初步篩選，若篩選結(jié)果呈陽性則應(yīng)用抗人球蛋白卡及抗體篩選細胞對不規(guī)則抗體進行檢測，具體方式如下：對抗人球蛋白卡進行標記后分別加入50 μl濃度為0.5%的Ⅰ～Ⅲ篩查紅細胞，然后將50 μl獻血者血漿加入至各孔并于恒溫器中持續(xù)孵育（溫度：37℃，時間：15 min），然后對血漿進行離心處理，離心速度：900 r/min、離心時間：2 min，離心速度：1 500 r/min、離心時間：3 min，對離心結(jié)果進行觀察。通過譜細胞對抗體檢查陽性獻血者標本不規(guī)則抗體進行鑒定，應(yīng)用巰基試劑對抗體IgG及IgM類別進行鑒定。

1.3 臨床觀察指標 （1）分析獻血者不規(guī)則抗體檢出情況及分布情況；（2）分析不同性別及不同年度的獻血者不規(guī)則抗體分布情況；（3）分析不同獻血次數(shù)及不同妊娠情況獻血者不規(guī)則抗體分布情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 23.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料通過例（百分率）表示，行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體檢出情況及分布情況分析 90 000份血液標本中共計57 份血液標本不規(guī)則抗體檢測結(jié)果呈陽性，構(gòu)成比為0.06%，其中，特異性抗體共計41份，構(gòu)成比為71.93%，其他16份為非特異性抗體，構(gòu)成比為28.07%，特異性抗體檢出率明顯高于非特異性抗體檢出率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不規(guī)則抗體檢出情況及分布情況[n（%）]

2.2 不同性別及不同年度獻血者不規(guī)則抗體分布情況分析 女性獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率明顯高于男性獻血者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；不同年份獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同年度獻血者不規(guī)則抗體分布情況分析（n）

2.3 不同獻血次數(shù)及不同妊娠情況獻血者不規(guī)則抗體分布情況分析 初次獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率明顯高于多次獻血者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。有妊娠史獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率明顯高于無妊娠史獻血者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同妊娠情況及不同獻血次數(shù)獻血者不規(guī)則抗體分布情況分析（n）

3 討論

紅細胞血型不規(guī)則抗體是指具有ABO血型系統(tǒng)以外的所有紅細胞血型系統(tǒng)所產(chǎn)生的抗體，抗體主要包括了紅細胞同種抗體以及自身抗體。不規(guī)則抗體是引起輸血反應(yīng)、新生兒溶血病、血型鑒定困難及疑難配血等主要原因［7］。在歐美地區(qū)等多個發(fā)達國家中，普遍采用紅細胞對獻血者體內(nèi)的不規(guī)則抗體進行篩選，中國香港、臺灣等地區(qū)的采供血機構(gòu)將不規(guī)則抗體作為常規(guī)血液篩查項目［8］。在我國未要求對獻血者進行常規(guī)不規(guī)則抗體篩查，且對于抗體篩查操作未形成統(tǒng)一規(guī)范，國內(nèi)有學(xué)者認為有條件的血液中心，應(yīng)開展獻血者不規(guī)則抗體篩查檢測，以減少或避免不規(guī)則抗體所致的輸血不良反應(yīng)［9］。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，臨床上出現(xiàn)因獻血者不規(guī)則抗體陽性而引起的交叉配血不合現(xiàn)象時有發(fā)生，因此，對獻血者進行不規(guī)則抗體篩查在輸血安全性方面具有積極重要的意義。

輸血是臨床搶救患者的重要手段之一，輸注冰凍血漿、單采血小板、去白細胞懸浮紅細胞等血液制品是臨床救治急危重癥患者的重要手段，隨著臨床輸血技術(shù)的不斷發(fā)展，部分患者在接受同種異體血液后或者在輸血的過程中可能出現(xiàn)不同程度的輸血不良反應(yīng)，如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、皮疹、皮膚瘙癢等，反應(yīng)強烈者還可產(chǎn)生遲發(fā)性或者急發(fā)性溶血性輸血不良反應(yīng)，輕則影響治療效果導(dǎo)致患者輸注無效，重則危及患者生命［10］。輸血治療以安全為前提，目前我國對采供血機構(gòu)提供的血液制品中不規(guī)則抗體篩選試驗還沒有相關(guān)的規(guī)范和要求，輸注洗滌紅細胞可以避免或減少不規(guī)則抗體所致的輸血不良反應(yīng)，可將不規(guī)則抗體篩查陽性的懸浮紅細胞制備為洗滌紅細胞應(yīng)用，以節(jié)約有限的血液資源［9］。由于血型檢測試劑的質(zhì)量和檢測水平的提高，醫(yī)療機構(gòu)及采供血機構(gòu)因為Rh血型、ABO血型鑒定誤差等造成的輸血反應(yīng)發(fā)生率極低，但是因不規(guī)則抗體引發(fā)的血型鑒定困難、交叉配血困難、正反定血型不一致及新生兒溶血病等現(xiàn)象仍然存在［11］。

不規(guī)則抗體分為兩種類型，分別是IgM 型和IgG型。IgM 型不規(guī)則抗體可以通過生理鹽水與對應(yīng)的紅細胞直接連接產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，這種凝集現(xiàn)象比較明顯，肉眼可見；而IgG 型不規(guī)則抗體以生理鹽水為介質(zhì)與對應(yīng)的紅細胞反應(yīng)是不會出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，只有致敏相應(yīng)抗原的紅細胞，采用酶法、聚凝胺法、抗人球蛋白法、凝膠法等技術(shù)才會出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。多數(shù)不規(guī)則抗體是IgG型抗體，抗體效價較弱［12］。在輸血治療中，要把檢測的重點關(guān)注在對臨床有直接意義的血型抗體篩查中，不論該血型抗體是特異性的還是非特異性的，均有很大可能引起輸血的不良反應(yīng)［13］。在此次研究中，獻血人群中的不規(guī)則抗體檢測陽性率為0.06%，特異性抗體及非特異性抗體的檢出率分別為71.93%、28.07%，特異性抗體檢出率明顯高于非特異性抗體檢出率。徐兆云等研究［14］中，不規(guī)則抗體陽性檢出率為0.07%，與本研究結(jié)果一致。非特異性抗體檢出率為28.07%且均為冷自身抗體，37℃環(huán)境下冷自身抗體引發(fā)免疫性輸血反應(yīng)的幾率較低，但是麻醉狀態(tài)或者低溫狀態(tài)下可通過激活補體誘發(fā)輸血反應(yīng)。紅細胞與其他血型紅細胞均可與冷自身抗體產(chǎn)生非特異性凝集反應(yīng)，不但會對患者輸血前的血型鑒定結(jié)果造成影響，還會對交叉配血試驗造成干擾，故而在應(yīng)用于臨床治療前必須將血漿去除并制備成洗滌紅細胞。

在正常情況下，人體血液中是不會有不規(guī)則抗體，體內(nèi)的不規(guī)則抗體通常是通過輸血或妊娠期接觸抗原紅細胞后產(chǎn)生的。雖然不規(guī)則抗體的發(fā)生率不高，但在臨床輸血治療中是導(dǎo)致輸血配型不合、輸血不良反應(yīng)或無效輸血的主要原因。此次研究中，女性獻血者占獻血人群的47.4%，而女性獻血者不規(guī)則抗體的陽性檢出率明顯高于男性獻血者，有妊娠史獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率明顯高于無妊娠史的獻血者，原因是女性人群受到妊娠、分娩或者流產(chǎn)等免疫刺激明顯增加，并且隨著妊娠次數(shù)的增加，女性不規(guī)則抗體產(chǎn)生幾率也隨之升高，隨著二孩政策的放開，這類人群的數(shù)量也會漸漸增加。這也說明了不規(guī)則抗體的產(chǎn)生主要跟免疫刺激有關(guān)。

此次研究中，不同年份獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與郭偉潔等［15］研究結(jié)果一致。初次獻血的獻血者不規(guī)則抗體陽性檢出率明顯高于多次獻血者，這與血站的管理手段密切相關(guān)，由于血站采用的血站管理信息系統(tǒng)能夠自動屏蔽那些檢測出不規(guī)則抗體的獻血者，使其無法再次獻血，從而導(dǎo)致多次獻血的獻血者不規(guī)則抗體的檢出率相對較低，但也有研究認為，中國獻血人群意外抗體陽性率低于一般隨機人群中的同種抗體檢出率，可能原因是臨床患者意外抗體陽性率高于獻血者意外抗體陽性率導(dǎo)致一般隨機人群平均意外抗體陽性率高于獻血人群的意外抗體陽性率［15］。

綜上所述，輸血在臨床救治危重患者的過程中發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用，為了保證血液質(zhì)量并為患者輸血安全提供保障，血站應(yīng)該保證所提供血液制品的安全性和有效性。不規(guī)則抗體屬于引發(fā)交叉配血及血型鑒定困難的重要誘發(fā)原因，為了充分保證輸血的有效性和安全性，推廣獻血者全面實施不規(guī)則抗體篩查具有重要意義。