高效液相色譜法測定懸浮種衣劑40%溴酰·噻蟲嗪

高青環(huán) ， 路朝陽 ， 李俊玲 ， 袁竹青 ， 盛治喻 ， 祝 捷

(河南省化工研究所有限責任公司 ， 河南 鄭州 450052)

溴氰蟲酰胺又稱氰蟲酰胺，是一種新型的鄰氨基苯甲酰胺類殺蟲劑，通過激活靶標害蟲的魚尼丁受體二防治害蟲，對哺乳動物和害蟲魚尼丁受體有顯著的選擇性差異，對非靶標節(jié)肢動物有很好的選擇性，大大提高了其環(huán)境安全性[1]。溴氰蟲酰胺是杜邦公司繼氯蟲酰胺之后成功開發(fā)的第二代魚尼丁受體抑制劑類殺蟲劑，通過改變苯環(huán)上的各種極性基團而成，作用更高效，適用作物更廣泛，可有效防治鱗翅目、半翅目和鞘翅目害蟲。噻蟲嗪，化學名稱為3-(2-氯-1,3-噻唑-5-基甲基)-5-甲基-1，3,5-惡二嗪-4-基叉(硝基)胺，是一種第二代煙堿類高效低毒殺蟲劑，對害蟲具有胃毒、觸殺及內吸活性，用于葉面噴霧及灌根處理。其施藥后迅速被內吸，并傳導到植株各部位，對刺吸式害蟲如蚜蟲、飛虱、葉嬋、粉虱等具有良好的防效作用[2-5]。

目前40%溴氰蟲酰胺·噻蟲嗪懸浮種衣劑國內還未見關于高效液相色譜的分析方法。本文采用高效液相色譜法，使用反相C18柱對試樣中的溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪進行定量分析，該方法操作簡便、分析速度快，精密度和準確度均符合分析要求，可以滿足常規(guī)分析和生產中的質量控制。

1 實驗部分

1.1 試劑和溶液

甲醇，色譜純；水，二次蒸餾水；溴氰蟲酰胺標準品，質量分數(shù)≥99.4%，上海市農藥研究所；噻蟲嗪標準品，質量分數(shù)≥98.6%，上海市農藥研究所；40%溴氰蟲酰胺·噻蟲嗪懸浮種衣劑，金農田氏農藥實驗廠。

1.2 儀器

儀器：Agilent1260高效液相色譜儀；紫外檢測器；Agilent Chemstation色譜工作站；色譜柱，ZORBAX SB-C18，5 μm，150 mm×4.5 mm；超聲波清洗器； 過濾器，過濾膜孔徑0.45 μm。

1.3 色譜操作條件

流動相：甲醇-水(體積比55∶45)；柱溫：室溫；檢測波長：250 nm；流動相流速：1.0 mL/min；進樣體積：5.0 μL；保留時間：噻蟲嗪約2.16 min，溴氰蟲酰胺約6.4 min。溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪標準品液相色譜圖見圖1。40%溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪FS液相色譜圖見圖2。

圖1 溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪標準品液相色譜圖

圖2 40%溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪FS液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1標樣溶液的配制

分別準確稱取溴氰蟲酰胺標準品0.013 6 g(精確至0.000 2 g)，噻蟲嗪標準品0.012 8 g(精確至0.000 2 g)置于同一50 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇置于超聲波清洗器中超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置，備用。

1.4.2試樣溶液的配制

稱取0.062 0 g樣品(精確至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇置于超聲波清洗器中超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置，過濾，備用。

1.4.3測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標樣溶液，計算各相對響應值，待相鄰兩針的相對響應值變化<1.5%時，按照標樣溶液、 試樣溶液、 試樣溶液、 標樣溶液的順序進樣測定。

1.5 計算

將測得的兩針試樣溶液及試樣前后兩針標樣溶液的峰面積分別進行平均，按下式計算溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪的質量分數(shù)(X)。

式中：A1為標樣溶液中溴氰蟲酰胺(或噻蟲嗪)峰面積平均值；A2為試樣溶液中溴氰蟲酰胺(或噻蟲嗪)峰面積平均值；m1為溴氰蟲酰胺(或噻蟲嗪)標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；P為標樣中溴氰蟲酰胺(或噻蟲嗪)質量分數(shù)，%。

2 結果分析

2.1 流動相的選擇

為了實現(xiàn)溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪的有效分離，先后試驗了甲醇-水不同配比流動相進行反復試驗，最后確定甲醇-水(體積比55∶45)為試驗的流動相。溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪分離效果好，峰形對稱，保留時間適中，可以滿足分析要求。

2.2 檢測波長的選擇

通過Agilent 1260高效液相色譜儀的紫外光譜采集功能，經紫外光譜掃描噻蟲嗪在225～270 nm有很好的吸收，溴氰蟲酰胺在210、250 nm均有很好的吸收，為了保證溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪都有較好的吸收，選用250 nm為檢測波長。噻蟲嗪紫外吸收圖見圖3。溴氰蟲酰胺紫外吸收圖見圖4。

圖3 噻蟲嗪紫外吸收圖

圖4 溴氰蟲酰胺紫外吸收圖

2.3 方法線性關系的測定

分別準確稱取溴氰蟲酰胺標準品0.013 6 g(精確至0.000 2 g)，噻蟲嗪標準品0.012 8 g(精確至0.000 2 g)置于同一50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容后，用移液槍分別準確移取2.0、4.0、10.0、20.0、30.0 mL于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，按上述操作條件進行測定，以標品質量(μg)為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準曲線(見圖5、圖6)，得線性回歸方程為：噻蟲嗪y=599.8x+3.5898，相關系數(shù)為1；溴氰蟲酰胺y=845.90x+17.724，相關系數(shù)為0.999 74。

圖5 噻蟲嗪紫外吸收圖

圖6 溴氰蟲酰胺紫外吸收圖

2.4 方法精密度測定

按上述操作條件對同一樣品平行測定5次，溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪的標準偏差分別為0.072和0.014，變異系數(shù)分別為0.36%和0.068%。

表1 精密度測定結果

2.5 方法準確度測定

在已知含量的樣品中加入一定數(shù)量的標準品，在上述操作條件下進行測定，測得溴氰蟲酰胺的回收率為98.80%～99.47%，平均回收率為99.23%；噻蟲嗪的回收率為99.13%～99.88%，平均回收率為99.51%。

表2 回收率的試驗測定結果

3 結論

通過實驗表明，本方法可以同時測定40%溴氰蟲酰胺·噻蟲嗪懸浮種衣劑中的兩種有效成分，方法操作簡單、快速、分離效果好，精密度和準確度高，符合定量分析要求，可以滿足企業(yè)生產中的質量控制分析。