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    吉林省朝鮮族人群Diego血型系統(tǒng)抗原頻率調(diào)查

    2015-03-11 03:34:08焦立新,陳琳,韓瑜
    關(guān)鍵詞:朝鮮族血型吉林

    吉林省朝鮮族人群Diego血型系統(tǒng)抗原頻率調(diào)查

    焦立新1,陳琳1,韓瑜1,楊帆1,林乾飛1,金成日1,劉鐵梅2*

    (1.吉林省血液中心,吉林 長(zhǎng)春130033;2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春130033)

    目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了30個(gè)人類血型系統(tǒng),除了ABO和Rh外,還有其他一些血型系統(tǒng),例如MNS、Diego、Duffy、Kidd等。這些血型系統(tǒng)抗原在吉林地區(qū)人群中的分布特征還不清楚,而臨床輸血實(shí)踐中遇到的疑難問(wèn)題又常與這些血型系統(tǒng)有關(guān),掌握除ABO系統(tǒng)以外的其他抗原分布情況,有利于相配合供者的尋找及新生兒溶血病的預(yù)防。由于Dia主要分布于蒙古族人種中,因此Diego血型系統(tǒng)除了具有上述臨床意義外,還具有重要的人類學(xué)意義,本文調(diào)查了本地區(qū)朝鮮族人群Diego血型系統(tǒng)Dia、Dib抗原分布情況。

    1資料與方法

    1.1對(duì)象隨機(jī)抽取2013年1月-2014年12月無(wú)血緣關(guān)系的吉林省延吉市朝鮮族體檢健康人1000名,包括男性542人,女性458人,ABO血型分布為A型286人,B型321人,O型281人,AB型112人。采取每位待檢者靜脈血5 ml,EDTA抗凝,置于4℃保存。

    1.2序列特異性引物PCR(sequence-specific primer polymerase chain reaction,PCR-SSP)篩選Diego血型系統(tǒng)基因型采用天津秀鵬生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的特異性引物(引物包被在擴(kuò)增板上,批號(hào) 201501011)。該試劑盒根據(jù)Genebank公布的Dia、Dib基因特異性序列設(shè)計(jì);參照試劑盒說(shuō)明書(shū)加入反應(yīng)混合液和模板DNA;啟動(dòng)PCR循環(huán)程序,在Bio-Rad iCycler DNA擴(kuò)增儀96℃2 min 1Cycle, 96℃20 s、68℃60 s 5Cycles,96℃20 s、65℃45 s、72℃30 s 10Cycles,96℃ 20 s、62℃45 s、72℃30 s 15Cycles,72℃3 min,4℃min~;擴(kuò)增產(chǎn)物采用2.0%瓊脂糖凝膠140-150 V,電泳15-20 min。

    1.3血清學(xué)實(shí)驗(yàn)獻(xiàn)血者紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次,配成3%-5%紅細(xì)胞懸液。采用間接抗球蛋白法進(jìn)行Dia、Dib抗原檢測(cè),抗-Dia和-Dib血清為美國(guó)Bio-Rad公司試劑(批號(hào) 2216050)。

    1.4數(shù)據(jù)分析計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1吉林省朝鮮族人Diego血型抗原分布

    在1000例朝鮮族人樣本中,經(jīng)統(tǒng)計(jì)Dia抗原頻率為0.112,Dib抗原頻率1.0;Di(a+b+)112例,Di(a-b+)888例,未檢測(cè)到Di(a+b-)和Di(a-b-)樣本。經(jīng)Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn),吉林省朝鮮族的Diego血型抗原分布符合Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)(表1)。Dia和Dib基因分型結(jié)果見(jiàn)圖1。

    圖1 Diego血型抗原基因的電泳結(jié)果

    2.2吉林地區(qū)朝鮮族人與其他人種的Dia基因頻率比較

    經(jīng)與下表中各人種進(jìn)行兩組之間率的比較[1],χ2檢驗(yàn)P<0.05,均有顯著性差異(見(jiàn)表2)。Dia頻率在南美洲人群中較高(委內(nèi)瑞拉、巴西),而在歐洲、非洲、澳洲血統(tǒng)人群中較罕見(jiàn),吉林地區(qū)朝鮮族中的頻率高于大多數(shù)東南亞人群。

    表1 吉林地區(qū)朝鮮族人群Diego血型抗原分布情況

    表2 不同地區(qū)Dia頻率研究結(jié)果

    3討論

    編碼人類紅細(xì)胞Diego血型系統(tǒng)抗原的基因位于17號(hào)染色體17q12-q21上,名為SLC4K1。該基因編碼的22個(gè)抗原都位于帶3蛋白上,它是主要的細(xì)胞膜糖蛋白,在HCO3-和Cl-快速交換及CO2轉(zhuǎn)運(yùn)中起重要作用,Dia和Dib是Diego血型系統(tǒng)的兩個(gè)常見(jiàn)表型。是由帶3蛋白的第854位氨基酸替換形成,Dia為L(zhǎng)eu854而Dib為Pro854。

    1965年Layriss 和Arends首次在發(fā)生新生兒溶血病的委內(nèi)瑞拉家庭中檢出Dia抗原,1967年Thompson等檢出了Dib,Dia和Dib兩個(gè)抗原均為顯性遺傳[2],Dia和Dib能引起新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)。由于Dia存在于東南亞人群中,因此東方人應(yīng)特別注意抗-Dia抗體的存在。

    Dia的頻率在不同人種分布差異較大,在南美的委內(nèi)瑞拉和巴西人群中分別為35.54%和54.16%,在北美的加拿大因紐特人中很罕見(jiàn),而在白人和澳洲土著人中極為罕見(jiàn),Dia似乎不存在于澳洲原住民及許多大西洋人群中,在非洲人群中不存在或極少存在,Dia在東南亞人群中頻率2%-12%不等。至今未發(fā)現(xiàn)Di(a-b-)紅細(xì)胞。中國(guó)漢族人的Dia抗原頻率(antigen frequency)為5%左右,本文調(diào)查說(shuō)明吉林地區(qū)朝鮮族人群中Dia頻率(11.2%)高于漢族人,Dib頻率則是100%。由于Dia在歐洲人群中罕見(jiàn),進(jìn)口譜細(xì)胞中經(jīng)常不含有Di(a+)的細(xì)胞,是我們?cè)谂R床輸血工作中應(yīng)該注意的,吉林地區(qū)朝鮮族是 Dia抗原頻率較高的人群,應(yīng)防止抗-Dia的漏檢;本調(diào)查沒(méi)有檢測(cè)到Di(b-)細(xì)胞,抗-Dib抗體又沒(méi)有天然產(chǎn)生的報(bào)道,因此抗-Dib在朝鮮族人中引起輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的幾率極低。吉林地區(qū)朝鮮族人群的Diego血型系統(tǒng)抗原分布有其自身特點(diǎn),這部分人群輸血治療遇到的問(wèn)題需要考慮其血型抗原分布特征,因此有必要繼續(xù)篩查其他主要血型系統(tǒng)抗原分布,以便指導(dǎo)臨床輸血。

    由于基因分型方法穩(wěn)定可靠且費(fèi)用較低,適合大樣本篩查,可以鑒定血清學(xué)方法無(wú)法檢測(cè)的血型系統(tǒng);另外作為紅細(xì)胞其他血型系統(tǒng)的一項(xiàng)輔助技術(shù),也有助于提高譜紅細(xì)胞定型的準(zhǔn)確性。

    參考文獻(xiàn):

    [1]Daniel J.人類血型[M].北京:科學(xué)出版社,2007:119-120.

    [2]胡麗華.臨床輸血檢驗(yàn)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2004:80-82.

    (收稿日期:2015-07-14)

    文章編號(hào):1007-4287(2015)12-2129-02

    *通訊作者

    基金項(xiàng)目:吉林省衛(wèi)生科研計(jì)劃課題,項(xiàng)目編號(hào)“2013Z029”,“2012ZC028”

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