生活飲用水水質(zhì)微生物檢驗(yàn)結(jié)果分析

文安敏

摘 要：目的：微生物檢測(cè)技術(shù)在生活飲用水檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果分析。方法：研究抽取180份生活飲用水（枯水期90份，豐水期90份），將枯水期與豐水期的飲用水標(biāo)本分別進(jìn)行濾膜法實(shí)驗(yàn)（即對(duì)照組）與多管發(fā)酵法（即觀察組），根據(jù)其檢查結(jié)果評(píng)估枯水期、豐水期的微生物檢出情況。結(jié)果：兩組枯水期、豐水期大腸菌群檢出率、雜菌檢出率無顯著差異（P>0.05），與對(duì)照組相比，觀察組枯水期、豐水期大腸埃希菌檢出率、耐熱大腸菌群檢出率偏高（P<0.05）。結(jié)論：在對(duì)飲用水中的微生物進(jìn)行檢驗(yàn)的過程中，通常依據(jù)微生物指標(biāo)，檢測(cè)耐熱大腸菌群、菌落總數(shù)、總大腸菌群等指標(biāo)，全面檢測(cè)飲用水的質(zhì)量，并得出相應(yīng)的報(bào)告。

關(guān)鍵詞：微生物;檢測(cè)技術(shù);生活飲用水;檢驗(yàn)

Analysis of Microbiological Test Results of Drinking

Water Quality

WEN Anmin

（Center for Disease Control and prevention， Bozhou District， Zunyi City， Guizhou Province， Zunyi 563100， China）

Abstract： Objective： To analyze the application effect of microbial detection technology in drinking water inspection. Method： 180 drinking water samples （90 in dry season and 90 in wet season） were selected， and the samples of drinking water in dry season and wet season were tested by filter membrane method （control group） and multi-tube fermentation method （observation group） respectively， and the microbial detection in dry season and wet season was evaluated according to the inspection results. Result： There was no significant difference in the detection rates of coliform and miscellaneous bacteria between the two groups in dry season and wet season （P>0.05）. Compared with the control group， the detection rates of Escherichia coli and thermotolerant coliform in the observation group were higher in dry season and wet season （P<0.05）. Conclusion： In the process of testing microorganisms in drinking water， usually according to microbial indicators， indicators such as heat-resistant coliforms， total number of colonies， total coliforms， etc. are detected， and the quality of drinking water is comprehensively tested， and corresponding reports are obtained.

Keywords： microorganism; detection technology; drinking water; test

現(xiàn)階段，飲用水最迫切的安全問題是微生物污染問題，這也是世界范圍的難題。消除安全問題最有效的方法為生活飲用水微生物檢查。符合國(guó)家規(guī)定的飲用水都是經(jīng)由相關(guān)處理，水中微生物達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)，且人們能夠安全飲用的水[1]。世界衛(wèi)生組織調(diào)查發(fā)現(xiàn)，水污染導(dǎo)致世界上約12億人發(fā)生了腸道傳染性疾病，其中大約有400萬人因?yàn)樗廴炯膊∷劳?，所以生活飲用水質(zhì)量把控工作十分重要[2]。近幾年，我國(guó)加強(qiáng)了生活飲用水質(zhì)量監(jiān)測(cè)工作，以確保生活飲用水中所含有的微生物含量符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn);但是在輸送等過程中也可能出現(xiàn)二次污染的問題，導(dǎo)致水中微生物含量超標(biāo)，因此微生物檢驗(yàn)是檢驗(yàn)生活飲用水質(zhì)量的重要方式，能夠保證飲用水質(zhì)量安全[3-4]。

濾膜法是一種行之有效的微生物檢測(cè)方式，該方法操作極為便利，在檢測(cè)前會(huì)對(duì)水質(zhì)當(dāng)中的雜質(zhì)進(jìn)行判別，但是檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性較差[5]。為此，本次研究主要采用濾膜法與多管發(fā)酵法兩種微生物檢測(cè)技術(shù)對(duì)生活飲用水中微生物進(jìn)行檢測(cè)，并觀察結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 材料

研究抽取180份生活飲用水（枯水期90份，豐水期90份），時(shí)間段為2020年4月到2021年4月，樣本檢測(cè)遵循《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法水樣收集和保存》[6]中記載的流程實(shí)施采集及保存，兩組基線資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。將枯水期與豐水期的飲用水標(biāo)本分別進(jìn)行濾膜法實(shí)驗(yàn)（即對(duì)照組）與多管發(fā)酵法（即觀察組）。

1.2 試劑與儀器

生物顯微鏡，型號(hào)XSP-12CA，上海光學(xué)儀器一廠;生物安全柜，型號(hào)BSC-1500IIB2-X，濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司;高壓蒸汽滅菌消毒器，型號(hào)BKQ-B50II，濟(jì)南泰醫(yī)生物技術(shù)有限公司;電熱鼓風(fēng)干燥箱，型號(hào)DHG-9240A，武漢若瑞德科技有限公司;電熱恒溫培養(yǎng)箱，型號(hào)DHP-9012，上海燈晟儀器制造有限公司;紫外光燈，型號(hào)BOT-IIA，北京士博瑞科技有限公司。

乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（PB95789-250 g）、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基（PA95908-250 g）、EC-MUG培養(yǎng)基（PC95790-250 g）、革蘭氏染色液（PB231292-100 mL×4），均為廣東翁江化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 濾膜法實(shí)驗(yàn)

在燒杯中放入濾膜，加入蒸餾水，將其煮至沸騰，循環(huán)沸騰3次之后，將其實(shí)施15 min的常規(guī)殺菌措施，再對(duì)燒杯實(shí)施清潔，保證無殘留物后再次煮沸。將濾膜粗糙面向上，使用無菌鑷子取出，再放在無菌濾床上。取出水樣100 mL。開啟閥門實(shí)施抽濾，過濾完成后實(shí)施5 s抽氣，再關(guān)閉濾器閥門，使用滅菌鑷子除去濾膜，放入品紅硫酸鈉培養(yǎng)基上，確保有細(xì)菌殘留面朝上，在使用電熱恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

1.3.2 多管發(fā)酵法

把10 mL水樣接種到10 mL雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，取1 mL水樣接種到10 mL單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，另取1 mL水樣加入到9 mL滅菌生理鹽水中稀釋10倍，即0.1 mL水樣與10 mL單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液混合，每一稀釋度接種5管。從自來水廠出來的水，應(yīng)當(dāng)時(shí)常檢測(cè)，或每天檢測(cè)1次，可以與5份容積為10 mL水樣品雙料培養(yǎng)基相混合，每份與10 mL水樣品相混。若檢測(cè)水源發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重污染，則要擴(kuò)大稀釋度，可以與1 mL、0.1 mL、0.01 mL，甚至0.1 mL、0.01 mL、0.001 mL相混，每稀釋度對(duì)接5管，每種水樣品共對(duì)接15管。與低于1 mL水樣品對(duì)接時(shí)，稀釋時(shí)，必須遵守逐步增加的原則，可進(jìn)行10倍遞增的稀釋，再與1 mL對(duì)接，每上升

1次，更換1次1 mL滅菌刻度吸管。完成接種之后，將接種管置恒溫培養(yǎng)箱，36 ℃培養(yǎng)24 h。在培養(yǎng)后，觀察試管中是否有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，如所有乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大腸菌群陰性，若是陽(yáng)性則將產(chǎn)酸產(chǎn)氣管轉(zhuǎn)種紅美蘭瓊脂平板中，再使用培養(yǎng)箱36 ℃培養(yǎng)18～24 h，在完成培養(yǎng)后，密切觀察菌落形態(tài)，如果發(fā)現(xiàn)紫黑色且有金屬光澤、淡紫色且無金屬光澤的菌落，則必須染色后鏡檢，在染色工作完成之后，鏡檢結(jié)果凸顯革蘭氏陰性無芽孢桿菌，同時(shí)接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液進(jìn)行證實(shí)試驗(yàn)，置恒溫培養(yǎng)箱36 ℃培養(yǎng)24 h，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，即證實(shí)有總大腸菌群存在。再進(jìn)行耐熱大腸菌群及大腸埃希氏菌檢測(cè)。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料用（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯水期檢出率比較

枯水期一般為每年12月至次年4月全年流水量最少的時(shí)期，此時(shí)間段的降雨量較為稀少、地表水流枯竭，主要依靠地下水補(bǔ)給水源。相對(duì)而言，水中菌群的活躍度降低、水中微生物不易繁殖。如表1所示，采用濾膜法與多管發(fā)酵法在檢測(cè)枯水期飲用水樣本時(shí)發(fā)現(xiàn)，兩種方法對(duì)大腸菌群、雜菌的檢出數(shù)量之間的差異較?。≒>0.05），與濾膜法（對(duì)照組）相比，多管發(fā)酵法（觀察組）在大腸埃希菌、耐熱大腸菌群的檢出率偏高（P<0.05）。

2.2 豐水期檢出率比較

豐水期一般為5月—9月，此時(shí)間段氣溫持續(xù)升高且多為雨水充沛或高山溶雪補(bǔ)給的時(shí)期，因此水中菌群異常活躍、導(dǎo)致微生物的大量繁殖，若未能徹底消毒，在飲用后可引起感染。如表2所示，在豐水期分別采用濾膜法與多管發(fā)酵法檢測(cè)后，兩種方法在大腸菌群、雜菌的檢出數(shù)量之間無顯著性差異（P>0.05），與濾膜法（對(duì)照組）相比，多管發(fā)酵法（觀察組）在大腸埃希菌、耐熱大腸菌群的檢出數(shù)量較高（P<0.05）。

3 結(jié)論與討論

水是一切生命活動(dòng)的起源，是人類及動(dòng)植物生命過程中不可缺少的一項(xiàng)重要資源，也是生物體重要的組成部分。社會(huì)的可持續(xù)發(fā)展離不開工業(yè)、農(nóng)業(yè)及城市建設(shè)，就目前的情況來看，工業(yè)生產(chǎn)時(shí)排放未處理的廢水、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中大量使用農(nóng)藥和肥料，及城市垃圾、廢氣與污水等是造成水污染的主要原因，水質(zhì)污染的情況也越發(fā)嚴(yán)重。水污染直接影響到飲用水源的水質(zhì)，同時(shí)飲用水源中的微生物總含量超標(biāo)也對(duì)人們的健康造成嚴(yán)重影響，水污染已成為威脅人類生命安全的重要問題。因此，有關(guān)部門還需加強(qiáng)對(duì)水源的保護(hù)，切實(shí)提高對(duì)飲用水質(zhì)的檢測(cè)技術(shù)，已保障生活飲用水的水質(zhì)質(zhì)量。

微生物檢測(cè)是評(píng)價(jià)水源、生活飲用水水質(zhì)情況的一項(xiàng)重要指標(biāo)，加強(qiáng)對(duì)水質(zhì)的監(jiān)測(cè)、提高檢測(cè)合格率，是保障居民用水安全，預(yù)防水源性疾病的重要手段[7-8]。在日常飲水的微生物檢測(cè)方法中，多管發(fā)酵法是研究水樣大腸菌類的一種使用率較高的方法，能夠有效檢測(cè)水中的總大腸菌群。總大腸菌群的主要種類是革蘭氏陰性菌，它是無芽孢桿菌，在36 ℃培養(yǎng)24 h的條件下，此類菌種會(huì)產(chǎn)生發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，而其自身具有需氧、厭氧的屬性，可利用培養(yǎng)基以及其他試劑實(shí)施培養(yǎng)及檢測(cè)[9]。本實(shí)驗(yàn)中采用濾膜法及多管發(fā)酵法均能檢出水源中大腸菌群和雜菌，且兩種方法檢出的數(shù)量之間存在顯著差異性，但對(duì)于大腸埃希菌和耐熱大腸菌群而言，多管發(fā)酵法檢出的數(shù)量更高（P<0.05）。

綜上所述，在對(duì)飲用水質(zhì)量進(jìn)行控制的過程中采用合理的措施，可以促進(jìn)飲用水的質(zhì)量得到提升，保證人們的身體健康，使人們可以飲用質(zhì)量合格的生活飲用水。

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