腫瘤細(xì)胞免疫治療的挑戰(zhàn)和機(jī)遇

鄭志元 劉穎斌 劉贇

通信作者：劉穎斌，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，長(zhǎng)江學(xué)者特聘教授。現(xiàn)任上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院膽胰外科主任、普外科主任，上海市腫瘤研究所所長(zhǎng)，癌基因與相關(guān)基因國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室副主任。長(zhǎng)期從事膽道惡性腫瘤的臨床與基礎(chǔ)研究，相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在Nature Genetics、GUT、Journal of Hepatology等國(guó)際知名雜志，并獲得華夏醫(yī)學(xué)科技一等獎(jiǎng)、教育部科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)、教育部高校自然科學(xué)一等獎(jiǎng)、中華醫(yī)學(xué)科技二等獎(jiǎng)、吳階平—保羅·楊森醫(yī)學(xué)藥學(xué)獎(jiǎng)、藥明康德生命化學(xué)研究獎(jiǎng)、上海市科學(xué)技術(shù)自然一等獎(jiǎng)等獎(jiǎng)項(xiàng)。并入選國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生突出貢獻(xiàn)中青年專(zhuān)家，國(guó)家百千萬(wàn)人才工程，上海市科技精英，上海市優(yōu)秀學(xué)術(shù)帶頭人，上海市領(lǐng)軍人才等人才項(xiàng)目，目前已主持包括國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)、國(guó)際合作、面上項(xiàng)目等10余項(xiàng)。

通信作者：劉贇，博士，研究員。本科畢業(yè)于浙江大學(xué)，在中科院上海生命科學(xué)研究院獲博士學(xué)位。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院上海市腫瘤研究所研究員，主要從事腫瘤的靶向治療與細(xì)胞免疫治療研究，研究成果發(fā)表在Nature Genetics、Nature Communication、GUT、Clinical Cancer Research、Journal of Hematology＆Oncology等國(guó)際知名期刊，被引用超過(guò)1000次。先后獲得中華醫(yī)學(xué)科技獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)，教育部高等學(xué)校科學(xué)研究?jī)?yōu)秀成果獎(jiǎng)（自然科學(xué)）一等獎(jiǎng)和上海市科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)自然科學(xué)一等獎(jiǎng)等獎(jiǎng)項(xiàng)。

摘要：腫瘤是目前嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康的主要疾病之一，每年因腫瘤死亡的人數(shù)居世界所有疾病之首，2020年全世界新發(fā)癌癥病例高達(dá)1930萬(wàn)例，死亡人數(shù)近1000萬(wàn)。腫瘤細(xì)胞的免疫治療是當(dāng)今腫瘤治療的熱點(diǎn)之一，具有極其巨大的潛力，但是同時(shí)其在應(yīng)用到臨床治療上面臨著巨大挑戰(zhàn)。本文就腫瘤細(xì)胞免疫治療的相關(guān)熱點(diǎn)問(wèn)題及面臨的挑戰(zhàn)機(jī)遇進(jìn)行了綜述。

關(guān)鍵詞：腫瘤 免疫治療 臨床 挑戰(zhàn)

中圖分類(lèi)號(hào)：R730.51文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1006—1533（2022）S2—0041—10

引用本文鄭志元，劉穎斌，劉贇．腫瘤細(xì)胞免疫治療的挑戰(zhàn)和機(jī)遇［J］．上海醫(yī)藥，2022，43（S2）：41—50．

Challenges and opportunities of tumor cell immunotherapy

ZHENG Zhiyuan， LIU Yingbin，LIU Yun

（Department of Biliary-Pancreatic Surgery，Renji Hospital， Shanghai Jiao Tong University School of Medicine，Shanghai 200127，China）

ABSTRACT Caneer is one of the major diseases that seriously threaten human life and health.Everyyear，cancer causes more deaths than any other disease in the world.In 2020，the number of new cancer cases in the world is up to 19.3 million，and the number of deaths is nearly 10 million. Immunotherapy of tumor cells is one of the hot spots in tumor therapy today，which has great potential.But at the same time， it faces great challenges in clinical treatment. In the following，I will expound the hot issues， opportunities and challenges related to tumor cell immunotherapy.

KEY WORDS tumor;immunotherapy;clinie;challenge

腫瘤是目前嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命和健康的主要疾病之一，每年因腫瘤死亡的人數(shù)居所有疾病的前2位。腫瘤細(xì)胞的免疫治療是目前腫瘤治療的熱點(diǎn)之一，極具潛力，與此同時(shí)，其臨床應(yīng)用也面臨巨大挑戰(zhàn)?，F(xiàn)將腫瘤細(xì)胞免疫治療的相關(guān)熱點(diǎn)問(wèn)題及挑戰(zhàn)機(jī)遇綜述如下。

1腫瘤細(xì)胞免疫治療的現(xiàn)狀

腫瘤是目前嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命和健康的主要疾病之一。近年來(lái)每年死于癌癥的患者超過(guò)1000萬(wàn)。目前腫瘤常用的治療方式有手術(shù)、放療、化療、免疫治療、分子靶向治療和中醫(yī)中藥治療等。醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展在手術(shù)，放化療方面取得了極大的進(jìn)步，近年來(lái)，小分子靶向藥物大量出現(xiàn)，抗體藥物（PD-1／PD-L1）也已經(jīng)應(yīng)用于臨床，但是腫瘤的整體治療情況依舊不容樂(lè)觀（2）。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和研究的深入，腫瘤細(xì)胞免疫治療作為一種新的診療技術(shù)收到廣泛關(guān)注，成為腫瘤治療的新手段。

腫瘤細(xì)胞免疫治療一般是指將正常的或者某些具有特定功能的細(xì)胞采用生物工程方法獲取和或通過(guò)體外擴(kuò)增、特殊培養(yǎng)處理后，使這些細(xì)胞具有增強(qiáng)免疫、殺死病原體和腫瘤細(xì)胞、促進(jìn)組織器官和機(jī)體康復(fù)等治療功效，然后將這些細(xì)胞移植或輸入到患者體內(nèi)，新輸入的細(xì)胞可以代替受損細(xì)胞或者具有更強(qiáng)的免疫殺傷功能，從而達(dá)到治療或者緩解疾病的目的。與傳統(tǒng)藥物治療相比，細(xì)胞免疫治療選擇性高，細(xì)胞藥物能感知復(fù)雜的人體內(nèi)環(huán)境，只在特定的環(huán)境中激活；局部濃度高，細(xì)胞藥物可以主動(dòng)遷移到靶組織或靶細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，減少脫靶效應(yīng)；可以個(gè)性化定制，細(xì)胞治療可以針對(duì)特定病人設(shè)計(jì)藥物，并且可應(yīng)用合成生物學(xué)設(shè)計(jì)基因開(kāi)關(guān)控制藥物的合成或釋放，使治療效果最大化。

從1989年首次提出嵌合抗原受體（chimeric antigen receptor，CAR）的概念開(kāi)始，經(jīng)過(guò)了30多年的發(fā)展，嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T-cell，CAR-T）療法經(jīng)過(guò)五代的更迭，終于進(jìn)入臨床使用。1989年以色列科學(xué)家Zelig Eshhar及其團(tuán)隊(duì)3構(gòu)建出了抗體可變區(qū)和TCR恒定區(qū)的嵌合受體，并且證明該嵌合受體能直接接收抗原的刺激信號(hào)。1993年Zelig Eshhar團(tuán)隊(duì)將抗體scFv與 CD3ζ直接融合成一個(gè)蛋白質(zhì)，且證明表達(dá)這樣融合蛋白的T細(xì)胞能傳遞信號(hào)、分泌白細(xì)胞介素并在體外殺死表達(dá)特定抗原的淋巴瘤細(xì)胞，至此第一代CAR-T產(chǎn)生。一代CAR-T回輸體內(nèi)活化的時(shí)間和存在的壽命較短，其根本原因是細(xì)胞識(shí)別腫瘤細(xì)胞后沒(méi)有辦法完全活化。第二代CAR-T細(xì)胞在第一代的基礎(chǔ)上增加了共刺激信號(hào)CD28的胞內(nèi)區(qū)，使改造后的T細(xì)胞也能夠像正常的T細(xì)胞一樣在雙信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的幫助下更好地靶向殺傷癌細(xì)胞，第二代CAR-T確定了CAR-T的基本結(jié)構(gòu)，同時(shí)滿足了通過(guò)抗原抗體的高特異性識(shí)別腫瘤以及識(shí)別后高效活化T細(xì)胞兩種特性。第三代CAR-T在二代CAR-T的基礎(chǔ)上又串聯(lián)了一個(gè)共刺激分子以期望達(dá)到更好的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的效果。但是共刺激信號(hào)不是簡(jiǎn)單的相加，增加多個(gè)共刺激因子也可能因?yàn)楦淖僀AR-T細(xì)胞包內(nèi)段結(jié)構(gòu)域長(zhǎng)度導(dǎo)致原有的信號(hào)減弱或不能傳遞，所以二代和三代CAR-T的比較，需要根據(jù)其療效決定取舍。自此CAR-T在血液瘤領(lǐng)域的治療能力已經(jīng)得到展現(xiàn)，但是在實(shí)體瘤領(lǐng)域的表現(xiàn)卻不盡如人意。實(shí)體瘤表達(dá)的腫瘤相關(guān)的抗原在正常細(xì)胞中同樣會(huì)低水平表達(dá)；實(shí)體瘤內(nèi)部存在異質(zhì)性；腫瘤內(nèi)弱酸性、低氧、缺乏營(yíng)養(yǎng)的特殊微環(huán)境，共同導(dǎo)致了CAR-T效應(yīng)的不理想6]。因此第四代CAR-T細(xì)胞在第二代CAR-T的基礎(chǔ)上引入了促炎癥細(xì)胞因子白介素12（interleukin，IL-12），使CAR在腫瘤抗原刺激下釋放細(xì)胞因子，募集并活化更多的先天性免疫細(xì)胞如巨噬細(xì)胞，識(shí)別并殺傷缺乏T細(xì)胞靶向抗原的腫瘤細(xì)胞，進(jìn)而引起更為廣泛的抗腫瘤效應(yīng)。同時(shí)，釋放的細(xì)胞因子有利于克服腫瘤微環(huán)境的抑制作用。為了進(jìn)一步提高T細(xì)胞在患者體內(nèi)的持久性7。第五代CAR-T在第二代CAR-T的基礎(chǔ)上增加了一個(gè)細(xì)胞質(zhì)IL-2Rβ鏈結(jié)構(gòu)域，帶有STAT3／5的結(jié)合位點(diǎn)，該受體的抗原特異性激活同時(shí)觸發(fā)TCR（通過(guò)CD3ζ域）、共刺激因子（CD28域）和細(xì)胞因子（JAK-STAT3／5信號(hào)），有效地提供了三種協(xié)同信號(hào)，從生理上驅(qū)動(dòng)了T細(xì)胞的激活和增殖。目前，全球共有5種CAR-T治療藥物上市，其中四款為CD19藥物，分別是諾華公司的Kymriah8]，適應(yīng)證為B細(xì)胞前體急性淋巴細(xì)胞性白血病和復(fù)發(fā)或難治彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤；Kite Pharma公司的Yescarta9，適應(yīng)證為復(fù)發(fā)或難治性大B細(xì)胞淋巴瘤和復(fù)發(fā)或難治性濾泡性淋巴瘤，以及Tecartus10]，適應(yīng)證為復(fù)發(fā)或難治性B細(xì)胞淋巴瘤；Juno Therapeutics公司的Breyanzi，適應(yīng)證為復(fù)發(fā)或難治性大B細(xì)胞淋巴瘤。另外一款為B細(xì)胞成熟抗原（B-cell maturation antigen，BCMA）藥物，即Bluebird bio公司的Abecma[12]，適應(yīng)證為復(fù)發(fā)或難治性多發(fā)性骨髓瘤。

目前細(xì)胞免疫治療可分為特異性和非特異性兩大類(lèi)：有特異性的主要是CAR-T，T細(xì)胞受體嵌合T細(xì)胞（T cellreceptor-engineeredT cells，TCR-T），腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（tumor infiltrating lymphocytes，TIL），自然殺傷細(xì)胞（CAR- engineered NK，CAR-NK），樹(shù)突狀細(xì)胞與細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（dendritic cell-cytokine-induced killer cell，DC- CIK）；非特異性的有淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（humanlymphokine-activated killer cells，LAK細(xì)胞），細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells，CIK）。截至2021年4月，全球共有2073種細(xì)胞治療方案用于臨床（研究），較2020年增長(zhǎng)了38％（13）。其中CAR-T在近年來(lái)的細(xì)胞治療臨床試驗(yàn)依然占主流，21年間共有1164種CAR-T治療方案處于研究當(dāng)中，接近80％的CAR-T療法處于臨床I期。TCR-T和CAR-NK也在迅速的發(fā)展，均已有接近200項(xiàng)臨床試驗(yàn)。對(duì)于細(xì)胞治療相關(guān)疾病領(lǐng)域的臨床布局，血液瘤占據(jù)著主導(dǎo)地位，實(shí)體瘤則是未來(lái)創(chuàng)新研發(fā)策略的一條主線。血液瘤細(xì)胞療法靶點(diǎn)和通路分析顯示：CD19、BCMA、CD22和CD20仍然是血液瘤的主要靶點(diǎn)。實(shí)體瘤細(xì)胞療法靶點(diǎn)和通路分析顯示：腫瘤相關(guān)抗原（tumor associatedantigen，TAA）位居實(shí)體瘤靶點(diǎn)首位，靶向Glypicans 2和3（GPC2和GPC3）的細(xì)胞治療藥物增速極快，2019年以來(lái)每年幾乎翻一番。并且大多數(shù)實(shí)體瘤細(xì)胞療法都使用增強(qiáng)型CAR-T細(xì)胞，以克服實(shí)體瘤中抑制性免疫微環(huán)境，并幫助CAR-T細(xì)胞向?qū)嶓w瘤遷移和生存。

細(xì)胞免疫療法的發(fā)展非常迅速，并且擁有很廣闊的前景，但是目前仍舊存在很多的痛點(diǎn)與限制。以CAR-T細(xì)胞療法進(jìn)行舉例，CAR-T細(xì)胞療法是目前唯一存在上市藥物的療法，但是它的廣泛應(yīng)用面臨著較大困難：首先目前的CAR-T療法為自體制備法，制作過(guò)程復(fù)雜，需要從患者體內(nèi)收集足夠數(shù)量的T細(xì)胞，并且及時(shí)完成基因工程對(duì)T細(xì)胞的改造和T細(xì)胞的擴(kuò)增和純化，然而大部分患者由于進(jìn)行了化療或相關(guān)治療，無(wú)法提供足夠多的淋巴細(xì)胞，如果患者存在T細(xì)胞相關(guān)功能障礙，甚至可能面臨CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)失敗或得到低效產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于晚期患者，自體制備法所需要的較長(zhǎng)生產(chǎn)周期可能使其錯(cuò)過(guò)了最佳治療時(shí)間。其次，由于其個(gè)性化和復(fù)雜的生物工程研究過(guò)程，需要大量的資金和專(zhuān)業(yè)人員參與，開(kāi)發(fā)成本高，制備成本高，造成的高昂定價(jià)決定了僅有少數(shù)人可以獲益。CAR-T細(xì)胞已成功實(shí)現(xiàn)血液癌癥的治療，但在治療實(shí)體瘤方面還未取得實(shí)質(zhì)性進(jìn)展。CAR-T細(xì)胞難以進(jìn)入實(shí)體瘤，且不同類(lèi)型的器官都有不同的免疫微環(huán)境，使得在不同類(lèi)型的癌癥患者中測(cè)試CAR-T頗具挑戰(zhàn)。治療耐藥和相關(guān)副反應(yīng)的產(chǎn)生，是每一種治療方法都無(wú)法繞過(guò)的坎：CD19在血液瘤治療上的耐藥出現(xiàn)，提示細(xì)胞療法依然不是一勞永逸的終極方案。細(xì)胞因子釋放綜合征（cytokine release syndrome，CRS）以及神經(jīng)毒性等副作用仍需要更好的解決方案14]。對(duì)于一些罕見(jiàn)癌種例如膽道系統(tǒng)腫瘤的的基礎(chǔ)研究還不夠深入（15]，無(wú)法為進(jìn)一步的細(xì)胞免疫療法開(kāi)發(fā)提供充足的前期研究支持。最后，知識(shí)產(chǎn)權(quán)的斗爭(zhēng)也是阻礙細(xì)胞免疫療法發(fā)展的一大因素，針對(duì)這一新興技術(shù)專(zhuān)利方面的相關(guān)法律法規(guī)還有待進(jìn)一步完善。

目前世界各地對(duì)于細(xì)胞免疫治療的政策存在差異[16]。美國(guó)在1997年通過(guò)了由FDA提交的《對(duì)人體細(xì)胞及組織產(chǎn)品的管理建議》，免疫細(xì)胞療法正式被納入美國(guó)藥品法規(guī)進(jìn)行管理。隨后在2005年聯(lián)邦政府正式頒布了《人體細(xì)胞及組織產(chǎn)品的管理規(guī)定》，作為審批細(xì)胞治療的最主要法律依據(jù)。歐盟則是在2008年正式實(shí)行《先進(jìn)治療醫(yī)藥產(chǎn)品管理規(guī)定》，將細(xì)胞免疫治療作為一種體細(xì)胞治療產(chǎn)品納入了藥品監(jiān)管體系，并且首次提出了“醫(yī)院豁免”的條款，允許醫(yī)生在經(jīng)過(guò)安全性和有效性驗(yàn)證后，為患者個(gè)體進(jìn)行治療[18]。縱觀我國(guó)關(guān)于細(xì)胞治療的政策發(fā)展歷程，可以發(fā)現(xiàn)，我國(guó)在細(xì)胞治療領(lǐng)域制定了一系列重要的政策和法規(guī)，在不同時(shí)期的政策基調(diào)雖然整體來(lái)看是穩(wěn)步推進(jìn)，大力支持的，但是在各個(gè)階段的側(cè)重點(diǎn)也有所不同，主要可分為三個(gè)階段。在20世紀(jì)90年代至2008年，政策開(kāi)始大力支持細(xì)胞治療研究，監(jiān)管較為寬松。2003年才由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布了《人體細(xì)胞治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》，首次將細(xì)胞治療納入了監(jiān)管范圍。直到2009年，衛(wèi)生部發(fā)布了《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》[19]以及《首批允許臨床應(yīng)用的第三類(lèi)醫(yī)療技術(shù)目錄》，免疫細(xì)胞治療技術(shù)被納入可以進(jìn)入臨床研究和臨床應(yīng)用的第三類(lèi)醫(yī)療技術(shù)；要求其首次應(yīng)用于臨床前必須經(jīng)過(guò)衛(wèi)生部組織的安全性、有效性臨床試驗(yàn)研究、論證及倫理審查，且實(shí)行第三方技術(shù)審核制度，取得衛(wèi)生行政部門(mén)批文的醫(yī)療機(jī)構(gòu)在辦理了醫(yī)療技術(shù)等級(jí)后方可開(kāi)展第三類(lèi)醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用。在這一期間，細(xì)胞治療政策上強(qiáng)調(diào)安全，政策導(dǎo)向以穩(wěn)妥為主。直至2015，原國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委取消了第三類(lèi)醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用的準(zhǔn)入審批工作，自此，包括干細(xì)胞和免疫細(xì)胞在內(nèi)的細(xì)胞治療發(fā)展總體上進(jìn)入快車(chē)道，國(guó)家在政策上大力促進(jìn)。國(guó)家發(fā)改委在2017年發(fā)布的《“十三五”生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃》中指出要培育符合國(guó)際規(guī)范的基因治療、細(xì)胞治療和免疫治療等專(zhuān)業(yè)化服務(wù)平臺(tái)，加快發(fā)展細(xì)胞治療和免疫治療等多個(gè)熱門(mén)領(lǐng)域，從而推動(dòng)新型個(gè)體化細(xì)胞治療的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化。國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局在2018年發(fā)布的《知識(shí)產(chǎn)權(quán)重點(diǎn)支持產(chǎn)業(yè)目錄》中明確指出要將干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)、免疫治療、細(xì)胞治療等明確列為國(guó)家重點(diǎn)發(fā)展和亟需知識(shí)產(chǎn)權(quán)支持的重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)之一。2021年中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會(huì)發(fā)布了《醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理嵌合抗體受體T細(xì)胞治療產(chǎn)品臨床應(yīng)用的規(guī)范》，進(jìn)一步完善了對(duì)于CAR-T細(xì)胞上市產(chǎn)品臨床應(yīng)用的管理[20]。

2主要腫瘤細(xì)胞免疫治療療法的技術(shù)迭代

目前處于臨床期的最主要的細(xì)胞免疫療法包括CAR-T、TCR-T、TIL、CAR-NK等（圖1）[21]。CAR-T細(xì)胞療法全稱(chēng)是嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法（chimeric antigenreceptor T-cell immunotherapy），通過(guò)向T細(xì)胞中導(dǎo)入一種人工設(shè)計(jì)的CAR分子，賦予T細(xì)胞全新的靶向活化功能，再將這種改造后的CAR-T細(xì)胞回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，這些CAR-T不再具有主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）限制性，只通過(guò)結(jié)合靶向抗原即可被活化，從而高效殺傷腫瘤細(xì)胞。CAR-T的關(guān)鍵是CAR分子的設(shè)計(jì)，CAR是一種的人工改造的受體分子，它可以賦予免疫細(xì)胞被某個(gè)特定靶點(diǎn)激活的特異性，從而增強(qiáng)細(xì)胞識(shí)別抗原信號(hào)與活化的功能。目前主要用于血液瘤治療，正在開(kāi)發(fā)實(shí)體瘤上的使用可能?；赥細(xì)胞的療法目前必須使用患者自體細(xì)胞，且國(guó)內(nèi)通常回輸周期為2～3周，CRS和神經(jīng)毒性是其常見(jiàn)的副作用。CAR-T細(xì)胞的特點(diǎn)易于改造，可以制備成靶向多靶點(diǎn)的CAR-T、能使CAR-T表達(dá)改善腫瘤微環(huán)境的細(xì)胞因子或者解除免疫抑制。

TCR-T細(xì)胞療法是通過(guò)篩選和鑒定能夠特異性結(jié)合靶點(diǎn)抗原的TCR序列，采用基因工程手段將其轉(zhuǎn)入患者外周血來(lái)源的T細(xì)胞中（或異源T細(xì)胞），再將改造后的T細(xì)胞回輸至患者體內(nèi)，使其特異性識(shí)別和殺傷表達(dá)抗原的腫瘤細(xì)胞，從而達(dá)到治療腫瘤的目的。TCR-T細(xì)胞療法也是一種過(guò)繼細(xì)胞療法（adoptive cell transfer therapy，ACT），其細(xì)胞來(lái)源、制備周期以及副作用等和CAR-T相似，但是T細(xì)胞體內(nèi)擴(kuò)增的能力遠(yuǎn)低于CAR-T。目前所有的研究均處于臨床試驗(yàn)階段，研究的方向主要集中在實(shí)體瘤[22]。

TIL細(xì)胞療法是指在腫瘤組織內(nèi)浸潤(rùn)了大量T細(xì)胞，這些細(xì)胞中存在部分針對(duì)腫瘤特異性抗原的T細(xì)胞，是能夠深入腫瘤組織內(nèi)部殺傷腫瘤的免疫細(xì)胞，TIL療法將腫瘤組織中的T細(xì)胞分離出，在體外進(jìn)行刺激擴(kuò)增后，回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而擴(kuò)大免疫應(yīng)答，治療原發(fā)或繼發(fā)腫瘤的方法[23]。由于其細(xì)胞來(lái)源的特殊性，TIL細(xì)胞療法在對(duì)于實(shí)體瘤的治療突破中有著舉足輕重的地位。

NK細(xì)胞即自然殺傷細(xì)胞，具有強(qiáng)力殺傷腫瘤細(xì)胞的能力，且不具M(jìn)HC限制性（24]。CAR-NK過(guò)繼細(xì)胞療法是指將NK細(xì)胞經(jīng)過(guò)CAR基因修飾，賦予NK細(xì)胞靶向識(shí)別腫瘤細(xì)胞的能力，經(jīng)過(guò)體外擴(kuò)展后注入人體從而達(dá)到腫瘤治療的效果。目前臨床上使用的NK細(xì)胞主要有5種來(lái)源：人外周血（peripheral blood，PB）、臍帶血（umbilical cord blood，UCB）、人胚胎干細(xì)胞（human embryonic stem cells，hESCs）、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）以及NK-92細(xì)胞系。相較于CAR-T細(xì)胞療法，CAR-NK來(lái)源廣泛，更加適于進(jìn)行體外培養(yǎng)和基因改造，有潛力應(yīng)用于同種異體；實(shí)體腫瘤對(duì)抗原依賴型的NK細(xì)胞敏感，CAR-NK對(duì)抗實(shí)體腫瘤有優(yōu)勢(shì)；此外，CAR-NK制作過(guò)程更加簡(jiǎn)單，有望大大縮短治療周期和價(jià)格[25]。

研究者們對(duì)于細(xì)胞療法有效性，安全性和普適性的不斷探索與追求，推動(dòng)著細(xì)胞療法技術(shù)的不斷迭代，我們?cè)诒?中對(duì)4種主要的細(xì)胞免疫治療方法的特點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)。

有效性是CAR-T療法的核心優(yōu)勢(shì)和關(guān)鍵競(jìng)爭(zhēng)力，盡管CAR-T療法（尤其是靶向CD19的二代CAR-T）在治療B-ALL上表現(xiàn)了相當(dāng)高的有效性（80％～90％的反應(yīng)率），但是對(duì)其他類(lèi)型的血液瘤和實(shí)體瘤上效果欠佳[26]。目前已知的原因包括：腫瘤逃逸：CAR-T細(xì)胞識(shí)別的抗原種類(lèi)有限，難以獲得腫瘤特異性表面抗原，且腫瘤細(xì)胞能夠通過(guò)內(nèi)吞抗原，改變抗原結(jié)構(gòu)，下調(diào)抗原表達(dá)等方式逃脫CAR-T的靶向。免疫抑制：腫瘤局部抑制性的免疫微環(huán)境，會(huì)使CAR-T細(xì)胞功能耗竭，使其免疫活性難以維持，此外CAR作為人工改造的蛋白具有一定免疫原性，自身免疫系統(tǒng)的攻擊，會(huì)影響CAR-T細(xì)胞在患者體內(nèi)的存活和增殖，從而影響治療效果。無(wú)法進(jìn)入腫瘤內(nèi)部：CAR-T細(xì)胞輸入患者體內(nèi)后，會(huì)識(shí)別并結(jié)合在腫瘤組織外圍難以進(jìn)入腫瘤組織內(nèi)殺傷腫瘤細(xì)胞。針對(duì)腫瘤抑制和逃逸，Autolus公司研發(fā)出了全球首個(gè)靶向CD19和CD22的雙靶向CAR-T療法AUTO3[27]，不僅得到了可以同時(shí)靶向CD19和CD22的CAR-T，以此來(lái)減少腫瘤抗原逃逸，增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別。同時(shí)在胞內(nèi)段加入了OX40／4-1BB共刺激區(qū)域來(lái)提高CAR-T細(xì)胞活化的持久性。Aleta公司則是針對(duì)CD19陰性腫瘤細(xì)胞，開(kāi)發(fā)了CD19橋接蛋白[28]，將另一個(gè)腫瘤細(xì)胞表達(dá)的表面蛋白（例如CD20）抗體和CD19鏈接，此橋接蛋白能夠通過(guò)靶向另一個(gè)表面蛋白而使得腫瘤細(xì)胞表面攜帶CD19，轉(zhuǎn)變?yōu)椤皞蜟D19陽(yáng)性”細(xì)胞，從而使CD19 CAR-T療法對(duì)不表達(dá)CD19的腫瘤細(xì)胞生效。Noile-Immune Biotech公司將Koji Tamada博士團(tuán)隊(duì)的研究轉(zhuǎn)化為專(zhuān)項(xiàng)技術(shù)PRIME，通過(guò)改造CAR-T細(xì)胞使其同時(shí)產(chǎn)生白介素7（IL-7）和CCL19。IL-7可以促進(jìn)T細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活而CCL19可以增強(qiáng)T細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞的遷移。此技術(shù)從改善CAR-T細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞向?qū)嶓w瘤的運(yùn)輸遷移、激活宿主免疫系統(tǒng)以誘導(dǎo)對(duì)各種癌癥抗原以及靶蛋白陰性的腫瘤細(xì)胞的免疫反應(yīng)，以解決腫瘤異質(zhì)性問(wèn)題、幫助產(chǎn)生免疫記憶，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)三個(gè)方面促進(jìn)了對(duì)腫瘤的靶向殺傷。

在用CAR-T細(xì)胞治療的患者中觀察到系統(tǒng)性細(xì)胞因子水平的增加，反映了CAR-T細(xì)胞與癌細(xì)胞和／或宿主免疫系統(tǒng)細(xì)胞的強(qiáng)相互作用。目前已知CAR-T治療可能帶來(lái)的副作用包括細(xì)胞因子釋放綜合征、神經(jīng)毒性、脫靶效應(yīng)、全身性過(guò)敏反應(yīng)等，其中兩個(gè)標(biāo)志性臨床毒性是細(xì)胞因子釋放綜合征（cytokine release syndrome， CRS）和免疫效應(yīng)細(xì)胞相關(guān)神經(jīng)毒性綜合征（immuneeffector cell-associated neurotoxicity syndrome，ICANS）。為了達(dá)到臨床療效，同時(shí)避免全身性細(xì)胞因子毒性，CAR-T細(xì)胞必須達(dá)到激活和細(xì)胞因子分泌的閾值水平，而不超過(guò)導(dǎo)致細(xì)胞因子釋放惡性循環(huán)的水平[29]。Abbvie和Calibr共同開(kāi)發(fā)CLBR001＋SWI019的分子開(kāi)關(guān)CAR-T 療法，將CAR-T細(xì)胞置于一種新的分子“開(kāi)關(guān)”的控制之下，該開(kāi)關(guān)一端可以識(shí)別腫瘤細(xì)胞的表面蛋白，另一端可以和配套的CAR-T細(xì)胞結(jié)合激活CAR-T細(xì)胞，該分子開(kāi)關(guān)是CAR-T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞間的媒介，只有分子開(kāi)關(guān)存在下CAR-T細(xì)胞才能被激活，通過(guò)控制分子開(kāi)關(guān)的使用控制患者體內(nèi)的免疫反應(yīng)強(qiáng)度，在安全方面有顯著優(yōu)勢(shì)，目前該療法已經(jīng)進(jìn)入臨床I期。Arcellx公司研發(fā)了一種可控可調(diào)的細(xì)胞治療平臺(tái)-ARC-SparX，該平臺(tái)由兩部分組成：SparX蛋白，能夠與病變細(xì)胞上的特定抗原結(jié)合，然后標(biāo)記這些細(xì)胞以供ARC-T細(xì)胞破壞；ARC-T細(xì)胞，是一種與SparX蛋白結(jié)合并殺死標(biāo)記細(xì)胞的工程免疫細(xì)胞。ARC-T細(xì)胞本身不能識(shí)別病變細(xì)胞，只有在與細(xì)胞抗原結(jié)合的SparX蛋白結(jié)合時(shí)才會(huì)激活。該平臺(tái)通過(guò)條件性激活的方式顯著地提高了安全性。Cartesian公司是mRNA工程化細(xì)胞療法的先驅(qū)，他們開(kāi)發(fā)的RNAArmory平臺(tái)可以mRNA工程化任何細(xì)胞，以靶向任何組織以及聯(lián)合治療[30]。該平臺(tái)發(fā)揮治療功效的途徑主要有4個(gè)步驟：①多種mRNA同時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染；②mRNA進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)被翻譯成多種治療性蛋白；③將mRNA工程化細(xì)胞回輸給患者；④這些表達(dá)治療性蛋白的細(xì)胞進(jìn)入疾病部位發(fā)揮治療功效。由于mRNA在體內(nèi)發(fā)揮作用后會(huì)被降解，因此mRNA工程化細(xì)胞不會(huì)導(dǎo)致免疫細(xì)胞在體內(nèi)不受控制得活化，也不存在改變患者工程細(xì)胞基因組的未知的長(zhǎng)期風(fēng)險(xiǎn)，該療法相對(duì)傳統(tǒng)CAR-T更安全。y8T細(xì)胞（gamma delta T cell，GDT細(xì)胞）是人體中固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分，是能夠分泌多種細(xì)胞因子具有細(xì)胞毒性的T細(xì)胞亞群，也是天然的抗腫瘤免疫細(xì)胞。盡管GDT的TCR所能識(shí)別的抗原種類(lèi)較少，但表面的TCR沒(méi)有MHC限制性，只需要識(shí)別抗原即可被活化，免疫反應(yīng)速度快。TC BioPharm公司基于yδT的CAR-T細(xì)胞療法將CAR-T與來(lái)自GDT的天然泛癌癥TCR信號(hào)結(jié)合，使得表達(dá)靶抗原的健康細(xì)胞不會(huì)被殺死，毒性更低，與細(xì)胞因子釋放相關(guān)的嚴(yán)重副作用的可能性也降低。目前的CAR-T療法中所用的CAR分子對(duì)靶向抗原具有極高的親和力，但越來(lái)越多的研究表明這可能不是最優(yōu)的選擇，因?yàn)檫^(guò)高親和力的CAR-T細(xì)胞還可能錯(cuò)誤殺傷部分抗原表達(dá)量較低的正常細(xì)胞。此外高親和力CAR-T細(xì)胞容易被持續(xù)活化，更容易發(fā)生功能耗竭，失去殺傷能力。而低親和力的CAR-T細(xì)胞可以更好得選擇性結(jié)合高表達(dá)抗原的腫瘤細(xì)胞，且其活化過(guò)程和人體T細(xì)胞的自然活化過(guò)程更相似，治療過(guò)程也更安全，具有更好的持久殺傷效果。AffyImmune的專(zhuān)有技術(shù)允許微調(diào)CAR-T細(xì)胞親和力，以選擇性地殺死抗原過(guò)表達(dá)的腫瘤細(xì)胞，降低毒性3。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明親和力調(diào)節(jié)后的CAR-T細(xì)胞具有更強(qiáng)大且持久的腫瘤根除效果，且無(wú)毒性。

目前FDA批準(zhǔn)的CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品以及迄今為止臨床試驗(yàn)中使用的大多數(shù)產(chǎn)品都是使用從預(yù)期受體患者身上獲得的自體T細(xì)胞制造的。這種個(gè)性化的抗癌治療方法在臨床上取得了顯著的成功，但是這種生產(chǎn)方式制備成本高、周期長(zhǎng)、對(duì)癌癥患者身體情況要求高、也限制了大規(guī)模生產(chǎn)和惠及患者人數(shù)?；蚓庉嫾夹g(shù)使同種異體細(xì)胞得以實(shí)現(xiàn)，從捐贈(zèng)者體內(nèi)收集T細(xì)胞，通過(guò)基因組編輯技術(shù)來(lái)消除同種異體供體T細(xì)胞中αβTCR和／或MHCI類(lèi)（MHCI）復(fù)合物的表達(dá)，避免供體T細(xì)胞與患者發(fā)生免疫排斥[32]。Fate公司以及Cartherics公司均通過(guò)利用誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞，誘導(dǎo)生成均一化的高治療的目的細(xì)胞，對(duì)這些目的細(xì)胞進(jìn)行改造，生產(chǎn)出質(zhì)量可控的、同質(zhì)化的、可重復(fù)給藥的通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品33]。Celularity公司則是利用人胎盤(pán)抽取干細(xì)胞，衍生出多樣的細(xì)胞庫(kù)，為不同的臨床需求提供選擇：基于胎盤(pán)干細(xì)胞的通用型CAR-T，無(wú)需特殊定制，可縮短患者等待時(shí)間，提高療效；同種異體胎盤(pán)CAR-NK細(xì)胞34，受體內(nèi)環(huán)境影響小，表達(dá)的蛋白少，可以減少腫瘤免疫逃逸和患者的免疫排斥。近日，Allogene宣布啟動(dòng)CD19靶向的UCAR-T療法ALLO-501A的關(guān)鍵性II期研究，用于復(fù)發(fā)／難治性大B細(xì)胞淋巴瘤（r／rLBCL）治療。這是業(yè)界首個(gè)進(jìn)入臨床II期的UCAR-T療法。

細(xì)胞免疫療法在血液瘤領(lǐng)域已經(jīng)卓有成效，如何從血液瘤到實(shí)體瘤，我們還面臨著幾大難點(diǎn)：實(shí)體瘤缺乏類(lèi)似CD19這種在血液腫瘤中特異性存在的TAA，導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞的分子靶點(diǎn)會(huì)同時(shí)出現(xiàn)在癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的表面，從而導(dǎo)致殺傷非腫瘤細(xì)胞的嚴(yán)重副作用；實(shí)體腫瘤往往表現(xiàn)出很大程度的抗原異質(zhì)性。許多腫瘤只有一部分細(xì)胞表達(dá)靶抗原。即使在一致表達(dá)的TAA的背景下，也存在著抗原丟失或抗原逃逸的可能性；腫瘤周?chē)Ｓ形锢砘|(zhì)及較高的組織壓力。這常常是CAR-T細(xì)胞難于進(jìn)入腫瘤發(fā)揮作用的第一道屏障。腫瘤微環(huán)境大多為低氧及營(yíng)養(yǎng)饑餓狀態(tài)，抑制了T細(xì)胞增殖及產(chǎn)生細(xì)胞因子。腫瘤的可溶因子及細(xì)胞因子同樣可能降低CAR-T細(xì)胞的效能，如前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）、腺苷等；腫瘤微環(huán)境中存在各種免疫抑制細(xì)胞如Treg、骨髓源性抑制細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cells， MDSC）和抑制性免疫分子如PD-L1和PD-1等，使得進(jìn)入腫瘤中的CAR-T細(xì)胞功能被抑制[35]。

針對(duì)實(shí)體瘤的挑戰(zhàn)，研究人員需要?jiǎng)?chuàng)新CAR-T技術(shù)，利用包括腫瘤微環(huán)境的特性、T細(xì)胞趨化能力的影響因子、新型腫瘤相關(guān)抗原靶點(diǎn)等方面，對(duì)細(xì)胞的活性、趨化能力等開(kāi)展針對(duì)性的改進(jìn)36]。Coaudin18.2作為新型腫瘤相關(guān)抗原靶點(diǎn)，可能成為實(shí)現(xiàn)難治性實(shí)體瘤的一個(gè)突破[3]。Coaudin18.2是位于細(xì)胞膜上的一個(gè)跨膜蛋白，表達(dá)于正常胃黏膜組織中，以及高度選擇性、穩(wěn)定地表達(dá)于特定腫瘤組織，參與腫瘤細(xì)胞的增殖分化和遷移，例如胃癌、食管癌、胰腺癌等癌癥組織。這使其成為潛在的抗腫瘤藥物有效分子靶點(diǎn)。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，Claudin18.2并不是一個(gè)完美的腫瘤特異性靶點(diǎn)，有同族相似結(jié)構(gòu)的蛋白Claudin18.1，并且廣泛表達(dá)于正常組織中，治療過(guò)程中會(huì)有一定的脫靶毒性。但目前的研發(fā)水平能夠盡量精準(zhǔn)靶向Claudin18.2，而不識(shí)別同族蛋白，此外Claudin18.2靶向治療所帶來(lái)的臨床副作用多為惡心、嘔吐等消化道癥狀，是可控可接受的。目前國(guó)內(nèi)外約有數(shù)十種的Claudin18.2靶向創(chuàng)新療法處于臨床I期。Imugene公司開(kāi)發(fā)了一種新穎有效的聯(lián)合免疫療法：溶瘤病毒與CAT聯(lián)用，利用CF33溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)CF33-CD19，誘導(dǎo)CD19CAR-T細(xì)胞識(shí)別，從而實(shí)現(xiàn)抗實(shí)體腫瘤反應(yīng)[38]。最新的臨床前實(shí)驗(yàn)顯示：用小鼠試驗(yàn)測(cè)試了該療法對(duì)三陰乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、腦癌等不同癌癥的治療效果。發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療比溶瘤病毒和CAR-T單獨(dú)治療的療效更好。Leucid公司研發(fā)出了新一代平行CAR模型Parallel CAR：兩個(gè)共刺激域平行整合在細(xì)胞膜上，復(fù)制其在正常免疫細(xì)胞中跨細(xì)胞膜的自然并排位置。區(qū)別于1～3代共刺激域線性串聯(lián)排列的傳統(tǒng)CAR模型，新模型可以低毒性、高特異性地識(shí)別80％的腫瘤，并且能夠更好地控制T細(xì)胞活化，提高效力和聯(lián)系殺傷，增加CAR-T細(xì)胞在血液中的存活時(shí)間和腫瘤浸潤(rùn)。TIL療法是針對(duì)實(shí)體瘤的一種高度個(gè)性化的方法，Iovance公司旨在解決削弱天然抗腫瘤免疫反應(yīng)的多種障礙，在TIL離體培養(yǎng)擴(kuò)增的過(guò)程中，消除腫瘤產(chǎn)生的免疫抑制環(huán)境，在相同的培養(yǎng)環(huán)境下優(yōu)化侵襲性抗腫瘤TIL的復(fù)制和激活，使其能夠介導(dǎo)強(qiáng)效的抗腫瘤反應(yīng)并具有較強(qiáng)的持久性。其公司的產(chǎn)品之一Lifileucel（LN-144）[39]，在單藥治療黑色素瘤的2期臨床試驗(yàn)近3年的長(zhǎng)期隨訪中顯示出長(zhǎng)效的抗腫瘤反應(yīng)，更令人驚喜的是，患有PD-L1陰性的患者也有響應(yīng)，這說(shuō)明對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑無(wú)效的患者仍能獲益于TIL療法。TCR2公司開(kāi)發(fā)了一個(gè)TRuC（TCR fusion construct）T細(xì)胞[40]，將腫瘤抗原識(shí)別域直接融合到TCR的一個(gè)亞基上來(lái)設(shè)計(jì)TRuC-T細(xì)胞，并使用慢病毒載體將TRuC構(gòu)建的遺傳信息轉(zhuǎn)移到患者自身的T細(xì)胞中。這種修飾過(guò)的亞基自然地整合到天然的TCR復(fù)合體中，創(chuàng)造了一個(gè)配備了新的“歸位裝置”的工程T細(xì)胞，從而檢測(cè)和接觸癌細(xì)胞表面的特定抗原。這些全新組裝的TCR在接觸到癌細(xì)胞表面抗原后，促使T細(xì)胞更快地遷移到腫瘤，控制細(xì)胞因子分泌，對(duì)癌癥細(xì)胞產(chǎn)生更強(qiáng)大但可控的殺傷作用。該公司正在開(kāi)發(fā)針對(duì)間皮素實(shí)體瘤的TC-210。在臨床前研究中，證明了與CAR-T細(xì)胞相比，TRuC-T細(xì)胞具有更好的抗腫瘤活性和持久性，同時(shí)細(xì)胞因子釋放水平也較低。Kuur Therapeutic引領(lǐng)開(kāi)發(fā)了“off-the-shelf”的CAR-NKT細(xì)胞療法，在實(shí)體瘤治療中，通過(guò)設(shè)計(jì)分泌IL-15來(lái)延長(zhǎng)持久性以及MHC敲低降低免疫原性，其產(chǎn)品KUR-503-一種現(xiàn)成的GPC3靶向同種異體CAR-NKT，在治療晚期肝細(xì)胞癌時(shí)表現(xiàn)出了高活化率，長(zhǎng)持久性和高抗腫瘤活性。KUR-503目前已啟動(dòng)臨床試驗(yàn)。

3腫瘤細(xì)胞免疫療法迎來(lái)新的挑戰(zhàn)和機(jī)遇

隨著近年來(lái)國(guó)內(nèi)外政策的開(kāi)放，國(guó)內(nèi)政策的大力支持，中國(guó)的細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)蓬勃發(fā)展，目前國(guó)內(nèi)從事細(xì)胞治療領(lǐng)域的公司已經(jīng)達(dá)到20多家，并且都在相關(guān)的細(xì)分領(lǐng)域深耕，集中精力以突破當(dāng)下細(xì)胞療法面臨的各個(gè)難點(diǎn)痛點(diǎn)。國(guó)內(nèi)已有CAR-T藥物上市，臨床進(jìn)度達(dá)到II期以上的CAR-T產(chǎn)品已經(jīng)達(dá)到數(shù)十例，適應(yīng)證不僅限于血管瘤，實(shí)體瘤如胰腺癌和甲狀腺癌也開(kāi)發(fā)出了相應(yīng)的藥物。對(duì)于腫瘤治療的整體情況而言，治療結(jié)果并不樂(lè)觀，大部分癌癥，特別是罕見(jiàn)腫瘤如膽囊癌胰腺癌，僅有的治愈方法只有手術(shù)切除，晚期喪失切除機(jī)會(huì)的患者，只能通過(guò)放化療來(lái)延長(zhǎng)生存期。在這一大背景之下，細(xì)胞免疫療法的出現(xiàn)，必定存在著巨大的需求，筆者團(tuán)隊(duì)正致力于胰腺和膽道腫瘤相關(guān)的基礎(chǔ)研究，相信能為相關(guān)腫瘤的細(xì)胞免疫療法提供越來(lái)越充足的理論基礎(chǔ)（2）。如何讓更多患者獲益，如何實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)且有效的治療，如何適應(yīng)目前大數(shù)據(jù)噴發(fā)、新技術(shù)和藥物不斷涌現(xiàn)的局面，以及如何建立細(xì)胞基因治療相關(guān)工藝和工業(yè)化體系都是目前細(xì)胞免疫治療新的挑戰(zhàn)和機(jī)遇。同其他治療方式類(lèi)似，細(xì)胞免疫治療也會(huì)出現(xiàn)不良反應(yīng)，我們需要從更多的臨床病例中積累經(jīng)驗(yàn)，掌握不良反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展機(jī)制并尋找預(yù)防和治療的方法，從而減少細(xì)胞基因治療可能帶來(lái)的不良反應(yīng)。如果可以攻克技術(shù)難關(guān)，控制不良反應(yīng)，使其實(shí)現(xiàn)比化療和靶向治療更小的傷害，將會(huì)推動(dòng)細(xì)胞治療從臨床上的末線治療向前走?；谧泽w細(xì)胞的治療方式受到患者自身情況的限制，患者本身可能存在免疫缺陷，晚期患者無(wú)法承受較長(zhǎng)的制備周期，通用型細(xì)胞的研究和開(kāi)放將會(huì)是解決問(wèn)題的關(guān)鍵。成本和價(jià)格問(wèn)題是無(wú)法避免的一個(gè)問(wèn)題，更是患者最為關(guān)注的問(wèn)題，一些早期患者受限于其昂貴的價(jià)格，只有在沒(méi)有替代療法時(shí)才迫不得已選擇細(xì)胞療法。對(duì)于開(kāi)發(fā)模式的改進(jìn)以及生產(chǎn)方式的優(yōu)化，都有助于成本的降低，擴(kuò)大適應(yīng)患者群體。細(xì)胞基因治療產(chǎn)品生產(chǎn)主要涉及到以下3種工藝：腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞的篩選，免疫細(xì)胞的體外擴(kuò)增，T細(xì)胞的高效基因改造。但是我國(guó)的細(xì)胞生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)仍舊沒(méi)有建立，與西方國(guó)家較為成熟的體系存在差距，我們需要工程、機(jī)械、化學(xué)、生物以及醫(yī)學(xué)等多領(lǐng)域共同合作從而開(kāi)發(fā)全自動(dòng)、全封閉、操作簡(jiǎn)單且符合臨床需求的硬件和軟件系統(tǒng)，自動(dòng)化生產(chǎn)體系的建立是成敗的關(guān)鍵。細(xì)胞治療的巨大需求，給眾多的技術(shù)平臺(tái)提供了發(fā)展空間，技術(shù)平臺(tái)的發(fā)展和標(biāo)準(zhǔn)化將會(huì)給細(xì)胞治療帶來(lái)無(wú)與倫比的前景。隨著基礎(chǔ)研究和臨床研究的進(jìn)展，會(huì)涉及大量的知識(shí)產(chǎn)權(quán)問(wèn)題，目前關(guān)于細(xì)胞基因治療的相關(guān)專(zhuān)利主要掌握在國(guó)外研究機(jī)構(gòu)和藥廠手中。我國(guó)在細(xì)胞基因治療領(lǐng)域相對(duì)發(fā)達(dá)國(guó)家還處于起步階段，需要加大基礎(chǔ)研發(fā)支持力度，打破國(guó)外對(duì)細(xì)胞基因治療知識(shí)產(chǎn)權(quán)壟斷的局面，這是未來(lái)支撐細(xì)胞基因治療研究和發(fā)展的關(guān)鍵。

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（收稿日期：2022-09-26）