羅朝軍,陳 頂,姜應(yīng)杰,趙梓鈞,陳鵬超,謝 杰,盧 玲,張雪芹,梁順線
(1.貴州煙葉復(fù)烤有限責任公司貴陽復(fù)烤廠,貴州貴陽 550005;2.中國煙草貴州進出口有限責任公司,貴州貴陽 550003;3.貴州輕工職業(yè)技術(shù)學院/貴州山地特色水果及其制品工程研究中心,貴州貴陽 550025;4.中華人民共和國貴陽海關(guān),貴州貴陽 550032)
煙草甲,拉丁名Lasioderma serricorne(F.),英文名Cigarette beetle,屬于竊蠹科Anobiidae 下的鞘翅目Coleoptera。作為世界倉儲害蟲之一,煙草甲不僅會對煙草造成影響,還會影響國家的貿(mào)易形象,造成難以估量的損失[1-3]。
煙草作為我國重要的經(jīng)濟作物,在儲藏期間極易受到煙草甲危害而造成品質(zhì)下降,所以需要對其進行防治,但目前對其的防治方式主要是物理防治[4-6]、生物防治[7-9]和化學防治[10-12]。即使現(xiàn)在在開發(fā)昆蟲激素[13-15]等類似對環(huán)境友好的防治方法目前化學防治的優(yōu)勢是簡便快捷、使用較廣的防治方法,仍是國內(nèi)外煙草倉庫控制煙草甲時倉庫清潔的主要輔助手段,如磷化鋁[16-18]、氮氣[19-21]、氧氣[22]、二氧化碳[23-25]、硫酰氟[26]等化學氣體熏蒸劑,烯蟲酯[27]、高效氯氟氰菊酯[22]、溴氰菊酯[22]等化學農(nóng)藥都是極佳的化學防治方式。
氟氯氰菊酯Cyfluthrin[29]、敵敵畏Dichlorvos[30-31]和阿維菌素Abamectin[29]等都是對煙草甲具有高效滅殺效果的農(nóng)藥,但目前已被國際煙草科學研究合作中心的第27 號指南煙葉生產(chǎn)中高風險農(nóng)藥的鑒別與消除(Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco,CORESTA Guide N° 27,Identification and Elimination of Highly Hazardous Pesticides (HHPs) in Leaf Tobacco Production)列入高風險農(nóng)藥名單[32]。為避免我國出口煙葉被監(jiān)測到高風險農(nóng)藥有效成分而被拒收,應(yīng)在煙葉生產(chǎn)的各個環(huán)節(jié)杜絕使用相關(guān)農(nóng)藥,且目前還尚未有研究對非高風險農(nóng)藥進行經(jīng)濟分析,在煙草甲的綜合防控中無對應(yīng)參考資料。部分地區(qū)的煙草甲已經(jīng)對磷化鋁產(chǎn)生了抗性。為了避免因煙草甲產(chǎn)生抗性而導(dǎo)致防治效率不高,所以本文以不在高風險農(nóng)藥名單里面的優(yōu)效農(nóng)藥來測定其對煙草甲試驗種群(統(tǒng)一試驗種群,減少可變因素)的毒力,并進行相對經(jīng)濟效益分析,以此為倉庫煙草甲的綜合防治提供參考依據(jù)。
煙草甲在貴州煙葉復(fù)烤有限責任公司貴陽復(fù)烤廠采集,在貴州輕工職業(yè)技術(shù)學院生態(tài)食品農(nóng)產(chǎn)品工程研究中心昆蟲試驗室飼養(yǎng)純化10代以上,用自配飼料(玉米、煙沫、啤酒酵母重量比為9∶5∶5,以電子天平稱量,配置好后在電熱鼓風干燥箱內(nèi)70 ℃滅菌30 min)在溫度33 ℃,相對濕度(75±5)%,光周期10 D∶14 L的條件下飼養(yǎng)。
試驗煙葉:云煙85,由貴州煙葉復(fù)烤有限責任公司貴陽復(fù)烤廠提供。用于試驗開始后供煙草甲取食,避免因無食物造成煙草甲死亡。
人工智能氣候箱(LAC-450HPY-2、由上海龍躍有限公司提供)、1 000 mL 分體一次性餐盒(布丁盒,用于觸殺試驗盛放煙草甲,使用時需在蓋上戳小孔以保證空氣流通,由安徽穎泉區(qū)樂淘酒店用品經(jīng)營部提供)、電熱鼓風干燥箱(101-1AB 型,天津市泰斯特儀器有限公司)、電子天平(JY3002,測量范圍0.2~300 g,上海舜宇恒平科學儀器有限公司)。
保安定(30%甲基嘧啶磷,英國先正達有限公司);凱安保(15%溴氰菊酯,法國拜耳有限責任公司);清源保(1.5%除蟲菊素,內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司);康寬(13%氯蟲苯甲酰胺,河南省鄭州沙隆達偉新農(nóng)藥有限公司);凱恩(10%茚蟲威,美國富美實公司);田秀才苯氧威(3%氨基甲酸乙酯,山東省青島泰生生物科技有限公司)。
參照中華人名共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T 1154.1—2006(農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準則,殺蟲劑,第1 部分:觸殺活性試驗,點滴法),來進行煙草甲的初步毒力測定。
1.4.1 初步毒力測定
依據(jù)類似文獻和農(nóng)藥效力設(shè)定大范圍的初濃度3個(用純水做稀釋),每個濃度3個重復(fù),每個重復(fù)10頭煙草甲。若效果不佳,擴大濃度梯度繼續(xù)試驗。以此來確定正式試驗的5個農(nóng)藥梯度。
成蟲死亡觀測方法:用毛刷輕刷成蟲身體,觀察1 min,若靜止不動,則視為死亡,以下類同。
1.4.2 毒力測定
依據(jù)初步毒力測定結(jié)果,設(shè)定5 個濃度梯度,每個梯度5 個重復(fù),每個重復(fù)20 頭煙草甲成蟲,以純水點滴為空白對照,對照組重復(fù)及數(shù)量和實驗組相同。每頭煙草甲成蟲背板中央點滴1 μL稀釋好的試劑。在第2 天、第4天和第6天觀察并記錄煙草甲成蟲死亡數(shù)量。
在Microsoft Excel 2016 進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計,隨后進行計算并分析:
死亡率=死亡蟲數(shù)/試驗蟲數(shù);
矯正死亡率=(對照組存活率—處理組存活率)/對照組存活率);
半數(shù)致死量:LC50由SPSS的Probit模擬而得。
相對毒力分數(shù):按第6 天LC50排序,從低到高各自得分6、5、4、3、2、1;
相對經(jīng)濟分數(shù):按第6 天LC99(Probit 模擬中無LC100)每667 m2用水50 kg 的防治價格從低到高各自得分6、5、4、3、2、1,(注:價格為2021年11月淘寶購入價格,渠道不同價格會有所差異);
相對推薦分數(shù)=相對毒力分數(shù)+相對經(jīng)濟分數(shù)
通過6 種藥劑對煙草甲的毒力測定試驗,在SPSS的Probit 中模擬了毒力曲線,并獲得了LC50和LC99。相對毒力大?。ㄊ褂糜行С煞謴纳僦炼啵┡帕许樞驗椋杭谆奏ち住被姿嵋阴?、溴氰菊酯、除蟲菊素、茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺,在第6 天的具體數(shù)值分別 是2.432 mg·L-1、6.519 mg·L-1、109.221 mg·L-1、128.308 mg·L-1、156.306 mg·L-1、564.767 mg·L-1。保安定因效果較好,在Probit 模擬時并無LC50的情況,而是LC55,但這對其所得相對毒力分數(shù)并無影響。在第2 天、第4天和第6天的毒力曲線及各自的LC50、LC99差異較大,詳見表1。
表1 煙草甲成蟲6種優(yōu)效農(nóng)藥毒力回歸方程及LC50(LC50單位:mg·L-1)
在得到6種藥劑對煙草甲的毒力回歸方程、LC50和LC99后,和原價及有效成分結(jié)合推算出每667 m2防治價格(每667 m2用50 kg 水),并獲得相應(yīng)的價格分數(shù)(由低到高):30%甲基嘧啶磷、1.5%除蟲菊素、3%氨基甲酸乙酯、10%茚蟲威、15%溴氰菊酯和13%氯蟲苯甲酰胺,具體價格以此是2.61 元、29.79 元、36.20 元、75.91 元、247.09 元、298.91 元。并 以 此 得到相對推薦分數(shù)排序(由高到低):30%甲基嘧啶磷、3%氨基甲酸乙酯、1.5%除蟲菊素、15%溴氰菊酯、10%茚蟲威和13%氯蟲苯甲酰胺,各自的分數(shù)為:12 分、9分、8分、6分、5分、2分。詳見表2。
表2 煙草甲成蟲6種優(yōu)效農(nóng)藥相對推薦分數(shù)表
本研究測定了煙草甲6 種優(yōu)效防治農(nóng)藥的毒力曲線,并模擬初LC50和LC99,相對毒力大小由高至低:甲基嘧啶磷、氨基甲酸乙酯、溴氰菊酯、除蟲菊素、茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺。并結(jié)合購價和有效成分含量推算出每667 m2防治價格,并以此排出相對經(jīng)濟分數(shù)由低至高:30%甲基嘧啶磷、1.5%除蟲菊素、3%氨基甲酸乙酯、10%茚蟲威、15%溴氰菊酯和13%氯蟲苯甲酰胺,以及農(nóng)藥的相對推薦分數(shù)由高至低:30%甲基嘧啶磷、3%氨基甲酸乙酯、1.5%除蟲菊素、15%溴氰菊酯、10%茚蟲威和13%氯蟲苯甲酰胺。
研究中部分農(nóng)藥的有效成分在一些研究中已經(jīng)作了探索,但又有所差異,如薛寶燕等所作甲基嘧啶磷的毒力曲線及LC50不同[30],但他們的飼養(yǎng)條件及飼養(yǎng)飼料與本研究的不同。有研究表明,不同的食物[33-36]和溫濕度[37-38]會影響煙草甲的生長發(fā)育,乃至不同的氧氣濃度都會影響煙草甲的活性[22,39],而從本研究和這些研究者的研究來看,不同的飼料或溫度會影響煙草甲對藥劑的敏感性,而這也會對不同地區(qū)的防控造成影響。并且,不同的光周期對昆蟲的行為影響是巨大的[40],但對不同光周期對煙草甲的影響尚未研究。