細(xì)胞色素P450家族成員CYP2E1,CYP3A4和CYP1A2表達(dá)與HCC發(fā)生有關(guān)并可作為HCC診斷和預(yù)后的分子標(biāo)志物

0 引言

肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)較為常見(jiàn)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤.流行病數(shù)據(jù)預(yù)計(jì),2021年全球范圍內(nèi)HCC每年新發(fā)病例為905677例,因HCC死亡病例為830180例

目前大多數(shù)研究認(rèn)為HCC的發(fā)生主要與乙肝肝硬化有關(guān),HBV感染后造成肝細(xì)胞的持續(xù)損傷、修復(fù)、再損傷循環(huán),從而造成肝硬化,繼而發(fā)生癌變,但其確切發(fā)病機(jī)制不清

大多數(shù)研究認(rèn)為多基因的時(shí)空表達(dá)失調(diào)與HCC的發(fā)生密切相關(guān)

,但涉及HCC有關(guān)的時(shí)空表達(dá)失調(diào)的基因眾多,不同的差異表達(dá)基因在HCC發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)過(guò)程中可能發(fā)揮不同的作用.現(xiàn)有的HCC發(fā)生及生物學(xué)行為相關(guān)基因有Tp53,Bcl-2,Bad-p,Bax

,HULC和H19等

上述基因大多被相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,而HCC差異表達(dá)基因集及其相關(guān)的生物學(xué)功能、與預(yù)后的關(guān)系和診斷價(jià)值鮮有報(bào)道.

1 材料和方法

1.1 材料 研究采用生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)分析,首先在基因綜合表達(dá)數(shù)據(jù)庫(kù)[(gene expression omnibus,GEO)中篩選HCC與正常肝組織基因表達(dá)數(shù)據(jù),然后對(duì)數(shù)據(jù)集中的差異表達(dá)基因進(jìn)行篩選,對(duì)篩選出的差異基因進(jìn)行基因本體論(gene ontology,GO),基因組百科全書(shū)(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)、蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)(protein-protein interaction,PPI)和聚類(lèi)分析.對(duì)差異基因進(jìn)行關(guān)鍵基因(hub基因)鑒定.Kaplan-Meier數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)比關(guān)鍵基因高低表達(dá)與HCC患者預(yù)后關(guān)系.同時(shí),采用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve,ROC)以hub基因?yàn)閰⒖?診斷HCC的價(jià)值,圖1.

研究選取(GEO,https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)、(KEGG,https://www.genome.jp/kegg/pathway.html)、蛋白互相作用拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)(STRING,http://string-db.org/cgi/input.pl)、腫瘤生存分析數(shù)據(jù)庫(kù)(Kaplan-Meier,http://kmplot.com/analysis/index.php?p=service),作為本次研究的主要數(shù)據(jù)來(lái)源.

針對(duì)高校服務(wù)器的分布特點(diǎn)，本文設(shè)計(jì)的基于Elasticsearch 的校內(nèi)全文搜索引擎的總體架構(gòu)如圖1所示，其核心組件包括爬蟲(chóng)模塊、索引模塊以及檢索模塊。

1.2 方法 GEO數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索HCC基因表達(dá)數(shù)據(jù)集,檢索詞為“Hepatocellular carcinoma (HCC)/liver cancer”,種屬為“human”.進(jìn)一步對(duì)檢索到的結(jié)果進(jìn)行篩選,選取GSE62232

、GSE67764

、GSE89377

和GSE112790

四個(gè)數(shù)據(jù)集進(jìn)行分析.根據(jù)數(shù)據(jù)集中HCC與正常肝組織中基因表達(dá)譜情況進(jìn)行篩選,篩選條件為HCC組和正常組中上調(diào)或下調(diào)超過(guò)2個(gè)拷貝的基因,且

<0.05;分別對(duì)GSE62232、GSE67764、GSE89377和GSE112790數(shù)據(jù)集中的差異基因進(jìn)行重疊分析,選取公差異表達(dá)基因,并繪制Venn圖.在STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中對(duì)篩選出的共差異表達(dá)基因進(jìn)行蛋白相互作用拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,構(gòu)建條件為:數(shù)據(jù)來(lái)源Textmining,co-expression,gene function和cooccurrence;相互作用關(guān)系系數(shù)≥0.4;相互作用蛋白不高于20個(gè).在KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)中對(duì)篩選出的差異表達(dá)基因相關(guān)信號(hào)通路進(jìn)行分析富集.物種選擇“human”;通路包含:代謝、遺傳信息、環(huán)境信息、細(xì)胞過(guò)程、人類(lèi)疾病和藥物開(kāi)發(fā)等.采用Cytoscapev3.7.2軟件對(duì)拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)中的hub基因進(jìn)行篩選關(guān)鍵hub基因,篩選依據(jù)為nodescore.在GSE112790數(shù)據(jù)中,根據(jù)HCC與正常肝組織37個(gè)差異基因表達(dá)水平繪制聚類(lèi)熱圖,條件為:行距離:歐氏距離;列距離:歐氏距離.

相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析采用R軟件進(jìn)行,計(jì)量資料應(yīng)用mean±SD表示,腫瘤組織與正常組織比較采用

檢驗(yàn);計(jì)數(shù)采用率表示,應(yīng)用

檢驗(yàn),

<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 H C C差異表達(dá)基因篩選 選取了GSE62232、GSE67764、GSE89377和GSE112790數(shù)據(jù)為研究對(duì)象,四個(gè)數(shù)據(jù)集基本特征見(jiàn)表1.HCC和正常肝組織中差異表達(dá)基因分別為370、1386、76和418(圖2),四個(gè)數(shù)據(jù)集中共差異表達(dá)的基因?yàn)?7個(gè)(圖3).

2.3 差異表達(dá)基因聚類(lèi)分析 根據(jù)HCC與正常肝組織37個(gè)差異基因表達(dá)水平繪制聚類(lèi)熱圖,腫瘤組織與正常組織間聚類(lèi)明顯,見(jiàn)圖4.

2.4 PPI拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)及hub基因 37個(gè)HCC與正常肝組織差異表達(dá)基因繪制PPI拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò),網(wǎng)絡(luò)中有42個(gè)蛋白節(jié)點(diǎn),145個(gè)作用關(guān)系,平均作用度為6.9,區(qū)域聚類(lèi)指數(shù)為0.586,富集顯著(

<0.05),見(jiàn)圖5.Cytoscapev3.7.2軟件對(duì)拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)中的hub基因進(jìn)行篩選,

,

和

為37個(gè)差異基因中的前三個(gè)hub基因,見(jiàn)圖6.

近年來(lái)隨著分子生物和高通量測(cè)序、芯片技術(shù)的發(fā)展,HCC發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移、預(yù)后和診斷等分子標(biāo)志物成為了研究熱點(diǎn).對(duì)HCC患者和正常人群進(jìn)行高通量差異表達(dá)基因的篩選,并對(duì)篩選的結(jié)果進(jìn)一步分析,有望鑒定出HCC特異表達(dá)基因譜,為HCC的診斷、預(yù)后、靶向藥物研發(fā)提供新的靶點(diǎn)和思路.為了篩選HCC和健康人體肝臟組織之間的差異表達(dá)基因(different expressed genes,DEGs),我們從GEO數(shù)據(jù)庫(kù)中下載了4個(gè)基因表達(dá)譜,以獲得HCC組織和正常組織樣本之間的DEGs.通過(guò)GO注釋和KEGG信號(hào)通路富集,對(duì)所選的DEGs進(jìn)行潛在功能分析.同時(shí),對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行了聚類(lèi)分析,并利用Cytoscape軟件構(gòu)建蛋白-蛋白相互作用拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)核心基因,尋找與HCC相關(guān)的樞紐基因.使用在線數(shù)據(jù)庫(kù)Kaplan-Meier plotter對(duì)這些關(guān)鍵hub基因進(jìn)行生存分析,評(píng)估其高低表達(dá)與HCC患者預(yù)后關(guān)系.研究結(jié)果共納入了4個(gè)數(shù)據(jù)集GSE62232、GSE67764、GSE89377和GSE112790中HCC和正常肝組織中差異表達(dá)基因分別為370、1386、76和418,四個(gè)數(shù)據(jù)集中共差異表達(dá)的基因?yàn)?7個(gè).37個(gè)差異表達(dá)基因主要富集于凋亡細(xì)胞的識(shí)別、過(guò)渡金屬離子結(jié)合,KEGG信號(hào)通路富集于化學(xué)致癌作用等.

,

和

為37個(gè)差異基因中的前三的hub基因;分別以

,

和

為參考診斷HCC的ROC曲線下面積分別為0.83,0.93和0.96,其診斷效能均較高;

、

高表達(dá)組OS和PFS均顯著高于低表達(dá)組且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(

<0.05),而CYP1A2高低表達(dá)組HCC患者OS和PFS無(wú)統(tǒng)計(jì)差異.

2.6 Hub基因與HCC預(yù)后分析

高表達(dá)組總生存率(overall survival,OS)(HR=0.57,95%CI:0.39-0.84),無(wú)疾病進(jìn)展生存(progression free survival,PFS)(HR=0.63,95%CI:0.46-0.88)和

高表達(dá)組OS(0.57,95%CI:0.40-0.81),PFS(0.61,95%CI:0.45-0.83)均顯著高于低表達(dá)組且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(

<0.05),而

高低表達(dá)組HCC患者OS和PFS無(wú)統(tǒng)計(jì)差異(

>0.05),見(jiàn)圖8.

3 討論

肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是較為常見(jiàn)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,預(yù)后差,5年生存率低.然而,雖然HCC的發(fā)生與乙肝病毒感染有關(guān),但確切發(fā)病機(jī)制目前仍不十分清楚.近年來(lái)已有研究提示HCC的發(fā)生與多基因的時(shí)空表達(dá)失調(diào)密切相關(guān).

2.5 Hub基因診斷HCC價(jià)值 三個(gè)hub基因

,

和

在HCC組織中的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組織(

<0.05),見(jiàn)圖6.以

,

和

為參考診斷HCC的ROC曲線下面積分別為0.83(95%CI:0.74-0.93),0.93(95%CI:0.88-0.97)和0.96(95%CI:0.924-0.98),見(jiàn)圖7.

董力就加強(qiáng)水利資金監(jiān)督管理工作提出六點(diǎn)意見(jiàn)。周英在總結(jié)講話中對(duì)水利財(cái)務(wù)工作提出具體要求。水利部總工程師汪洪在會(huì)上宣讀“關(guān)于表?yè)P(yáng)全國(guó)水利財(cái)務(wù)工作先進(jìn)集體和先進(jìn)個(gè)人的通報(bào)”。

為了比較基于LWT-LSSVM的數(shù)控機(jī)床熱誤差建模方法相對(duì)于其他方法的優(yōu)缺點(diǎn)，本文同時(shí)給出了常用的基于最小二乘法支持向量機(jī)(LSSVM)回歸建模的預(yù)測(cè)結(jié)果，兩者比較如圖6所示。從圖中可以看出，基于LWT-LSSVM的預(yù)測(cè)方法獲得的預(yù)測(cè)模型殘差遠(yuǎn)小于最小二乘法支持向量機(jī)的模型殘差，具有更好的模型預(yù)測(cè)效果。

,

和

均為細(xì)胞色素P450 (cytochrome P450)家族成員.既往有文獻(xiàn)報(bào)道

表達(dá)與胃癌、膀胱癌等預(yù)后有關(guān)

,而

表達(dá)與HCC相關(guān)性鮮有報(bào)道.細(xì)胞色素P450酶負(fù)責(zé)藥物、外源物質(zhì)和內(nèi)源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化.這種酶活性可以由內(nèi)在和外在因素調(diào)節(jié),從而改變機(jī)體對(duì)藥物或某些毒性物質(zhì)的反應(yīng).從巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞釋放的促炎性細(xì)胞因子,如白細(xì)胞介素-1(interleukin 1,IL-1)、白細(xì)胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)等能夠在導(dǎo)致細(xì)胞色素P450酶抑制或活化的.上述細(xì)胞也存在于腫瘤微環(huán)境中,參與癌癥的發(fā)展.在本研究中我們發(fā)現(xiàn)CYP2E1高表達(dá)者OS和PFS優(yōu)于低表達(dá)者,因而提示

可能為HCC生存的優(yōu)勢(shì)基因,可作為HCC術(shù)后預(yù)后較好的標(biāo)記物.同時(shí)

也可作為HCC診斷的分子標(biāo)記物,其診斷HCC的ROC曲線下面積高達(dá)0.83.

與腫瘤的生物學(xué)功能及預(yù)后亦有報(bào)道,但和HCC的關(guān)系報(bào)道不多.我們的研究也提示

高表達(dá)與HCC預(yù)后較好有關(guān).

然而本文存在一定的局限性,首先研究結(jié)論主要基于生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)分析,其結(jié)果和結(jié)論的可靠性需要進(jìn)一步相關(guān)臨床和基礎(chǔ)試驗(yàn)進(jìn)行證實(shí).其次,歐美和日本HCC患者多有HCV感染背景,而中國(guó)HCC患者多為HBV感染背景,單純HBV背景或HCV背景的HCC患者數(shù)據(jù)對(duì)研究中所獲結(jié)果是否存在不同有待補(bǔ)充相關(guān)臨床研究數(shù)據(jù)證實(shí).

4 結(jié)論

綜上,

,

和

可能與HCC發(fā)病有關(guān),并可作為HCC診斷和預(yù)后的分子標(biāo)志物.

今年正是“兩個(gè)3年”任務(wù)的收官之年。三年來(lái)，無(wú)論是辦社會(huì)職能改革還是國(guó)有土地確權(quán)登記發(fā)證，歷史問(wèn)題與現(xiàn)實(shí)困境交織，內(nèi)部掣肘與外部矛盾疊加，改革前行的每一步都不似“輕輕松松、敲鑼打鼓”般容易實(shí)現(xiàn)?？上驳氖?，新時(shí)代里農(nóng)墾精神仍然煥發(fā)著勃勃生機(jī)，農(nóng)墾人懷著高度的責(zé)任感和事業(yè)心，涉險(xiǎn)灘、闖難關(guān)，將改革扎扎實(shí)實(shí)地推向縱深。

HCC是臨床上較為常見(jiàn)的實(shí)體惡性腫瘤,在常見(jiàn)的癌癥中排名第六,癌癥相關(guān)死亡原因排名第四

乙肝病毒感染(hepatitis B virus,HBV)導(dǎo)致的肝硬化是HCC的最常見(jiàn)原因

我國(guó)是HBV感染大國(guó),HBV感染人數(shù)眾多,因而HCC的發(fā)生率也較高.HCC的預(yù)后極差,5年生存率低于30%,同時(shí)也缺乏有效的早期診斷方法

甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)是HCC早期診斷和術(shù)后監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的重要血清標(biāo)志物,但其可受到其他因素如妊娠、急慢性肝損傷等的影響而降低其診斷的敏感性和特異性

同時(shí),AFP明顯升高后,HCC已形成和發(fā)展為非早期,其作為早期預(yù)警或高危人群檢測(cè)的指標(biāo)效果并不理想.

1.3 細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC-1-A接種于含10%小牛血清的DMEM/ F12培養(yǎng)基中，37℃、5%CO2孵箱中常規(guī)培養(yǎng)，0.25%胰酶消化傳代，將過(guò)表達(dá)質(zhì)粒PTEN-OE及其對(duì)照質(zhì)粒(NC)按說(shuō)明進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后72 h，分PTEN-OE組、空載組及正常組，取生長(zhǎng)良好、處于對(duì)數(shù)期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

首先采用生物信息分析技術(shù)在基因綜合表達(dá)數(shù)據(jù)庫(kù)(gene expression omnibus,GEO)中選取HCC與非HCC肝組織中差異表達(dá)基因譜數(shù)據(jù).對(duì)篩選出的差異基因進(jìn)行聚類(lèi),基因注釋及蛋白網(wǎng)絡(luò)分析,并鑒定差異表達(dá)基因進(jìn)行關(guān)鍵基因(hub).根據(jù)hub基因表達(dá)分為高低表達(dá)組,比較高低表達(dá)組HCC患者總生存率(overall survival,OS)和無(wú)疾病進(jìn)展生存(progression free survival,PFS)有無(wú)差異并評(píng)估hub診斷HCC的敏感性和特異性.

例題3：已知點(diǎn)P：（1,1），圓C： x2+y2-4y=0，過(guò)P點(diǎn)的直線1交圓C于A、B兩點(diǎn)，AB中點(diǎn)為M，｜OM｜=｜OP｜，求△OPM的面積。

探討HCC差異表達(dá)基因及其與患者預(yù)后關(guān)系,同時(shí)分析差異表達(dá)基因作為HCC診斷分子標(biāo)志物的價(jià)值.

2.2 差異表達(dá)基因GO及KEGG分析 篩選出的37個(gè)差異表達(dá)基因生物學(xué)過(guò)程主要富集于代謝過(guò)程、凋亡細(xì)胞的識(shí)別和細(xì)胞金屬離子的反應(yīng);細(xì)胞定位于轉(zhuǎn)錄因子ap-1復(fù)合體和高密度脂蛋白粒子;生物學(xué)過(guò)程主要為過(guò)渡金屬離子結(jié)合、芳香化酶活性和雌激素2-hydroxylase活性等,見(jiàn)表2.KEGG信號(hào)通路富集于細(xì)胞色素P450對(duì)外來(lái)生物的代謝、化學(xué)致癌作用和藥物代謝-細(xì)胞色素P450等,見(jiàn)表3.

采用生物信息數(shù)據(jù)深度挖掘方法探尋HCC差異表達(dá)基因及其作為分子標(biāo)志物診斷肝癌的臨床價(jià)值,同時(shí)進(jìn)一步探討差異表達(dá)關(guān)鍵基因與HCC患者預(yù)后關(guān)系,評(píng)估差異表達(dá)基因作為HCC預(yù)后分子標(biāo)志物的可行性.

初中語(yǔ)文教學(xué)大綱指出∶語(yǔ)文作為中華民族最重要的交際工具,是人類(lèi)文化的重要組成部分,而初中語(yǔ)文對(duì)于培養(yǎng)初中階段學(xué)生的思想道德品質(zhì)和科學(xué)文化素養(yǎng),弘揚(yáng)祖國(guó)的優(yōu)秀文化和吸收人類(lèi)的進(jìn)步文化具有十分重要的意義，“文史不分家”，語(yǔ)文學(xué)科和歷史學(xué)科之間的滲透和結(jié)合在很多文學(xué)作品中體現(xiàn)的尤為突出，歷史元素的融入，更加有利于中學(xué)生對(duì)于中華民族傳統(tǒng)文化的學(xué)習(xí)以及優(yōu)秀品質(zhì)精神的影響和弘揚(yáng)。

HCC在四個(gè)數(shù)據(jù)集中共共差異表達(dá)的基因?yàn)?7個(gè).37個(gè)差異表達(dá)基因主要富集于凋亡細(xì)胞的識(shí)別、過(guò)渡金屬離子結(jié)合,KEGG信號(hào)通路富集于化學(xué)致癌作用等.

,

和

為37個(gè)差異基因中的前三個(gè)hub基因;CYP2E1,

和

為參考診斷HCC的AUC分別為0.83(95%CI:0.74-0.93),0.93(95%CI:0.88-0.97)和0.96(95%CI:0.924-0.98);CYP2E1高表達(dá)組OS(HR=0.57,95%CI:0.39-0.84),PFS(HR=0.63,95%CI:0.46-0.88)和

高表達(dá)組OS(0.57,95%CI:0.40-0.81),PFS(0.61,95%CI:0.45-0.83)均顯著高于低表達(dá)組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(

<0.05).

使用創(chuàng)新PST工藝噴涂形成的粘接聚合物可與金屬(銅、鋁、鋼或不銹鋼)表面粘接，并同時(shí)生成可與AKROMID?B3GF 30 7 PST材料粘接的有機(jī)化合物。在噴涂該聚合物時(shí)同時(shí)將金屬嵌件加熱至粘結(jié)聚合物的熔點(diǎn)以上，就可激活粘接效應(yīng)。試驗(yàn)試樣的金屬/塑料粘合強(qiáng)度測(cè)試值在鋁材(而非粘結(jié)層)因荷載過(guò)高而發(fā)生斷裂前達(dá)到了35 MPa。

細(xì)胞色素P450家族成員

,

和

差異表達(dá)與HCC發(fā)生有關(guān),有望成為HCC診斷和預(yù)后的分子標(biāo)志物.

本研究通過(guò)生物信息數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞色素P450家族成員

,

和

差異表達(dá)與HCC發(fā)生有關(guān),并可作為HCC診斷和預(yù)后的潛在生物學(xué)標(biāo)記物.然而,研究結(jié)果和結(jié)論主要基于相關(guān)的數(shù)據(jù)庫(kù)生物信息學(xué)分析,缺乏組織標(biāo)本和細(xì)胞學(xué)驗(yàn)證結(jié)果.后續(xù)應(yīng)進(jìn)補(bǔ)充臨床組織標(biāo)本和相關(guān)細(xì)胞學(xué)試驗(yàn),對(duì)研究結(jié)果和結(jié)論進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證.

1 Sung H,Ferlay J,Siegel RL,Laversanne M,Soerjomataram I,Jemal A,Bray F.Global Cancer Statistics 2020:GLOBOCAN Estimates of Incidence and Mortality Worldwide for 36 Cancers in 185 Countries.

2021;71:209-249 [PMID:33538338 DOI:10.3322/caac.21660]

2 Yin X,Xiong W,Wang Y,Tang W,Xi W,Qian S,Guo Y.Association of CYP2E1 gene polymorphisms with bladder cancer risk:A systematic review and meta-analysis.

2018;97:e11910 [PMID:30278485 DOI:10.1097/MD.0000000000011910]

3 Liu Y,Guo LW,Xu HF,Kang RH,Zheng LY,Zhang LY,Chen Q,Sun XB,Zhang SK,Qiao YL.Risk of Liver Cirrhosis in HBV/HCV-Infected Individuals with First-Degree Relatives Who Have Liver Cancer:Development and Validation of a Simple Model.

2022;15:111-120 [PMID:34675066 DOI:10.1158/1940-6207.CAPR-21-0220]

4 Li Y,Xiao F,Li W,Hu P,Xu R,Li J,Li G,Zhu C.Overexpression of Opa interacting protein 5 increases the progression of liver cancer via BMPR2/JUN/CHEK1/RAC1 dysregulation.

2019;41:2075-2088 [PMID:30816485 DOI:10.3892/or.2019.7006]

5 Liu T,Yang H,Fan W,Tu J,Li TWH,Wang J,Shen H,Yang J,Xiong T,Steggerda J,Liu Z,Noureddin M,Maldonado SS,Annamalai A,Seki E,Mato JM,Lu SC.Mechanisms of MAFG Dysregulation in Cholestatic Liver Injury and Development of Liver Cancer.

2018;155:557-571.e14 [PMID:29733835 DOI:10.1053/j.gastro.2018.04.032]

6 Chang CS,Huang SM,Lin HH,Wu CC,Wang CJ.Different expression of apoptotic proteins between HBV-infected and non-HBV-infected hepatocellular carcinoma.

2007;54:2061-2068 [PMID:18251160 DOI:10.1016/s0033-8389(05)70186-x]

7 Yang Z,Lu Y,Xu Q,Tang B,Park CK,Chen X.HULC and H19 Played Different Roles in Overall and Disease-Free Survival from Hepatocellular Carcinoma after Curative Hepatectomy:A Preliminary Analysis from Gene Expression Omnibus.

2015;2015:191029 [PMID:26136615 DOI:10.1155/2015/191029]

8 Schulze K,Imbeaud S,Letouzé E,Alexandrov LB,Calderaro J,Rebouissou S,Couchy G,Meiller C,Shinde J,Soysouvanh F,Calatayud AL,Pinyol R,Pelletier L,Balabaud C,Laurent A,Blanc JF,Mazzaferro V,Calvo F,Villanueva A,Nault JC,Bioulac-Sage P,Stratton MR,Llovet JM,Zucman-Rossi J.Exome sequencing of hepatocellular carcinomas identifies new mutational signatures and potential therapeutic targets.

2015;47:505-511 [PMID:25822088 DOI:10.1038/ng.3252]

9 Yang Y,Guo Y,Tan S,Ke B,Tao J,Liu H,Jiang J,Chen J,Chen G,Wu B.β-Arrestin1 enhances hepatocellular carcinogenesis through inflammation-mediated Akt signalling.

2015;6:7369 [PMID:26077142 DOI:10.1038/ncomms8369]

10 Shen Q,Eun JW,Lee K,Kim HS,Yang HD,Kim SY,Lee EK,Kim T,Kang K,Kim S,Min DH,Oh SN,Lee YJ,Moon H,Ro SW,Park WS,Lee JY,Nam SW.Barrier to autointegration factor 1,procollagenlysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 3,and splicing factor 3b subunit 4 as early-stage cancer decision markers and drivers of hepatocellular carcinoma.

2018;67:1360-1377 [PMID:29059470 DOI:10.1002/hep.29606]

11 Shimada S,Mogushi K,Akiyama Y,Furuyama T,Watanabe S,Ogura T,Ogawa K,Ono H,Mitsunori Y,Ban D,Kudo A,Arii S,Tanabe M,Wands JR,Tanaka S.Comprehensive molecular and immunological characterization of hepatocellular carcinoma.

2019;40:457-470 [PMID:30598371 DOI:10.1016/j.ebiom.2018.12.058]

12 Bray F,Ferlay J,Soerjomataram I,Siegel RL,Torre LA,Jemal A.Global cancer statistics 2018:GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.

2018;68:394-424 [PMID:30207593 DOI:10.3322/caac.21492]

13 何倩玉,李俊峰,毛小榮.慢性HBV感染相關(guān)性肝癌發(fā)生的突變基因研究.肝臟 2021;26:811-814 [DOI:10.14000/j.cnki.issn.1008-1704.2021.07.027]

14 賈紅宇,劉克洲.慢性HBV感染免疫耐受期抗病毒治療有益于預(yù)防肝硬化和肝癌的發(fā)生.臨床肝膽病雜志 2021;37:1024-1025 [DOI:10.3969/j.issn.1001-5256.2021.05.007]

15 Bosch FX,Ribes J,Borràs J.Epidemiology of primary liver cancer.

1999;19:271-285 [PMID:10518307 DOI:10.1055/s-2007-1007117]

16 Tzartzeva K,Singal AG.Testing for AFP in combination with ultrasound improves early liver cancer detection.

2018;12:947-949 [PMID:30118333 DOI:10.1080/17474124.2018.1512855]

17 Wang RY,Chen XW,Zhang WW,Jiang F,Liu MQ,Shen XB.CYP2E1 changes the biological function of gastric cancer cells via the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway.

2020;21:842-850 [PMID:31974627 DOI:10.3892/mmr.2019.10890]