造影劑腎病患者尿TIMP-2、IGFBP7水平的相關(guān)性及臨床意義*

阿依加肯·卡司木馬力，瑪伊努爾·阿卜拉，周瑋瑋，娜孜亞·斯加克，金 燕

喀什地區(qū)第二人民醫(yī)院腎病科，新疆喀什 844000

隨著造影技術(shù)在臨床上的廣泛應(yīng)用，特別是在高齡、糖尿病、心力衰竭等高危患者中的應(yīng)用，造影劑腎病(CIN)成為醫(yī)院獲得性腎功能衰竭的第3大主要原因[1]。金屬蛋白酶組織抑制劑-2(TIMP-2)屬于金屬蛋白酶組織抑制劑家族成員，在急性腎損傷發(fā)生早期其水平可明顯升高，因此可作為CIN的早期診斷生物標(biāo)志物[2]。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)是一種在肝臟合成的分泌蛋白，在肝臟、脾臟、腎臟、睪丸、卵巢中水平較高，腎小管上皮細(xì)胞損傷后，IGFBP7水平升高，通過(guò)誘導(dǎo)周?chē)婊罴?xì)胞G1細(xì)胞期停止，減輕腎損傷[3]。提示TIMP-2、IGFBP7均可作為腎損傷的預(yù)警標(biāo)志物。因此，本研究旨在初步探討尿TIMP-2、IGFBP7在CIN早期診斷中的臨床意義，以期為其在CIN早期診斷中可能具有的廣闊應(yīng)用前景提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 前瞻性收集本院住院行造影檢查及介入治療術(shù)(包括冠狀動(dòng)脈造影及介入術(shù)、CT增強(qiáng)造影、腦血管及外周動(dòng)脈造影及介入治療)的182例CIN高危患者作為觀察對(duì)象。其中CIN高危者的標(biāo)準(zhǔn)定義為符合以下任何1項(xiàng)者：(1)腎功能輕中度受損；(2)30 mL/(min·1.73 m2)≤腎小球?yàn)V過(guò)率≤89 mL/(min·1.73 m2)；(3)糖尿病；(4)脫水、心力衰竭。根據(jù)CIN的定義[行造影檢查及介入治療術(shù)后72 h內(nèi)、血清肌酐(Cr)水平升高0.5 mg/dL(44.2 μmol/L)或比基礎(chǔ)值升高25%]，將納入患者分為CIN組和非CIN組，每組91例。CIN組中，男45例，女46例；年齡47～74歲，平均(64.34±15.22)歲；體質(zhì)量指數(shù)(21.54±5.93)kg/m2。非CIN組中，男52例，女39例；年齡45～77歲，平均(63.53±13.53)歲；體質(zhì)量指數(shù)(21.90±5.46)kg/m2。兩組年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡>75歲者；(2)行造影檢查及介入治療術(shù)的住院患者；(3)簽署知情同意書(shū)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)過(guò)往存在急性腎損傷；(2)含碘造影劑過(guò)敏；(3)1周內(nèi)使用過(guò)造影劑。

1.2儀器與試劑 武漢優(yōu)爾生生物制劑有限公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒(編號(hào)：SEC173Ra、SEC229Ra、SEC231Ra、SEC237Ra，物種：Rattus norvegicus)；日本三洋生產(chǎn)的MF-192深低溫冰箱；深圳邁瑞生產(chǎn)的BS-200全自動(dòng)生化分析儀；上?？迫A生產(chǎn)的ST-360酶標(biāo)儀；武漢華美生物工程有限公司生產(chǎn)的CUSABIO試劑。檢測(cè)步驟必須嚴(yán)格按照所用試紙盒和檢測(cè)儀的操作流程進(jìn)行。

1.3方法

1.3.1術(shù)前一般資料收集 術(shù)前從患者住院病史采集患者病史及相關(guān)信息，包括患者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)等一般資料。

1.3.2造影或介入術(shù)后 (1)資料收集：術(shù)中和術(shù)后從患者手術(shù)記錄和住院病史采集的信息包括造影劑類(lèi)型與劑量、冠狀動(dòng)脈病變情況等。(2)檢測(cè)：術(shù)前，術(shù)后6、12、24 h分別留取5 mL尿液標(biāo)本，離心取上清液，-80 ℃保存。尿液檢測(cè)指標(biāo)：尿TIMP-2、IGFBP7水平。根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)完成試驗(yàn)步驟，結(jié)果于不同光波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，以吸光度(A)值反應(yīng)待測(cè)樣品的濃度，若樣品中A值超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線上限時(shí)需對(duì)原樣本進(jìn)行稀釋后重新測(cè)定，所得結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)得到最終結(jié)果。

1.3.3質(zhì)量控制 為最大程度縮小研究偏倚，本研究中所有計(jì)量指標(biāo)平行重復(fù)測(cè)量3次并取平均值作為最終結(jié)果。

1.4觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組患者不同時(shí)間點(diǎn)的TIMP-2、IGFBP7水平，分析IMP-2與IGFBP7的相關(guān)性，評(píng)估TIMP-2、IGFBP7診斷CIN的效能。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者不同時(shí)間點(diǎn)TIMP-2、IGFBP7水平比較 CIN組不同時(shí)間點(diǎn)尿液TIMP-2、IGFBP7水平高于非CIN組，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高，TIMP-2、IGFBP7水平從低到高依次為術(shù)前，術(shù)后6、12、24 h(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同時(shí)間點(diǎn)兩組患者TIMP-2、IGFBP7水平比較

2.2TIMP-2、IGFBP7相關(guān)性分析 TIMP-2與IGFBP7呈正相關(guān)(r=0.378，P<0.05)。

2.3TIMP-2、IGFBP7診斷CIN的效能比較 TIMP-2、IGFBP7在診斷CIN中具有較高的效能，且二者聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線下面積(AUC)明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)(P<0.05)，見(jiàn)圖1。

圖1 TIMP-2、IGFBP7診斷CIN的ROC曲線

3 討 論

隨著心血管介入診療技術(shù)的不斷發(fā)展，廣泛使用的造影劑所造成的急性腎損傷發(fā)生率明顯升高，CIN已逐漸成為造影檢查容易出現(xiàn)的并發(fā)癥之一，這種損傷可能短暫、輕微，亦可能持續(xù)存在，導(dǎo)致患者住院時(shí)間延長(zhǎng)和病死率明顯增高[4]。然而，臨床上關(guān)于CIN的發(fā)病機(jī)制并不明確，主流學(xué)說(shuō)包括以下幾點(diǎn)：造影劑能夠影響腎臟的血流動(dòng)力學(xué)造成腎髓質(zhì)出現(xiàn)缺血缺氧；造影劑產(chǎn)生毒性，改變腎小管的上皮細(xì)胞形態(tài)及其代謝；造影劑影響腎血流血管活性物質(zhì)的合成及釋放，造成腎組織缺氧及腎血管收縮；造影劑能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生大量的氧自由基而對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性[5-7]。

目前，臨床上治療CIN暫無(wú)有效的方法，最好的措施就是預(yù)防其發(fā)生，因此，早期預(yù)防造影檢查或介入術(shù)后導(dǎo)致的CIN，對(duì)改善患者預(yù)后具有極其重要的臨床意義[8]。過(guò)往常用血清Cr作為診斷CIN的生物標(biāo)志物，但是對(duì)于急性腎損傷患者，其血清Cr水平通常在腎損傷后48～72 h才出現(xiàn)異常升高，且血清Cr水平反映患者腎功能變化并不敏感，易受藥物、年齡等因素的影響[9]。因此，臨床急需早期診斷CIN的可靠標(biāo)志物，以促進(jìn)CIN早期防治工作的開(kāi)展。TIMP-2、IGFBP7作為細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)，參與機(jī)體炎性反應(yīng)，而炎性反應(yīng)是CIN加速進(jìn)展的重要原因之一，其可能加重腎小球、腎間質(zhì)及腎小管損傷，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)增多，導(dǎo)致纖溶酶原激活抑制物增多、基質(zhì)金屬蛋白酶減少，是腎小球硬化及腎間質(zhì)纖維化過(guò)程中的重要因素[10-11]。本研究結(jié)果顯示，TIMP-2與IGFBP7呈正相關(guān)，CIN組不同時(shí)間點(diǎn)尿TIMP-2、IGFBP7水平高于非CIN組，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高，TIMP-2、IGFBP7水平從低到高依次為術(shù)前，術(shù)后6、12、24 h(P<0.05)，表明尿TIMP-2、IGFBP7參與CIN發(fā)病的整個(gè)過(guò)程，可作為CIN炎癥損傷早期診斷的靶向標(biāo)志物。其原因可能是IGFBP7和TIMP-2分別是相對(duì)分子質(zhì)量為26×103和22×103的可溶蛋白，主要參與白細(xì)胞的浸潤(rùn)，與細(xì)胞的損傷及連接破壞過(guò)程關(guān)系密切，二者在細(xì)胞損傷最早期的G1期細(xì)胞周期阻滯過(guò)程中發(fā)揮重要作用[12-13]。陳凱等[14]研究發(fā)現(xiàn)，腎小管上皮細(xì)胞在出現(xiàn)損傷后，會(huì)迅速進(jìn)行G1期細(xì)胞周期阻滯，從而阻止 DNA損傷、細(xì)胞凋亡；當(dāng)出現(xiàn)CIN時(shí)，尿IGFBP7和TIMP-2水平明顯升高，腎間質(zhì)的IGFBP7和TIMP-2大量沉積，腎臟組織和結(jié)構(gòu)被破壞，進(jìn)一步加重了腎功能損傷[15]。

綜上所述，尿TIMP-2、IGFBP7水平與CIN疾病關(guān)系密切，聯(lián)合檢測(cè)尿TIMP-2、IGFBP7水平可用于早期CIN的診斷，為該病臨床治療和預(yù)后評(píng)估提供參考。