甲基化PAX1在宮頸癌篩查中的臨床應(yīng)用綜述

蘆曉莉 王亞美 雷林

【中圖分類號(hào)】R711.74 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1673-9026（2022）11--01

一、宮頸脫落細(xì)胞PAX1基因甲基化檢測(cè)：

PAX1基因是關(guān)鍵腫瘤的抑制基因，調(diào)控細(xì)胞分化成熟，基因異常甲基化與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、細(xì)胞癌變有著密切的關(guān)系。在宮頸細(xì)胞中，基因PAX1啟動(dòng)子被甲基化后會(huì)因此造成該基因沉默或失活，因而喪失抑制腫瘤生長(zhǎng)的功能，異常的細(xì)胞就失去控制，從而導(dǎo)致宮頸癌變，這一機(jī)制已被國(guó)際廣泛認(rèn)可和研究，因此基因PAX1甲基化程度可作為檢測(cè)宮頸細(xì)胞是否正常，以及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的動(dòng)態(tài)指標(biāo)。

二、宮頸癌的發(fā)病機(jī)制：

宮頸癌目前仍然是全球女性的第四大常見(jiàn)腫瘤。據(jù)報(bào)道，我國(guó)每年約有新發(fā)病例13萬(wàn)，約占世界宮頸癌新發(fā)病例總數(shù)的1/4，現(xiàn)已明確人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染尤其是高危型HPV（16-18）持續(xù)感染是誘發(fā)宮頸癌的明確病因之一，其致癌作用與HPV DNA和宿主DNA的整合有關(guān)。90%的單純HPV感染者可在2年內(nèi)自然轉(zhuǎn)陰，尤其是<30歲女性。從感染到宮頸癌變，一般要5～20年。

宮頸癌是威脅女性健康的第二大婦科惡性腫瘤，并呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)。

因高危型HPV病毒持續(xù)感染引起由癌前病變逐步發(fā)展而來(lái)病理類型分為：

鱗癌（80%）? 腺癌（15-20%）? 鱗腺癌

危險(xiǎn)因素：性生活過(guò)早、多個(gè)性伴侶、早孕多產(chǎn)或人流、吸煙、炎癥反復(fù)刺激，等。

早期宮頸癌常無(wú)明顯癥狀和體征，宮頸可光滑或難與宮頸柱狀上皮異位區(qū)別。頸管型患者因?qū)m頸外觀正常易漏診或誤診。隨病變發(fā)展，可出現(xiàn)以下表現(xiàn)：

1.癥狀

（1）陰道流血早期多為接觸性出血：中晚期為不規(guī)則陰道流血。出血量根據(jù)病灶大小、侵及間質(zhì)內(nèi)血管情況而不同，若侵襲大血管可引起大出血。年輕患者也可表現(xiàn)為經(jīng)期延長(zhǎng)、經(jīng)量增多：老年患者常為絕經(jīng)后不規(guī)則陰道流血。一般外生型較早出現(xiàn)陰道出血癥狀，出血量多;內(nèi)生型較晚出現(xiàn)該癥狀。

（2）陰道排液多數(shù)患者有陰道排液，液體為白色或血性可稀薄如水樣或米泔狀，或有腥臭。晚期患者因癌組織壞死伴感染?？捎写罅棵诇珮踊蚰撔詠喅舭讕А?/p>

（3）晚期癥狀根據(jù)癌灶累及范圍出現(xiàn)不同的繼發(fā)性癥狀。如尿頻、尿急、便秘、下肢腫痛等：癌腫樂(lè)迫或累及輸尿管時(shí)，可引起輸尿管梗阻、腎盂積水及尿毒癥;晚期可有貧血、惡病質(zhì)等全身衰竭癥狀。

三、宮頸癌篩查現(xiàn)狀：

宮頸上皮的癌變過(guò)程包括許多基因和表觀基因的攻變，DNA甲基化是最常見(jiàn)的表觀遺傳學(xué)改變，常發(fā)生于腫瘤抑制基因的啟動(dòng)子區(qū)域，造成該基因的轉(zhuǎn)錄失活，從而促使腫瘤的發(fā)生。本研究旨在探討宮頸癌基因甲基化檢測(cè)、高危型HPV檢測(cè)對(duì)宮頸癌篩查的分流作用，甲基化選取的是PAX1.

宮頸癌篩查的手段包括：應(yīng)用了幾十年的細(xì)胞學(xué)，這是傳統(tǒng)的篩查手段，但是它存在敏感性不足。另外，HPV是宮頸癌、宮頸病變的最重要的原因之一，因此，檢查HPV是目前篩查宮頸癌重要的手段，但是HPV檢查特異性差，特別是一過(guò)性HPV感染，對(duì)宮頸病變的發(fā)生影響有限。

常規(guī)檢查的弊端：

（1）TCT：漏診率過(guò)高，檢出率降低，宮頸腺癌TCT檢測(cè)呈假陰 性。

（2）HPV：靈敏度高，感染非常普遍，40%的女性在一生當(dāng)中的某個(gè)時(shí)期都可能感染過(guò)HPV病毒，但隨著自身免疫力增強(qiáng)，病毒可以自行消除，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性不一定有問(wèn)題，增加患者心理負(fù)擔(dān)。

（3）活檢：造成創(chuàng)傷，本身感染HPV患者再活檢，增加感染風(fēng)險(xiǎn)。

宮頸脫落細(xì)胞PAX1基因甲基化檢測(cè)優(yōu)勢(shì)：

（1）增加檢出率，減少漏診率。

（2）減少檢查頻率，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。

（3）無(wú)創(chuàng)傷，精準(zhǔn)結(jié)果，降低誤診率。

（4）宮頸病變治療的

常規(guī)檢查像腫瘤的診斷和治療即將進(jìn)入或者逐漸進(jìn)入分子診斷和分子治療的時(shí)代，而宮頸病變的篩查也需要跟隨新技術(shù)——生物技術(shù)的發(fā)展篩選新的分子標(biāo)志物。

四、宮頸癌與DNA的甲基化

基因的甲基化可以調(diào)控基因的活性。根據(jù)國(guó)內(nèi)外的研究，幾乎所有癌癥都與基因甲基化異常有關(guān)，也就是說(shuō)DNA甲基化是癌癥的必經(jīng)之路。因此研究宮頸病變的發(fā)生發(fā)展就應(yīng)該重視DNA甲基化的應(yīng)用。

宮頸癌發(fā)生的機(jī)制與甲基化診斷性能，通過(guò)臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，HPV感染到正常的宮頸上皮細(xì)胞可以引起DNA甲基化繼而引起宮頸的病變甚至發(fā)展為宮頸癌，那么這是有高度的相關(guān)性。

在宮頸病變發(fā)展的進(jìn)程中，宮頸上皮細(xì)胞從正常到異常的增生、到癌前病變、到宮頸癌的發(fā)生，需要數(shù)年甚至數(shù)十年發(fā)展的過(guò)程，在這個(gè)過(guò)程中，研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于低級(jí)別宮頸癌前病變短期內(nèi)進(jìn)展為癌的風(fēng)險(xiǎn)比較低，如果是宮頸高級(jí)別癌前病變，短期內(nèi)進(jìn)展為宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)就比較高，發(fā)現(xiàn)在這個(gè)風(fēng)險(xiǎn)高低的過(guò)程中，伴隨DNA甲基化是密切高度相關(guān)，其中有個(gè)關(guān)鍵基因是PAX1基因。①

五、PAX1基因甲基化檢測(cè)的現(xiàn)狀

2019年至今，我院共檢測(cè)病例為89例，年齡在28-55歲之間。其中，宮頸癌術(shù)后8例、CIN病變6例、常規(guī)檢查75例。對(duì)照的方法是組織病理學(xué)金標(biāo)準(zhǔn)。PAX1基因甲基化檢測(cè)是基于亞洲人群開發(fā)的產(chǎn)品，是根據(jù)以中國(guó)人為研究對(duì)象的臨床數(shù)據(jù)的研究結(jié)果。 甲基化目前來(lái)說(shuō)解決臨床問(wèn)題如下：

（1）HPV感染造成的恐慌問(wèn)題。HPV陽(yáng)性患者可以做一個(gè)甲基化檢測(cè)，如果是甲基化非常低（△Cp值大），那告訴病人你不用緊張，你可以延長(zhǎng)你的篩查周期;如果甲基化比較高（△Cp值?。?，我們會(huì)采取更積極點(diǎn)的處理方式。

（2）宮頸腺癌發(fā)病率確實(shí)比以前高了，也可能和我們檢出手段有關(guān)系，那甲基化更利于宮頸腺癌的檢出，減少它的漏診;

（3）三型轉(zhuǎn)化區(qū)婦女;

（4）臨床上可能更多的用于年輕女性未生育的女性CIN2治療的分流。如果報(bào)告CIN2，病變也比較局限，我們做一個(gè)甲基化的檢測(cè)，如果甲基化△Cp值比較高，這部分病人會(huì)選擇進(jìn)行更保守一點(diǎn)的處理，而不是去做LEEP或錐切。

六、小結(jié)

PAX1基因甲基化檢測(cè)解決臨床問(wèn)題：HPV持續(xù)感染恐慌問(wèn)題、宮頸腺癌漏診、三型轉(zhuǎn)化區(qū)漏診、年輕未生育女性CIN2治療分流、宮頸癌治療過(guò)程檢測(cè)困擾、手術(shù)/隨訪。

PAX1甲基化檢測(cè)能更廣泛地應(yīng)用于宮頸癌臨床篩查，更加精準(zhǔn)地對(duì)高危型HPV感染的患者進(jìn)行管理，一方面避免不必要的恐慌，另一方面也加強(qiáng)對(duì)真正有風(fēng)險(xiǎn)的患者的診治，有非常重要的臨床價(jià)值。甲基化基因檢測(cè)能夠?qū)δ贻p、未生育的女性CIN2治療進(jìn)行分流，解決HPV持續(xù)感染的恐慌問(wèn)題，減少宮頸腺癌的漏診等。

①王建六教授 《PAX1甲基化在宮頸癌篩查中的應(yīng)用》

②崔寶霞教授 《PAX1在宮頸癌篩查中的應(yīng)用》